Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Исследовательская статья

miR-22-опосредованная регуляция Wnt/β-катениновой сигнализации куркумином при ретинобластоме

594 просмотров

⸱

DOI:

10.3791/69300

⸱

26 сентября 2025 г.

 ,  ,  ,  , 
1Department of Cataract, Tianjin Eye Hospital, 2Academy of Medical Engineering and Translational Medicine, Tianjin University, 3School of Medicine, Nankai University Affiliated Eye Hospital, 4Tianjin Key Laboratory of Ophthalmology and Visual Science, Tianjin Eye Institute, Tianjin Eye Hospital

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

В данном исследовании представлен протокол оценки влияния куркумина на поведение клеток ретинобластомы посредством модуляции пути Wnt/β-катенина и экспрессии miR-22.

Аннотация

Ретинобластома (РБ) является распространенной внутриглазной злокачественной опухолью, поражающей младенцев и детей, однако ее точная этиология и патогенез остаются до конца неизученными. Куркумин, биоактивный полифенол, ингибирует прогрессирование опухоли посредством микроРНК-опосредованной модуляции сигнального каскада Wnt/β-катенина. Это исследование было направлено на выяснение того, как куркумин опосредует свои противоопухолевые эффекты при RB, изучая его регуляцию экспрессии микроРНК-22 (miR-22) и изучая лежащие в ее основе молекулярные механизмы. Две валидированные модели ретинобластомы (SO-RB50/WERI-Rb-1) лечили куркумином в различных концентрациях. Чтобы определить регуляцию передачи сигналов Wnt/β-катенина в miR-22, клетки-мишени трансдуцировали либо лентивирусом, имитирующим miR-22, либо лентивирусом с нефункциональным контролем. Модели опухолей ксенотрансплантата были созданы у мышей с использованием RB-клеток человека для наблюдения за влиянием куркумина in vivo на размер опухоли, экспрессию miR-22 и уровни белка Wnt/β-катенина. Клеточную пролиферацию, инвазию и апоптоз оценивали с помощью анализа двойного окрашивания CCK-8, Transwell и Annexin V-APC-PI соответственно. Уровни miR-22 количественно определяли с помощью ОТ-ПЦР, а профили экспрессии Wnt1 и β-катенина определяли с помощью вестерн-блоттинга. Лечение куркумином привело к снижению пролиферации и инвазивности в RB-клетках, одновременно усиливая апоптоз и повышая экспрессию miR-22. Ингибирование miR-22 уменьшало влияние куркумина на сигнальный путь Wnt/β-катенина. В исследованиях ксенотрансплантатов куркумин значительно уменьшал размер опухоли и усиливал экспрессию miR-22 в опухолях, эффективно подавляя передачу сигналов Wnt/β-катенина. Эти результаты показывают, что куркумин ингибирует пролиферацию и инвазивность RB-клеток, способствуя апоптозу, в первую очередь опосредованному за счет повышения регуляции miR-22 и последующего ингибирования пути Wnt/β-катенина.

Введение

Ретинобластома (РБ) – злокачественное новообразование у детей с высокой агрессивностью, возникающей в тканях сетчатки, представляет существенную угрозу для здоровья, особенно для детей в возрасте до пяти лет. Генетические мутации, особенно те, которые влияют на ген RB1, тесно связаны с развитием этого заболевания1. Учитывая значительную распространенность ретинобластомы (РБ) среди младенцев и детей, а также тот факт, что ежегодно регистрируется около 9000 новых случаев, преимущественно в странах с низким уровнем дохода и развивающихся странах, всестороннее понимание механизмов заболевания является обязательным для разработки эффективных терапевтических стратегий и улучшения результатов лечения пациентов2. На протяжении многих лет исследования RB в основном были сосредоточены на геномных изменениях, в частности, на экспрессии микроРНК3. Безусловно, miR-34a и miR-22 оказались жизненно важными игроками в онкогенезе RB 4,5. Среди этих микроРНК miR-22 продемонстрировала свое участие в онкогенезе при различных видах рака 6,7,8, влияя на пролиферацию, инвазию и миграцию 6,9. Более того, предыдущие исследования показали снижение экспрессии miR-22 как в мышиных, так и в человеческих RB-клеточных линиях, что еще больше подчеркивает его потенциальную роль вэтом заболевании.

Куркумин, основной биологически активный куркуминоид в корневищах Curcuma longa, является основным ингредиентом традиционной медицины и азиатской кухни11. Его богатый фармакологический профиль, охватывающий противоопухолевое, противомикробное, противовоспалительное, антиоксидантное и нейропротекторное действие, привлек значительное внимание в биомедицинских исследованиях 12,13,14. Многочисленные исследования изучали его противоопухолевую роль при RB, подчеркивая его влияние на различные сигнальные пути, включая NF-κB15, JAK/STAT16 и MRP117. По сравнению с этими ранее изученными путями, ось куркумин-miR-22/Wnt/β-катенин может предложить более целенаправленный и специфичный подход, потенциально улучшая терапевтическую эффективность и уменьшая побочные эффекты.

Предыдущие исследования показали, что куркумин достигает противоопухолевых эффектов за счет модуляции оси сигнального пути TET1/Wnt/β-катенина в клетках гепатоцеллюлярной карциномы18 и раковых клеток толстой кишки19. Тем не менее, может ли куркумин подавлять прогрессию опухоли в RB-клетках, влияя на сигнальный путь Wnt/β-катенина, остается неизвестным. В недавних исследованиях сообщалось о снижении экспрессии miR-22 в клетках ретинобластомы и плоскоклеточного рака полости рта, связанном с изменениями активности сигнального пути Wnt/β-катенина20,21. Учитывая практическую применимость, куркумин проявляет эффективную противоопухолевую активность в определенном диапазоне концентраций (10-40 мкМ in vitro)15,22 и может быть введен in vivo с управляемыми фармакокинетическими свойствами, что облегчает трансляционные исследования. Таким образом, данное исследование направлено на создание модели RB для изучения того, повышает ли куркумин уровни miR-22 и впоследствии снижает сигнальную активность Wnt/β-катенина, обеспечивая потенциально более эффективную и клинически значимую терапевтическую стратегию по сравнению с традиционными подходами модуляции NF-κB, JAK/STAT или MRP1.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными, были рассмотрены и одобрены Комитетом по этике и благополучию животных (AEWC) Тяньцзиньской офтальмологической больницы (Approval No. NKYY-DWLL-2023-054). Используемые реагенты и оборудование приведены в Таблице материалов.

1. Культура клеток

Клетки линий ретинобластомы человека WERI-Rb-1 и SO-RB50 культивировали в модифицированной среде Dulbecco Eagle с высоким содержанием глюкозы с добавлением 10% эмбриональной бычьей сыворотки и 1% пенициллин-стрептомицина. Клетки высевали при соответствующей плотности в колбах для культур и поддерживали при температуре 37 °С во влажной атмосфере, содержащей %CO2. Среду заменяли каждые 2-3 дня, а клетки пропускали при 70%-80% конфлюенции с использованием стандартной трипсинизации.

2. Эксперименты на животных

В общей сложности было использовано 48 голых мышей Balb/c без специфических патогенов (возрастом 4 недели, 16-18 г). Животных содержали в стерильных, индивидуально вентилируемых клетках под ламинарным потоком воздуха с контролируемыми условиями окружающей среды 26-28 °C и относительной влажностью 40%-60%. Корм, вода и подстилка были стерилизованы перед использованием. Мышам был предоставлен свободный доступ к пище и воде, и они были акклиматизированы в течение недели перед экспериментами.

3. Группировка и лечение животных

Для инокуляции опухоли использовали клетки WERI-Rb-1 и SO-RB50, стабильно трансфицированные либо мимикой miR-22, либо отрицательной контрольной последовательностью. Клетки в логарифмической фазе роста собирали, ресуспендировали в стерильном фосфатно-солевом буфере и доводили до плотности 5 × 107 клеток/мл. Каждой мыши подкожно вводили 0,1 мл суспензии в правую переднюю конечность. Мыши были случайным образом разделены на шесть групп (n = 6 в группе): модельная группа, группа куркумина, группа мимики miR-22, группа miR-22 имитация + куркумин, группа отрицательного контроля miR-22 и группа отрицательного контроля miR-22 + группа куркумина. В группах, получавших куркумин, мышам вводили внутрибрюшинные инъекции 15 мг/кг куркумина один раз в сутки, начиная сразу после инокуляции опухолевых клеток. Остальные группы получали равные объемы ДМСО в качестве управления транспортным средством.

4. Измерение массы и объема опухоли

Частота изъятия опухоли составила примерно 80-90% у ксенотрансплантатированных голых мышей. Размер опухоли измеряли еженедельно с помощью цифрового штангенциркуля, при этом самый длинный диаметр записывался как длина (L), а самый короткий диаметр — как ширина (W). Объем опухоли рассчитывали по формуле V = (L × W2)/2. Мышей регулярно контролировали рост опухоли и состояние здоровья, а гуманные конечные точки применяли, если опухолевые опухоли превышали 1500мм3 или если у животных проявлялись признаки дистресса или потери веса. В конце 4-й недели мышей усыпляли путем ингаляцииCO2 с последующим вывихом шейки матки, чтобы обеспечить смерть. Опухоли препарировали и взвешивали сразу после удаления.

5. Трансфекция микроРНК

Для трансфекции использовали синтетические олигонуклеотиды, в том числе miR-22, отрицательный контроль, анти-miR-22 (20-метокси-модифицированный), анти-miR негативный контроль, Wnt1-специфичные миРНК и контрольные миРНК. Клетки при 70%-80% конфлюенции засеивали в 6-луночные планшеты за сутки до трансфекции. Трансфекцию проводили с использованием реагента на основе липидов в соответствии с инструкцией производителя. Для каждой лунки нуклеиновые кислоты разводили в бессывороточной среде и соединяли с реагентом для трансфекции в рекомендуемом соотношении с образованием комплексов, которые инкубировали в течение 15-20 мин при комнатной температуре, а затем добавляли по каплям в клетки в полной среде. Итоговый объем на лунку составил 2 мл. После 6 ч инкубации при 37 °C с 5%CO2 среду заменяли свежей полной средой. Клетки поддерживали в течение 48 ч перед последующими анализами. Эффективность трансфекции оценивали с помощью количественной ПЦР в реальном времени. Три различные миРНК, нацеленные на Wnt1 (si-Wnt1-1: 5'-CCAAGAGTCTGCAACTGGTACTCGA-3'; si-Wnt1-2: 5'-CGAGAAACGGCGTTTATCTTCGCTA-3'; si-Wnt1-3: 5'-GCTTCCTCATGAACCTTCACAACAA-3') использовали по отдельности или в виде эквимолярной смеси для минимизации побочных эффектов.

6. Набор для подсчета клеток Kit-8 (CCK-8)

Клетки засеивали в 96-луночные планшеты с плотностью 5 × 103 ячейки на лунку в 100 мкл полной среды и давали прилипнуть в течение ночи. После обработки указанными концентрациями куркумина в течение указанного времени непосредственно в каждую лунку добавляли 10 мкл рабочего раствора CCK-8. Лунки, содержащие только среду, служили пустыми контрольными отверстиями. Планшеты инкубировали при 37 °C с 5%CO2 в течение 4 ч, после чего измеряли поглощение при 490 нм с помощью считывателя микропланшетов. Жизнеспособность клеток рассчитывалась следующим образом:

Жизнеспособность (%) = figure-protocol-1 x 100

Были построены кривые «доза-реакция», и соответственно была определена полумаксимальная ингибиторная концентрация (IC50) куркумина.

7. Трансвелл-анализ

Для проведения миграционного анализа клетки суспендировали в бессывороточной среде и засеивали в верхние камеры вкладышей Transwell (размер пор 8 мкм) со скоростью 3 × 105 клеток по 200 мкл на вставку. Нижние камеры заполняли 600 мкл готовой среды, содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки в качестве хемоаттрактанта. Планшеты инкубировали при 37 °C с 5%CO2 в течение 24 ч. После инкубации немигрирующие клетки на верхней поверхности мембраны аккуратно удаляли стерильным ватным тампоном. Вкладыши дважды промывали фосфатно-соевым буфером, фиксированным в 5% глутаральдегиде при 4 °C в течение 30 минут, снова промывали и окрашивали 0,1% кристаллического фиолетового в течение 30 минут при комнатной температуре. Излишки красителя удаляли промывкой в PBS. Мембранам дали высохнуть на воздухе, а мигрировавшие клетки визуализировали под инвертированным микроскопом при увеличении 400×. Для количественной оценки были отображены три случайных поля на каждую вставку, а также рассчитано среднее количество ячеек.

8. Аннексин V-APC-PI анализ

Клетки из каждой группы собирали, дважды промывали предварительно охлажденным фосфатно-солевым буфером (PBS) и центрифугировали при 300 × г в течение 5 мин при 4 °C. Гранулу ресуспендировали в 300 мкл 1× связывающего буфера при плотности примерно 1 × 106 клеток/мл. Добавляли аннексин V-APC (5 мкл) и инкубировали образцы в течение 15 мин при комнатной температуре в темноте. Непосредственно перед проточной цитометрией к 200 мкл клеточной суспензии добавляли 5 мкл йодида пропидия и инкубировали в течение 5 мин при комнатной температуре. Образцы анализировали на проточном цитометре с использованием соответствующих каналов (APC и PI), а данные обрабатывали с помощью стандартных стратегий гейтирования для различения живых, ранних апоптотических, поздних апоптотических и некротических клеток.

9. Профилирование qRT-PCR

Общую РНК экстрагировали фенол-хлороформным методом, а концентрацию и чистоту определяли методом ультрафиолетовой спектрофотометрии. Для обратной транскрипции использовали 1 мкг общей РНК в реакции объемом 20 мкл с мастер-смесью обратной транскрипции в соответствии с протоколом производителя. Количественную ПЦР проводили в 20 мкл реакциях, содержащих 2 мкл кДНК, 10 мкл мастер-смеси SYBR Green и 0,4 мкМ каждого праймера. Реакции проводили на ПЦР-системе в реальном времени со следующей циклической программой: 95 °C в течение 1 мин, затем 40 циклов при 95 °C в течение 15 с и 63 °C в течение 25 с, с получением флуоресценции в конце каждого цикла. Для проверки специфичности продукта был проведен анализ кривой плавления при температуре от 55 °C до 95 °C. Каждый образец анализировали в трех экземплярах, а относительную экспрессию количественно определяли с помощью метода 2-ΔΔCt. U6 служил референсным геном для количественного определения микроРНК, а β-актин использовался для нормализации мРНК.

Последовательности праймеров были следующими: U6: вперед 5'-CTCGCTTCGGCAGCACACA-3', обратный 5'-AACGCTTCACGAATTGCGT-3'; miR-22: вперед 5'-GCCTGAAGCTGCCAGTTGA-3', задний 5'-GTGCAGGGTCGAGGT-3'; Wnt1: вперед 5'-CGATGGTGGGGTGTGAAC-3', задний 5'-CCGGATTGGCGTATCAGAC-3'; β-актин: вперед 5'-AGTGTGACGTGGACATCCGCAAAG-3', обратный 5'-ATCCACATCTGCTGGAAGGTGGAC-3'. Данные амплификации обрабатывались с помощью программного обеспечения системы. Все грунтовки были получены от коммерческого поставщика.

10. Вестерн-блот

Белки экстрагировали из культивируемых клеток или тканей с помощью буфера для лизиса, содержащего ингибиторы протеазы, а концентрации белков определяли методом бицинхониновой кислоты. Равное количество белка (40 мкг на полосу) разделяли 10% SDS-PAGE при постоянном напряжении (80 В для стекирующего геля и 120 В для разрешающего геля) и переносили на мембраны из поливинилидендифторида с помощью мокрой системы переноса при напряжении 100 В в течение 90 мин. Мембраны блокировали в 5 % обезжиренном молоке, приготовленном в трис-буферном физрастворе с 0,1 % Tween-20 (TBST) в течение 1 ч при комнатной температуре. Первичные антитела против Wnt1, β-катенина и β-актина разводили в соотношении 1:1000 в TBST, содержащем 1% обезжиренного молока, и инкубировали с мембранами в течение ночи при 4 °C. После трехкратной промывки TBST (по 10 мин) мембраны инкубировали с пероксидазой-конъюгированным с хреном вторичным антителом (разведение 1:5000) в течение 1 ч при комнатной температуре. После еще трех промывок с помощью TBST белковые полосы были визуализированы с помощью реагента для обнаружения хемилюминесценции, а сигналы были захвачены с помощью цифровой системы визуализации. Интенсивность полос была количественно определена с помощью программного обеспечения ImageJ.

11. Анализ люциферазы

Была сконструирована репортерная плазмида дикого типа (Wnt1-WT), содержащая 3'UTR Wnt1 с предсказанными сайтами связывания miR-22, и мутантный репортер (Wnt1-MUT) с нарушенными сайтами связывания. Клетки ретинобластомы человека засеивали в 24-луночные планшеты с плотностью от 1 × 10до 5 клеток на лунку и ко-трансфицировали репортерными плазмидами Wnt1-WT или Wnt1-MUT вместе с мимикой miR-22 или отрицательным контролем с использованием реагента для трансфекции на основе липидов. Для каждой лунки использовали 500 нг репортерной плазмиды и 50 нМ микроРНК, имитирующей или контрольную. После 48 ч инкубации при 37 °C с 5 %CO2 клетки лизировали в 100 мкл буфера пассивного лизиса. Активность люциферазы Firefly и Renilla измеряли последовательно с помощью системы двойного репортерного анализа люциферазы в соответствии с протоколом производителя. Активность люциферазы светлячков нормализовали до активности люциферазы Renilla для контроля эффективности трансфекции. Каждое условие было проверено в тройных лунках и повторено в трех независимых биологических репликах.

12. Статистический анализ

Все данные представлены в виде среднего ± стандартного отклонения (SD) по меньшей мере от трех независимых биологических репликатов. Статистический анализ проводился с использованием статистического программного обеспечения. Сравнения между несколькими группами проводились с помощью одностороннего дисперсионного анализа (ANOVA) с последующим апостериорным тестом Тьюки. p-значение <0,05 считалось статистически значимым.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Дозозависимые антипролиферативные и антиинвазивные эффекты куркумина на клетки ретинобластомы человека, сопровождающиеся деактивацией пути Wnt/β-катенина
RB-клетки человека обрабатывали различными дозами куркумина в течение 24 часов. Полученные данные выявили дозозависимое снижение жизнеспособности и инвазии клеток в сочетании с увеличением апоптоза. В частности, по мере увеличения концентрации куркумина с 10 до 50 мкМ, пролиферация клеток постепенно снижалась как в клеточных линиях SO-Rb50, так и в W...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Куркумин, полифенол, получаемый из корневищ Curcuma longa, известен своими противовоспалительными, антиангиогенными, антипролиферативными и антиоксидантными свойствами23,24. Кроме того, он обладает противоопухолевыми свойствами, в частности, способностью индуцировать апоптоз в злокачественныхклетках. Несмотря на то, что в предыдущих исследованиях подчеркивалось подавляющее рост действие куркумина на RB-кле...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

У авторов нет конфликта интересов, о котором можно было бы заявить.

Благодарности

Национальный фонд естественных наук Китая (82271218); Научный фонд Тяньцзиньской глазной больницы (общий проект ykyb1908).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Annexin V-APC/PI набор для двойного окрашиванияСоларбиоКА1020количественно оценить апоптоз в RB-клетках с помощью проточной цитометрии
Набор для анализа CCK-8БейотимС0038Измерьте поглощение при длине волны 490 нм для оценки пролиферативной способности клеток
CO2 инкубаторЭппендорфподдерживать оптимальные условия культивирования (37°; C, 5% CO2 и насыщенная влажность) для размножения RB-клеток
КуркуминСигмаС1386 г.Исследование противоопухолевого действия куркумина на ретинобластому (РБ)
Хемилюминесцентная подложка ECLБиоссС05-07004  визуализируйте белковые полосы в вестерн-блоттинге
Фетальная бычья сыворотка (FBS)ВиваСеллК04001-500 К04002-500Клеточная культура
Проточная цитометрияБекман КоултерГаллиосколичественно проанализировать скорость апоптоза клеток
Программное обеспечение ImageJНациональные институты здравоохраненияверсия 6Анализ полос вестерн-блоттинга, оценка уровня экспрессии белка
Инвертированный микроскопОлимпСКХ53наблюдать и подсчитывать инвазивные клетки в 400 раз; увеличение в пробе Transwell
Липофектамин 3000ИнвитрогенL3000015Клеточная трансфекция
Считыватель микропланшетов ТермоК3Количественное определение иммуноферментного анализа (ИФА)
miR-22 имитирует лентивирусХаньхэн Биотехнологияхас-миР-22Создание стабильно трансфицированной клеточной линии для экспериментов на животных
Мультиплексная система ПЦР в реальном времениБио-РадКФХ384проведение количественной ОТ-ПЦР (qRT-PCR) для точного анализа экспрессии генов
Пенициллин-стрептомицин (PS)АббкинBMC1030Добавляется в среды для культивирования клеток для предотвращения бактериального загрязнения
Набор для экстракции белкаСоларбиоБК3640-50Твыделение белка из клеточных и тканевых образцов
Вектор psiCHECK-2ПРОМЕГАJR20110328построить репортерные плазмиды Wnt1-WT (дикого типа) и Wnt1-MUT (мутантные) для исследования взаимодействия между miR-22 и Wnt1 3'UTR
Мембрана из ПВДФМеркISEQ00010протеиновый блоттинг
Вторичное антитело IgG кроликаТехнологии клеточной сигнализации14708Обнаружение вестерн-блоттинга путем связывания с первичным антителом
Статистическое программное обеспечение SPSSIBMВерсия SPSS 20.0проводить статистический анализ экспериментальных данных
SuperScript III Набор SuperMix для синтеза первой нитиИнвитроген11752-050  обратная транскрипция РНК в кДНК для последующего анализа ОТ-ПЦР
Набор премиксов SYBR Ex Taq IIБиография TaKaRaРР820АДля количественного обнаружения ОТ-ПЦР экспрессии Wnt1, β-актина и других генов-мишеней
Реагент ТРИзолИнвитроген12183-555Экстракция РНК как из клеточных, так и из тканевых образцов
УФ-спектрофотометрБэкменДУ800определить концентрацию и чистоту образцов РНК
Антитела Wnt1АбкамАБ15251Вестерн-блоттинг для определения экспрессии белка Wnt1
β-актиновое антителоАбкамАБ8227используется в качестве внутреннего эталона для нормализации белковой нагрузки в вестерн-блоттинге
β-катенин антителаТехнологии клеточной сигнализации37447Вестерн-блоттинг для определения экспрессии белка β-катенина

Ссылки

  1. Dimaras, H., et al. Retinoblastoma. Nat Rev Dis Primers. 1, 15021(2015).
  2. Pandey, A. N. Retinoblastoma: An overview. Saudi J Ophthalmol. 28 (4), 310-315 (2014).
  3. Rushlow, D., et al. Detection of mosaic RB1 mutations in families with retinoblastoma. Hum Mutat. 30 (5), 842-851 (2009).
  4. Yin, W., Gao, F., Zhang, S. MicroRNA-34a inhibits the proliferation and promotes the chemosensitivity of retinoblastoma cells by downregulating Notch1 expression. Mol Med Rep. 22 (2), 1613-1620 (2020).
  5. Liu, M., Wang, S. M., Jiang, Z. X., Lauren, H., Tao, L. M. Effects of miR-22 on viability, migration, invasion and apoptosis in retinoblastoma Y79 cells by targeting high-mobility group box 1. Int J Ophthalmol. 11 (10), 1600-1607 (2018).
  6. Guo, S., et al. miR-22 inhibits osteosarcoma cell proliferation and migration by targeting HMGB1 and inhibiting HMGB1-mediated autophagy. Tumour Biol. 35 (7), 7025-7034 (2014).
  7. Poliseno, L., et al. Identification of the miR-106b~25 microRNA cluster as a proto-oncogenic PTEN-targeting intron that cooperates with its host gene MCM7 in transformation. Sci Signal. 3 (117), ra29(2010).
  8. Zhang, J., et al. microRNA-22, downregulated in hepatocellular carcinoma and correlated with prognosis, suppresses cell proliferation and tumourigenicity. Br J Cancer. 103 (8), 1215-1220 (2010).
  9. Chen, H., et al. miR-22 inhibits the proliferation, motility, and invasion of human glioblastoma cells by directly targeting SIRT1. Tumour Biol. 37 (5), 6761-6768 (2016).
  10. Martin, J., et al. Differentially expressed miRNAs in retinoblastoma. Gene. 512 (2), 294-299 (2013).
  11. Hewlings, S. J., Kalman, D. S. Curcumin: A review of its effects on human health. Foods. 6 (10), 92(2017).
  12. He, Y., et al. Curcumin, inflammation, and chronic diseases: how are they linked. Molecules. 20 (5), 9183-9213 (2015).
  13. Anand, P., Sundaram, C., Jhurani, S., Kunnumakkara, A. B., Aggarwal, B. B. Curcumin and cancer: an "old-age" disease with an "age-old" solution. Cancer Lett. 267 (1), 133-164 (2008).
  14. Khadrawy, Y. A., Hosny, E. N., Eldein Mohamed, H. S. Assessment of the neuroprotective effect of green synthesized iron oxide nanoparticles capped with curcumin against a rat model of Parkinson's disease. Iran J Basic Med Sci. 27 (1), 81-89 (2024).
  15. Mu, Y. T., et al. Curcumin suppressed proliferation and migration of human retinoblastoma cells through modulating NF-κB pathway. Int Ophthalmol. 40 (10), 2435-2440 (2020).
  16. Li, Y., Sun, W., Han, N., Zou, Y., Yin, D. Curcumin inhibits proliferation, migration, invasion and promotes apoptosis of retinoblastoma cell lines through modulation of miR-99a and JAK/STAT pathway. BMC Cancer. 18 (1), 1230(2018).
  17. Sreenivasan, S., Ravichandran, S., Vetrivel, U., Krishnakumar, S. In vitro and in silico studies on inhibitory effects of curcumin on multi drug resistance associated protein (MRP1) in retinoblastoma cells. Bioinformation. 8 (1), 13-19 (2012).
  18. Zhu, J., Qu, J., Fan, Y., Zhang, R., Wang, X. Curcumin inhibits invasion and epithelial-mesenchymal transition in hepatocellular carcinoma cells by regulating TET1/Wnt/β-catenin signal axis. Bull Exp Biol Med. 173 (6), 770-774 (2022).
  19. Lu, Y., Zhang, R., Zhang, X., Zhang, B., Yao, Q. Curcumin may reverse 5-fluorouracil resistance on colonic cancer cells by regulating TET1-NKD-Wnt signal pathway to inhibit the EMT progress. Biomed Pharmacother. 129, 110381(2020).
  20. Sreenivasan, S., Thirumalai, K., Danda, R., Krishnakumar, S. Effect of curcumin on miRNA expression in human Y79 retinoblastoma cells. Curr Eye Res. 37 (5), 421-428 (2012).
  21. Yuan, S., et al. miR-22 promotes stem cell traits via activating Wnt/β-catenin signaling in cutaneous squamous cell carcinoma. Oncogene. 40 (39), 5799-5813 (2021).
  22. Sreenivasan, S., Thirumalai, K., Krishnakumar, S. Expression profile of genes regulated by curcumin in Y79 retinoblastoma cells. Nutr Cancer. 64 (4), 607-616 (2012).
  23. Park, W., Amin, A. R., Chen, Z. G., Shin, D. M. New perspectives of curcumin in cancer prevention. Cancer Prev Res (Phila). 6 (5), 387-400 (2013).
  24. Gupta, S. C., Patchva, S., Aggarwal, B. B. Therapeutic roles of curcumin: Lessons learned from clinical trials. AAPS J. 15 (1), 195-218 (2013).
  25. Reuter, S., Eifes, S., Dicato, M., Aggarwal, B. B., Diederich, M. Modulation of anti-apoptotic and survival pathways by curcumin as a strategy to induce apoptosis in cancer cells. Biochem Pharmacol. 76 (11), 1340-1351 (2008).
  26. Yu, X., et al. Curcumin exerts antitumor effects in retinoblastoma cells by regulating the JNK and p38 MAPK pathways. Int J Mol Med. 38 (3), 861-868 (2016).
  27. Sreenivasan, S., Krishnakumar, S. Synergistic effect of curcumin in combination with anticancer agents in human retinoblastoma cancer cell lines. Curr Eye Res. 40 (11), 1153-1165 (2015).
  28. Jiao, D. M., et al. Exploration of inhibitory mechanisms of curcumin in lung cancer metastasis using a miRNA-transcription factor-target gene network. PLoS One. 12 (2), e0172470(2017).
  29. Lu, Y., et al. Curcumin increases the sensitivity of Paclitaxel-resistant NSCLC cells to Paclitaxel through microRNA-30c-mediated MTA1 reduction. Tumour Biol. 39 (4), 1010428317698353(2017).
  30. Suresh, R., Ali, S., Ahmad, A., Philip, P. A., Sarkar, F. H. The role of cancer stem cells in recurrent and drug-resistant lung cancer. Adv Exp Med Biol. 890, 57-74 (2016).
  31. Yang, Z., et al. Retinoblastoma-binding protein 5 regulates H3K4 methylation modification to inhibit the proliferation of melanoma cells by inactivating the Wnt/β-catenin and epithelial-mesenchymal transition pathways. J Oncol. 2023, 5093941(2023).
  32. Bai, S., Shao, J., Bi, C., Li, F. β-asarone attenuates the proliferation, migration and enhances apoptosis of retinoblastoma through Wnt/β-catenin signaling pathway. Int Ophthalmol. 43 (5), 1687-1699 (2023).
  33. Yang, M., Li, Y., Wei, W. MicroRNA-188-5p promotes epithelial-mesenchymal transition by targeting ID4 through Wnt/β-catenin signaling in retinoblastoma. Onco Targets Ther. 12, 10251-10262 (2019).
  34. Shang, S., Hua, F., Hu, Z. W. The regulation of β-catenin activity and function in cancer: Therapeutic opportunities. Oncotarget. 8 (20), 33972-33989 (2017).
  35. Lu, Y., Wei, C., Xi, Z. Curcumin suppresses proliferation and invasion in non-small cell lung cancer by modulation of MTA1-mediated Wnt/β-catenin pathway. In Vitro Cell Dev Biol Anim. 50 (9), 840-850 (2014).
  36. Hao, J., et al. Curcumin suppresses colorectal tumorigenesis via the Wnt/β-catenin signaling pathway by downregulating Axin2. Oncol Lett. 21 (3), 186(2021).
  37. Shao, J., et al. LincROR mediates the suppressive effects of curcumin on hepatocellular carcinoma through inactivating Wnt/β-catenin signaling. Front Pharmacol. 11, 847(2020).
  38. Gao, M., Cui, Z., Zhao, D., Zhang, S., Cai, Q. MicroRNA-9 inhibits proliferation and progression in retinoblastoma cells by targeting PTEN. Genes Genomics. 43 (9), 1023-1033 (2021).
  39. Xu, L., Zhu, S., Tang, A., Liu, W. LncRNA MBLN1-AS1 inhibits the progression of retinoblastoma through targeting miR-338-5p-Wnt/β-catenin signaling pathway. Inflamm Res. 70 (2), 217-227 (2021).
  40. Fu, C., Wang, S., Jin, L., Zhang, M., Li, M. CircTET1 inhibits retinoblastoma progression via targeting miR-492 and miR-494-3p through Wnt/β-catenin signaling pathway. Curr Eye Res. 46 (7), 978-987 (2021).
  41. Bi, L. L., Han, F., Zhang, X. M., Li, Y. Y. LncRNA MT1JP acts as a tumor inhibitor via reciprocally regulating Wnt/β-catenin pathway in retinoblastoma. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 22 (13), 4204-4214 (2018).
  42. Lyv, X., et al. Long noncoding RNA ZFPM2-AS1 knockdown restrains the development of retinoblastoma by modulating the MicroRNA-515/HOXA1/Wnt/β-catenin axis. Invest Ophthalmol Vis Sci. 61 (6), 41(2020).
  43. He, H., Qin, M. Long non-coding RNA LEF1-AS1 is involved in the progression of retinoblastoma through regulating the Wnt/β-catenin pathway. Clin Exp Pharmacol Physiol. 47 (5), 886-891 (2020).
  44. Yu, F., Pang, G., Zhao, G. RETRACTED: ANRIL acts as onco-lncRNA by regulation of microRNA-24/c-Myc, MEK/ERK and Wnt/β-catenin pathway in retinoblastoma. Int J Biol Macromol. 128, 583-592 (2019).
  45. Cruickshank, B. M., et al. LncRNA PART1 promotes proliferation and migration, is associated with cancer stem cells, and alters the miRNA landscape in triple-negative breast cancer. Cancers (Basel). 13 (11), 2644(2021).
  46. Rysz, J., Konecki, T., Franczyk, B., Ławiński, J., Gluba-Brzózka, A. The role of long noncoding RNA (lncRNAs) biomarkers in renal cell carcinoma. Int J Mol Sci. 24 (1), 643(2022).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Клетки ретинобластомыобработка куркуминомрегуляция miR-22Wnt бета-катенинксенотрансплантат опухолипролиферация клетокапоптоз клетоквестерн-блоттингОТ-ПЦРанализ в системе Transwell
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.