Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Стандартизация модели Rat Intraluminal MCAO: подробный протокол с мерами контроля качества

121 просмотров

⸱

DOI:

10.3791/69573

⸱

7 августа 2026 г.

 ,  ,  ,  , 
1Department of Neurology, Xuanwu Hospital, Capital Medical University

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Этот протокол демонстрирует оптимизированную 60-минутную технику окклюзии средней церебральной артерии (MCAO) у крыс. Протокол валидирован с использованием мультимодальных подходов, достигая 87,5% успешности при минимальной смертности и воспроизводимых инфарктных и поведенческих результатов для исследований инсульта.

Аннотация

Модель окклюзии средней церебральной артерии (MCAO) у крысы остаётся эталоном для разъяснения ишемической патофизиологии инсульта и валидации нейропротекторных методов. Однако тонкие хирургические отклонения могут существенно изменить объём инфаркта и поведенческие последствия. Используя фреймворк «визуализируй, а потом систематизировать», мы пересмотрели каждый этап создания и валидации модели. Была проведена детальная фотодокументация ключевых хирургических ориентиров и ключевых этапов для стандартизации анатомической ориентации и размещения нитей. Для точного отображения объёма и топологии инфарктов через 24 и 72 часа после реперфузии использовалось окрашивание с использованием 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида (TTC). Неврологические дефициты оценивались по шкалам Зеа-Лонги, Бедерсона и модифицированных Гарсии. Двадцать четыре самца крыс Спраг-Доули прошли 60-минутный переходный MCAO; Объём инфаркта и неврологические показатели оценивались через 24 и 72 часа. Примерно 87,50% животных добились успешной блокады кровотока в мозге (Zea-Longa ≥ 1 и однозначный инфаркт, определённый TTC), с общей смертностью 12,50%, что свидетельствует о высокой точности модели. Этот стандартизированный протокол обеспечивает технически усовершенствованную, воспроизводимую основу для доклинических исследований инсульта, способствуя межлабораторной согласованности в исследованиях, изучающих патофизиологию инсульта и терапевтические вмешательства.

Введение

Инсульт — вторая по величине причина смерти и третья по величине причина инвалидности в мире 1,2. Инсульт непропорционально часто затрагивает страны с низким и средним уровнем дохода, где он происходит в среднем на 15 лет раньше, чем в странах с высоким уровнемдохода 1. Два основных типа — ишемический инсульт (85%) и внутримозговое кровоизлияние (15%)3. Ишемический инсульт, составляющий подавляющее большинство инсультов, возникает из-за блокировки кровотока в мозге, что приводит к гибели клеток и инфарктумозга 4. Ишемический каскад включает множество биохимических событий, включая значительные прооксидативныепроцессы 5,6.

Несмотря на обширные доклинические и клинические исследования, лишь несколько терапий — особенно внутривенный тромболиз с активатором тканевого плазминогена и механическая тромбэктомия — доказали свою эффективность, и эти методы ограничены узкими терапевтическими окнами и строгими критериями отбора пациентов. Следовательно, существует острая необходимость прояснить клеточные и молекулярные механизмы, лежащие в основе ишемического повреждения, нейроваскулярного восстановления и восстановления после инсульта. Воспроизводимая, клинически значимая модель животных необходима для достижения этой цели.

Модель окклюзии средней церебральной артерии (MCAO) широко используется для изучения ишемического инсульта угрызунов 7,8. Метод интралюминальной окклюзии филамента является одним из самых классических и широко используемых методовMCAO 9. Эта техника может моделировать как постоянные, так и временные окклюзии без необходимости краниэктомии. Новая трансфеморальная техника с эндоваскулярными проводами показала перспективы для индуцирования временного MCAO у крыс, обеспечивая более стабильныерезультаты 10. Эта модель включает окклюзию средней церебральной артерии, обычно с помощью техники внутрилюминальногофиламента 11. MCAO вызывает фокальную гипоперфузию мозга, что приводит к ишемии иреперфузионному повреждению 12.

Хотя MCAO ценен для изучения патофизиологии инсульта и возможных методов лечения, он может приводить к переменным объёмампоражения 7. Поэтому улучшения модели MCAO — такие как совершенствование реперфузионных методов, установление стандартизированных операционных протоколов и разработка единых критериев оценки — могут снизить вариабельность расположения и объёма инфаркта, тем самым повышая её полезность в исследованиях ишемического инсульта.

Этот протокол требует кривой обучения примерно из 10–15 операций для достижения единообразныхрезультатов 13. Показатели успеха могут варьироваться в зависимости от опыта оператора и штаммакрыс 14. Модель подходит для изучения острого ишемического инсульта, но может не полностью воспроизводить сопутствующие заболевания человека, такие как гипертония или диабет15. Соответственно, мы стремились разработать и тщательно проверить оптимизированный протокол MCAO, направленный на снижение экспериментальной вариабельности с помощью стандартизированных процедур и строгих мер контроля качества. Для достижения двойных улучшений в стандартизации и надёжности данных были интегрированы четыре взаимодополняющие инновации: (1) продольная оценка с двойными временными точками — неврологические показатели по шкалам Зеа-Лонга, Бедерсона и Модифицированной Гарсии были получены параллельно с инфарктными объёмами, полученными на основе 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида (TTC), через 24 и 72 часа после реперфузии, что определяло временную связь между разрешение отёка и функциональным восстановлением; (2) Тройная перекрёстная валидация — слепая оценка с двумя исследователями с интегрированной трёхмасштабной калибровкой значительно повысила чувствительность и точность поведенческой оценки; (3) Целостное быстрое гипотермическое сечение — стандартная операционная процедура (SOP) «экстракция в ледяной ванне 90-х с последующим одноступенчатым корональным разрезом диаметром 2 мм в предварительно охлаждённых формах» была введена для минимизации аутолиза и человеческой ошибки, обеспечивая высокоточные объемные измерения; (4) Интегрированная система контроля качества — комплексная SOP, охватывающая предоперационное голодание, контроль глубины анестезии, предоперационную терморегуляцию и предотвращение перекрёстного загрязнения, чтобы обеспечить воспроизводимую и легко передаваемую процедуру стандарта MCAO, заложив прочную основу для межлабораторной согласованности и сопоставимости между исследованиями.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Эксперимент был одобрен и контролировался Комитетом по институциональным экспериментам на животных и Экспериментальному комитету по благополучию животных Капитального медицинского университета. Все протоколы соответствуют Руководству NIH по уходу и использованию лабораторных животных (NIH Publ. 80-23, пересмотр 1996 года), а стерильное оборудование и асептические методы необходимы.

1. Отбор животных

  1. Используйте самцов крыс Спраг-Доули (возрастом 6–8 недель, весом 240–270 г), полученных у сертифицированного поставщика лабораторных животных (Лицензия No SCXK (Пекин) 2021-0011) для создания модели MCAO.
  2. Живут животных традиционным образом с едой и водой; все процедуры следовали Международному кодексу этики.
  3. Используйте следующие критерии, основанные на массе тела животного, для выбора размера нити, чтобы обеспечить равномерную окклюзию:
    - 220–250 г: диаметр 0,33–0,35 мм
    - 250–280 г: диаметр 0,35–0,38 мм
    - 280–310 г: диаметр 0,38–0,40 мм
    ПРИМЕЧАНИЕ: Эти спецификации учитывают возрастное увеличение диаметра сосуда и снижают заболеваемость SAH или неполнойокклюзии 13.

2. Размер выборки

  1. Рассчитайте размер выборки с помощью программного обеспечения для расчёта размера выборки. Основываясь на предварительных данных, показывающих ожидаемый объём инфаркта в составе 35% ± 10% (средний ± SD) в группе MCAO против 0% ± 2% в группе SHAM, оцените размер эффекта (Коэна d). Для двухстороннего теста Mann-Whitney U (непараметрическая альтернатива t-тесту) с α = 0,05 и степенью (1-β) = 0,80 вычислите минимальный размер выборки.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Размер эффекта оценивался как 3,5, а минимальный размер выборки составлял 6 животных на группу.
  2. Для учёта предполагаемой смертности (12,5%) и уровня исключения (5–10%) включите 24 крысы в группу MCAO и 6 крыс в группу SHAM, обеспечивая достаточную мощность (>0,90) для первичной конечной точки (объём инфаркта через 24 часа).

3. Критерии включения и исключения

  1. Включите животных, если они соответствовали следующим критериям: (1) самцы крыс Sprague-Dawley, весом 240–270 г, возраст 6–8 недель; (2) отсутствие предшествующих неврологических дефицитов (предоперационный неврологический балл = 0); (3) успешное введение анестезии без осложнений.
  2. Исключить животных из анализа, если у них наблюдалось: (1) субарахноидальное кровоизлияние (SAH), проявившееся при вскрытии; (2) преждевременная смерть (<24 часа после реперфузии), не связанная с экспериментальным вмешательством; (3) неудачная окклюзия (неврологический балл = 0 и отсутствие инфаркта, определённого TTC); (4) технический хирургический отказ (например, разрыв CCA).
    ПРИМЕЧАНИЕ: Эти критерии были заранее определены до начала исследования, чтобы минимизировать предвзятость отбора.
  3. Политика замены животных: Заменять только животных, исключённых из-за технической хирургической неисправности или интраоперационной смерти, чтобы сохранить статистическую эффективность. Не заменяйте животных неудачным моделированием (неудачной окклюзией), а сообщайте о них в рамках расчёта успеха, чтобы избежать искусственного снижения вариабельности.

4. Предоперационная подготовка

  1. Подготовьте автоклавные инструменты, стерильную филамент и драпированное поле.
  2. Регулярное голодание не требуется; При необходимости ограничивайте продолжительность голодания 2–4 часами. Индуцировать анестезию изофлураном (3–4%) и поддерживать её на уровне 1,5–2% при 30–40% O₂ во время процедуры. Подтвердите глубину анестезии потерей рефлекса выпрямления и защемления пальцев.
  3. Поддерживайте температуру тела на уровне 37 ± 0,5 °C с помощью грелки с обратной связью и контролем температуры ректа.
  4. Побрейте шею и кожу головы, затем очистите участок повидон-йодом, затем 70% этанола.
  5. Вводите бупренорфин (0,05 мг/кг, подкожно) за 30 минут до операции и каждые 12 часов после операции в течение 48 часов, или мелоксикам (1 мг/кг, подкожно) один раз в день в течение 3 дней16. Оценивайте боль, отслеживая поведение при груминге, осанку и спонтанную активность; Дополнительное обезболивание, если признаки дискомфорта сохраняются.

5. Закрытие MCA

  1. Поместите крысу в спинное положение, аккуратно вытянув голову, чтобы открыть вентральную шею.
  2. Сделайте разрез шейки по средней линии (1,5–2,0 см) с помощью ирисовых ножниц.
  3. Грубо разделяйте грудинномастовидные и омоподъязычные мышцы с помощью изогнутых щипцов, чтобы обнажить бифуркации левой общей сонной артерии (CCA).
  4. Перевязывайте наружную сонную артерию (ЭКА) дистально постоянным швом 4-0 и проксимально временной перевязкой. Сделайте небольшой разрез между двумя лигатурами ECA с помощью микроножниц.
  5. Временно блокируйте CCA и внутреннюю сонную артерию (ICA) с помощью микрососудистых зажимов (давление 60 g).
  6. Вставьте монофиламент с силиконовым покрытием 4-0 (диаметром 0,35–0,40 мм) через разрез ECA. Продвигайте его назад в CCA, затем перенаправляйте в ICA за бифуркации CCA.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Убедитесь, что филамент поступает в ICA в сторону основания черепа, а не крыло-небёжной артерии (PPA), которая ветвится вбок. Если сопротивление встречается на <10 мм, втяните нить, поверните голову животного на 30° в сторону противоположной стороны и снова продвигайтесь, чтобы перенаправить мимо начала PPA.
  7. Продвигайте филамент на 18–20 мм от бифуркации CCA, пока небольшое сопротивление не покажет окклюзию начала MCA. Проверьте глубину с помощью заранее отмеченной опорной линии на филаменте (расположенной в 2 мм непосредственно к силиконовой пробке), измеренной суппортом из точки вставки пня ECA. Освободите зажим CCA, когда филамент окажется на месте.

6. Реперфузия

  1. Через 60 минут окклюзии откройте разрез и ослабьте временную ЭКА-лигатуру.
  2. Аккуратно убирайте филамент, пока её кончик не очистит пень, восстановив кровоток. Немедленно установите постоянную связку проксимально к пеню, чтобы предотвратить обратное кровотечение. Закройте рану слоями.
  3. Переместите крысу в тёплую клетку для восстановления для постоянного наблюдения.

7. Фиктивная операция

  1. Подготовьте животное по той же процедуре, описанной выше, для MCAO (голодание, анестезия, контроль температуры, стерильное драпирование).
  2. Выполните разрез шейки матки и экспозицию бифуркации CCA, как указано выше.
  3. Вскрыть и обнажить сосуд. Не вставляйте филамент.
  4. Пусть артерии останутся открытыми; Не вызывайте ишемию мозга.
  5. Закройте разрез слоями после 10 минут экспозиции. Переместите животное в тёплую клетку для восстановления для наблюдения.

8. Послеоперационные неврологические показатели

  1. Оценивайте через 24 и 72 часа после реперфузии, непосредственно перед жертвой для измерения объёма инфаркта.
  2. Приучите животное в тихой комнате при температуре 25 °C в течение 30 минут.
  3. Пусть два независимых следователя не видят распределения групп. Пусть каждый следователь записывает результаты на отдельных листах без консультаций; Любое различие между оценщиками ≥1 балл приводит к переоценке.
  4. Шкалы (в порядке введения): Проведите оценкуZea-Longa 17 (Таблица 1), Bederson18 (Таблица 2) и Modified Garcia19 (Таблица 3), следуя последним опубликованным протоколам для согласованности критериев.
  5. Используйте среднее значения двух наблюдателей для статистического анализа. Исключить данные любого животного, если средние баллы отличаются на >10%, и заменить их новым испытуемым.

9. Измерение объёма инфаркта мозга

  1. Через 24 и 72 часа после реперфузии глубоко анестезируйте крыс с помощью 5% изофлурана. Подтвердите глубокую анестезию потерей рефлекса выпрямления и реакции на сжатие пальцев ног, а также при стабильном дыхании, прежде чем приступить к действию.
  2. Быстро удалять мозг в течение 90 секунд после подтверждения глубокой анестезии, промывать его ледяным PBS и разрезать на корональные срезы диаметром 2 мм с помощью охлаждённой крысиной мозговой матрицы. Во время нарезки соблюдайте следующие меры предосторожности
    1. Держите всю процедуру на льду при температуре 0–4 °C; Собрать мозг в течение 90 секунд и расположить его в предварительно охлаждённую матрицу.
    2. Используйте острое лезвие, чтобы сделать одиночные чистые разрезы для точных корональных срезов шириной 2 мм, собирая каждый срез в ростро-каудальном порядке в ледяной PBS.
    3. Немедленно очистите матрицу и лезвие 75% этанолом между животными, чтобы предотвратить перекрёстное загрязнение.
  3. После предварительного прогрева 2% TTC до 37 °C полностью погрузите ломтики и инкубируете в темноте 20 минут, аккуратно перемешивая каждые 5 минут по 20 минут.
  4. Быстро прекратите реакцию, промывая три раза с 4 °C PBS. Затем зафиксируйте 4% параформальдегид при 4 °C на ночь.
  5. При 300 dpi фотографируйте обе стороны каждого ломка по одному разу.
    1. Используйте фиксированное освещение на белом фоне, чтобы устранить тени и отражения.
    2. Размещайте срезы ровно без перекрытия, добавляя в каждом кадре планку масштаба и ID-метку. Держите камеру перпендикулярно к секциям и поддерживайте постоянное фокусное расстояние и баланс белого на протяжении всего участка.
  6. Количественно определите объём инфаркта с помощью ImageJ.
    1. Импортируйте изображение с разрешением 300 dpi (формат RGB) и конвертируйте в 8-битные оттенки серого (Image > Type > 8-битный).
    2. Примените авто-порог Оцу (Image > Adjust > Auto Threshold > выберите Otsu), чтобы отделить инфаркт (белый) от жизнеспособной ткани (красный).
    3. Используйте инструмент свободного выбора , чтобы обвести границу ипсилатерального полушария.
    4. Измерьте площадь (Анализировать > Измерять) и записывать количество пикселей.
    5. Вычислите объём инфаркта: Σ (площадь инфаркта × толщины среза [2 мм]) × (объём контралатерального полушария/ипсилатерального полушария), выраженного в процентах от противоположного полушария.

10. Статистический анализ

  1. Представляйте данные в виде среднего ± стандартного отклонения (SD) или медианы [межквартильного диапазона], в зависимости от необходимости.
  2. Проведите сравнения между группами с использованием непарного t-теста Студента или теста Манна-Уитни для ненормально распределённых данных.
  3. Установите статистическую значимость в P < 0,05. Проводите все анализы с помощью соответствующего программного обеспечения для статистического анализа.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Животные случайным образом распределялись на группы выживаемости после 24 часа (n = 10) или 72 часа (n = 10) для послереперфузионного окрашивания TTC. Ещё 4 крысы прошли MCAO, но умерли до запланированного окончания (уровень смертности 12,5%). Группа SHAM состояла из n = 6. Таким образом, общее количество использованных животных составило 30 (24 MCAO + 6 SHAM).

Крысы проходили 60-минутный MCAO для индуцирования церебральной ишемии (рисунок...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Важно уточнить, что основной целью этого исследования была методологическая стандартизация, а не биологическое открытие. Разработка стандартизированного протокола MCAO крайне важна для снижения межлабораторной вариабельности и повышения воспроизводимости в исследованиях ишемического инсульта. Этот протокол повышает процедурную прозрачность за счёт строгих мер контроля качества и устраняет распространённые технические недостатки моделирования MCAO, включая стандартизированную вставку фила...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

Эта работа была поддержана Пекинским фондом естественных наук (No7232269) и Пекинским фондом развития науки и технологий традиционной китайской медицины (No JJ-2023-93).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
2% TTC раствор окрашиванияBeijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd.T817025 г/бутылка, ≥98 % чистоты
4% PFABeijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd.P1110500 мл готовый к использованию
Рассасывающийся шовShandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd.VCP345H5-0 Vicryl
Зажимы АдсонаShanghai Jinzhong Surgical Instrument Co., Ltd.JD-110101×2 зубца, 12 см
Изгибанные зажимы DumontShanghai Jinzhong Surgical Instrument Co., Ltd.JD-1105211 см длина, 0,05 мм тонкий кончик
Оборудование для обратного отопленияShenzhen Reward Life Science & Technology Co., Ltd.6900137 ± 0,3 °C замкнутый контур
ImageJNational Institutes of Healthверсия 1.53k
Ножницы для разрезания радужкиShanghai Jinzhong Surgical Instrument Co., Ltd.JD-14060Изгибанный кончик, 10 см
Микрососудистые зажимыShenzhen Ruiwode Lift Technology Co.,Ltd.JD-160101,5 см изогнутый зажим
Нерасасывающийся шёлковый шовShanghai Pudong Jin-Huan Medical Products Co., Ltd.S-23046-0 Чёрный шёлковый нить
ПО PASS NCSS, LLC, Kaysville, UT, USAверсия 15.0 Программное обеспечение для расчёта размера выборки 
Матрица головного мозга крысыShenzhen Ruiwode Lift Technology Co.,Ltd.68610Корональные слоты 2 мм
Силиконопокрытый нилоновый филаментShenzhen Ruiwode Lift Technology Co.,Ltd.60-12500,35 мм НВ, 30 мм силиконовая насадка, EO-стерильный
Машина для анестезии малых животныхShenzhen Ruiwode Lift Technology Co.,Ltd.R500IEИзофлуранный вапоризатер, включая камеру для индуцирования и маску
SPSSIBM Corp., Armonk, NY, USAверсия 26.0 Программное обеспечение для статистического анализа
Микроножницы VannasShanghai Jinzhong Surgical Instrument Co., Ltd.JD-14058Изгибанный кончик, 8 см

Ссылки

  1. Walter, J., Oyere, O., Mayowa, O., Sonal, S. Stroke: a global response is needed. Bull World Health Organ. 94 (9), 1816-1834 (2016).
  2. Mira, K., Andreas, L. Global burden of stroke. Semin Neurol. 38 (2), 1649-2211 (2018).
  3. Stephen, J. M., David, J. W. Stroke: causes and clinical features. Medicine (Abingdon). 48 (9), 1561-1566 (2020).
  4. Narayanaswamy, V. Ischemic stroke: new insights from risk factors, mechanisms and outcomes. J Cardiovasc Dev Dis. 10 (12), 472(2023).
  5. Chao, L., Tao, S., Chen, J. Recent advances in nanomedicines for the treatment of ischemic stroke. Acta Pharm Sin B. 11 (7), 1767-1788 (2021).
  6. Marcelo, F., Leonardo, E. V., Brigitta, B., Elisabetta, P., Luciano, S. The nrf2 pathway in ischemic stroke: a review. Molecules. 26 (16), 5001(2021).
  7. Melissa, T. -L., Claire, L. G. A review of experimental models of focal cerebral ischemia focusing on the middle cerebral artery occlusion model. F1000Res. 10, 51752(2021).
  8. Lang, Z., et al. Animal models of ischemic stroke with different forms of middle cerebral artery occlusion. Brain Sci. 13 (7), 1007(2023).
  9. Rosalia, C., Rosanna, D. P., Emanuela, E., Salvatore, C. Middle cerebral artery occlusion by an intraluminal suture method. Methods Mol Biol. 1727, 1393-1401 (2018).
  10. Afshin, A. D., et al. Transfemoral approach to induce transient middle cerebral artery occlusion in rats: the use of commercially available endovascular wires. Neurocrit Care. 32 (2), 575-585 (2020).
  11. Seunghoon, L., et al. Middle cerebral artery occlusion methods in rat versus mouse models of transient focal cerebral ischemic stroke. Neural Regen Res. 9 (7), 1315-1318 (2014).
  12. Kitti, T., Nipon, C., Siripron, C. C. The effects of hyperbaric oxygen therapy on the brain with middle cerebral artery occlusion. J Cell Physiol. 236 (3), 21677-21694 (2021).
  13. Gary, P. M., et al. A comparative study of variables influencing ischemic injury in the longa and koizumi methods of intraluminal filament middle cerebral artery occlusion in mice. PLoS One. 11 (2), e0148503(2016).
  14. J, S., et al. Strain differences in intraluminal thread model of middle cerebral artery occlusion in rats. Physiol Res. 68 (1), 933937-933948 (2019).
  15. Chang, L., Xiaoqing, W., Yueru, Z., Songli, Y., Xiangshi, T. Study on the efficacy and pharmacological mechanism of innate immune sting pathway regulators in the treatment of ischemic brain injury. Pharmaceuticals. 18 (12), 1775(2025).
  16. Pei-Kang, L., et al. Neuroprotective effects of low-dose G-CSF plus meloxicam in a rat model of anterior ischemic optic neuropathy. Sci Rep. 10 (1), 66977(2020).
  17. Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats. Stroke. 20 (1), 1184-1191 (1989).
  18. Bederson, J. B., et al. Rat middle cerebral artery occlusion: evaluation of the model and development of a neurologic examination. Stroke. 17 (3), 1472-1476 (1986).
  19. David, W. H., et al. Different strokes for different folks: the rich diversity of animal models of focal cerebral ischemia. J Cereb Blood Flow Metab. 30 (8), 1412-1431 (2010).
  20. Kudret, T., Raghu, V., Kurt, A. S., Robert, J. D. Ideal suture diameter is critical for consistent middle cerebral artery occlusion in mice. Neurosurgery. 56 (1 Suppl), 196-200 (2005).
  21. Ilya, L. G., et al. MRI guiding of the middle cerebral artery occlusion in rats aimed to improve stroke modeling. Transl Stroke Res. 9 (4), 12417-12425 (2018).
  22. Nathalie, P. D. S., et al. The IMPROVE guidelines (Ischaemia models: procedural refinements of in vivo experiments). J Cereb Blood Flow Metab. 37 (11), 17703488-17703517 (2017).
  23. Chintamani, N. J., Swatantra, K. J., Puvvada, S. R. M. An optimized triphenyltetrazolium chloride method for identification of cerebral infarcts. Brain Res Protoc. 13 (1), 1011-1017 (2004).
  24. Huaxin, S., Lihong, D., Xuan, L., Zhong, Y., Wei, Y. A modified transcranial middle cerebral artery occlusion model to study stroke outcomes in aged mice. J Vis Exp. (195), e65345(2023).
  25. Maria, S., et al. Modified middle cerebral artery occlusion model provides detailed intraoperative cerebral blood flow registration and improves neurobehavioral evaluation. J Neurosci Methods. 358, 109179(2021).
  26. Clemens, J. S. Ischemic stroke: experimental models and reality. Acta Neuropathol. 133 (2), 245-261 (2017).
  27. Bharti, M., Louise, D. M. Sexual dimorphism in ischemic stroke: lessons from the laboratory. Womens Health (Lond). 7 (3), 2222-2239 (2011).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

234234JoVE
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.