Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Исследовательская статья

Остхол улучшает артрит у крыс по оси miR-34a/BCL-2

97 просмотров

⸱

DOI:

10.3791/69624

⸱

15 мая 2026 г.

 ,  ,  ,  ,  , 
1Jiangsu Key Laboratory of New Drug Research and Clinical Pharmacy, and Public Experimental Research Center, Xuzhou Medical University, 2Department of Joint Surgery, Shuyang Affiliated Hospital of Xuzhou Medical University

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Osthole (OST) — это природное соединение с обширной фармакологической активностью. Это исследование предполагает, что ОСТ смягчает эффекты остеоартрита колена (KOA ) по оси miR-34a/Bcl-2, что продемонстрировано в in vivo и in vitro исследованиях у крыс, а также предлагает новые идеи и направления для его патентной медицины и клинических применений.

Аннотация

Остеоартрит колена (КОА), также называемый гипертрофическим или дегенеративным артритом, является распространённым заболеванием суставов. Текущие клинические методы ведения включают фармакологическую терапию, физическое вмешательство, хирургические процедуры и дополнительные методы лечения. Хотя эти методы могут в определённой степени облегчить симптомы КОА, они часто имеют ограничения, такие как побочные эффекты, ограниченная эффективность или инвазивность. Остхол (OST), натуральный производный кумарина, широко изучен за свои лечебные свойства, особенно в облегчении боли в суставах и улучшении функции суставов. В этом исследовании были использованы анализ CCK8, трансмиссионная электронная микроскопия (TEM), окрашивание H&E и биохимический анализ сыворотки, чтобы показать, что ОСТ оказывает защитное действие на хондроциты как in vitro , так и in vivo, при отсутствии значительной токсичности. Последующие исследования с использованием TEM, акридино-оранжевого окрашивания, флоу-цитометрии и вестерн-блотинга показали, что ОСТ способствует аутофагии и подавляет апоптоз в хондроцитах. Дальнейшие механистические исследования с использованием qRT-PCR и анализов люциферазы показали, что ОСТ снижает уровень miR-34a, тем самым повышая экспрессию Bcl-2 и ингибируя апоптоз через путь miR-34a/Bcl-2. В итоге эти результаты показывают, что ОСТ защищает хондроциты как в клеточных, так и в животных моделях, снижая стресс, вызванный LPS, и снижая воспаление и апоптоз у крыс с KOA. Снижение уровня miR-34a и последующее увеличение экспрессии Bcl-2 способствуют его антиапоптотическому эффекту. Эти результаты дают теоретическую основу для разработки запатентованных препаратов на основе OST и их потенциальной клинической трансляции в терапии KOA.

Введение

Остеоартрит колена (КОА) — это распространённое заболевание суставов, также известное как гипертрофический, гипертрофический или старческий артрит колена. Она вызвана дегенерацией суставного хряща и изменениями структуры вокруг сустава. Согласно эпидемиологическим исследованиям, остеоартрит колена является распространённым заболеванием, особенно упожилых людей 1. Заболеваемость тесно связана с возрастом, весом, генетикой, травмами суставов и так далее. Также могут быть нарушены физиологические функции, включая ограниченную подвижность суставов, снижение мышечной силы и аномальную походку. В настоящее время при лечении остеоартрита колена наиболее часто используемые методы включают медикаментозную терапию, физиотерапию, хирургическое вмешательство и адъювантнуютерапию 2. Лекарства часто включают обезболивающие, нестероидные противовоспалительные препараты и препараты от хронического артрита для уменьшения боли и контроля воспаления. Физиотерапия включает горячие компрессы, холодные компрессы, массаж и специальные реабилитационные упражнения для улучшения моторной функции суставов и уменьшения боли. Хирургическое лечение может включать артроскопическую операцию, искусственную замену суставов или морфологическое восстановление костной кости для восстановления структуры и функций суставов. Кроме того, широко используются дополнительные методы терапии, такие как акупунктура, физиотерапия и традиционная китайская медицина.

Однако, несмотря на то, что такие методы лечения обеспечивают некоторое облегчение симптомов и заболевания остеоартрита колена, все же существуют ограничения. Лечение лекарствами может вызывать побочные реакции и проблемы с зависимостью; Физиотерапия требует постоянного процесса реабилитации, и результаты варьируются от индивидуальных различий; Хирургическое лечение рискованно, процесс восстановления длится и требует тщательного рассмотрения; И хотя адъювантная терапия получила широкое внимание и применение, научные подтверждения её эффективности всё ещё ограничены, необходимо глубоко изучить регуляторный механизм адъювантной терапии. В адъювантной терапии традиционные китайские лекарства для лечения остеоартрита колена широко используются во многих областях и доказали свою пользу. Должны быть некоторые компоненты традиционной китайской медицины, которые пока недостаточно известны, но доказаны в ходе долгосрочной практики и последующих исследований. В настоящее время многие китайские лекарства накопили богатый опыт в лечении остеоартрита колена, такие как Cibotium barometz3, Ligusticum wallichiiFranchat 4, Angelica pubescens5 и другие. Эти травы обладают обезболивающими и противовоспалительными свойствами, которые эффективно облегчают боль и уменьшают воспаление.

ОСТ — это соединение, похожее на кумарин, широко используемое в медицине как натуральный травяной экстракт6. В ней много фармакологических направлений, и она поддерживается многочисленными исследованиями. Исследования показали, что книдий обладает множеством фармакологических эффектов, включая противоопухольные, противовоспалительные препараты, гипергликемию, агрегацию антитромбоцитов и нейропротекцию, а также может иметь терапевтическое влияние на многие другие заболевания7. Сообщалось, что ОСТ может способствовать апоптозу раковых клеток, регулируя аутофагию, которая ингибирует апоптоз клеток карциномы яичников через LC3-опосредованную аутофагию и GSDME-зависимыйпироптоз 8; ОСТ индуцирует апоптоз клеток HT-29 через эндоплазматический стресс ретикулума и аутофагиюклеток 9; OST способствует апоптозу колоректального рака путём подавления сигнализации AMPK/Akt, индуцирования аутофагии клеток, ROS и ферроптоза10; ОСТ может подавлять рост колоректального рака, регулируя аутофагию и сигнальную трансдукцию, опосредованную митохондриями11. В то же время ОСТ особенно важен для облегчения боли в суставах и улучшении их функции, главным образом за счёт снижения воспалительного ответа и облегчения боли в суставах. А его активные компоненты могут снижать выброс воспалительных веществ и подавлять дегенерацию суставного хряща, вызванную артритом. По сравнению с распространёнными западными препаратами, ОСТ безопаснее и обладает низкой токсичностью, а длительное применение не вызывает устойчивости к лекарствам. Сообщалось, что остхоле усиливает остеогенез в остеобластах за счёт повышения транскрипционного фактора остерикса посредством cAMP/CREB сигнализации in vitro и in vivo12; ОСТ подавляет развитие остеоартрита колена, усиливая аутофагию, активируемую через путь AMPK/ULK1 13; Книдий лактон ингибирует дифференцировку остеокластов через p38 MAPK и PI3K-Akt и c-Fos/NFATc1 сигнальныйпуть 14; Книдий лактон предотвращает потерю костной ткани в вариэктомизированной модели крыс через эстроген-α/BMP-2/SMAD сигнальныйпуть 15; ОСТ улучшает остеопороз за счёт увеличения аутофагии мезенхимальных стволовыхклеток 16. Однако наблюдения и анализ показали, что большинство исследований остались в фенотипе или не раскрыли механизм регуляции сигнальных путей участия лекарств на молекулярном уровне, что также стало одной из причин, по которой соединения, извлеченные из традиционной китайской медицины, трудно принять широко. Поэтому крайне важно дальнейшее изучение механизма биологической регуляции Остхола на молекулярном уровне для его патентованного медицинского и клинического применения.

miRNA — это небольшая РНК, регулирующая биологическую функцию, ингибируя экспрессию целевых генов. Известно, что многие традиционные китайские лекарства оказывают биологическое воздействие, регулируя миРНК. Аналогично, сообщается, что ОСТ влияет на экспрессию миРНК. Во-первых, ОСТ играет противоопухолевую биологическую роль через миРНК. Сообщалось, что ОСТ ингибирует клеточную пролиферацию и индуцирует клеточную апоптоз, снижая экспрессию CPEB2 за счёт усиления miR-424 при эндометриальнойкарциноме 17; ОСТ подавляет пролиферацию и ускоряет апоптоз человеческих глиомных клеток за счёт повышенной регуляции miR-16 и понижения MMP-918; ОСТ проявляет противоопухолевой эффект при ретинобластоме, ингибируя путь PI3K/AKT/mTOR и регулируя ось hsa_circ_0007534/miR-214-3p19. Во-вторых, ОСТ также может влиять на физиологические процессы органов организма через регуляцию миРНК, что облегчает ремоделирование сосудистых лёгочных за счёт модуляции липидного метаболического перепрограммирования, опосредованного miR-22–3p; ОСТ защищает крыс от ишемии миокарда/ реперфузии за счёт подавления miR-30a и стимулированияаутофагии 21; ОСТ защищает кардиомиоциты H9c2 от повреждений, вызванных трастузумабом, усиливая аутофагию через сигнальный путь p38MAPK/mTOR22. В-третьих, ОСТ может играть нейропротективную роль через miRNA, которая стимулировала дифференцировку нейронных стволовых клеток в нейроны в модели клеток болезни Альцгеймера через апрегуляцию miR-9 и спасла функциональные нарушения гиппокампальных нейронов у трансгенных мышей APP/PS1 23; ОСТ снижает уровень бета-амилоида за счёт повышения уровня miR-107 при болезни Альцгеймера 24. Однако не сообщалось, что миРНК можно регулировать с помощью ОСТ для лечения остеоартрита колена. Литература показала, что miR-34a усиливает апоптоз хондроцитов и способствует развитию остеоартрита, нацеливаясь на DLL1 и регулируя путь PI3K/AKT 25. Длинная некодирующая РНК MEG3 регулирует прогрессирование остеоартрита, регулируя ось miR-34a/Клото 26; Снижение уровня miR-34a способствует пролиферации и подавляет апоптоз остеоартритных хрящевых клеток крыс, активируя путь PI3K/Akt 27. Таким образом, можно ли лечить KOA OST с помощью регулирования miR-34a? Поэтому выдвигается гипотеза, что ОСТ может лечить остеоартрит колена, регулируя миРНК.

В итоге, ОСТ — это природное соединение с обширной фармакологическойактивностью 28. Ранее исследовательская группа подтвердила, что ОСТ может улучшать остеоартрит колена у крыс, но передача клеточного сигнала и молекулярные механизмы, лежащие в основе этого биологического эффекта, пока не были полностью прояснены. В этой статье, изучая дальнейшее изучение миРНК, аутофагии и апоптозных сигнальных путей OST, целью прояснить механизм ОСТ в лечении остеоартрита колена и предложить новые идеи и направления для его патентованной медицины и клинического применения.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все исследования были одобрены Институциональным комитетом по уходу и лечению животных Медицинского университета Сюйчжоу. Реагенты и используемое оборудование перечислены в Таблице материалов.

1. Животная модель

Взрослые самцы и самки крыс Sprague-Dawley (SD) весом от 250 до 300 г были приобретены в Центре экспериментальных животных Медицинского университета Сюйчжоу. Крыс разводились в специальной комнате без патогенов. Экспериментальные процедуры на животных, включая лечение, уход и выбор конечной цели, следовали рекомендациям «Исследования животных: отчетность экспериментов in vivo». Эксперименты на животных проводились с использованием рандомизации. Крысы с синдромом SD были сгруппированы на четыре группы (n = 8 на группу): нормальная группа (без операции, нормальное питание) (нормальная группа), фиктивная группа (фиктивная операция: разрез кожи и мышц без пересечения передней крестообразной связки [ACLT], затем физиологическая жидкость), группа KOA/NC (операция ACLT + физиологическая жидкость), KOA/OST группа (ACLT операция + OST gavage). Модель колена крысы KOA была построена с использованием метода пересечения пересечения крестообразной связки (ACLT), как описаноранее 29. Физиологической группе вводили физиологический раствор через гаваж, а группе OST — через гаваж в течение 4 недель. Доза ОСТ составляет 50 мг/кг массы тела (растворяется в PEG 400 и разбавлен физиологическим физиологическим раствором), а частота введения — один раз в день в течение 4 недель в разделе крыс. Затем крыс усыпляли для анализа (согласно официально утверждённым протоколам). Ткани либо сразу замораживались в жидком азоте, либо фиксировались в 4% параформальдегиде.

2. Клеточная культура

Линия клеток человеческих хондроцитов (C28/I2) была получена из Американской коллекции типовых культур (ATCC, Манассас, Вирджиния). Клетки культивировались в соответствии с рекомендациями ATCC и использовались в течение 6 месяцев.

Условия культуры: среда DMEM/F-12, дополненная сывороткой из 10% плода и 1% пенициллин-стрептомицином, инкубирована при 37 °C в увлажнённом инкубаторе с содержанием 5%CO2 .

Обработки: Клетки были засеяны в 1 × 106 клеток/скважину в пластинах с 6 колодцами; после 24 часов спайки их лечили ЛПС (1 мкг/мл) самостоятельно или ОСТ (100 мкм) в течение 24 часов.

3. Анализы жизнеспособности клеток

Клетки хондроцитов были коинкубированы с OST или LPS в различных концентрациях в пластинах с 96 лунками. Анализ CCK8 отражает жизнеспособность клетки, обнаруживая поглощение (OD450 нм) с помощью считывателя микропластин, при этом более высокие значения OD указывают на более жизнеспособные клетки.

Градиент концентрации OST: 0, 25, 50, 100, 200, 400 мкм (инкубация 24 часа). Анализ CCK8 показал >90% жизнеспособность клеток во всех концентрациях, что подтверждает нетоксичность соединения.

Градиент концентрации LPS: 0, 0,1, 0,5, 1, 2 мкг/мл (инкубировался 24 часа). Группа LPS 1 мкг/мл имела жизнеспособность клетки ~50% (по сравнению с группой Ctrl), поэтому эта концентрация была выбрана для последующих экспериментов.

4. Окрашивание гематоксилином и эозином (H&E) и сафанином O окрашиванием

Ткани встраивались в парафин, девизировались, регидратировали и окрашивались реагентами H&E и Safranin O/Fast Green согласно инструкциям производителя. Условия окрашивания: рабочая концентрация AO составляла 1 мкг/мл; клетки инкубировали при 37 °C в течение 5 минут в темноте.

Количественный метод: Положительный коэффициент AVO был рассчитан путём подсчёта оранжевых пунктных клеток в 5 случайных полях (×400 увеличения) на выборку с помощью программного обеспечения ImageJ. Затем срезы фиксировались под микроскопом BX43 (увеличение ×400).

5. Потоковая цитометрия

Клетки были собраны и вновь суспендированы в растворе Annexin-V FITC/PI для анализа апоптоза. Условия инкубации: Клетки были повторно суспендированы при 1 × 106 клеток/мл в растворе Annexin-V FITC/PI (KeyGEN) и инкубированы при комнатной температуре в течение 15 минут в темноте.

Стратегия гейтинга: Вперёд (FSC ) против использовались боковые шлюзы рассеяния (SSC) для исключения элементарного мусора; Клетки Annexin-V FITC⁺/PI⁻ были определены как раннеапоптотические, а клетки Annexin-V FITC⁺/PI⁺ — как позднее апоптотические. График гейтинга включен в Дополнительный файл 1 (сырые данные потоковой цитометрии). Клетки собирались с помощью потокового цитометра. Данные анализировались с помощью программного обеспечения Flow Jo.

6. Трансфекция плазмид и мимика

MiR-34a mimic (34a-mimic), неспецифический управляющий мимик (NC) были получены из коммерческого источника. Клетки были трансфектированы плазмидами с использованием LipofectamineTM 3000 согласно инструкциям производителя.

7. Акридино-оранжевое пятно

Аутофагию обычно оценивали с помощью окрашивания акридином в оранжевый цвет в клетках. После обработки клеток LPS или OST в определённых концентрациях в течение 24 часов их инкубировали с AO (1 мкг/мл) при 37 °C в течение 5 минут в темноте. Изображения были сделаны с помощью лазерного конфокального микроскопа. Положительный коэффициент AVO был рассчитан путём подсчёта оранжевых пункта-клеток в 5 случайных полях (×400 увеличения) на выборку с помощью программного обеспечения ImageJ. Данные представлены как средние ± SD по трём независимым экспериментам.

8. Наблюдение с помощью трансмиссионного электронного микроскопа

Образцы фиксировались в 2,5% глутаральдегиде и 1% тетроксиде осмия, затем обезвоживались, промывали и импрегнировали. После полимеризации образцы разрезали на секции толщиной 70 нм с помощью ультрамикротома. Ультраструктура клеток наблюдалась с помощью трансмиссионной электронной микроскопии.

9. Иммуноблот

Моноклональное антитело мыши (Abs) против Bcl-2 (#68103), поликлональное антитело кролика против LC3 (#14600-1-AP), IL-6 (21865-1-AP) и моноклональное антитело мыши против β-актина (#66009-1-lg) были приобретены у Proteintech. Вторичные ABS, конъюгированные с IRDye 800CW Goat (поликлональный), анти-Rabbit IgG (H+L) или IRDye 800CW Goat (поликлональный) антимышиный IgG (H+L), были коммерчески получены. Клетки были лизированы в анализе на лизис целой клетки, отделённом электрофорезом на гель-электрофорезе SDS-полиакриламид. Белки были обнаружены с помощью первичных ABS и соответствующих вторичных ABS. Нагрузка белка составляла 30 мкг на полосу; первичное разбавление антител: Bcl-2 (1:1000), LC3 (1:1500), β-тубулин (1:5000); вторичные антитела (IRDye 800CW) использовались при 1:10 000, IL-6 (1:800). Затем белковые полосы были зафиксированы с помощью усиленной системы лазерного сканирования с хемилюминесценцией. Белковые диапазоны были количественно измерены программным обеспечением ImageJ.

10. Количественная полимеразная цепная реакция в реальном времени (qRT-PCR)

Общие РНК были выделены из клеток с помощью реагента Тризол. cДНК, полученные из общего количества РНК, были синтезированы с помощью регентного набора cDNA и проанализированы методами SYBR Green. cДНК, полученные из miRNA, были синтезированы с помощью набора miRcute и miRNA для первой цепи cDNA и проанализированы с помощью набора miRcute и miRNA qPCR. Все процедуры выполнялись в соответствии с производственным протоколом. Экспрессия целевого транскрипта была рассчитана с помощью метода 2-△△CT . GADPH и U6 использовались в качестве управления нагрузкой для мРНК и миРНК соответственно. Последовательность праймеров приведена в таблице 1.

11. Анализы репортёров Luciferase

Дикий тип psiCHECK2- Bcl-2-3′UTR репортерная плазмида (WT) и psiCHECK2-Bcl-2-3′UTR репортерная плазмида с мутантом на месте связывания miR-34a (Mut). Репортеры и мимика miR-34a были совместно трансфектированы в клетки хондроцитов с использованием LipofectamineTM 3000. Клетки извлекались и лизировались после 24 часов трансфекции. Интенсивность люциферазы затем измерялась с помощью набора Dual-LumiTM Reporter Gene Assay согласно инструкции производителя.

12. Тесты на анализ походки

Система MGT-PR использовалась для наблюдения за бегущими движениями конечностей крыс в каждой группе. Перед испытаниями крысам позволяли адаптироваться к условиям взлётно-посадочной полосы. Данные о походке во время свободной ходьбы были зафиксированы три последовательных действительных испытания ходьбы для каждой крысы. Анализируемые параметры включали длину шага, длительность замаха и координацию между правой и левой задними конечностями.

13. Статистический анализ

Эксперименты проводились в трёх экземплярах и независимо повторялись как минимум три раза. Статистический анализ проводился с помощью программного обеспечения GraphPad Prism 9. Данные были показаны как средние ± SD. Статистические различия оценивались с помощью одностороннего ANOVA (пост-хок теста Тьюки) для множественных сравнений или двухсторонним тестом Стьюдента для двух сравнений экспериментальных групп. Различия были признаны значимыми на уровне p < 0,05.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Клетки, защищённые OST, как in vitro, так и in vivo
Как натуральный продукт, профиль безопасности OST требует тщательного изучения. В этом исследовании впервые оценили его цитотоксичность на хондроцитах in vitro с помощью анализа CCK8. Результаты показали, что ОСТ не проявляет токсичности для хондроцитов даже при концентрации 400 мкм (рисунок 1A). Для изучения противовоспалительных и антиапоптотичес...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Прежде всего, ОСТ защищал хондроциты от стресса, вызванного LPS , in vitro , и облегчал воспаление и апоптоз у крыс с KOA in vivo. Эти защитные эффекты были связаны со снижением уровня miR-34a и последующим увеличением экспрессии Bcl-2, что соответствует предполагаемой роли оси miR-34a/Bcl-2 в опосредовании действия OST.

В этом исследовании было установлено, что ОСТ способствует аутофагии хондроцитных клеток и снижает апоптоз как in vitro...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

У авторов нет финансовых конфликтов интересов.

Благодарности

Это исследование финансировалось Ключевой лабораторией новых лекарств и клинической медицины Университета Цзянсу (XZSYSKF2021037). Эксперименты, описанные в этой статье, частично проводились в Государственном экспериментальном исследовательском центре и Центре лабораторных животных Медицинского университета Сюйчжоу. Выражаем благодарность Фусин Дуну, Кэцзя Чжану, Цзинся Куаю и Мин Чжану за их энергичную помощь.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
1% тетроксид осмияТехнология Руисин
2,5% глутаральдегидZhongjingkeyi Technology
Акридиновый оранжевыйSigmaAmresco 0360
Решение Annexin-V FITC/PIKeyGENKGA107
Bcl-2Proteintech#68103
Набор для подсчёта клеток 8VICMED39.VC5001L
ХемилюминесценцияOdyssey CLX
Конфокальный микроскопLeicaSTELLARIS 5
DMEM/F-12HyClone12.SH30023-01
Dual-LumiTM Репортер для анализа генаBeyotimeRG088
Набор FastKing cDNA RegentТЯНЬГЭНKR116-03
Потоковый цитометрBDПесня FACS II
Линия клеток хондроцита человекаКоллекция американской типографической культурыYTLK280144
LC3Proteintech#14600-1-AP
ЛипофектаминTM 3000ИнвитрогенL3000015
ЛипополисахаридыSigma29.L2880
Лизисный анализKeyGENKGP704-100
Считыватель микропластинBioTekСинергия 2
miRcute плюс набор для кДНК первой цепи miRNAТЯНЬГЭНKR211-02‌
miRcute плюс набор miRNA qPCRТЯНЬГЭНFP411-02
ОстхолеМедчемэкспрессO815127-25 г
SDS-полиакриламидный гель-электрофорезNCM BiotechP2012
СывороткаClark BioscienceFB15015
SYBR GreenТЯНЬГЭНFP217-01‌
Трансмиссионная электронная микроскопияFEITecnai G2
ультра-микротомЛецияUC7
Вертикальный флуоресцентный микроскопОлимпBX43
&бета;-АктинProteintech#66009-1-LG

Ссылки

  1. Kan, H. S., et al. Non-surgical treatment of knee osteoarthritis. Hong Kong Med J. 25 (2), 127-133 (2019).
  2. Dantas, L. O., Salvini, T. F., McAlindon, T. E. Knee osteoarthritis: Key treatments and implications for physical therapy. Braz J Phys Ther. 25 (2), 135-146 (2021).
  3. Chen, G. Y., et al. Network pharmacology-based strategy to investigate the mechanisms of Cibotium barometz in treating osteoarthritis. Evid Based Complement Alternat Med. 2022, 1-15 (2022).
  4. Li, H., et al. Intra-articular injection of a nanosuspension of tetramethylpyrazine dihydroxynaphthalenate for stronger and longer-lasting effects against osteoarthritis. J Biomed Nanotechnol. 17 (6), 1199-1207 (2021).
  5. Qiang, R., et al. Carbon quantum dots derived from herbal medicine as therapeutic nanoagents for rheumatoid arthritis with ultrahigh lubrication and anti-inflammation. ACS Appl Mater Interfaces. 15 (32), 38653-38664 (2023).
  6. Sun, M., Sun, M., Zhang, J. Osthole: An overview of its sources, biological activities, and modification development. Med Chem Res. 30 (10), 1767-1794 (2021).
  7. Yang, S., et al. Osthole: An up-to-date review of its anticancer potential and mechanisms of action. Front Pharmacol. 13, 945627(2022).
  8. Liang, J., et al. Osthole inhibits ovarian carcinoma cells through LC3-mediated autophagy and GSDME-dependent pyroptosis except for apoptosis. Eur J Pharmacol. 874, 172990(2020).
  9. Zhou, X. H., Kang, J., Zhong, Z. D., Cheng, Y. Osthole induces apoptosis of HT-29 cells via endoplasmic reticulum stress and autophagy. Oncol Lett. 22 (4), 726(2021).
  10. Zhou, X., Kang, J., Zhang, L., Cheng, Y. Osthole inhibits malignant phenotypes and induces ferroptosis in KRAS-mutant colorectal cancer cells via suppressing AMPK/Akt signaling. Cancer Chemother Pharmacol. 92 (2), 119-134 (2023).
  11. Song, J., et al. Osthole impairs mitochondrial metabolism and the autophagic flux in colorectal cancer. Phytomedicine. 125, 155383(2024).
  12. Zhang, Z. R., et al. Osthole enhances osteogenesis in osteoblasts by elevating transcription factor Osterix via cAMP/CREB signaling in vitro and in vivo. Nutrients. 9 (6), 588(2017).
  13. Ma, T., et al. Osthole suppresses knee osteoarthritis development by enhancing autophagy activated via the AMPK/ULK1 pathway. Molecules. 27 (23), 8624(2022).
  14. Liang, J. Y., Wu, W. L., Chen, Y. X., Liu, H. The efficacy and potential mechanism of cnidium lactone to inhibit osteoclast differentiation. Artif Cells Nanomed Biotechnol. 47 (1), 3087-3093 (2019).
  15. Wang, Z., Bao, H. W., Xu, Y. J. Cnidium lactone prevents bone loss in an ovariectomized rat model through the estrogen-α/BMP-2/Smad signaling pathway. J Cell Biochem. 121 (10), 4567-4576 (2020).
  16. Zheng, X., et al. Osthole improves therapy for osteoporosis through increasing autophagy of mesenchymal stem cells. Exp Anim. 68 (4), 347-355 (2019).
  17. Lu, K., Lin, J., Jiang, J. Osthole inhibits cell proliferation and induces apoptosis through decreasing CPEB2 expression via upregulating miR-424 in endometrial carcinoma. J Recept Signal Transduct. 40 (1), 89-96 (2020).
  18. Lin, K. A. I., et al. Osthole suppresses proliferation and accelerates apoptosis of human glioma cells via upregulation of microRNA-16 and downregulation of MMP-9. Mol Med Rep. 12 (3), 4592-4597 (2015).
  19. Lv, X., et al. Osthole exhibits an anti-tumor effect in retinoblastoma through inhibiting the PI3K/AKT/mTOR pathway via regulating the hsa_circ_0007534/miR-214-3p axis. Pharm Biol. 60 (1), 417-426 (2022).
  20. Niu, Z., et al. Osthole alleviates pulmonary vascular remodeling by modulating microRNA-22-3p mediated lipid metabolic reprogramming. Phytomedicine. 96, 153840(2022).
  21. Lu, W. Osthole down-regulates miR-30a and promotes autophagy to protect rats against myocardial ischemia/reperfusion injury. Turk J Thorac Cardiovasc Surg. 27 (2), 178-184 (2019).
  22. Hou, H., Yang, Y., Chen, R., Guo, Z. Osthole protects H9c2 cardiomyocytes against trastuzumab-induced damage by enhancing autophagy through the p38MAPK/mTOR signaling pathway. Toxicol In Vitro. 93, 105704(2023).
  23. Li, S. H., et al. Osthole stimulated neural stem cells differentiation into neurons in an Alzheimer’s disease cell model via upregulation of microRNA-9 and rescued functional impairment of hippocampal neurons in APP/PS1 transgenic mice. Front Neurosci. 11, 340(2017).
  24. Jiao, Y., et al. Osthole decreases beta amyloid levels through upregulation of miR-107 in Alzheimer’s disease. Neuropharmacology. 108, 332-344 (2016).
  25. Zhang, W., et al. miR-34a enhances chondrocyte apoptosis, senescence and facilitates development of osteoarthritis by targeting DLL1 and regulating PI3K/AKT pathway. Cell Physiol Biochem. 48 (3), 1304-1316 (2018).
  26. Xiong, G., et al. Long non-coding RNA MEG3 regulates the progress of osteoarthritis by regulating the miR-34a/Klotho axis. Ann Transl Med. 10 (8), 454(2022).
  27. Tao, H., Cheng, L., Yang, R. Downregulation of miR-34a promotes proliferation and inhibits apoptosis of rat osteoarthritic cartilage cells by activating PI3K/Akt pathway. Clin Interv Aging. 15, 373-385 (2020).
  28. Zafar, S., et al. Osthole: A multifunctional natural compound with potential anticancer, antioxidant and anti-inflammatory activities. Mini Rev Med Chem. 21 (18), 2747-2763 (2021).
  29. Zhang, H., Zheng, W., Li, D., Zheng, J. miR-146a-5p promotes chondrocyte apoptosis and inhibits autophagy of osteoarthritis by targeting NUMB. Cartilage. 12 (10), 1467S-1477S (2021).
  30. Lu, R., et al. Oroxin B alleviates osteoarthritis through anti-inflammation and inhibition of PI3K/AKT/mTOR signaling pathway and enhancement of autophagy. Front Endocrinol. 13, 1060721(2022).
  31. Lv, X., et al. miR-34a-5p was involved in chronic intermittent hypoxia-induced autophagy of human coronary artery endothelial cells via Bcl-2/beclin 1 signal transduction pathway. J Cell Biochem. 120 (11), 18871-18882 (2019).
  32. Ma, L., et al. Knee osteoarthritis therapy: Recent advances in intra-articular drug delivery systems. Drug Des Devel Ther. 16, 1311-1347 (2022).
  33. Zhang, W., et al. GelMA hydrogel as a promising delivery system for osthole in the treatment of rheumatoid arthritis: targeting the miR-1224-3p/AGO1 axis. Int J Mol Sci. 24 (17), 13210(2023).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Свяжитесь с нами
Рекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия эксплуатации

Политика

Авторские права © 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.