Здесь мы представляем новый, простой в создании и недорогой протокол рециркуляции жилья данио-реро.
Методическая статья
* These authors contributed equally
Здесь мы представляем новый, простой в создании и недорогой протокол рециркуляции жилья данио-реро.
Данио — популярный образцовый организм для проведения исследований in vivo , отчасти потому, что их содержание и содержание считаются недорогими. Тем не менее, коммерческие жилищные системы обычно слишком дороги для небольших исследовательских групп. Существует множество специально построенных систем содержания данио-рерио, но они имеют проблемы с нестабильными условиями воды, низкими темпами циркуляции воды и хрупкими аквариумами. Эти проблемы с проектированием снижают жизнеспособность этих систем для долгосрочных исследовательских программ. В этой статье мы представляем индивидуально изготовленную рециркулирующуюся стойку для хранения данио-рерыо, которая является инновационной, доступной и простой в сборке. Эта система, в сочетании с ранее опубликованным дизайном аквариума, позволяет содержать данио-рерио на любом этапе развития. Существует несколько уровней фильтрации и стерилизации, которые обеспечивают стабильные условия воды, позволяя установить долгосрочное использование данио-рерио для исследований и обучения. Система, описанная ниже, использовалась нашей лабораторией для содержания данио-рерио-рерыба в течение 9 лет, представляя собой несколько поколений содержащихся рыб и сотни экспериментов.
Данио-рерио — распространённый модельный организм, используемый в биологических исследованиях. Они устойчивы к многим условиям окружающей среды и легко размножаются с большим количествомпотомства 1. Они служат отличной моделью для широкого спектра биологических исследований, включая здоровье человека, воспаление, генетику итоксикологию 1,2,3,4,5,6,7. Они также предлагают экономичный вариант с относительно низкими требованиями к обслуживанию. Однако создание системы содержания данио-рериов может быть пугающе, особенно для тех, у кого меньше опыта — следует учитывать множество факторов, таких как скорость рециркуляции, качество воды и сложности содержания данио-рерио-рерио-рерония на разных этапах их развития.
Коммерческие системы содержания данио-рерио-рероа часто дорогие, что может стать серьёзным препятствием для небольших лабораторий или тех, у кого ограниченное финансирование. Эти системы могут стоить десятки тысяч долларов, особенно с такими дополнениями, как автоматические кормушки и авточистка, но такие дополнения не нужны для бюджетных лабораторий, а также тех, кто хочет использовать данио-рерио в учебных условиях. Для таких объектов строительство системы содержания данио-рерио-рероа гораздо более разумно. Были опубликованы и другие статьи с индивидуальными строительными планами, но у каждой есть свои недостатки. Ким и соавторы продемонстрировали метод создания простой в конструкции системы из 80 резервуаров8. На момент публикации строительство стоило около 500 долларов, но сейчас это было бы гораздо дороже. Пейдж и др. разработали план, призванный усовершенствовать вышеупомянутый метод, но стоимость строительства составила $15009. Кроме того, содержание колонии из 150 рыб оценивалось в 1000 долларов каждые 3 месяца.
В этой статье мы установили метод создания системы рециркулирующего содержания и фильтрации данио-реро, которая в сочетании с ранее опубликованным проектомаквариума 10 значительно дешевле коммерчески доступных систем. Кроме того, её легко построить с помощью нескольких распространённых инструментов. Система при использовании 30 отдельных баллонов (~70% ёмкости) также относительно тиха, вырабатывая примерно 60 дБА звука, что эквивалентно обычному разговору илителевизору 11. С помощью нескольких простых доработок или использования с меньшим количеством баков мы считаем, что систему можно использовать непосредственно в классе, не отвлекая учеников. Общая конструкция рециркуляционной системы выглядит следующим образом: вода, нагревшаяся и кондиционированная, перекачивается из бассейна по главной водопроводной линии, которая поднимается через центр стойки корпуса. Шаровые краны от главной линии подачи воды подают воду в перегородку, которая подает воду с регулируемой скоростью потока в отдельные резервуары на каждом уровне. Чтобы предотвратить чрезмерное накопление давления в главной линии подачи, система использует линию сброса давления с регулируемым шаровым краном для возврата избыточной воды обратно в сумп. Вода, поступающая в баки через перегородку, рециркулирует внутри резервуаров, при этом «переполнение» захватывается слегка наклонным желобом, проходящим через центр стойки на каждом уровне. Вода из желоба затем поступает в вертикальную обратную трубу, которая возвращает её в дренажный бассейн, где очищается многоступенчатым канистро-фильтром и стерилизуется ультрафиолетовым светом.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Описанный здесь протокол ранее был одобрен для использования Институциональными комитетами по уходу и использованию животных как Северного Мичиганского университета, так и Университета Шенандоа.
ПРИМЕЧАНИЯ: Для резки ПВХ-труб для системы возврата воды потребуется пила. В этом протоколе использовался роторный инструмент, но для большинства разрезов достаточны и другие типы пил, кроме тех, что нужны для возвратных труб в баках. Для разрезания прозрачной виниловой трубки водопроводных линий использовался служебный нож. Для затягивания хомутов шлангов требуется отвёртка. Для крепления ПВХ-резервуара к держателю для возврата ПВХ потребуется дрель с свредлом 3/16" (0,47 см) (также подойдут немного больше/меньшие детали). Чтобы избежать травм, необходимо проявлять осторожность при использовании электроинструментов. Следующий протокол описывает изготовление стойки для корпуса, которая будет сочетаться с ранее опубликованным дизайномтанка 10. Если будет использоваться альтернативный резервуар, потребуется внести изменения в подачу воды и инструкции по возвращению воды в соответствии с требованиями резервуара.
1. Сборка стойки корпуса (рисунок 1A)
2. Опорный кронштейн системы возврата бака (рисунок 1A)
3. Сборка системы возврата воды (рисунок 1B-D)
ПРИМЕЧАНИЕ: Трубы для возврата воды получают воду из отдельных резервуаров и направляют её к вертикальной обратной трубе, которая транспортирует воду в сумп, где она фильтруется и в конечном итоге возвращается обратно в систему.
4. Сборка дренажного бассейна
ПРИМЕЧАНИЕ: Дренажный бассейн ограничивает колебания проводимости, pH, уровней нитратов/нитритов и температуры, выступая в роли водного резерва (рисунок 1A). В бассейне также проходят несколько стадий фильтрации.
5. Сборка главной водопроводной линии (рисунок 1A,F)
ПРИМЕЧАНИЕ: Основная линия подачи может быть быстро построена и разобрана для очистки из-за нехватки клеев. Чтобы избежать протечек, на все виниловые трубки могут быть креплены хомуты для шлангов. Их можно добавить после первого запуска системы и оценки на наличие утечек.
6. Сборка линии сброса давления (рисунок 1A, левая панель)
7. Сборка водопроводных линий резервуара (рисунок 1E)
ПРИМЕЧАНИЕ: Водопроводные линии резервуаров подают воду от основной линии к отдельным резервуарам.
8. Подготовка системы к эксплуатации
ПРИМЕЧАНИЕ: Необходимо предпринять последующие шаги для обеспечения здоровья и выживания рыб, предназначенных для содержания в системе. Этот процесс должен происходить как минимум за неделю до добавления рыбы в систему.
9. Регулярное обслуживание
10. Распространённая диагностика
11. Дополнительные соображения
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Представленный здесь протокол создаст трёхуровневую систему рециркулирующего содержания данио-реза (рисунок 1). В сочетании с ранее опубликованным модульным дизайном данио-рероа10 система легко вмещает 30-36 отдельных аквариумов, каждый из которых может вместить ~40 рыб при плотности менее 10 взрослых рыб налитр 1. В общей сложности система жилья может вместить более 1200 взрослых данио-рерио-рерио, с небольшой общей площадью (~5' x 7') (~1,52 ...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Система рециркуляционного жилья, описанная здесь, может быть построена в общей сумме менее $1500. Годовая стоимость оценивается всего в 75 долларов, при условии, что не требуется крупная замена компонентов, все компоненты доступны в местных и онлайн-магазинах. Для завершения строительства этого проекта не требуются специальные инструменты или навыки, что делает его доступным для большинства к сборке, хотя необходимо изменить длину материалов, если не использовать точно ту самую металличе...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Авторам нечего раскрывать.
Авторы выражают благодарность многим студентам, которые помогали поддерживать и модифицировать систему жилья за последние 9 лет.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 0.17" inner diameter clear vinyl tubing 20 ft | Lowes | 814315 | |
| 1-1/2" PVC pipe cap x3 | Lowes | 23899 | |
| 2" PVC pipe cap x1 | Lowes | 23900 | |
| 3/4" inner diameter clear vinyl tubing 5 ft | Lowes | 879267 | |
| 3/4" to 1/2" threaded elbow and 1/2" adaptor | Lowes | 23931 | |
| 3/4" x 3/4" x 1/2" Tx4 | Lowes | 3311539 | |
| 3/8" hose barb nylon T coupler x3 | Lowes | 877110 | |
| 3/8" inner diameter clear vinyl tubing 5 ft | Lowes | 879263 | |
| 40 gallon sump basin | Tractor Supply | 2229846 | |
| 5/8" inner diameter clear vinyl tubing 10 ft | Lowes | 814320 | |
| AAwipes 8-in-1 Aquarium Test Kit | Amazon | B0D2RG3LXR | |
| Attmu 50 pcs reusable fastening straps | Attmu | 8350503624091 | |
| Bacto-sure high-density foam filter (2-pack) | Pets Warehouse | 8729780257055 | |
| Cascade CCF3UL Canister Filter, 100 Gallon, 265sph | Aquatic Warehouse | 30172015946 | Куплено в Amazon |
| Charlotte pipe 10 ft PVC pipe 1-1/2" diameter x2 | Lowes | 23830 | |
| Charlotte pipe 2-in x 2-in PVC DWV sanitary T | Lowes | 23395 | |
| Charlotte pipe 5 ft PVC pipe 1-1/4" diameter | Lowes | 23982 | |
| Charlotte pipe 5 ft PVC pipe 2" diameter | Lowes | 23832 | |
| Charlotte pipe 5 ft PVC pipe 3/4" diameter | Lowes | 23990 | |
| Honeforest TDS meter | Walmart | B073713G5F | |
| Industrial strength rack 48 x 24 x 72 | Lowes | 23395 | |
| Ispinner 28 pcs worm gear hose clamps | Home Depot | 313206783 | |
| JoyTube plastic hose barb reducer pipe fittings 5/8" to 3/8" pack of 3 | Amazon | B08DNJY57G | |
| LASCO 2-in x 2-in x 2-in dia Elbow PVC fitting | Lowes | 23910 | |
| Pond pump submersible (2100 GPH) | Amazon | B004DFMZME | |
| Qmseller stainless steel aquarium valve x6 | Amazon | B07PDSVH3N | |
| Submersible aquarium heater | Amazon | B0DLG8VSL8 | |
| Tetra whisper easy to use air pump for aquariums | Amazon | B0009YF4FI | |
| UV light sterilizer Coralife Turbo Twist UV sterilizer, 6x | Coralife | 96316156005 | Куплено в Amazon |
| Uxcell drip irrigation barbed value for 5/8" double male barbed valve aquarium water flow control - 3 pcs x2 | Harfington | 1003460 | Куплено в Amazon |
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE
Запросить разрешение