В данной статье представлен протокол выявления Mycobacterium tuberculosis и ее лекарственной устойчивости с помощью технологии флуоресцентной количественной ПЦР (кПЦР) в реальном времени.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
* These authors contributed equally
В данной статье представлен протокол выявления Mycobacterium tuberculosis и ее лекарственной устойчивости с помощью технологии флуоресцентной количественной ПЦР (кПЦР) в реальном времени.
Туберкулез (ТБ) является одной из основных проблем здравоохранения, которая в непропорционально большой степени затрагивает уязвимые группы населения. Появление и распространение лекарственно-устойчивого туберкулеза представляют серьезную угрозу для глобального общественного здравоохранения. Традиционные методы диагностики микобактерий туберкулеза (МТБ), такие как микроскопия мазка и бактериологическое исследование, имеют значительные ограничения и часто приводят к запоздалому клиническому лечению. Для решения этой проблемы была разработана эффективная схема диагностики на основе флуоресцентной ПЦР в реальном времени. Высококачественные нуклеиновые кислоты MTB могут быть экстрагированы из тестовых образцов, а статус резистентности может быть определен в ключевых местах резистентности. По сравнению с традиционными методами, этот подход значительно сокращает время обнаружения до нескольких часов, что позволяет определить статус инфекции и резистентности вскоре после первого визита пациента. Чувствительность обнаружения превышает 85%, а специфичность достигает 95%. Эта неинвазивная технология не только сводит к минимуму дискомфорт пациента, но и поддерживает точную диагностику в низовых медицинских учреждениях благодаря своей низкой стоимости и высокой эффективности. В целом, этот подход представляет собой значительное улучшение диагностики туберкулеза.
Туберкулез (ТБ), хроническое инфекционное заболевание, вызываемое микобактериями туберкулеза (МТБ), входит в десятку основных глобальных причин смертности1. Лекарственно-устойчивый туберкулез (ЛУ-ТБ) представляет собой серьезную проблему для борьбы с туберкулезом. В Плане действий по созданию сообществ, свободных от туберкулеза (2022-2027 гг.), опубликованном Китайским центром по контролю и профилактике заболеваний (China CDC), подчеркивается необходимость раннего скрининга лекарственной устойчивости у всех пациентов с бактериологически подтвержденным туберкулезом легких2. В нем....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Это исследование было одобрено Комитетом по этике больницы пятого отделения Синьцзянского производственно-строительного корпуса; Этическое число равно LLWYH2025001, и этического конфликта нет. Используемые реагенты и оборудование приведены в Таблице материалов.
1. Забор образцов
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
В этом исследовании использовалась флуоресцентная ПЦР в реальном времени и анализ кривой плавления для тестирования образцов мокроты у 17 пациентов с туберкулезом. Кроме того, 30 пациентов прошли тестирование на резистентность к рифампицину , а 20 были протестированы на устойчивость к изониазиду и этамбутолу. Метод флуоресцентной ПЦР в реальном времени показал 88,2% положительных результатов выявления комплекса Mycobacterium tuberculosis .
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Появление в мировом масштабе лекарственно-устойчивых штаммов Mycobacterium tuberculosis complex (MTBC) значительно усложнило лечение больных туберкулезом (ТБ). В частности, туберкулез с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ) и широкой лекарственной устойчивостью (ШЛУ) представляет собой огромные проблемы для борьбы с ТБ12. Быстрое выявление лекарственной устойчивости имеет решающее значение для разработки соответствующих схем лечения, предотвраще.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Это исследование было профинансировано за счет специального гранта от Corps Tuberculosis Project.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| центрифуга | |||
| Lysis Buffer | Xiamen Zhishan Biotechnology Co., Ltd. | ||
| Набор для обнаружения мутаций устойчивости к этамбутолу Mycobacterium tuberculosis | Xiamen Zhishan Biotechnology Co., Ltd. | ||
| Набор для обнаружения мутаций резистентности к изониазиду Mycobacterium tuberculosis | Xiamen Zhishan Biotechnology Co., Ltd. | ||
| Обнаружение мутаций устойчивости к рифампицину Mycobacterium tuberculosis Ki | Xiamen Zhishan Biotechnology Co., Ltd. | ||
| Система ПЦР в реальном времени SLAN-96P | Shanghai Hongshi Medical Technology Co., Ltd. | SLAN-96P | |
| Раствор для переработки мокроты | Xiamen Zhishan Biotechnology Co., Ltd. | ||
| TopPette Pipettor |
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Эта статья была опубликована
Видео скоро будет доступно