Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Описание случая

Редкий патоген при гангрене диабетической стопы: случай инфекции Wohlfahrtiimonas chitiniclastica

616 просмотров

DOI:

10.3791/68877

23 сентября 2025 г.

В этой статье

Краткое содержание

У 76-летнего мужчины с диабетом и хронической язвой стопы и гангреной, осложненной инвазией личинок, был диагностирован Wohlfahrtiimonas chitiniclastica с помощью метагеномного секвенирования. Санация, терапия эртапенемом и реконструкция раны позволили добиться выздоровления, что подчеркивает важность раннего выявления и расширенной диагностики редких патогенов у пациентов с ослабленным иммунитетом.

Аннотация

Wohlfahrtiimonas chitiniclastica является редкой грамотрицательной бактерией, обычно связанной с раневыми инфекциями, особенно у пациентов с ослабленным иммунитетом или лиц, подвергающихся воздействию антисанитарных условий. Несмотря на то, что клинические случаи встречаются нечасто, инфекция может привести к серьезным осложнениям, таким как бактериемия, септический шок и даже смерть, если ее не распознать или не лечить должным образом. Мы представляем случай 76-летнего мужчины с диабетом, у которого развились хронические, незаживающие язвы стопы, осложненные гангреной и заражением личинками. Диагностические проблемы были решены с помощью метагеномного секвенирования нового поколения, которое идентифицировало W. chitiniclastica наряду с Proteus mirabilis и Corynebacterium striatum. Лечение включало агрессивную хирургическую обработку для удаления некротической ткани, местное применение костного цемента, пропитанного гентамицином, системную антибиотикотерапию эртапенемом и реконструкцию раны с использованием дорсально расположенного фасциального лоскута. Этот комбинированный подход привел к значительному клиническому улучшению, прогрессирующему заживлению ран и заметному снижению маркеров инфекции. Этот случай подчеркивает решающую роль передовых технологий секвенирования в выявлении редких патогенов при полимикробных инфекциях, где традиционные методы, такие как масс-спектрометрия MALDI-TOF, могут оказаться неэффективными. В нем также подчеркивается важность интеграции прецизионной диагностики с хирургическим вмешательством, таргетной антимикробной терапией и тщательным послеоперационным уходом для достижения успешных результатов. Документируя эту необычную презентацию, мы стремимся расширить клиническую осведомленность об инфекциях, вызванных W. chitiniclastica , и обеспечить практическую основу для лечения столь же сложных инфекций диабетической стопы.

Введение

Wohlfahrtiimonas chitiniclastica представляет собой грамотрицательный, неподвижный стержень, способный колонизировать различных хозяев как в аэробных, так и в анаэробных условиях, со значительной хитиназной активностью, которая играет важную роль в метаморфозе паразитических мух 1,2. Самки мух откладывают яйца на поверхности слизистых оболочек и ранах, создавая очаг инфекции. Личинки питаются жидкими биологическими жидкостями, проглоченной пищей или живыми и некротическими тканями хозяина в течение определенного периода времени3. Несмотря на то, что инфекции встречаются редко, число клинических сообщений растет, особенно у пациентов с ослабленным иммунитетом или тех, кто подвергался воздействию антисанитарных условий. Эта тенденция отчасти связана с более широким использованием технологий генетического секвенирования, что улучшило понимание эпидемиологии патогена4. Клинически W. chitiniclastica может вызывать локализованные раневые инфекции, но приотсутствии лечения может также прогрессировать до тяжелой бактериемии, септического шока и даже смерти.

В этом клиническом случае описывается пациент с хронической, незаживающей диабетической язвой стопы, осложненной инвазией личинок, в конечном итоге диагностированной инфекцией W. chitiniclastica . В отчете показаны диагностические проблемы и важность ранней идентификации с использованием метагеномного секвенирования нового поколения (mNGS). Кроме того, в нем подчеркивается интеграция агрессивной хирургической обработки с терапией карбапенемами для достижения спасения конечностей. Подчеркивая синергию между передовой диагностикой и инновационной реконструктивной хирургией, этот случай расширяет сценарии, в которых следует подозревать W. chitiniclastica , и обеспечивает практическую основу для лечения подобных сложных инфекций.

ПРЕЗЕНТАЦИЯ КЛИНИЧЕСКОГО СЛУЧАЯ:

76-летний мужчина обратился с язвами на правой ноге, которые сохранялись в течение трех месяцев и постепенно приводили к почернению третьего и пятого пальцев ног. Примерно за три месяца до госпитализации у него развилась небольшая язва на подошвенной стороне правой передней части стопы. В течение последующих недель очаг поражения постепенно увеличивался и производил гнойные выделения. Первоначально он обратился за помощью в местную больницу, где ему был назначен 5-дневный курс эмпирических пероральных антибиотиков (цефуроксим натрия, 1 таблетка два раза в день), но улучшение было минимальным. За пятнадцать дней до госпитализации язва обострилась, прогрессирующий некроз и заражение личинками.

У пациента в анамнезе был сахарный диабет с плохим гликемическим контролем, сообщалось о частых пропущенных дозах и нерегулярном контроле уровня глюкозы в крови. Его регулярные лекарства включали пероральные таблетки метформина с пролонгированным высвобождением (одна таблетка, три раза в день). У него также была имплантация кардиостимулятора. В социальном плане он жил в сельской местности с ограниченным доступом к здравоохранению и неоптимальными условиями жизни, что, возможно, способствовало задержке лечения ран. Он был отставным чернорабочим с историей хронического употребления табака (около 20 пачек года) и периодического употребления алкоголя. Семейный анамнез был отрицательным в отношении сахарного диабета, заболеваний периферических сосудов или хронических инфекционных заболеваний.

Компьютерная томографическая ангиография (КТА) нижних конечностей выявила атеросклероз обеих ног. При поступлении лабораторные исследования показали лейкоцитоз (лейкоциты 14,74 × 109/л) с нейтрофилией (82,1%), повышенным уровнем С-реактивного белка (126 мг/л) и повышенной скоростью оседания эритроцитов (72 мм/ч), что соответствует системной инфекции. Гликозилированный гемоглобин (HbA1c) составлял 9,2%. Физикальное обследование выявило выраженный отек правой стопы, почернение третьего и пятого пальцев ноги, уменьшение пульсации дорсальной ножки и задней большеберцовой артерии по сравнению с контралатеральной стороной, потерю поверхностной чувствительности в правой нижней конечности и отсутствие болевых ощущений.

Интраоперационно наблюдалась гангрена в области третьего-пятого пальцев стопы, а также в тыльной стороне и подошве правой стопы, сопровождавшаяся гнойными выделениями и неприятным запахом. Были отмечены активные личинки, извивающиеся внутри раны (Рисунок 1 и Рисунок 2). Некротические фаланги, сухожилия и кость были очищены, а остеомиелитические очаги удалены. Дорсально расположенный фасциальный лоскут был повернут, чтобы закрыть обнаженный дефект подошвенной кости. Были достигнуты ирригация и гемостаз. Пропитанный антибиотиками костный цемент, приготовленный путем смешивания 0,5 г гентамицина на 40 г цемента, наносили на остаточные костные концы после сверления.

После операции пациенту проводилось внутривенное введение эртапенема (1 г один раз в сутки) в течение 14 дней в зависимости от профиля возбудителя и клинического ответа. Интраоперационный мазок выявил небольшое количество эпителиальных клеток, многочисленные грамотрицательные бациллы, а также грамположительные кокки и бациллы. В традиционной культуре идентифицирован Staphylococcus faecalis (группа D). Тестирование на чувствительность к препаратам показало чувствительность к ванкомицину, пенициллину G, левофлоксацину, хлорамфениколу, ципрофлоксацину и высокому уровню гентамицина в комбинации, но устойчивость к высокому уровню стрептомицина, эритромицина и тетрациклина. Тестирование проводилось с использованием автоматизированной системы идентификации микроорганизмов и анализа чувствительности к лекарственным препаратам в соответствии с рекомендациями CLSI M100-33. Метагеномное секвенирование интраоперационных образцов выявило Proteus mirabilis, Wohlfahrtiimonas chitiniclastica и Corynebacterium striatum (рис. 3). После операции и лечения маркеры инфекции значительно снизились, а рана продемонстрировала прогрессирующее заживление.

Диагностика, оценка и планирование:

У пациента, 76-летнего мужчины с диабетом и плохо контролируемой гликемией, наблюдались хронические язвы правой стопы, которые прогрессировали до гангрены и заражения личинками. Первоначальная оценка включала физикальное обследование, которое выявило некротические пальцы ног, гнойный дренаж и активность личинок, а также лабораторные данные лейкоцитоза (WBC 14,74 × 109/л) и нейтрофилии (82,1%), что соответствует системной инфекции. Компьютерная томографическая ангиография (КТА) нижних конечностей подтвердила атеросклероз, способствующий нарушению перфузии. Интраоперационное исследование показало остеомиелит и обширную некротическую ткань, что послужило основанием для хирургической обработки и микробиологического отбора проб.

Wohlfahrtiimonas chitiniclastica часто выделяют в контексте полимикробных инфекций. В этом случае метагеномное секвенирование нового поколения (mNGS) идентифицировало W. chitiniclastica, Proteus mirabilis и Corynebacterium striatum. mNGS был выбран потому, что он обеспечивает разрешение сложных инфекций, которые часто не обнаруживаются обычными методами, такими как MALDI-TOF MS. Дифференциальный диагноз включал распространенные патогены диабетической стопы, такие как виды Pseudomonas и Staphylococcus ; Тем не менее, контакт, связанный с личинками, и секвенирование подтвердили присутствие редкого патогена.

В плане лечения приоритетное внимание отдавалось хирургической обработке для снижения микробной нагрузки с последующим внутривенным введением эртапенема (1 г в день) для широкого спектра действия грамотрицательного покрытия, включая W. chitiniclastica, которая обычно чувствительна к карбапенемам. Терапия была запланирована на 14 дней с учетом профиля патогена и клинического ответа. Пациентка была проконсультирована относительно общих побочных эффектов эртапенема, включая желудочно-кишечное расстройство (тошнота, диарея) и реакции, связанные с инфузией, и тщательно контролировалась на протяжении всей госпитализации. Критерии для коррекции терапии включали ухудшение клинических признаков (увеличение эритемы раны, отека или гнойного дренажа) или повышение маркеров инфекции, в частности, лейкоцитов >15 × 109/л или С-реактивного белка >150 мг/л. В таких случаях будет рассмотрена возможность повторной визуализации с помощью ультразвукового исследования сосудов или МРТ, а также модификации антибиотиков или их усиления.

Последующее наблюдение после лечения было структурировано таким образом, чтобы обеспечить непрерывность ухода: осмотр раны каждые 3-5 дней в течение стационарного периода, всесторонняя оценка раны и сосудов через 2 недели после выписки и ежемесячные обзоры в течение 3 месяцев для контроля заживления ран, состояния сосудов и гликемического контроля. Реконструкция раны с помощью дорсально расположенного фасциального лоскута была выполнена для устранения потери тканей и ускорения заживления. Выбор эртапенема был поддержан его стабильностью к бета-лактамазам расширенного спектра действия и активностью в отношении анаэробов, что было критически важно в некротической среде раны. Потенциальные осложнения включали устойчивость к противомикробным препаратам, инфекцию области хирургического вмешательства или несостоятельность лоскута, что требовало тщательного мониторинга. Этот подход подчеркивает необходимость расширенной диагностики и мультидисциплинарного лечения пациентов с ослабленным иммунитетом и редкими и сложными инфекциями.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

От пациента было получено письменное информированное согласие на публикацию клинических данных и клинических изображений в соответствии с рекомендациями учреждения. Идентификаторы пациентов были анонимизированы во всей документации.

1. Оценка пациента и первичная оценка

  1. Был получен исчерпывающий анамнез, в котором особое внимание уделялось продолжительности сахарного диабета, гликемическому контролю (уровень HbA1c), заболеваниям периферических сосудов в анамнезе и предшествующим вмешательствам (например, имплантации кардиостимулятора). Документально подтверждено прогрессирование хронической язвы стопы и заражение личинками.
  2. Физикальное обследование оценило отек правой стопы, некротическую ткань (третий и пятый пальцы ноги), сенсорный дефицит и визуальное подтверждение активности личинок. Морфологию раны фотографировали (рис. 1 и рис. 2).
  3. Лабораторные тесты включали общий анализ крови (ОАК), С-реактивный белок (СРБ) и скорость оседания эритроцитов (СОЭ).
    1. Для общего анализа крови (лейкоцитов, нейтрофилов) цельную кровь (3 мл) собирали в пробирку ЭДТА, которую аккуратно переворачивали в 8-10 раз и анализировали в течение 4 часов.
    2. Для исследования СРБ кровь (2-3 мл) собирали в пробирку-сепаратор сыворотки, давали ей свернуться в течение 20-30 минут, центрифугировали при 1500-2000 × г в течение 10 минут и анализировали в тот же день.
    3. Для СОЭ цельную кровь (2 мл) собирали в пробирку с 3,2% цитратом натрия, аккуратно перемешивали и анализировали с использованием метода Вестергрена в течение 4 ч.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Храните/транспортируйте кровь при температуре 2-8 °C при задержке >1 ч.
  4. Компьютерная томографическая ангиография (КТА) нижних конечностей выполнялась на срезовом сканере с использованием следующих параметров: спиральная регистрация от диафрагмы к пальцам ног, коллимация 0,6-0,625 мм, время вращения 0,33-0,5 с, шаг 0,8-1,2, напряжение в трубке 100-120 кВ, ток 150-300 мА.
    1. Иогексол контраст (350 мг в/мл, 1,0-1,5 мл/кг, всего 80-120 мл) вводили через 18-20 г антокбитального внутривенного введения со скоростью 4-5 мл/с с последующим промыванием 30-40 мл физиологическим раствором. Отслеживание болюса срабатывало при 150 HU.
    2. Изображения были восстановлены при толщине среза 0,75-1,25 мм; Постобработка набора данных КТ-ангиографии включала мультипланарную реконструкцию (MPR), проекцию максимальной интенсивности (MIP) и трехмерный объемный рендеринг (VR).
      1. МПР проводили для переформатирования спирального захвата в осевую, сагиттальную, корональную и косую плоскости с толщиной среза 0,75-1,25 мм, что позволило оценить анатомические структуры с разных ориентаций.
      2. Изображения MIP были получены с использованием пластинчатых проекций (10-20 мм) для отображения вокселей с самыми высокими значениями затухания вдоль каждой линии взгляда, тем самым усиливая сосудистые и кальцинированные структуры при одновременном подавлении окружающих мягких тканей.
      3. Для виртуальной реальности объемные данные обрабатывались на специальной рабочей станции с сегментацией на основе пороговых значений и назначением непрозрачности, создавая 3D-модели костей, мягких тканей и сосудов с цветовой кодировкой, которые можно было вращать и увеличивать для улучшения пространственного понимания и хирургического планирования.
  5. Работа с зараженными личинками тканями:
    ПРИМЕЧАНИЕ: Процедуры соответствовали уровню биобезопасности 2 (BSL-2). Персонал был одет в халаты, перчатки, средства защиты глаз и маски N95.
    1. Личинки удаляли щипцами под орошением, помещали в герметичные контейнеры и погружали в 70-95% этанол для утилизации.
    2. Загрязненные инструменты дезинфицировали 0,1% гипохлоритом натрия в течение ≥10 мин (0,5% при сильном загрязнении). Инфекционные отходы упаковывали в красные пакеты биологической опасности и автоклавировали при температуре 121 °C в течение ≥15 минут или сжигали. Острые предметы выбрасывались в устойчивые к проколам контейнеры.

2. Диагностические процедуры

  1. Интраоперационная некротическая ткань и гнойный дренаж были собраны в качестве образцов во время хирургической обработки.
  2. Образцы окрашивали методом окрашивания по Граму и культивировали как в аэробных, так и в анаэробных условиях.
  3. Метагеномное секвенирование нового поколения (mNGS) было проведено на интраоперационных образцах тканей.
    1. Биопсию тканей (~0,5 × 0,5 × 0,5 мм) гомогенизировали в 100 мкл 1× PBS в течение 5-8 мин и доводили до 200 мкл.
    2. ДНК и РНК были выделены отдельно из гомогенизированных образцов.
      1. Для процессинга ДНК хозяина истощали обработкой 1 U бензоназой и 0,5% Tween-20 при 37 °C в течение 5 мин с последующей экстракцией с использованием указанного набора DNA Kit. Концентрацию ДНК количественно определяли с помощью анализа dsDNA HS.
      2. Все библиотеки ДНК и РНК были проверены с помощью набора ДНК и количественно определены с помощью флуориметра перед секвенированием.
    3. Библиотеки проверялись и секвенировались на платформе секвенирования (например, SE-75, ~2 × 107 прочтений/выборка). Считывания < 50.о., низкокачественная ДНК или ДНК хозяина были удалены.
    4. Микробные чтения были согласованы с внутренней базой данных. Пороги обнаружения были следующими: SMRN-r ≥10 (если также в отрицательном контроле), SMRN ≥3 (если отсутствует в отрицательном контроле), SMRN >1 для внутриклеточных/трудно поддающихся воздействию бактерий; вирусам требовалось ≥3 неперекрывающихся участка генома; Оборот ~16-19 ч.
  4. Дифференциальный диагноз включал распространенные патогены диабетической стопы, такие как Pseudomonas aeruginosa и Staphylococcus aureus. Эти организмы были исключены с помощью mNGS и клинической корреляции.

3. Хирургическое вмешательство

  1. Проводилась радикальная санация с иссечением некротических мягких тканей, остеомиелитической кости и инфицированных сухожилий. Личинки были вручную извлечены из раны.
  2. Реконструкция раны была достигнута путем вращения дорсально основанного фасциального лоскута, чтобы закрыть открытый дефект подошвенной кости. Был достигнут гемостаз, и рану тщательно орошали физиологическим раствором.
  3. Пропитанный антибиотиками костный цемент готовили путем добавления 0,5 г гентамицина в 40 г цемента и наносили на остаточные концы кости после сверления.

4. Антибиотикотерапия

  1. Эртапенем внутривенно (1 г один раз в день) вводили эмпирически для определения грамотрицательного покрытия, включая Wohlfahrtiimonas chitiniclastica, который обычно чувствителен к карбапенемам.
  2. Антибиотикотерапия продолжалась в течение 14 дней и корректировалась в соответствии с клиническим ответом и маркерами инфекции, такими как количество лейкоцитов и уровень СРБ.

5. Послеоперационный уход

  1. Уровень глюкозы в крови регулярно контролировался, а дозы инсулина корректировались для поддержания HbA1c ниже 7,5%.
  2. Рана ежедневно осматривалась на наличие признаков инфекции, а общий анализ крови и маркеры воспаления контролировались еженедельно.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

76-летнему мужчине с диабетом и хронической гангреной правой стопы и инвазией личинок (рис. 1 и рис. 2) было проведено комплексное лечение, включающее радикальную обработку некротической ткани, удаление остеомиелитических очагов и реконструкцию раны с использованием дорсально фасциального лоскута. Метагеномное секвенирование нового поколения (mNGS) интраоперационных образцов идентифицировало Wohlfahrtiimonas chitiniclastica в качестве основного патогена...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Wohlfahrtiimonas chitiniclastica представляет собой палочковидную, грамотрицательную, неферментирующую бактерию, которая является оксидазой и каталазой. Впервые он был обнаружен у личинок паразитической мухи Wohlfahrtia magnifica6. Самки мух откладывают яйца на раны и поверхности слизистых оболочек, создавая очаг инфекции. Личинки в течение некоторого времени питаются некротическими или жизнеспособными тканями хозяина, биологическими жидкостями и...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Agilent 2100 HS DNA KitAgilent Technologies, Санта-Клара, Калифорния, США5067-4626 (ДНК 1000) / 5067-4627 (ДНК HS)*Используется для контроля качества библиотеки и анализа фрагментов
Agilent 2100 HS DNA, Qubit 3.0Agilent Technologies, Санта-Клара, Калифорния, СШАG2939BAПрибор для контроля качества библиотеки в сочетании с набором HS DNA Kit
биоМé Система rieux VITEK 2биоМé rieux, Marcy-l'É toile, Франция414532Автоматизированная идентификация микроорганизмов и тестирование чувствительности к противомикробным препаратам
Иллюминат NextSeq 500  Illumina Inc., Сан-Диего, Калифорния, USAIllumina Inc.,SY-415-1001Высокопроизводительная платформа для секвенирования
QIAamp UCP Набор ДНК патогеновВысокопроизводительная платформа для секвенирования50214Экстракция ДНК патогена с истощением ДНК хозяина
Флуориметр Qubit 3.0Thermo Fisher Scientific, Уолтем, Массачусетс, СШАВопрос 33216Количественное определение ДНК и РНК
Siemens SOMATOM Definition AS 64-slice Siemens Healthineers, Эрланген, ГерманияН/ДИспользуется для компьютерной томографической ангиографии (КТА)

Ссылки

  1. Kozyk, M., Strubchevska, K., Fisher, J. Wohlfahrtiimonas chitiniclastica: A rare infection reported in an adult with liver cirrhosis. Clin Case Rep. 11 (2), e6972(2023).
  2. Kopf, A., et al. Comparative genomic analysis of the human pathogen Wohlfahrtiimonas chitiniclastica provides insight into the identification of antimicrobial resistance genotypes and potential virulence traits. Front Cell Infect Microbiol. 12, 912427(2022).
  3. Robbins, K., Khachemoune, A. Cutaneous myiasis: A review of the common types of myiasis. Int J Dermatol. 49 (10), 1092-1098 (2010).
  4. Kopf, A., Bunk, B., Riedel, T., Schrottner, P. The zoonotic pathogen Wohlfahrtiimonas chitiniclastica- current findings from a clinical and genomic perspective. BMC Microbiol. 24 (1), 3(2024).
  5. Leeolou, M. C., et al. A rare case of Wohlfahrtiimonas chitiniclastica infection in California. JAAD Case Rep. 17, 55-57 (2021).
  6. Tóth, E. M., et al. Wohlfahrtiimonas chitiniclastica gen. nov., sp. nov., a new gammaproteobacterium isolated from Wohlfahrtia magnifica (Diptera: Sarcophagidae). Int J Syst Evol Microbiol. 58 (Pt 4), 976-981 (2008).
  7. De Smet, D., Goegebuer, T., Ho, E., Vandenbroucke, M., Lemmens, A. First case of Wohlfahrtiimonas chitiniclastica isolation from a patient with a foot ulcer infection in Belgium. Acta Clin Belg. 78 (3), 245-247 (2023).
  8. Harfouch, O., Luethy, P. M., Noval, M., Baghdadi, J. D. Wohlfahrtiimonas chitiniclastica monomicrobial bacteremia in a homeless man. Emerg Infect Dis. 27 (12), 3195-3197 (2021).
  9. Calderaro, A., Chezzi, C. Maldi-tof MS: A reliable tool in the real life of the clinical microbiology laboratory. Microorganisms. 12 (2), 322(2024).
  10. Chiu, C. Y., Miller, S. A. Clinical metagenomics. Nat Rev Genet. 20 (6), 341-355 (2019).
  11. Li, K., et al. Sepsis and hepatapostema secondary to Chromobacterium violaceum infection on lower limb skin: A case report. Infect Drug Resist. 17, 1003-1010 (2024).
  12. Dong, Y., et al. Post-COVID reactivation of latent Bartonella henselae infection: A case report and literature review. BMC Infect Dis. 24 (1), 422(2024).
  13. Ohtani, H. Granuloma cells in chronic inflammation express CD205 (DEC205) antigen and harbor proliferating T lymphocytes: Similarity to antigen-presenting cells. Pathol Int. 63 (2), 85-93 (2013).
  14. Ergin, N. Ö, Demirel, M., Özmen, E. An exceptional case of suture granuloma 30 years following an open repair of Achilles tendon rupture: A case report. J Orthop Case Rep. 7 (3), 50-53 (2017).
  15. Liu, Y. F., Ni, P. W., Huang, Y., Xie, T. Therapeutic strategies for chronic wound infection. Chin J Traumatol. 25 (1), 11-16 (2022).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги