Обогащенная тромбоцитами плазма (PRP) используется при лечении заболеваний опорно-двигательного аппарата у лошадей. Различные методы позволяют получить PRP с различной концентрацией тромбоцитов и лейкоцитов. В данной статье описан метод получения ОТР из лошадиной крови.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Простой метод двойного центрифугирования в пробирке для получения обогащенной тромбоцитами плазмы из крови лошади
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Обогащенная тромбоцитами плазма (PRP) широко используется в качестве рутинного лечения хронических заболеваний опорно-двигательного аппарата у лошадей, таких как остеоартрит, тендинопатии и десмопатии. Эта эффективность обусловлена высокой концентрацией факторов роста и противовоспалительных цитокинов, которые высвобождаются при активации этого ортобиологического агента, независимо от того, активируются ли они эндогенно или экзогенно. Несмотря на его растущую популярность, заметно отсутствует обучающие видео, демонстрирующие методы получения ОТР у лошадей.
В данном исследовании рассматривается метод двойного центрифугирования в трубке для получения PRP у лошадей. Цельную кровь от шести лошадей собирали в пробирки с цитратом натрия и центрифугировали дважды при 120 × г в течение 5 мин и 240 × г в течение 5 мин. Средняя концентрация тромбоцитов для PRP составила 360,95 ± 56,31 тромбоцитов (PLT) × 103/мкл, в то время как средняя концентрация лейкоцитов составила 3,05 ± 1,53 клеток × 103/мкл. Количество тромбоцитов в PRP было в 2,41 раза выше, чем в цельной крови, в то время как концентрация лейкоцитов в PRP была в 0,44 раза ниже. Эффективность сбора PLT в PRP составила 17%, в то время как эффективность сбора лейкоцитов в PRP составила 3,1%. Средние концентрации трансформирующего фактора роста бета-1 и тромбоцитарного фактора роста BB в PRP составили 2601,82 (95% доверительный интервал (ДИ): 2358,88-2844,76) пг/мл и 1208,05 (95% ДИ: 1051,09-1365,02) пг/мл соответственно. Эти результаты указывают на то, что ОТР может быть эффективно и воспроизводимо получена с помощью простого, экономичного метода, подходящего для использования практикующими лошадьми.
Введение
Обогащенная тромбоцитами плазма (PRP) является ортобиологическим продуктом, обычно используемым для лечения хронических заболеваний опорно-двигательного аппарата лошадей, таких как тендинопатии, десмопатии, остеоартрит и ламинит 1,2,3. Он также эффективен при лечении ран конечностей и заболеваний глазной поверхности 4,5. Обоснование его использования основано на высоких концентрациях факторов роста (ГР), выделяемых в основном тромбоцитами6. Лейкоциты также внос....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Данное исследование проводилось в соответствии с внутренними протоколами по приготовлению и применению PRP у лошадей в Ветеринарном учебном госпитале Университета Кальдас, Манисалес, Колумбия. Это исследование не требовало одобрения Комитета по уходу за животными, так как данные были получены от хромых лошадей, получавших клиническое лечение в нашем учреждении. Для разработки этого протокола были использованы данные шести колумбийских креольских лошадей, трех кобыл и трех меринов, средний возраст которых составил 7,4 (± 2,6) года. Владельцы лошадей были проинформированы о характере исследования и подписали форму информированного согласия. Все лошади, включенные в иссл....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Среднее количество тромбоцитов (тромбоциты × 103/мкл) было достоверно выше в ОТП, чем в цельной крови (р < 0,001). Напротив, средняя концентрация лейкоцитов (лейкоцитов × 103/мкл) в ОТР была значительно ниже, чем в цельной крови (р < 0,001) (табл. 1). В частности, количество тромбоцитов в PRP было в 2,41 раза выше, чем в цельной крови, в то время как концентрация лейкоцитов в PRP была в 0,44 раза ниже. Эффективность сбора PLT в PRP составила 17%, в то время как эффективность с.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Использование ОТР в медицине и ветеринарии для лечения хронических заболеваний опорно-двигательного аппарата увеличивается 1,8,26,27. Тем не менее, основным критическим моментом в отношении применения ОТР в экспериментальных и клинических условиях является отсутствие основных данных о методах и протоколах, используемых для получения этих гемокомпонентов
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
У авторов нет конфликта интересов, который можно было бы раскрыть.
Благодарности
Мы благодарим Vicerrectoría de Investigaciones y Postgrados Университета Кальдас, Манисалес, Колумбия, за финансовую поддержку для публикации этой статьи.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 10 мл пробирок для сбора венозной крови | BD Vacutainer, Франклин Лейкс, Нью-Джерси, США | Код 366430 | Это только пример, можно использовать тубы других марок. |
| 4,5 мл цитрата натрия в пробирках (105 М/3,2%) | BD Vacutainer, Франклин Лейкс, Нью-Джерси, США | 107451 | Это только пример, можно использовать тубы других марок. |
| Настольная центрифуга | Rotofix 32A, Hettich GmbH, Туттлинген, Германия | Можно использовать и другие настольные центрифуги. | |
| Игла для бабочки (21 G & умножить на 0,75 дюйма) с 12 дюймов. Трубки и предварительно прикрепленный держатель | Набор для сбора крови Safety-Lok, BD Vacutainer, Франклин Лейкс, Нью-Джерси, США | Ссылка 367296 | Это только пример, можно использовать иглы-бабочки других марок. |
| Раствор пены хлоргексидина в концентрации 2,3-4% | Торговые марки или торговые названия этих продуктов могут различаться в зависимости от страны. | ||
| Колпак класса II с ламинарным потоком | Thermo Fischer Scientific, Уолтем, Массачусетс, США | Можно использовать другие колпаки класса II с ламинарным потоком | |
| Считыватель ИФА | Thermo Fischer Scientific, Уолтем, Массачусетс, США | ||
| Этиловый спирт на 95% | Торговые марки или торговые названия этих продуктов могут различаться в зависимости от страны. | ||
| Человеческий PDGF-BB DuoSet ELISA | НИР D Systems, Inc, Мак-Кинли Плейс, Миннесота, США | DY220 | |
| Человеческий TGF-beta 1 DouSet ELISA | НИР D Systems, Inc, Мак-Кинли Плейс, Миннесота, США | DY240 | |
| Повидон йод пенный раствор в концентрации 4-10% | Торговые марки или торговые названия этих продуктов могут различаться в зависимости от страны. | ||
| Программное обеспечение SPSS 25.0 | IBM Corp, SPSS, Нью-Йорк, США | ||
| Стерильные люэровские шприцы различного объема | Discardit Шприц, BD Vacutainer, Франклин Лейкс, Нью-Джерси, США | Это только пример, можно использовать шприцы других марок. | |
| Игла для позвоночника стерильная (18 G & раз; 90 мм) | BD Quincke Spinel Needle, Франклин Лейкс, Нью-Джерси, США | Это только пример, можно использовать спинальные иглы других марок. |
Ссылки
- Pérez Fraile, A., González-Cubero, E., Martínez-Flórez, S., Olivera, E. R., Villar-Suárez, V. Regenerative medicine applied to musculoskeletal diseases in equines: a systematic review. Vet Sci. 10 (12), 666(2023).
- Boone, L., Peroni, J. Introduction to equ....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
