Методическая статья

Применение оптогенетики в сочетании с регистрацией фотометрии волокон в регуляции нейронных цепей-висцеральных функций с помощью электроакупунктуры

717 просмотров

⸱

DOI:

10.3791/68667

⸱

19 сентября 2025 г.

 ,  ,  ,  , 
1Institute of Acupuncture and Moxibustion, China Academy of Chinese Medical Sciences, 2Northeast Asia Research Institute of Traditional Chinese Medicine, Changchun University of Chinese Medicine

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Целью данного эксперимента является создание нового подхода к одновременной интеграции оптогенетики, внутримозговой регистрации кальциевого сигнала и мониторинга моторики желудка, предлагая новую парадигму для мониторинга в реальном времени взаимосвязи между соматической стимуляцией и взаимодействием нейронных цепей и висцеральных функций, которая применяется в исследованиях иглоукалывания.

Аннотация

Этот протокол описывает технику оптогенетических манипуляций с определенными типами нейронов и регистрации в режиме реального времени эффектов электроакупунктуры в Зусанли (ST36) на ядерные сигналы кальция и моторику желудка у мышей под анестезией in vivo. Исследование центральных механизмов, лежащих в основе эффективности иглоукалывания, было ограничено технологическими ограничениями. Тем не менее, развитие оптогенетических технологий и технологий оптической визуализации дало толчок развитию нейробиологии. Фотометрическая запись волокон, первоначально использующая генетически закодированные показатели кальция для визуализации изменений в динамике кальция, указывающих на активность нейронов, выделяется как ключевая технология для характеристики корреляций между мозгом и поведением in vivo. Применение оптогенетики позволяет генетически кодировать нейроны, обеспечивая их активацию или ингибирование в ответ на световую стимуляцию. Эта способность облегчает установление причинно-следственных связей между функцией нейронных схем и поведенческими результатами. Одновременная фотометрия волокон, запись кальция и оптогенетическая стимуляция обеспечивают метод регистрации и манипулирования нейронной активностью в режиме реального времени, выступая в качестве эффективного подхода к исследованию центральных механизмов иглоукалывания. Тем не менее, по-прежнему существует нехватка исследований, документирующих одновременное использование фотометрии волокон, записи кальция, оптогенетики и мониторинга висцеральных функций в исследованиях иглоукалывания. Результаты этого эксперимента показывают, что EA-ST36 может регулировать моторику желудка, связанную с цепью PBNGlu-NTS Glu-DMV ChAT. Оптогенетическая стимуляция этого контура дает тот же эффект. После наложения этих двух факторов изменения кальциевого сигнала и моторики желудка достигают своего максимума. Это исследование установило новый подход к одновременной интеграции оптогенетического, внутримозгового кальциевого сигнала и мониторинга моторики желудка, предложив новую парадигму для мониторинга в режиме реального времени взаимосвязи между соматической стимуляцией и взаимодействием нейронных цепей и висцеральных функций.

Введение

В последние годы распространение биомолекулярных флуоресцентных сенсоров способствовало использованию волоконной фотометрии в молекулярной биологии, облегчаязапись in vivo. Это достижение позволяет в режиме реального времени отслеживать изменения нейронной активности в мозге. Интеграция оптогенетики позволяет манипулировать нейронами, предлагая преимущество немедленного проведения оптогенетики и записи оптического волокна путем простой вставки оптического волокна. В сочетании с регистрацией висцеральных функций этот метод обеспечивает хорошее временное разрешение и нацеливание на уровне ядер для наблюдения за тем, как иглоукалывание модулирует висцеральные функции через модификации нейронной активности.

Многочисленные исследования проиллюстрировали отчетливое регулирующее влияние иглоукалывания на функцию желудочно-кишечного тракта 2,3,4, хотя точные центральные механизмы остаются неясными. Во многих древних китайских медицинских книгах, таких как HuangDiNeiJing, также записано, что ST36 (на боковой стороне позади коленного сустава, примерно на 2 мм ниже малоберцовой кости5) часто используется для лечения желудочно-кишечных заболеваний. Недавние исследования показали, что ядра, участвующие в физиологических процессах желудка (например, пищевом поведении6,прекращении приема пищи7, подавлении аппетита8) и патологических процессах (например, желудочная боль9, желудочная дисфункция10) охватывают парасубталамическое ядро (PSTn), дорсальное ядро рафа (DRN), латеральное парабрахиальное ядро (LPB), ядро одиночного тракта (NTS) и дорсальное моторное ядро блуждающего нерва (DMV). Исследования показали, что электроакупунктура при ST36 может увеличить количество клеток c-Fos+ в DMV, тем самым увеличивая экспрессию c-Fos+ в каудальном субядре NTS11. Кроме того, документально подтверждено, что парацентрическое ядро (PBN) участвует в составе парацентрического ядерного комплекса, может проецироваться вплоть до продолговатого мозга NTS, который играет важную роль в интеграции висцеральной сенсорной информации, такой как желудочно-кишечные сигналы12,13. Приведенная выше информация позволяет предположить, что иглоукалывание потенциально может модулировать моторику желудка и может быть связано с нейронной цепью PBN Glu-NTSGlu-DMV ChAT. Глутаматергические нейроны в основном участвуют в LPB и NTS14, в то время как холинергические нейроны в основном участвуют в DMV во время желудочных физиологических и патологических процессов15. Исследование регулирующего влияния иглоукалывания на нейронные цепи и висцеральные функции может обеспечить более четкое понимание механизмов иглоукалывания и обеспечить теоретическую поддержку для клинических вмешательств иглоукалывания при висцеральных заболеваниях.

Тем не менее, из-за технических ограничений, ограниченные исследования углубились в механизмы нейронных схем электроакупунктуры в модуляции висцеральных функций. Таким образом, в настоящем исследовании представлены упрощенные рекомендации по ознакомлению с подробным процессом введения вируса. Примечательно, что методология, изложенная в этой статье, может быть использована для выяснения схемологических механизмов, участвующих в регуляции различных висцеральных функций иглоукалыванием.

Таким образом, данное исследование направлено на изучение регуляторных эффектов иглоукалывания на моторику желудка, которая может быть связана с нейронной цепью PBNGlu-NTS Glu-DMV ChAT путем сочетания оптогенетики с волоконной фотометрией для записи визуализации кальция. Цель состоит в том, чтобы создать протокол для визуализации кальция и оптогенетической синхронизации, представляя новую исследовательскую основу для изучения висцеральных функций и нейронных схем.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все процедуры соответствовали рекомендациям по уходу за лабораторными животными и их использованию, установленным Национальными институтами здравоохранения, и получили одобрение Комитета по уходу за животными и этике использования Института акупунктуры и прижигания Китайской академии медицинских наук. Взрослые самцы мышей C57 массой 25 г были использованы для инъекции вируса и имплантации оптического волокна. Протокол эксперимента на животных строго соответствовал требованиям национального стандарта «Руководство по этической экспертизе благополучия лабораторных животных» (GB/T 35892-2018) и был утвержден Этическим комитетом учреждения.

ПРИМЕЧАНИЕ: Поддерживайте чистоту окружающей среды во время процесса инъекции вируса и имплантации оптического волокна. Носите маски на протяжении всей операции. После периода высокой экспрессии вируса (21-28 дней) была проведена электроакупунктура на ST36 и оптогенетические манипуляции для регистрации моторики желудка. Животные содержались в помещении для животных Института акупунктуры и прижигания Китайской академии медицинских наук, в контролируемых условиях (температура: 22-24 °C, влажность: 50%-60%, 12-часовой цикл свет-темнота), со свободным доступом к пище и воде. Конкретную информацию об используемых реагентах и оборудовании можно найти в Таблице материалов.

1. Предоперационная подготовка

  1. Продезинфицируйте хирургический инструмент, прошедший высокотемпературную стерилизацию, и очистите операционную область 70% этанолом.
  2. Анестезия: Внутрибрюшинная инъекция 1,25% трибромэтанола (0,2 мл/10 г веса) мыши. Оцените отсутствие рефлекса защемления пальца ноги, чтобы измерить глубину анестезии.
  3. Сбрейте шерсть с головы и поместите мышей в стереотаксическую рамку, оснащенную ушными и зубными планками. Нанесите эритромициновую мазь на глаза мышей, чтобы предотвратить повреждение хирургическим светом.
  4. Замочите наконечник оптического волокна (размер наконечника: 1,25 мм, белый наконечник, тип волокна: 200/0,37, длина волокна: 5,5 мм, модель иглы наконечника: V8475) в 75% этаноле на 30 минут, а затем смойте 70% этанол физиологическим раствором.
  5. Загрузите микроинъектор (1 μл) с парафином (800-900 нл). Расплавьте стеклянную трубку и разделите ее на две части. Заточите одну секцию на кончике с помощью игольчатого станка, который будет служить иглой для инъекций. Для того чтобы обеспечить газонепроницаемость микроинжектора, заполните трубку парафином и подсоедините ее к микроинжектору на наконечнике с помощью клеевого пистолета.

2. Инъекционная хирургия вируса

  1. Надрежьте кожу головы по средней линии от глаз до задней части шеи, чтобы открыть череп. Впоследствии иссекайте мышцы шеи, чтобы обнажить затылочную кость. Протрите поверхность кости H2O2 в течение 30 с, а затем очистите сухой ватной палочкой, чтобы удалить подкожную фасцию и соединительные ткани (рисунок 1A).
    ПРИМЕЧАНИЕ: Этот шаг предназначен для облегчения покрытия зубным цементом затылочной кости, что делает оптическое волокно более стабильным фиксацией.
  2. Выровняйте череп.
    1. Выравнивание по оси X: Отметьте две точки, которые находятся на расстоянии 3,5 мм от точки Брегема на коронковом шве, и соедините две точки в виде линии. Середина этой линии равна нулю. Абсолютная величина разности осей Z на поверхности кости на расстоянии 3,5 мм от начала координат должна составлять ≤ 0,03 мм.
    2. Выравнивание по оси Y: отметьте две точки, которые находятся на расстоянии 3,5 мм от точки лямбда на лямбдоидном шве, установите среднюю точку двух точек и соедините эту среднюю точку с точкой лямбда, чтобы сформировать линию. Середина этой линии — еще один ноль. Абсолютная величина разности по оси Z между этим нулем и нулем, на котором была отрегулирована поверхность кости во время оси X, должна составлять ≤ 0,03 мм.
  3. Отметьте маркером стереотаксические координаты инъекции вируса. Для PBN: -1,1 мм передне-задний (ось AP, Y), -5,45 мм медиально-латеральный (ML, X-ось), -3,3 мм дорсально-вентральный (ось DV, Z) (с брегмой в качестве нулевой точки); Для NTS: -0,35 мм AP, 0,2 мм ML, -3,3 мм DV (с верхней точкой затылочной кости в качестве нулевой точки); Для DMV: -0,35 мм AP, 0,0 мм (самая высокая точка затылочной кости), -3,5 мм DV (с самой высокой точкой затылочной кости в качестве нулевой точки) (Рисунок 1B). С помощью высокоскоростного микросверла (диаметр сверла 0,8 мм) проникните в череп в отведенных местах, чтобы обнажить поверхность мозга. Впоследствии с помощью тонких щипцов аккуратно проколите твердую мозговую оболочку и удалите ее, нанесите на просверленное отверстие физиологический раствор для поддержания влаги на поверхности мозга.
  4. Нанесите универсальный клей Single Bond на поверхность черепа (за исключением просверленной области) и выдержите ее на свет в течение 30 секунд для отверждения. Важно поддерживать сухую поверхность черепа перед нанесением универсального клея с одинарной связкой, чтобы обеспечить прочную адгезию. Кроме того, следует избегать попадания клея на мышцы во время нанесения.
  5. Прикрепите микроинъектор к механическому рычагу стереотаксического аппарата. Заполните 250 нл вируса (rAAV-CaMKIIα-CRE-WPRE-hGH polyA). При контакте кончика иглы с поверхностью мозга отрегулируйте глубину (Z) на 0. Опустите иглу к целевому участку в парабрахиальном ядре (PBN) и введите вирус в область PBN со скоростью 35 нл/мин. После инъекции удерживайте иглу на месте в течение 10 минут, затем втяните ее со скоростью 6 мм/мин. Затем погрузите иглу в пробирку Eppendorf, содержащую физиологический раствор для очистки (рис. 1C,D).
    ПРИМЕЧАНИЕ: Инъекционные дозы всех следующих вирусов составляют 250 нл; DMV составляет 100 нл16,17.
  6. Используйте идентичный протокол для введения rAAV-CaMKIIα-DIO-ChrimsonR-WPREs в ядро tritarius solitarius (NTS) и rAAV-ChAT-GCamp6s-WPRE-hGH-polyA в дорсальное моторное ядро блуждающего нерва (DMV) (рис. 1D). Все титры вируса составляют ≥ 1 × 1012 VG/мл.

3. Операция по имплантации оптического волокна

  1. Закрепите оптоволоконный наконечник за держатель оптрода и прикрепите его к механическому рычагу стереотаксического аппарата. Установите координаты имплантации, соответствующие положению примерно на 100 мкм над местом инъекции вируса DMV (рис. 1E, F).
  2. Смешайте 1-3 г стоматологического цемента с 1 мл затвердевшей смолы комнатной температуры до однородности. Немедленно нанесите смесь вокруг наконечника оптического волокна и на поверхность черепа, оставив открытой 5 мм верхней части наконечника оптического волокна. Как только цемент застынет, отпустите винт держателя, поднимите и снимите держатель (Рисунок 1G).
  3. Используйте рассасывающиеся хирургические швы (6-0) для наложения швов на заднюю затылочную часть головы мышей. Извлеките мышей из стереотаксической рамки и поместите их в теплую среду для восстановления после анестезии. Как только животные проявили неограниченную подвижность, их переселили в чистую и просторную клетку для проживания, где 4-5 мышей содержались вместе и им был предоставлен свободный доступ к пище и воде.
    Примечание: Во время эксперимента было замечено, что большая клетка полезна для нормального движения мышей и имеет решающее значение для поддержания их веса. Увеличенное пространство также снижает вероятность случайного контакта с имплантируемым волокном, тем самым сводя к минимуму потенциальное повреждение. У мышей массой 25 г и более наблюдались значительные изменения внутрижелудочного давления при иглоукалывании.

4. Операция по установке баллона

  1. На пике экспрессии вируса (21-28 дней) голодайте мышей в течение 4-5 ч. Затем мышам проводят обезболивание с помощью внутрибрюшинной инъекции 1,25% триброметанола (0,1 мл/10 г веса). Через 15 мин введите внутрибрюшинную инъекцию 10% раствора этилкарбамата (0,15 мл/10 г веса). Оцените глубину анестезии, подтвердив отсутствие рефлекса на пальце ноги.
  2. Сбрейте волосы в области живота и ST36. Включите грелку и установите ее на поддержание температуры 37 °C, при этом животное будет находиться на грелке на протяжении всей операции, чтобы обеспечить постоянную температуру тела.
  3. Подсоедините латексный баллон к шприцу и нагнетайте в него воздух, чтобы убедиться, что латексный баллон (BS4 73-2787) не имеет утечки воздуха.
  4. Обнажите желудок и часть двенадцатиперстной кишки ниже мечевидного отростка. Сделайте небольшой разрез в двенадцатиперстной кишке примерно 0,3 см в длину, на 0,5-1 см дистальнее привратника.
  5. Введите баллон в желудок по кишечному направлению через дуоденальный разрез, при этом узел должен быть расположен в привратном синусе.
  6. Извлеките иглу из шприца, налейте 5 мл чистой воды, выпустите воздух и соедините другой конец баллона со шприцем. Потяните люэровский замок шприца вверх, чтобы выпустить газ из баллона, затем опустите люэровский замок, чтобы ввести чистую воду в баллон. Подсоедините узел к трехстороннему запорному крану и датчику давления.

5. Синхронная регистрация внутрижелудочного давления и визуализация кальция

  1. Включите модель Neurolog Digitimer, CED Micro1401-4, Inper Studio, многоканальную оптоволоконную систему записи, программное обеспечение Inper Signal и программное обеспечение Spike 2. Настройте программное обеспечение Inper, запись кальциевого сигнала запускается программным обеспечением Spike2 и оптогенетическим стимулятором, гарантируя, что лазерная стимуляция и получение кальциевого сигнала с помощью программного обеспечения Inper согласуются с регистрацией внутрижелудочного давления с помощью программного обеспечения Spike2.
  2. Откройте все трехпозиционные запорные краны, которые подключаются к баллону, поверните ручку ZERO на модели Neurolog digitimer и наблюдайте в программном обеспечении Spike 2, настроена ли базовая линия на точку 0. После выравнивания давления внутри баллона с атмосферным давлением впрыскивайте в баллон чистую воду до тех пор, пока внутрижелудочное давление не проявится 15-35 см H2O. Как только внутрижелудочное давление и кальциевые сигналы достигнут стабильного состояния, запишите 60-секундный базовый уровень внутрижелудочного давления и сигналов кальция в DMV (рис. 2A).

6. Электроакупунктура в ST36 и лазерная стимуляция

  1. Введите акупунктурную иглу (0,25 мм × 25 мм) в левую акупунктурную точку ST36 и подключите ее к электроакупунктурному аппарату (10 Гц, 1 мА). Применяйте электроакупунктуру в течение 60 с, регистрируя изменения внутрижелудочного давления и сигналов кальция.
  2. После стабилизации исходного внутрижелудочного давления и сигналов кальция проводить оптогенетическую стимуляцию (635 нм, 5 мс, 5 Гц, 30 мВт) через волокно в течение 60 с, контролируя изменения внутрижелудочного давления и сигналов кальция.
  3. Как только исходный уровень внутрижелудочного давления и сигналов кальция снова стабилизируется, объедините электроакупунктуру при ST36 (10 Гц, 1 мА) с оптогенетической стимуляцией (635 нм, 5 мс, 5 Гц) в течение 60 с и зарегистрируйте изменения внутрижелудочного давления и сигналов кальция.

7. Гистологическое исследование вирусной инъекции и размещения волокон

  1. После завершения вышеупомянутых протоколов перфузируйте мышей физиологическим раствором и немедленно зафиксируйте 4% параформальдегидом через сердце. Соберите мозги мышей. Выполните градиентное обезвоживание с использованием 20% и 30% растворов сахарозы, затем срез после заделки быстрозамороженным закладочным агентом. Сравните срезы мозга с картами мозга мышей, чтобы увидеть, были ли точны положения инъекции вируса и имплантации оптоволокна. Точное позиционирование вирусных инъекций и фибровых имплантатов подтвердило достоверность данных о внутрижелудочном давлении и кальциевом сигнале (рис. 1H, I).

8. Анализ данных

  1. Анализируйте данные кальциевого сигнала с помощью программного обеспечения Inper Data Analysis и данные о моторике желудка с помощью программного обеспечения Spike2. Сравните различия между сигналами кальция или амплитудами моторики желудка во время стимуляции (60 с) и до стимуляции (60 с), чтобы наблюдать за регуляторным воздействием различных стимулов на моторику желудка и сигналы кальция. Все данные, показанные на рисунке 2 , являются исходными графиками данных.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Вирусы вводили в парабрахиальное ядро (PBN), ядро tritarius solitarius (NTS) и дорсальное моторное ядро блуждающего нерва (DMV) мышей с помощью волокна, имплантированного в DMV (рис. 1A-G). В период пиковой экспрессии вируса изменения внутрижелудочного давления и сигналов кальция в DMV регистрировались после электроакупунктуры на ST36 и оптогенетической стимуляции. Целью данного исследования является наблюдение за регуляторными эффектами электроакупунктуры при ST36 и оптоген...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Центральное научное исследование акупунктуры относится к регуляции органов-мишеней посредством акупунктурной стимуляции вегетативных нервов. Результаты, предложенные К. Ма, свидетельствуют о том, что влияние иглоукалывания на модуляцию функции отдаленных органов обусловлено соматическими вегетативными рефлексами, которые активируют симпатические и/или парасимпатические пути, особенно связанные с желудочно-кишечными заболеваниями и системным воспалением. Тем не мен...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Благодарности

Это исследование финансировалось Национальным фондом естественных наук Китая (No 82174518, 82474661), Фондами фундаментальных исследований для Центральных научно-исследовательских институтов общественного благосостояния (ZZ-2023008) и Проектом научных и технологических инноваций Китайской академии китайских медицинских наук (CI2021A03402).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
<сильный>вирус
rAAV-CaMKIIα-CRE-WPRE-hGH polyA (AAV2/9)BrainVTAКот#PT-0020
rAAV-CaMKIIα-DIO-ChrimsonR-WPREs (AAV2/9)BrainVTAКот#PT-12637
rAAV-CHAT-GCamp6s-WPRE-hGH-polyA (AAV2/9)BrainVTAКот#PT-10973
<сильный>другой
1 μ L микроинъекторГамильтон80135
3M EPSP Универсальный односвязный клейОфициальный представитель Dental World41269
Игла для иглоукалыванияЧжунъяньтайхэ0.25/13 сек
КЭД Микро1401-4CED(Англия)1401-4
Стоматологический цемент/смола, закаленная при комнатной температуреYAMAHACHI DENTALН/Д
Тонкие щипцыЗадний приводФ11028-13
Стеклянная трубкаМировые прецизионные приборы504949
ГАНС-200АИнститут ГАНСХАНС-200
Inper Signal (программное обеспечение)ИнперН/Д
Студия Inper (Венера)ИнперВ1502
Латексный воздушный шарАппарат ГарвардаБС4 73-2787
Многоканальная оптоволоконная система записи (Vista Pro)ИнперР5268
Модель Neurolog digitimer ДигитимерНЛ900Д
Оптоволоконный наконечник ИнперВ8475
Spike 2 (программное обеспечение)CED(Англия)Н/Д
Стереотаксические приборы (с калькулятором координат)Инструменты Дэвида КопфаКОПФ 942
ТрибромэтанолСигмаТ48402
ТрибромэтанолСигма Т48402

Ссылки

  1. Li, S., et al. Perspective of calcium imaging technology applied to acupuncture research. Chin J Integr Med. 30 (1), 3-9 (2024).
  2. Xu, X., et al. Mechanism of electro-acupuncture in alleviating intestinal injury in septic mice via polyamine-related M2-macrophage polarization. Front Immunol. 15, e1373876(2024).
  3. Yaklai, K., Pattanakuhar, S., Chattipakorn, N., Chattipakorn, S. C. The role of acupuncture on the gut-brain-microbiota axis in irritable bowel syndrome. Am J Chin Med. 49 (2), 285-314 (2021).
  4. Wang, X. Y., Wang, H., Guan, Y. Y., Cai, R. L., Shen, G. M. Acupuncture for functional gastrointestinal disorders: a systematic review and meta-analysis. J Gastroenterol Hepatol. 36 (11), 3015-3026 (2021).
  5. China Association of Acupuncture and Moxibustion. Nomenclature and location of acupuncture points for laboratory animals Part 3: Mouse. World J Acupunct Moxibustion. 35 (2), 160-166 (2025).
  6. Chen, J., et al. A vagal-NTS neural pathway that stimulates feeding. Curr Biol. 30 (20), 3986-3998 (2020).
  7. Campos, C. A., Bowen, A. J., Schwartz, M. W., Palmiter, R. D. Parabrachial CGRP neurons control meal termination. Cell Metab. 23 (5), 811-820 (2016).
  8. Zhang, T., Perkins, M. H., Chang, H., Han, W., de Araujo, I. E. An inter-organ neural circuit for appetite suppression. Cell. 185 (14), 2478-2494 (2022).
  9. Zhang, F. C., et al. A vagus nerve dominant tetra-synaptic ascending pathway for gastric pain processing. Nat Commun. 15 (1), 9824(2024).
  10. Dong, W. Y., et al. Brain regulation of gastric dysfunction induced by stress. Nat Metab. 5 (9), 1494-1505 (2023).
  11. Iwa, M., Tateiwa, M., Sakita, M., Fujimiya, M., Takahashi, T. Anatomical evidence of regional specific effects of acupuncture on gastric motor function in rats. Auton Neurosci. 137 (1-2), 67-76 (2007).
  12. Browning, K. N., Travagli, R. A. Central nervous system control of gastrointestinal motility and secretion and modulation of gastrointestinal functions. Compr Physiol. 4 (4), 1339-1368 (2011).
  13. Sun, L., et al. Parabrachial nucleus circuit governs neuropathic pain-like behavior. Nat Commun. 11 (1), 21(2020).
  14. Simpson, E., et al. Lights, fiber, action! A primer on in vivo fiber photometry. Neuron. 112 (5), 718-739 (2024).
  15. Tao, J., et al. Highly selective brain-to-gut communication via genetically defined vagus neurons. Neuron. 109 (13), 2106-2115 (2021).
  16. Yao, L., Ye, Q., Liu, Y., et al. Electroacupuncture improves swallowing function in a post-stroke dysphagia mouse model by activating the motor cortex inputs to the nucleus tractus solitarii through the parabrachial nuclei. Nat Commun. 14 (1), 810(2023).
  17. Lyu, Q., Xue, W., Liu, R., et al. A brain-to-gut signal controls intestinal fat absorption. Nature. 634 (8035), 936-943 (2024).
  18. Ma, Q. Somatotopic organization of autonomic reflexes by acupuncture. Curr Opin Neurobiol. 76, e102602(2022).
  19. Liu, S., et al. A neuroanatomical basis for electroacupuncture to drive the vagal-adrenal axis. Nature. 598 (7882), 641-645 (2021).
  20. Liu, S., et al. Somatotopic organization and intensity dependence in driving distinct NPY-expressing sympathetic pathways by electroacupuncture. Neuron. 108 (3), 436-450 (2020).
  21. Luo, L. Architectures of neuronal circuits. Science. 373 (6559), eabg7285(2021).
  22. Yuan, Z., et al. A corticoamygdalar pathway controls reward devaluation and depression using dynamic inhibition code. Neuron. 111 (23), 3837-3853 (2023).
  23. Feng, J., et al. Monitoring norepinephrine release in vivo using next-generation GRABNE sensors. Neuron. 112 (12), 1930-1942 (2024).
  24. Smith, J., et al. Regulation of stress-induced sleep fragmentation by preoptic glutamatergic neurons. Curr Biol. 34 (1), 12-23 (2024).
  25. Li, Y., Liu, Z., Guo, Q., Luo, M. Long-term fiber photometry for neuroscience studies. Neurosci Bull. 35 (3), 425-433 (2019).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи