Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Количественное определение виолацеина в Chromobacterium violaceum и его ингибирование биологически активными соединениями

2.6K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/68507

⸱

8 августа 2025 г.

 ,  ,  , 
1Food Research Center, Department of Food and Experimental Nutrition, Faculty of Pharmaceutical Sciences, University of São Paulo (USP)

В этой статье

Краткое содержание

Целью данного протокола является количественная оценка продукции виолацеина Chromobacterium violaceum ATCC 12472 в качестве косвенного показателя для оценки ингибирования чувства кворума биологически активными соединениями.

Аннотация

Бактерии общаются с помощью системы, известной как чувство кворума (QS), которая позволяет им координировать свое поведение в ответ на изменения плотности клеток. Этот процесс включает в себя производство, секрецию и обнаружение небольших внеклеточных сигнальных молекул, обычно называемых аутоиндукторами (ИИ). QS регулирует широкий спектр генов и функций, включая образование и распространение биопленки, подвижность роения, выработку факторов вирулентности, устойчивость к антибиотикам и биолюминесценцию, среди прочего. Ингибирование QS стало многообещающей антивирулентной стратегией против устойчивых к антибиотикам бактерий, поскольку оно оказывает более низкое селективное давление по сравнению с традиционными антибиотиками. В бактерии Chromobacterium violaceum ATCC 12472 белки QS CviI/CviR, которые гомологичны белкам QS типа LuxI/LuxR Aliivibrio fisheri, контролируют многие гены, в том числе те, которые отвечают за выработку фиолетового пигмента виолацеина. C. violaceum широко используется в качестве биосенсорного штамма в исследованиях ингибирования QS, в частности, ингибирования продукции виолацеина. Многие соединения обладают потенциалом ингибирования QS, связываясь с белками QS, либо с гомологами LuxI, либо с LuxR, нарушая цепи QS. В настоящем протоколе описан метод количественного определения виолацеина, продуцируемого C. violaceum ATCC 12472, и его ингибирования биологически активными соединениями в концентрациях, не влияющих на рост бактерий. Описанный здесь анализ демонстрирует значительное снижение продукции виолацина исследуемыми соединениями. Это исследование подчеркивает потенциал использования этого протокола для скрининга перспективных кандидатов в исследованиях ингибирования QS.

Введение

Бактерии могут общаться через систему, известную как QS, которая обеспечивает скоординированную модуляцию их поведения в ответ на изменения плотности клеток. Этот процесс включает в себя производство, секрецию и обнаружение малых внеклеточных сигнальных молекул, также называемых аутоиндукторами, которые обеспечивают связь как между различными видами, так и внутри одного вида 1,2.

Эта коммуникация способна регулировать гены и функции, такие как образование и диспергирование биопленки, подвижность и адгезия, пролиферация клеток, синтез экзоферментов и сидерофоров, спорообразование, устойчивость к кислотам, горизонтальный перенос генов, устойчивость к антибиотикам, биолюминесценция, производство экзополисахаридов и др. 3,4,5. Учитывая актуальность QS-регулируемых фенотипов, существует большой интерес к разработке систем, способных вмешиваться в эту клеточную коммуникацию. Ингибирование передачи сигналов QS также называется подавлением кворума (QQ)6. QQ может происходить несколькими путями, включая ингибиторы синтеза аутоиндукторов, ферментативную инактивацию этих сигналов, а также молекулы с антагонистическим действием на эти молекулы 4,7.

Растущая угроза устойчивости к антибиотикам подтолкнула к исследованиям альтернативных методов лечения, включая ингибиторы чувства кворума (QSI), которые нарушают бактериальную коммуникацию, не убивая патогены напрямую. Эти соединения могут проявлять синергетический эффект в сочетании с антибиотиками, повышая восприимчивость бактерий и позволяя снизить дозы антибиотиков, что является ключевой стратегией для замедления развития резистентности. Например, ресвератрол и канамицин вместе задерживают рост Aeromonas hydrophila 8, в то время как N-ацетилцистеин синергирует с тобрамицином, разрушая биопленки Pseudomonas aeruginosa 5.

В условиях чрезмерного использования антибиотиков и застоя в разработке лекарств антивирулентные подходы, такие как ингибирование QS,предлагают смену парадигмы. Вместо того, чтобы нацеливаться на жизнеспособность, они нацелены на факторы вирулентности, делая бактерии менее вредными и более уязвимыми к иммунитету хозяина или антибиотикам. Эта стратегия обеспечивает более слабое селективное давление по сравнению с традиционными антибиотиками, сводя к минимуму резистентность и сохраняя полезную микробиоту10,11. Несмотря на многообещающие лабораторные результаты, реальная валидация с помощью клинических испытаний остается недостаточно изученной12. Ингибирование QS представляет собой многообещающее дополнение к антибиотикам, но его применение на практике требует дополнительных доказательств эффективности и безопасности в сложных биологических средах.

C. violaceum — это бета-протеобактерия, которая образует фиолетовые колонии с гладкой и блестящей поверхностью. Они являются факультативными анаэробными бациллами и не образуют спор13. Механизм QS у C. violaceum включает в себя петлю положительной обратной связи, основанную на системе генов, аналогичной lux-модели Aliivibrio fisheri, которая содержит белки CviI (гомологичные LuxI) и CviR (гомологичные LuxR; Рисунок 1). Виолацеин проявляет биоцидную активность в отношении различных организмов, включая грибы, бактерии, нематоды и вирусы, особенно во время фазы стационарного роста микроорганизмов, когда плотность популяции чрезвычайно высока, а питательные вещества почти истощены. Следовательно, производство виолацеина можно рассматривать как конкурентную стратегию для продления выживания микробной колонии14.

Растения производят соединения, возникающие в результате вторичного метаболизма, которые играют решающую роль в повышении их способности адаптироваться к неблагоприятной окружающей среде. Эти метаболиты, такие как алкалоиды, фенолы, флавоноиды, хиноны, дубильные вещества, терпены и лектины, широко признаны в качестве защитных механизмов против травоядных животных и микроорганизмов. Потенциал соединений растительного происхождения в качестве QSI привлек особое внимание из-за динамического взаимодействия между растениями и микроорганизмами. Исследования взаимодействия растений и патогенов в ризосфере показали, что растения могут реагировать на бактериальные аутоиндукторы, выделяя биологически активные соединения, способные действовать как ингибиторы противпатогенов.

В данном исследовании мы описываем практический метод, направленный на количественную оценку продукции виолацеина C. violaceum, уделяя особое внимание его ингибированию биологически активными соединениями. Этот метод служит в качестве исходного инструмента скрининга для отбора соединений с потенциальной активностью QSI. Он обеспечивает быстрый и практический подход к будущим терапевтическим разработкам против грамотрицательных патогенных бактерий. Этот стандартизированный протокол будет полезен, поскольку он предоставляет подробное описание, которое не было сделано в предыдущих исследованиях, и облегчит сравнение между различными исследованиямив будущем.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

1. Подготовка культуры (Рисунок 2)

  1. Вырастите в пробирке 5 мл культуры C. violaceum ATCC 12472 в бульоне Luria Bertani (LB: триптон 10 г/л, дрожжевой экстракт 5 г/л, 5 г/л NaCl) при 30 °C в встряхивающем инкубаторе (220 об/мин) в течение 24 ч.
  2. Отрегулируйте культуру до наружного диаметра595 0,1 в фунтовом бульоне, что соответствует примерно 1 x 108 КОЕ/мл.

2. Приготовление компаунда

  1. В 96-луночный планшет с плоским дном добавьте бульон LB и биологически активное соединение в соответствии с расчетом серийного разведения, следуя описанию ниже. В зависимости от их растворимости, биологически активные соединения обычно разводят в чистом растворе ДМСО или растворе ДМСО: воде (1:1).
    ПРИМЕЧАНИЕ: В методологиях, оценивающих QSI, крайне важно убедиться, что используемые концентрации ниже минимальной ингибирующей концентрации (суб-MIC), что означает, что они не влияют на рост бактерий. Поэтому рекомендуется проводить анализ кривой роста при различных концентрациях, чтобы подтвердить, что соединение специфически ингибирует межклеточную коммуникацию, а не микробную жизнеспособность. На дополнительном рисунке 1 приведены анализы кривой роста тестируемых биологически активных соединений, используемых в этом протоколе.
  2. Для расчета концентрации биологически активного соединения в скважине с учетом стокового раствора фарнезола и линалоола в концентрации 20 мг/мл и целевой концентрации 200 мкг/мл в скважине, а также ресвератрола в концентрации 2,5 мг/мл в исходном растворе и 25 мкг/мл в скважине выполняют расчет следующим образом:
    C1V1 = C2V2
    20 000 мкг/мл x V1 = 200 мкг/мл x 200 мкл
    V1 = 40 000/20 000 μL
    V1 = 2 мкл
    где C1 = концентрация исходного раствора (20 мг/мл, что эквивалентно 20 000 г/мл); V1 = объем добавляемого исходного раствора; C2 = желаемая конечная концентрация (200 г/мл); V2 = конечный объем в скважине (200 μл).

3. Серийное разведение20 и подготовка планшетов (Рисунок 3)

ПРИМЕЧАНИЕ: Последовательное разбавление используется для быстрой оценки диапазона концентраций испытуемого соединения. В этом процессе соединение последовательно разбавляют в постоянном соотношении, в данном случае 1:2. При каждом разведении концентрация соединения уменьшается вдвое по сравнению с предыдущей концентрацией, что приводит к уменьшению диапазона концентраций20.

  1. В первую колонку серийного разведения добавьте 196 мкл бульона LB (в нашем примере колонки 3, 5 и 7). На следующие лунки серийного разведения добавляем 100 мкл ЛБ бульона (в нашем случае столбцы 4, 6 и 8).
  2. Затем добавьте в 2 раза больше биологически активного соединения, рассчитанного на предыдущем шаге (2.2), чтобы выполнить серийное разведение. В результате расчета было получено по 2 мкл каждого испытуемого соединения для достижения окончательной концентрации в первой лунке, поэтому добавьте 4 мкл соединения (столбцы 3, 5 и 7).
  3. Переложите половину общего объема скважины (100 μл) в следующую колонну (в нашем случае это колонки 4, 6 и 8) и так до последней желаемой концентрации, если вы делаете серийное разбавление. Не забудьте тщательно перемешать содержимое перед переносом.
    ПРИМЕЧАНИЕ: В этой экспериментальной установке для простоты мы использовали только две концентрации, и все соединения помещаются только в одну пластину.
  4. Проводите эксперимент в количестве, по крайней мере, в три раза на концентрацию каждого соединения. Также рекомендуется использовать три биологических реплицита. Поменяйте наконечник и повторяйте процедуру до последней желаемой концентрации. В последнем столбце (в нашем случае 4, 6 и 8) возьмите из него 100 μL и выбросьте.
  5. Добавьте во все лунки по 80 мкл бульона LB, итого 180 мкл (ряды от B до D). Затем добавьте 20 мкл культуры C. violaceum , стандартизированной на шаге 1.2, обеспечив конечный объем 200 мкл на лунку (строки от B до D). Обязательно меняйте наконечники пипеток каждый раз при смене лунок, чтобы избежать переноса более высоких концентраций между лунками или загрязнения.
  6. Если соединение растворено в каком-либо растворителе, обязательно приготовьте контроль с этим растворителем. Мы использовали ДМСО. В этом случае готовят растворитель для контроля, который будет представлять собой необработанный контроль - УК (без биоактивного соединения; колонка 9). Добавьте 2 мкл ДМСО на каждую контрольную лунку. Это дает максимальную концентрацию 1% ДМСО в тесте.
    ПРИМЕЧАНИЕ: ДМСО в концентрации 1% не влияет на рост бактерий21,22.
  7. Приготовьте заготовку, или контролируйте цвет, если используете пигментированные составы, без бактерий. После добавления 80 мкл бульона LB во все лунки, итого 180 мкл (строки от B до D, как описано ранее), добавьте 20 мкл бульона LB в соответствующие глухие лунки, итого 200 мкл (ряды от E до G). Это делается потому, что есть некоторое фоновое окрашивание от кристаллического фиолетового, которое необходимо вычесть из показаний OD, как будет описано в шаге 5 этого протокола.
  8. Если какая-либо колонка остается пустой, заполните ее 200 μL LB бульона или стерильной дистиллированной воды (колонки 1, 2, 10, 11 и 12). Этот шаг важен для предотвращения чрезмерного пересыхания среды в инкубаторе.

4. Инкубация и экстракция виолацина

  1. Накройте пластину крышкой или герметизирующей пленкой (как указано в Таблице материалов) для предотвращения испарения, в зависимости от используемого спектрофотометра.
  2. Инкубируйте планшет при температуре 30 °C с перемешиванием при 130 об/мин в течение 24 ч. Затем извлеките планшет из инкубатора, поместите его в сушильный инкубатор при температуре 60 °C, снимите крышку и дайте планшету полностью высохнуть (примерно 8 ч).
  3. После того как тарелка высохнет, достаньте ее из инкубатора и добавьте в каждую лунку по 200 мкл чистого ДМСО, затем накройте крышкой. Поместите планшет в инкубатор при температуре 25°C, встряхивая при 130 об/мин в течение 30 минут, чтобы растворить пигмент виолацеин.
  4. По истечении этого времени извлеките планшет из инкубатора и переложите 100 μL на другой микропланшет, избегая контакта наконечника со стенками лунки.

5. Количественная оценка продукции виолацина

  1. Количественно измерьте количество производимого виолацеина, измерив поглощение на длине волны 595 нм с помощью соответствующего пластинчатого спектрофотометра (Таблица материалов). Ингибирование пигмента виолацина пропорционально более низким показателям абсорбции.
  2. Количественно оцените продукцию виолацеина с использованием отрицательного контроля (необработанного контроля) в качестве эталона для 100% продукции виолацина (Таблица 1). Во-первых, вычтите значение абсорбции заготовки из каждой репликации обработки, чтобы получить абсорбцию, соответствующую исключительно пигменту виолацеину (исключая интерференцию от бульона или составного цвета). Затем рассчитайте процент выработки виолацина для каждой процедуры, используя следующее уравнение.
    % продукции виолацеина = (ОД биологически активного соединения / ОД необработанного контроля) х 100
  3. Рассчитайте результаты статистического анализа в трех репликациях. Результаты могут быть отправлены в ANOVA, после чего следует тест Тьюки с использованием программного обеспечения GraphPad Prism 8.0. Значение p <0,05 считалось статистически значимым.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Для получения показанных здесь результатов были использованы три биологически активных соединения, ранее изученные нашей исследовательской группой8: ресвератрол, фарнезол и линалоол. Каждое соединение было проверено на его способность ингибировать продукцию виолацеина в C. violaceum ATCC 12472, фенотип, регулируемый системой QS над опероном vioABCDE 23.

Полученные результаты подтверждают эффективность нашего протокола в количест...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Первый метод извлечения и определения характеристик виолацеина из C. violaceum появился в 1990-х годах, сосредоточившись на выявлении подходящих источников углерода для синтеза пигмента. В этом процессе виолацеин вместе с клетками и питательной средой высушивали, ресуспендировали в этаноле, а затем отделяли путем экстракции надосадочной жидкостью. Виолацеин, теперь растворенный в этаноле, впоследствии снова высушивали, получая чистую, сухую форму пигмента27

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих финансовых интересов.

Благодарности

Мы хотели бы поблагодарить Национальный совет по научному развитию (CNPQ) в виде грантов #403661/2023-4 и #444794/2024-7 и стипендии #306685/2022-1, а также Исследовательский фонд Сан-Паулу (FAPESP) за гранты #2024/05158-6 и 2023/17090-4 и финансовую поддержку Центра исследований продуктов питания (FoRC) #2013/07914-8.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
ДМСО Синтезатор
ФарнезолСигма-ОлдричФ20395%
ЛиналоолСигма-ОлдричЛ260297%
Лурия-Бертани МедиумДифко244620
Оптическая адгезивная пленкаТермо Фишер4311971Усилитель MicroAmp
РесвератролСигма-ОлдричР5010≥ 99% (ВЭЖХ)
Многорежимный считыватель Synergy HTXБиотек
Планшеты для культивирования тканей 96 лунокКасвиК12-096

Ссылки

  1. Mukherjee, S., Bassler, B. L. Bacterial quorum sensing in complex and dynamically changing environments. Nat Rev Microbiol. 17 (6), 371(2019).
  2. Lima, E. M. F., Winans, S. C., Pinto, U. M. Quorum sensing interference by phenolic compounds - A matter of bacterial misunderstanding. Heliyon. 9 (7), (2023).
  3. Papenfort, K., Bassler, B. L. Quorum sensing signal-response systems in Gram-negative bacteria. Nat Rev Microbiol. 14 (9), 576-588 (2016).
  4. Grandclément, C., Tannières, M., Moréra, S., Dessaux, Y., Faure, D. Quorum quenching: role in nature and applied developments. FEMS Microbiol Rev. 40 (1), 86-116 (2016).
  5. Lima, E. M. F., de Almeida, F. A., Sircili, M. P., Bueris, V., Pinto, U. M. N-acetylcysteine (NAC) attenuates quorum sensing regulated phenotypes in Pseudomonas aeruginosa PAO1. Heliyon. 9 (3), (2023).
  6. Allen, R. C., Popat, R., Diggle, S. P., Brown, S. P. Targeting virulence: can we make evolution-proof drugs. Nat Rev Microbiol. 12 (4), 300-308 (2014).
  7. Kalia, V. C., Patel, S. K. S., Kang, Y. C., Lee, J. K. Quorum sensing inhibitors as antipathogens: biotechnological applications. Biotechnol Adv. 37 (1), 68-90 (2019).
  8. Santos, C. A., Lima, E. M. F., Franco, B. D. G. deM., Pinto, U. M. Exploring phenolic compounds as quorum sensing inhibitors in foodborne bacteria. Front Microbiol. 12, 735931(2021).
  9. Ahmed, S. A. K. S., et al. Natural quorum sensing inhibitors effectively downregulate gene expression of Pseudomonas aeruginosa virulence factors. Appl Microbiol Biotechnol. 103 (8), 3521-3535 (2019).
  10. Yang, Q., Defoirdt, T. Weak selection for resistance to quorum sensing inhibition during multiple host infection cycles. ISME J. 18 (1), 251(2024).
  11. Defoirdt, T. Specific antivirulence activity, A new concept for reliable screening of virulence inhibitors. Trends Biotechnol. 34 (7), (2016).
  12. Defoirdt, T. Quorum-sensing systems as targets for antivirulence therapy. Trends Microbiol. 26 (4), 313-328 (2018).
  13. Mahendrarajan, V., Easwaran, N. Quorum quenching effects of linoleic and stearic acids on outer membrane vesicle-mediated virulence in Chromobacterium violaceum. Biofouling. , 1-11 (2024).
  14. Durán, N., et al. Advances in Chromobacterium violaceum and properties of violacein-Its main secondary metabolite: A review. Biotechnol Adv. 34 (5), 1030-1045 (2016).
  15. Nazir, N., et al. Characterization of phenolic compounds in two novel lines of Pisum sativum L. along with their in vitro antioxidant potential. Env Sci Pollut Res Int. 27 (7), 7639(2020).
  16. Majdura, J., Jankiewicz, U., Gałązka, A., Orzechowski, S. The role of quorum sensing molecules in bacterial-plant interactions. Metabolites. 13 (1), (2023).
  17. Çevikbaş, H., Ulusoy, S., Kaya Kinaytürk,, N, Exploring rose absolute and phenylethyl alcohol as novel quorum sensing inhibitors in Pseudomonas aeruginosa and Chromobacterium violaceum. Sci Rep. 14 (1), 15666(2024).
  18. Choi, S. Y., Lim, S., Yoon, K. H., Lee, J. I., Mitchell, R. J. Biotechnological activities and applications of bacterial pigments violacein and prodigiosin. J Biol Eng. 15 (1), (2021).
  19. Moradi, F., Hadi, N., Bazargani, A. Evaluation of quorum-sensing inhibitory effects of extracts of three traditional medicine plants with known antibacterial properties. New Microb New Infect. 38 (100769), 100769(2020).
  20. Wiegand, I., Hilpert, K., Hancock, R. E. Agar and broth dilution methods to determine the minimal inhibitory concentration (MIC) of antimicrobial substances. Nat Protoc. 3 (2), 163-175 (2008).
  21. Scardino, A., et al. Cinnamaldehyde effectively disrupts Desulfovibrio vulgaris biofilms: potential implication to mitigate microbiologically influenced corrosion. Appl Env Microbiol. 91 (5), (2025).
  22. Summer, K., Browne, J., Hollanders, M., Benkendorff, K. Out of control: The need for standardised solvent approaches and data reporting in antibiofilm assays incorporating dimethyl-sulfoxide (DMSO). Biofilm. 4, 100081(2022).
  23. Ravichandran, V., et al. Virtual screening and biomolecular interactions of CviR-based quorum sensing inhibitors against Chromobacterium violaceum. Front Cell Infect Microbiol. 8, (2018).
  24. Lima, E. M. F., de Almeida, F. A., Pinto, U. M. Exploring the antivirulence potential of phenolic compounds to inhibit quorum sensing in Pseudomonas aeruginosa. World J Microbiol Biotechnol. 41 (2), (2025).
  25. Blosser, R. S., Gray, K. M. Extraction of violacein from Chromobacterium violaceum provides a new quantitative bioassay for N-acyl homoserine lactone autoinducers. J Microbiol Methods. 40 (1), 47-55 (2000).
  26. Zhu, H., He, C. C., Chu, Q. H. Inhibition of quorum sensing in Chromobacterium violaceum by pigments extracted from Auricularia auricular. Lett Appl Microbiol. 52 (3), 269-274 (2011).
  27. Durán, N., Antonio, R. V., Haun, M., Pilli, R. A. Biosynthesis of a trypanocide by Chromobacterium violaceum. World J Microbiol Biotechnol. 10 (6), 686(1994).
  28. Rettori, D., Production Durán, N. extraction and purification of violacein: an antibiotic pigment produced by Chromobacterium violaceum. World J Microbiol Biotechnol. 14 (5), 685(1998).
  29. Cheng, K. -C., Hsiao, H. -C., Hou, Y. -C., Hsieh, C. -W., Hsu, H. -Y., Chen, H. -Y., Lin, S. -P. Improvement in violacein production by utilizing formic acid to induce quorum sensing in Chromobacterium violaceum. Antiox. 11 (5), 849(2022).
  30. Defoirdt, T., Brackman, G., Coenye, T. Quorum sensing inhibitors: how strong is the evidence. Trends Microbiol. 21 (12), 619-624 (2013).
  31. Alyousef, A. A., et al. Myrtus communis and its bioactive phytoconstituent, linalool, interferes with Quorum sensing regulated virulence functions and biofilm of uropathogenic bacteria: In vitro and in silico insights. J King Saud Univ Sci. 33 (7), 101588(2021).
  32. Kanekar, S., Devasya, R. P. Growth-phase specific regulation of cviI/R based quorum sensing associated virulence factors in Chromobacterium violaceum by linalool, a monoterpenoid. World J Microbiol Biotechnol. 38 (2), (2022).
  33. Dias, J. P., Domingues, F. C., Ferreira, S. Linalool reduces virulence and tolerance to adverse conditions of listeria monocytogenes. Antibiotics. 13 (6), 474(2024).
  34. Rodrigues, C. F., Černáková, L. Farnesol and tyrosol: Secondary metabolites with a crucial quorum-sensing role in Candida biofilm development. Genes. 11 (4), (2020).
  35. Hacioglu, M., Yilmaz, F. N., Yetke, H. I., Haciosmanoglu-Aldogan, E. Synergistic effects of quorum-sensing molecules and antimicrobials against Candida albicans and Pseudomonas aeruginosa biofilms: in vitro and in vivo studies. J Antimicrob Chemother. 79 (11), 2828(2024).
  36. Bhattacharyya, S., Agrawal, A., Knabe, C. Sol-gel silica controlled release thin films for the inhibition of methicillin resistant Staphylococcus aureus. Biomater. 35, 509-517 (2014).
  37. Qu, Y., Zou, Y., Wang, G., Zhang, Y., Yu, Q. Disruption of communication: Recent advances in antibiofilm materials with anti-quorum sensing properties. ACS Appl Mater Interfaces. 16 (11), 13353-13383 (2024).
  38. Li, B., et al. Effects of Rhapontigenin as a Novel Quorum-Sensing Inhibitor on Exoenzymes and Biofilm Formation of Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum and Its Application in Vegetables. Molecules. 27 (24), (2022).
  39. Mattio, L. M., Catinella, G., Pinto, A., Dallavalle, S. Natural and nature-inspired stilbenoids as antiviral agents. Eur J Med Chem. 202 (112541), 112541(2020).
  40. Duarte, A., Alves, A. C., Ferreira, S., Silva, F., Domingues, F. C. Resveratrol inclusion complexes: Antibacterial and anti-biofilm activity against Campylobacter spp. and Arcobacter butzleri. Food Res Int. 77, 244-250 (2015).
  41. Martinelli, D., Grossmann, G., Séquin, U., Brandl, H., Bachofen, R. Effects of natural and chemically synthesized furanones on quorum sensing in Chromobacterium violaceum. BMC Microbiol. 4 (1), (2004).
  42. Tan, L. Y., Yin, W. F., Piper Chan, K. G. nigrum, Piper betle and Gnetum gnemon-natural food sources with anti-quorum sensing properties. Sensors. 13 (3), 3975-3985 (2013).
  43. Tan, L. Y., Yin, W. F., Chan, K. G. Silencing quorum sensing through extracts of Melicope lunu-ankenda. Sensors. 12 (4), 4339-4351 (2012).
  44. Oliveira, B. D., et al. Antioxidant, antimicrobial and anti-quorum sensing activities of Rubus rosaefolius phenolic extract. Ind Crops Prod. 84, 59-66 (2016).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Чувство кворумаколичественное определение виолацеинаингибирование чувства кворумасерийное разведениемикропланшетный анализоптическая плотностьантибиотикорезистентностьфакторы вирулентности
Количественное определение виолацеина в Chromobacterium violaceum и его ингибирование биологически активными соединениями
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.