Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Хранение и трансплантация печени у холодноадаптивных даурских сусликов

1.4K просмотров

DOI:

10.3791/68444

3 июля 2025 г.

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

В этой статье мы представляем протокол для создания долгосрочной модели холодного хранения и трансплантации печени у даурского суслика (DGS), которая была технически сложной в стандартных моделях грызунов.

Аннотация

При трансплантации печени функциональное восстановление донорских трансплантатов после длительного хранения в холоде является серьезной проблемой. То же самое препятствие относится к стандартным моделям грызунов (например, мышей и крыс) для трансплантации печени, несмотря на их хорошо зарекомендовавшие себя хирургические протоколы, что ограничивает исследования по ключевым темам, таким как посттрансплантационное функциональное восстановление и иммуносовместимость хозяина и трансплантата. Здесь мы успешно создали новую модель трансплантации печени с использованием облигатного гибернатора, даурского суслика (DGS; Spermophilus dauricus), который демонстрирует внутреннюю адаптацию к сверхглубоким переходам гипотермия-разогревание и ишемия-реперфузия. В наших руках трансплантация печеночных трансплантатов после 24-часового хранения в холоде привела к 100% выживаемости реципиентов DGS в течение 7-дневного периода наблюдения, в то время как та же процедура у крыс Sprague-Dawley (SD) показала 0% выживаемость через 24 часа после операции. Таким образом, DGS и другие модели млекопитающих, адаптированных к холоду, обеспечивают уникальную и надежную платформу для исследования механизмов, лежащих в основе адаптации органов к холоду и толерантности к трансплантации, что может поддержать разработку новых стратегий лечения или хирургии в области трансплантационной медицины.

Введение

Холодовое согревание и ишемия-реперфузия вносят значительный вклад в повреждение печеночного трансплантата, увеличивая риск ранней дисфункции аллотрансплантата. Несмотря на то, что трансплантация печени у стандартных организмов грызунов, таких как мыши и крысы, былауспешно установлена, поскольку исследования этих холодонепереносимых видов дают ограниченное представление о механизмах адаптации к холоду, прогресс в области сохранения органов и трансплантационной медицины был затруднен.

Разработка исследовательских моделей трансплантации у подходящих к....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все эксперименты на животных были одобрены Институциональным комитетом Пекинского университета по уходу за животными и их использованию (LSC-WangSQ-2). Соответствующие инструменты, использованные для исследования, перечислены в таблице материалов и изображены на рисунке 1.

ПРИМЕЧАНИЕ: Обращение и разведение выловленных в дикой природе зимующих видов грызунов, таких как 13-полосные суслики, в лабораторных условиях описано15,16. DGS, использованные в этом исследовании, были получены в лаборатории самками ....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Средняя продолжительность хирургических вмешательств была следующей: донорская операция в среднем составила 24,8 ± 2,3 минуты, операция на спинном столе 15,4 ± 1,3 минуты, операция реципиента 52,7 ± 5,1 минуты, а анпеченочная фаза 14,2 ± 1,5 минуты.

Реципиенты печеночных трансплантатов, сохраненных в холодном растворе UW в течение 24 ч, показали 100% выживаемость через 7 дней после трансплантаци.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Основываясь на методе двойной манжетыКамады 2, мы успешно создали первую модель ортотопической трансплантации печени в DGS. Из-за анатомических различий между DGS и традиционными моделями крыс важны специфические соображения при подготовке материала, хирургических процедурах и послеоперационном ведении.

Такие факторы, как спячка и жировые запасы, способствуют значительным индивидуальным колебаниям веса взрослых ДГС, варьирующихся от 150.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

У авторов нет конфликта интересов, о котором можно было бы заявить.

Благодарности

Эта работа была поддержана Национальным крупным проектом по науке и технике «Неинфекционные хронические заболевания» (2023ZD0507600) и Национальным фондом естественных наук Китая (82371794 и 82170671). Работа также была спонсирована Образовательным фондом Чжэцзянского университета, Фондом талантов академика Шусэна Ланьцзюаня. Мы также хотели бы поблагодарить профессора Дану К. Мерриман из Висконсинского университета в Ошкоше за ее работу по разведению 13-линейных сусликов и за щедрый обмен полезными идеями и опытом в лабораторном разведении моделей зимующих грызунов.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
3-0 швы с игламиJinhuan Medical Products Co., LtdR315Для закрытия кожи
7-0 шелковый шовBraintree, sci, incSUT-S103
7F Вводный Шит Beijing Demax Medical Technology Co., Ltd.DQ07083818SНаручник для IHIVC
8-0 Швы с игламиJinhuan Medical Products Co., Ltd.H821Для анастомиса SHIVC
8F Introducter Sheath Beijing Demax Medical Technology Co., Ltd.DQ08083818SНаручник для IHIVC
Анестезиологический аппаратRWD life Science Co.R500
Коагуляция КровиNingbo Shunye Medical Co., Ltd.BDD-YE-DT-1
Бульдог-зажим (слегка изогнутый)Jinzhong Medical Products Co., Ltd.XEC120SHIVC
БупренорфинТяньцзиньский институт фармацевтических исследований Фармацевтическая компанияH12020275Обезболивающее
Цефуроксим натрийEsseti FarmaceuticiS.r.lH20160013Антибиотик
Ватные палочкиFuqing Health & Интегральная медицина20230R
Изогнутые микрощипцыRWD life Science Co.F11031-11Хирургический инструмент
Изогнутые микроножницы66 Vision Tech Co., Ltd.54108BХирургический инструмент
Марлевые мазкиYubei Medical Materials Co., LTD21080274
Инъекция гепарина натрияNorth China Pharmaceutical Co., LTD2101131-2
Инфузионный насосHowkmed Co., Ltd.HK-400
ИзофлуранRWD life Science Co.21070201
Держатель для игл для микроWorld Precision Instruments Co., Ltd.555408NTХирургический инструмент
Клипс для микрососудовRWD life Science Co.R31005-06PV и IHIVC
Аппликатор с клипсом Micro VesselRWD life Science Co.R34001-14Хирургический инструмент
Держатель для иглыRWD life Science Co.F31025-13Закрытие брюшной полости
Физиологический растворZhejiang Tianrui Pharmaceutical Co., Ltd716092103
Прямые микрощипцыRWD life Science Co.F11029-11Хирургический инструмент
Хирургический микроскопLeicaM650
Хирургическая платформаН/ДН/ДИндивидуальный, магнитный
Тканевые щипцыRWD life Science Co.F12002-12Хирургический инструмент
Тканевые ножницыRWD life Science Co.S12003-09Хирургический инструмент
Решение UWСистемы восстановления органовSPS-1Органная перфузия и хранение 

Ссылки

  1. Zeng, Q., et al. Successful orthotopic liver transplantation in mice utilizing microcomputed tomography angiography. J Vis Exp. (199), e65537(2023).
  2. Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in ....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги