Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Исследовательская статья

Противоопухолевые эффекты ключевых компонентов pileostegia tomentella посредством АФК-опосредованного классического апоптоза в клетках немелкоклеточного рака легкого

450 просмотров

⸱

DOI:

10.3791/69008

⸱

19 сентября 2025 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1International Zhuang Medicine Hospital affiliated to Guangxi University of Traditional Chinese Medicine, 2School of Zhuang Medicine, Guangxi University of Chinese Medicine, 3Guangxi Zhuang Autonomous Region Institute of Ethnic Medicine, 4Graduate School of Guangxi University of Traditional Chinese Medicine

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

В этом протоколе представлен метод оценки апоптоза, опосредованного активными формами кислорода (АФК), индуцированного природными соединениями в клетках немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ).

Аннотация

В этом исследовании изучается противоопухолевый потенциал Pileostegia tomentella, с особым акцентом на ее способность индуцировать классический апоптоз в клетках H1299 немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ) через опосредованные активные формы кислорода (АФК). Используя подход к выделению, управляемый биологической активностью, два активных соединения, умбеллиферон (UMB) и эпи-вогелозид, были идентифицированы как основные цитотоксические компоненты. Оба соединения проявляли значительное ингибирующее действие на жизнеспособность клеток и эффективно вызывали апоптотическую гибель клеток в клетках H1299. Механистические исследования показали, что лечение UMB и эпи-вогелозидом привело к заметному увеличению внутриклеточных уровней АФК, что является ключевым медиатором окислительного стресса. Вестерн-блоттинг выявил повышение уровня расщепленной каспазы-3 и снижение экспрессии антиапоптотического белка Bcl-2, что указывает на активацию внутреннего митохондриального апоптотического пути. Кроме того, транскриптомное профилирование показало обширные изменения в экспрессии генов, что еще больше способствует нарушению клеточного гомеостаза. Эти результаты свидетельствуют о том, что Pileostegia tomentella и ее активные компоненты являются перспективными в качестве потенциальных терапевтических агентов для лечения рака легких.

Введение

Рак представляет собой огромную глобальную проблему для общественного здравоохранения, характеризующуюся значительным ежегодным уровнем смертности. Немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ) является основным глобальным фактором смертности, связанной с раком, составляя примерно 85% случаев рака легких1. Канцерогенез, по своей сути сложное взаимодействие молекулярных и клеточных процессов, находится под критическим влиянием нарушений гомеостаза активных форм кислорода (АФК). АФК, которые включают нестабильные окислители, такие как супероксидные анионы, гидроксильные радикалы и перекись водорода, являются побочными продуктами нормального клеточного метаболизма и выполняют важные функции в передаче сигналов, пролиферации, дифференцировке и апоптозе. Дисбаланс концентраций АФК может вызвать окислительный стресс, потенциально активируя запрограммированные пути гибели клеток, в частности аутофагию и апоптоз, тем самым препятствуя пролиферациии выживанию раковых клеток. Следовательно, АФК играют двойную роль в онкологии, действуя как промоторы и супрессоры опухолевой прогрессии. За последнее десятилетие терапевтические стратегии лечения НМРЛ значительно продвинулись вперед, с разработкой новых противоопухолевых агентов, предназначенных для использования этой дихотомической природы АФК, представляющей собой особенно яркуюобласть исследований.

Известно, что многочисленные химически синтезированные противоопухолевые агенты, такие как адриамицин (доксорубицин), цисплатин и циклофосфамид, вызывают апоптоз в раковых клетках, стимулируявыработку АФК. Несмотря на достижения в области таргетной терапии и иммунотерапевтических антител, химиотерапия на основе платины продолжает оставаться краеугольным камнем лечения пациентов с НМРЛ. Тем не менее, появление резистентности и неблагоприятных побочных эффектов от химиотерапии требует разработки новых препаратов против НМРЛ. Следовательно, изучение природных источников противоопухолевых соединений все чаще признается своей важностью и потенциалом. Недавние исследования показали, что некоторые растительные экстракты и их активные компоненты проявляют мощные противоопухолевые свойства, характеризующиеся низкой токсичностью, высокой специфичностью и способностью воздействовать на несколько путей6. Примечательно, что некоторые из этих природных соединений могут модулировать уровни АФК и передачу сигналов7, тем самым вызывая аутофагию или апоптоз в раковых клетках и оказывая терапевтическое воздействие 8,9.

Pileostegia tomentella Рука. Цук, многолетнее травянистое растение из рода Клематис семейства Лютиковые (Buttercupaceae), преимущественно встречается в таких регионах, как Япония, Северная Корея и Китай. Различные компоненты растения, включая корни, стебли, листья и цветы, известны своими лечебными свойствами, обеспечивающими такие преимущества, как выведение тепла, детоксикация, уменьшение отеков, облегчение боли, а также антибактериальное и противовоспалительное действие. Недавние исследования пролили свет на противораковую активность экстрактов или активных ингредиентов Hoshi Hairy Vine, продемонстрировав супрессивное действие опухоли на ряд видов рака, включая глиому, рак молочной железы, толстой кишки и шейки матки10. Тем не менее, специфические противоопухолевые механизмы Pileostegia tomentella, в частности, ее потенциальная роль в модулировании АФК для индуцирования аутофагии или апоптоза в раковых клетках, остаются в значительной степени неизученными.

Несмотря на растущий интерес к природным соединениям для терапии рака, проапоптотические механизмы ключевых компонентов Pileostegia tomentella при раке легких остаются неизученными. В этом исследовании впервые была проведена идентификация и механистическое препарирование умбеллиферона и эпи-вогелозида в качестве селективных индукторов АФК-зависимого апоптоза при НМРЛ.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Реагенты и оборудование, использованные в данном исследовании, перечислены в Таблице материалов.

1. Химический состав Pileostegia tomentella и прогнозирование мишени НМРЛ

Химические составляющие Pileostegia tomentella были проанализированы с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии в сочетании с линейной ионной ловушкой — масс-спектрометрией Orbitrap (ВЭЖХ-LTQ/МС). Экстракты растворяли в соответствующих растворителях и фильтровали перед инъекцией. Хроматографическое разделение было достигнуто с использованием колонки с обращенной фазой в рамках программы градиентного элюирования, адаптированной для классов соединений. Данные масс-спектрометрии собирали в режиме положительной ионизации электроспреем в диапазоне масс 100-1500 м/з. Молекулярные структуры идентифицированных соединений были построены с помощью общего программного обеспечения для химического рисования и сохранены в формате SDF. Эти структурные файлы были представлены в онлайн-инструмент прогнозирования целей для идентификации потенциальных биологических целей, при этом 20 основных целей были выбраны для дальнейшей проверки. Мишени, ассоциированные с НМРЛ, были извлечены из общедоступной базы данных генов. Перекрывающиеся мишени из обоих наборов данных были идентифицированы как потенциальные терапевтические мишени Pileostegia tomentella.

2. Построение компонентно-целевой сети

Данные о белок-белковых взаимодействиях для предсказанных мишеней были получены из базы данных белковых взаимодействий с открытым доступом. Данные о взаимодействии были импортированы в программное обеспечение для общей визуализации сети для построения сети взаимодействия «составной-целевой объект». Топологические свойства сети, включая центральность степени, промежуточность и близость, были проанализированы с использованием встроенных аналитических инструментов для определения ключевых регуляторных узлов.

3. Анализ пути обогащения KEGG

Функциональное обогащение предсказанных целевых белков проводили с помощью анализа путей KEGG с помощью общедоступных инструментов обогащения и статистического программного обеспечения. Пути со скорректированными p-значениями менее 0,05 были признаны значимыми. Значимые пути были интегрированы с данными о составе-мишенях для построения сети взаимодействия «состав-мишень-путь» с использованием общего программного обеспечения для визуализации сети. Анализ топологии сети выявил ключевые биологические регуляторные узлы, иллюстрирующие многокомпонентные и многоцелевые механизмы Pileostegia tomentella.

4. Экстракция компонентов Pileostegia tomentella

Высушенные стебли винограда Corydalis spinosa измельчали в мелкий порошок. Порошкообразный материал экстрагировали 70% этанолом под ультразвуковой обработкой при комнатной температуре в течение определенного периода времени. Сырой экстракт фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Разделение жидкость-жидкость проводили с использованием растворителей с возрастающей полярностью, в том числе петролейного эфира, этилацетата и н-бутанола. Фракцию этилацетата, которая показала наибольшую биологическую активность в предварительных анализах, собирали, концентрировали, лиофилизировали и хранили при температуре -20 °С до дальнейшего использования.

5. Клеточная линия и условия лечения

Клеточную линию рака легкого человека H1299 культивировали в среде RPMI 1640 с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки при 37 °C во влажной атмосфере, содержащей 5%CO2. Клетки засеивали до соответствующей плотности и оставляли прилипнуть в течение ночи перед обработкой. Клетки подвергались воздействию различных концентраций (500 г/мл, 750 г/мл и 1000 г/мл) двух испытуемых соединений, UMB и эпи-вогелозида, как указано в таблице 1. После 24 часов инкубации в стандартных условиях культивирования клетки собирали для последующих анализов с целью оценки биологических эффектов соединений.

6. МТТ-анализ на жизнеспособность клеток

Цитотоксические эффекты соединений оценивали с помощью колориметрического МТТ-анализа. Клетки H1299 засеивали в 96-луночные планшеты с определенной плотностью и оставляли для прилипания в течение ночи. Затем клетки обрабатывали исследуемыми соединениями в течение 72 ч в стандартных условиях культивирования. После обработки раствор МТТ добавляли в каждую лунку и инкубировали, чтобы позволить жизнеспособным клеткам превращать МТТ в нерастворимые фиолетовые кристаллы формазана. После инкубации среду удаляли, а кристаллы формазана растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО). Поглощение измеряли на длине волны 570 нм с помощью считывателя микропланшетов. Значения абсорбции соответствуют жизнеспособности клеток, обеспечивая количественную оценку цитотоксичности соединения.

7. Оценка целостности мембраны с помощью высвобождения ЛДГ

Целостность клеточной мембраны оценивали путем измерения высвобождения лактатдегидрогеназы (ЛДГ) в качестве показателя цитотоксичности. Клетки H1299 обрабатывали исследуемыми соединениями в течение 24 ч, 48 ч или 72 ч. В каждый момент времени супернатанты культуры собирались и подвергались анализу активности LDH в соответствии с протоколом производителя. Поскольку ЛДГ высвобождается только из клеток с поврежденными мембранами, измеренные значения абсорбции отражают степень повреждения мембраны, вызванного соединениями с течением времени.

8. Проточный цитометрический анализ апоптоза

Индукцию апоптоза оценивали методом проточной цитометрии с использованием окрашивания аннексином V и 7-аминоактиномицином D (7-AAD). После обработки исследуемыми соединениями клетки H1299 собирали центрифугированием, промывали холодным фосфатно-солевым буфером и ресуспендировали в связывающем буфере. Затем клетки инкубировали с аннексином V, конъюгированным с флуоресцентным красителем и 7-AAD в соответствии с протоколом окрашивания. Образцы были немедленно проанализированы с помощью проточной цитометрии. Этот метод позволил дифференцировать жизнеспособные клетки (неокрашенные), ранние апоптотические клетки (аннексин V положительный, 7-AAD отрицательный) и поздние апоптотические или некротические клетки (положительные для обоих окрашивателей).

9. Количественное определение внутриклеточных АФК

Внутриклеточные уровни активных форм кислорода (АФК) измеряли с помощью флуоресцентного анализа. Клетки H1299 засеивали в 12-луночные планшеты с плотностью 1 × 10-5 клеток на лунку и культивировали до достижения приблизительно 80% конфлюенции. Затем клетки обрабатывали указанными соединениями в течение 72 ч. После обработки клетки инкубировали с 1 мкМ чувствительного к АФК флуоресцентного зонда 2',7'-дихлордигидрофлуоресцеина диацетата (DCFH-DA) при 37 °C в течение 30 мин в темноте. После инкубации клетки собирали, а интенсивность флуоресценции измеряли на длине волны излучения 525 нм с помощью считывателя флуоресцентных микропланшетов. Интенсивность флуоресценции соответствует уровню внутриклеточных АФК.

10. Количественная ПЦР в реальном времени (ОТ-кПЦР)

Клетки H1299 засеивали в 6-луночные планшеты с плотностью 2 × 10-5 клеток на лунку и культивировали до достижения примерно 80% конфлюенции. Затем клетки обрабатывали указанными соединениями в течение 72 ч. Общую РНК экстрагировали с помощью широко используемого фенол-хлороформного метода. Синтез комплементарной ДНК (кДНК) проводили с помощью набора для обратной транскрипции в соответствии с инструкцией производителя. Количественная ПЦР в реальном времени (qRT-PCR) проводилась с использованием системы ПЦР в реальном времени со специфическими праймерами (перечислены в таблице 2). Относительные уровни экспрессии генов рассчитывали с помощью сравнительного метода Ct, при этом в качестве внутреннего контроля использовались гены хозяйству.

11. Иммуноблоттинг для экспрессии белка

Вестерн-блоттинг проводили на культивируемых и обработанных клетках H1299. Общий белок экстрагировали с использованием соответствующего буфера для лизиса, а лизаты осветляли центрифугированием при 10 000 × г в течение 15 мин при 4 °С. Концентрации белков определяли с помощью спектрофотометрического анализа. Равное количество белка из каждого образца разделяли с помощью SDS-PAGE и переносили на мембрану из поливинилидендифторида (PVDF). Мембраны блокировали 5% обезжиренным сухим молоком в течение 2 ч при комнатной температуре, а затем инкубировали в течение ночи при 4 °C первичными антителами, специфичными к Bcl-2, каспазе-3, PARP1, BAX, GAPDH и тубулину в оптимизированных разведениях. После промывки мембраны инкубировали с соответствующими вторичными антителами в течение 2 ч при комнатной температуре. Белковые полосы были визуализированы и визуализированы с использованием хемилюминесцентной субстрата. Денситометрический анализ был выполнен с помощью программного обеспечения для анализа изображений, а интенсивности полос были нормализованы на GAPDH и тубулин в качестве контроля нагрузки.

12. Иммунофлуоресцентная микроскопия каспазы-3

Экспрессию и субклеточную локализацию каспазы-3, ключевого апоптотического белка, оценивали с помощью иммунофлуоресцентного окрашивания. После обработки клетки H1299 фиксировали параформальдегидом, проникали мягким раствором детергента и инкубировали с первичным антителом против каспазы-3. Затем применяли флуоресцентно меченное вторичное антитело для обнаружения сигнала первичного антитела. Ядра клеток окрашивали с помощью ДНК-связывающего флуоресцентного красителя. Окрашенные клетки визуализировали под флуоресцентным микроскопом. Интенсивность и клеточное распределение флуоресцентного сигнала предоставили качественную и пространственную информацию об активации каспазы-3, подтверждая ее участие в индуцированном соединением апоптотическом ответе.

13. Транскриптомное секвенирование

Для профилирования клеточного транскрипционного ответа на исследуемые соединения из обработанных клеток H1299 выделяли общую РНК и оценивали ее целостность с использованием стандартных методов контроля качества. Библиотеки секвенирования были подготовлены в соответствии с установленными протоколами и подвергнуты высокопроизводительному секвенированию с использованием платформы секвенирования нового поколения. Необработанные данные секвенирования обрабатывались с помощью обычного биоинформатического конвейера, который включал фильтрацию контроля качества, выравнивание по референсному геному и количественную оценку распространенности транскриптов. Дифференциальный анализ экспрессии генов был проведен для выявления генов со статистически значимыми изменениями экспрессии после лечения. Обогащение и анализ путей дифференциально экспрессируемых генов были проведены для выяснения ключевых биологических процессов, на которые влияют соединения, тем самым обеспечив всесторонний транскриптомный обзор их молекулярных эффектов.

14. Статистический анализ

Все данные выражены в виде среднего значения ± стандартного отклонения (SD) по крайней мере трех независимых экспериментов. Статистическая значимость между группами определялась с использованием стандартных методов, включая t-критерий Стьюдента или однофакторный ANOVA, где это уместно. Различия считались статистически значимыми для P-значений менее 0,05.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Скрининг ключевых компонентов Pileostegia tomentella на фоне рака легких
Обзор плана эксперимента представлен на рисунке 1. С помощью HPLC-LTQ/Orbitrap MS были охарактеризованы семь основных биологически активных компонентов, присутствующих в Pileostegia tomentella (Таблица 3). Впоследствии для этих соединений проводили прогнозирование мишеней in silico с использованием базы данных11

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ) остается насущной проблемой глобального здравоохранения, характеризуясь своей агрессивной биологией, быстрым клиническим прогрессированием и высоким метастатическим потенциалом, что часто приводит к плохим исходам для пациентов12. Хотя стандартные вмешательства, такие как хирургическая резекция, лучевая терапия и химиотерапия, обеспечивают терапевтический эффект на ранних стадиях заболевания, их эффективность снижается на поздни...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

У авторов нет конфликта интересов, о котором можно было бы заявить.

Благодарности

Эта работа была поддержана Проектом высокого уровня по построению ключевой дисциплины традиционной китайской медицины - Аптека этнических меньшинств (Аптека Чжуан) от Государственного управления традиционной китайской медицины (No zyyzdxk-2023165); Программа развития талантов «Молодежный проект» Международной медицинской больницы Чжуан провинции Гуанси (No 2022001); Проект междисциплинарной команды кросс-инноваций в китайской медицине провинции Гуанси (No. GZKJ2309); Программа инноваций высокого уровня по развитию талантов Университета традиционной китайской медицины Гуанси (No 2022A008); Ключевой проект исследований и разработок Департамента науки и технологий провинции Гуанси (No. Гуй Кэ AB21196057); Трехлетний план действий на 2023 год по строительству команды талантов высокого уровня для Международной медицинской больницы Чжуан в Гуанси (No GZCX20231203, GZCX20231202); Третий набор программы по развитию команды талантов высокого уровня «Проект Цихуан» Университета традиционной китайской медицины провинции Гуанси (No 202414).

ВКЛАД АВТОРА:

Вэнь Чжун, Лэйминь Цзян и Бин Цин внесли равный вклад в эту работу и являются первыми авторами. Они в первую очередь отвечали за планирование экспериментов, сбор данных и интерпретацию результатов. Сюмэй Ма провел анализ данных и внес свой вклад в подготовку рукописи. Ши Сяньи, Дэн Цинмэй и Чжоу Гуанъюнь участвовали в разработке исследования, сборе данных и изучении литературы. Цзянцунь Вэй, автор-корреспондент, руководил анализом и интерпретацией данных и играл ведущую роль в составлении и редактировании рукописи.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Приложение V– Набор для обнаружения апоптоза PE / 7-AADBD Biosciences556547Обнаружение апоптоза на основе проточной цитометрии
Антитело: BAXАбкамАБ32503Вестерн-блот на проапоптотический белок
Антитело: Bcl-2АбкамАБ182858Вестерн-блоттинг/иммунофлюоресценция
Антитело: расщепленная каспараза-3АбкамАБ32042Вестерн-блоттинг / ПЧ
Антитело: GAPDHАбкамАБ8245Внутренний контроль в вестерн-блоттинге
Антитело: PARP1АбкамАБ32064Вестерн-блот на маркер апоптоза
Антитело: ТубулинАбкамАБ78078Внутренний контроль в вестерн-блоттинге
ХимДроуPerkinElmer ИнформатикаCCG821391Построение структуры малых молекул
Система хемилюминесцентной визуализацииТанон Наука и ТехнологииТанон 5200Для визуализации белковых полос
ЦитоспейпCytoscape.orghttps://cytoscape.orgПостроение и анализ сетей
Ядерное пятно DAPIСигма Д9542Синее ядерное противопятно для ПЧ
ДАВИДНИЗhttps://david.ncifcrf.govФункциональное аннотирование и обогащение путей KEGG
ДМСОСигма <чел./> MFCD00002089Используется для растворения кристаллов формазана
Этанол (для экстракции)СигмаMFCD00003568Растворитель для ультразвуковой экстракции
ЭтилацетатСигмаMFCD00009171Используется для биоактивного фракционирования
FITC-конъюгированное вторичное антителоАбкамАБ6785Используется при иммунофлюоресценции
Проточный цитометрТермо СайентиалА29001Используется для обнаружения апоптоза и АФК
Флуоресцентный микроскопКорпорация OlympusБХ53ФДля визуализации иммунофлуоресцентных слайдов
Сублимационная сушилкаКорпорация «Лабконко»7670520Для лиофилизации и сохранения образцов
Генные картыИнститут Вейцманаhttps://www.genecards.orgБаза данных генов для актуальности заболеваний
Масс-спектрометрия HPLC-LTQ-OrbitrapТермо СайентиалIQLAAEGAAVFACZMAIKИдентификация соединений по МС
Платформа секвенирования Illumina NovaSeqIllumina Inc.20012850Используется для секвенирования РНК
Набор для анализа цитотоксичности ЛДГБейотимС0016Для измерения высвобождения ЛДГ в качестве индикатора цитотоксичности
Считыватель микропланшетовТермо СайентиалVL0000D0Для измерения абсорбции в анализах МТТ и ЛДГ
Набор для анализа жизнеспособности клеток MTTBeyotime С0009СИспользуется для анализа МТТ для оценки жизнеспособности клеток
Машина для количественной ПЦРТермо Сайентиал4485701Для анализа экспрессии генов
Программное обеспечение RФонд Rhttps://www.r-project.orgСтатистические вычисления и построение путей
Комплект для обратной транскрипции (RT Kit)ВазимеМР201Для синтеза кДНК
Набор для подготовки библиотеки RNA-seqIllumina Inc.20020594Подготовка библиотеки к секвенированию
SwissTargetПрогнозШвейцарский институтhttp://www.swisstargetprediction.chИнструмент прогнозирования составных целей
SYBR Зеленая смесь для количественной ПЦРВазимеВопрос 311-02Для количественной ПЦР
Реагент ТРИзол (экстракция РНК)Сигма Т3934Для полной экстракции РНК
Ультразвуковой очистительБрэнсонM1800-CPXHДля ультразвуковой экстракции
Аппарат вестерн-блоттингТермо СайентиалА56727Гель-электрофорез и перенос белка

Ссылки

  1. Fan, D., Yu, S., Yang, Y., Qu, S. Pyoluteorin induces apoptosis and autophagy in NSCLC cells. Biol Pharm Bull. 44 (7), 976-983 (2021).
  2. Cui, Q., et al. Modulating ROS to overcome multidrug resistance in cancer. Drug Resist Updat. 41, 1-25 (2018).
  3. Wang, Y., et al. The double-edged roles of ROS in cancer prevention and therapy. Theranostics. 11 (10), 4839-4857 (2021).
  4. Sahoo, B. M., Banik, B. K., Borah, P., Jain, A. Reactive oxygen species (ROS): Key components in cancer therapies. Anticancer Agents Med Chem. 22 (2), 215-222 (2022).
  5. Perillo, B., et al. Ros in cancer therapy: The bright side of the moon. Exp Mol Med. 52 (2), 192-203 (2020).
  6. Luo, H., et al. Naturally occurring anticancer compounds: Shining from Chinese herbal medicine. Chin Med. 14, 48(2019).
  7. Han, X., et al. Quercetin hinders microglial activation to alleviate neurotoxicity via the interplay between NLRP3 inflammasome and mitophagy. Redox Biol. 44, 102010(2021).
  8. Lv, C., et al. Ainsliadimer a induces ROS-mediated apoptosis in colorectal cancer cells via directly targeting peroxiredoxin 1 and 2. Cell Chem Biol. 30 (3), 295-307.e5 (2023).
  9. Jiaqi, L., et al. Andrographolide promoted ferroptosis to repress the development of non-small cell lung cancer through activation of the mitochondrial dysfunction. Phytomedicine. 109, 154601(2023).
  10. Liu, Y., et al. Total coumarins of Pileostegia tomentella induces cell death in SCLC by reprogramming metabolic patterns, possibly through attenuating β-catenin/AMPK/sirt1. Chin Med. 18 (1), 1(2023).
  11. Daina, A., Michielin, O., Zoete, V. Swisstargetprediction: Updated data and new features for efficient prediction of protein targets of small molecules. Nucleic Acids Res. 47 (W1), W357-W364 (2019).
  12. Catania, C., et al. New options and open issues in the management of unresectable stage III and in early-stage NSCLC: A report from an expert panel of Italian medical and radiation oncologists - interaction group. Crit Rev Oncol Hematol. 190, 104108(2023).
  13. Guo, H., et al. Biomarker-targeted therapies in non-small cell lung cancer: Current status and perspectives. Cells. 11 (20), 3200(2022).
  14. Mcnamee, N., Da Silva, I. P., Nagrial, A., Gao, B. Small-cell lung cancer update on targeted and immunotherapies. Int J Mol Sci. 24 (9), 8129(2023).
  15. Jiang, R., et al. The sodium new houttuyfonate suppresses NSCLC via activating pyroptosis through tcons-14036/mir-1228-5p/prkcdbp pathway. Cell Prolif. 56 (7), e13402(2023).
  16. Chen, P., Liu, Y., Wen, Y., Zhou, C. Non-small cell lung cancer in China. Cancer Commun (Lond). 42 (10), 937-970 (2022).
  17. Amorim, R., et al. Mitochondriotropic antioxidant based on caffeic acid antioxcin(4) activates Nrf2-dependent antioxidant defenses and quality control mechanisms to antagonize oxidative stress-induced cell damage. Free Radic Biol Med. 179, 119-132 (2022).
  18. Long, K., et al. Small-molecule inhibition of ape1 induces apoptosis, pyroptosis, and necroptosis in non-small cell lung cancer. Cell Death Dis. 12 (6), 503(2021).
  19. Lin, Z., Cheng, X., Zheng, H. Umbelliferon: A review of its pharmacology, toxicity and pharmacokinetics. Inflammopharmacology. 31 (4), 1731-1750 (2023).
  20. Cruz, L. F., et al. Umbelliferone (7-hydroxycoumarin): A non-toxic antidiarrheal and antiulcerogenic coumarin. Biomed Pharmacother. 129, 110432(2020).
  21. Zheng, S., et al. Systematic review of lonicerae japonicae flos: A significant food and traditional Chinese medicine. Front Pharmacol. 13, 1013992(2022).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Апоптозопосредованный АФКумбеллиферонэпи-вогелозиджизнеспособность клетококислительный стрессмитохондриальный путь апоптозавестерн-блоттинг
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.