Исследовательская статья

Сетевая фармакология и экспериментальное исследование клеток in vitro для изучения терапевтического потенциала производных тиазолонов при рабдомиосаркоме

DOI:

10.3791/69464

⸱

14 ноября 2025 г.

 ,  ,  ,  , 
1Research Institute for Doping Control, Shanghai University of Sport, 2Drug and Food Anti-doping Laboratory, China Anti-Doping Agency

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Мы представляем исследование, в котором систематически изучается терапевтический потенциал производных тиазолонов против рабдомиосаркомы на основе сетевой фармакологии и вычислительной химии, с валидацией и оценкой, выполненными с помощью экспериментов на клетках in vitro .

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Рабдомиосаркома (РД) – злокачественная опухоль, происходящая из рабдомиобластов, которая представляет серьезную угрозу для здоровья детей и подростков. Основываясь на потенциале производных тиазолонов в различных биологических активностях, данное исследование направлено на систематическое изучение механизмов использования производных тиазолонов в лечении ПД путем сочетания сетевой фармакологии и экспериментов на клетках in vitro . С помощью сетевой фармакологии были интегрированы данные с высокой пропускной способностью для прогнозирования потенциальных мишеней тиазолона. Кроме того, программное обеспечение AutoDock Vina использовалось для расчета энергии связи соединения и молекулы целевого белка, выявив его сигнальный путь, связанный с RD. Наконец, эксперименты с клетками in vitro еще раз подтвердили опухолевое супрессивное действие соединений. Для анализа мишеней производных тиазолонов в лечении ПД была использована сетевая фармакология, и в конечном итоге было получено 172 гена-мишени путем объединения и дедупликации. Пять белковых мишеней с низкой энергией связывания были обследованы путем стыковки между соединением и молекулой белка-мишени: PIK3CD, AKT1, GSK3B, HSP90AB1 и ITGB1. Результаты экспериментов на клеточных культурах in vitro показали, что специфическое производное тиазолона оказывает значительное ингибирующее действие на клеточные линии РД, обеспечивая научную основу для открытия новых мишеней и эффективных соединений для лечения ПД. Это исследование выявило механизмы использования производных тиазолона в лечении ПД посредством комбинации сетевой фармакологии и экспериментов in vitro и предоставило новую перспективу для будущей разработки лекарств и стратегий лечения.

Введение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Рабдомиосаркома (РД) – высокоагрессивная саркома мягких тканей у детей, представляющая значительную угрозу для здоровья детей, с ограниченными терапевтическими возможностями. Эпидемиологические исследования показывают, что, хотя ПД демонстрирует относительно низкие показатели заболеваемости, ее высокая злокачественность и плохой прогноз создают значительные клинические проблемы. РД классифицируется на четыре различных гистологических подтипа: эмбриональный, альвеолярный, веретеноклеточный/склерозирующий и плеоморфный, при этом наиболее распространенной формой является эмбриональная рабдомиосаркома (ЭРМС) 1....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Все процедуры сетевой фармакологии проводились в соответствии с Руководством по методам оценки сетевой фармакологии21. Комплексный рабочий процесс сетевой фармакологии, принятый в этом исследовании, схематически проиллюстрирован на рисунке 2.

Синтез производных тиазолона
Производные тиазолонов в этом исследовании были синтезированы в нашей предыдущей работе19 с помощью катализируемой медью реакции дистанционного асимметричного пропаргилирования. В реакции использовали CuI в качестве катализатора и хиральный лиг....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

В этом исследовании 13 производных тиазолонов (соединения a-m; Рисунок 3, рисунок 4) были ранее синтезированы,19 были отобраны для оценки их ингибирующей активности в отношении раковых клеток (рисунок 5). Среди этих соединений соединение m в концентрации 100 мкМ показало самую высокую скорость ингибирования в отношении клеток RD (Embryonal Rhabdomyosarcoma Cell) (STR Authenticated)22. .......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Сетевая фармакология обычно используется для прогнозирования и скрининга потенциальных активных молекул в сложных компонентах традиционной китайской медицины, а также для выяснения синергетических механизмов многокомпонентных, многоцелевых и многопутных действий в растительных формах. В этом исследовании мы применили подход сетевой фармакологии для систематического изучения потенциального механизма нашего недавно синтезированного производного тиазолона против РД путем создания сети соеди.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Исследование, представленное в этой публикации, было поддержано исследовательским проектом Шанхайского университета спорта (2025STD004).

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Пробный набор CCK-8Beyotime Biotechnology Co., Ltd.C0038Набор, используемый для измерения жизнеспособности и пролиферации клеток на основе восстановления водорастворимой соли тетразолия для образования цветного продукта.
Чистая скамейкаSuzhou Antai Airtech Co., LtdSW-CJ-1FDРабочая станция с ламинарным воздушным потоком, обеспечивающая стерильную среду для обработки клеточных культур и других чувствительных материалов.
CO2 ИнкубаторСила исцеленияHF90Для культивирования клеток используется среда, контролируемая температура, влажность и CO2 для поддержания оптимальных условий роста.
DMEM Высокий уровень глюкозыCytivaSH30022.01Среда для культивирования клеток с высокой концентрацией глюкозы (4,5 г/л), подходящая для различных типов клеток, включая быстрорастущие клетки млекопитающих.
FBSYEASEN40130ES76Распространённая добавка в клеточной культуре, обеспечивающая необходимые факторы роста, гормоны и питательные вещества для пролиферации клеток.
Инвертированный микроскопОЛИМПIX51Микроскоп, спроектированный с объективной линзой под уровнем, позволяющий наблюдать клеточные культуры в колбах или пластинах снизу.
Считыватель микропластинДиатекDR-200BПрибор, используемый для обнаружения биологических, химических или физических событий в образцах микропластин путём измерения абсорбции, флуоресценции или люминесценции.
PBSJinuo Biomedical Technology Co., Ltd.GNM20012Буферный раствор широко используется в биологических исследованиях для промывки клеток, разведения растворов и поддержания стабильности pH.
RD (эмбриональная клетка рабдомиосаркомы) (STR подтверждено)Shanghai FuHeng Biotechnology Co., Ltd.FH0712Клеточная линия была подтверждена с помощью анализа короткого тандемного повтора (STR), обладает чётко определённым генетическим фоном и чёткой идентичностью клетки, что обеспечивает надёжность и воспроизводимость экспериментальных данных.
Средняя модификация RMPI (1640)CytivaSH30809.01Широко используемая среда для культивирования клеток, изначально разработанная для человеческих лейкоцитарных клеток, теперь применяется для различных типов клеток млекопитающих.
Trypsin-EDTAJinuo Biomedical Technology Co., Ltd.GNM25200Раствор, используемый для отделения приклеенных клеток от поверхностей культуры путём переваривания внеклеточных белков и хелатирования ионов кальция.

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Chen, C., Dorado Garcia, H., Scheer, M., Henssen, A. G. Current and future treatment strategies for rhabdomyosarcoma. Front Oncol. 9, 1458(2019).
  2. Skapek, S. X., et al. Rhabdomyosarcoma. Nat Rev Dis Primers. 5 (1), 1(2019).
  3. Leiner, J., Le Loarer, F.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Network PharmacologyThiazolone DerivativesRhabdomyosarcoma TreatmentIn Vitro ExperimentsTumor SuppressionProtein DockingTarget PredictionCell CultureSignaling PathwaysDrug Development

Похожие статьи