Этот протокол описывает воспроизводимый метод получения механически обработанного SVF-обогащённого микрожира из аутологичной жировой ткани и введения его в кариесные травматические дефекты мягких тканей для клинической реконструкции.
Method Article
Этот протокол описывает воспроизводимый метод получения механически обработанного SVF-обогащённого микрожира из аутологичной жировой ткани и введения его в кариесные травматические дефекты мягких тканей для клинической реконструкции.
Травматические дефекты мягких тканей представляют серьёзные трудности при реконструкции из-за потери тканей, нарушения сосудистой работы и трудностей с обеспечением устойчивого покрытия. Жировая ткань является практичным аутологичным источником тканей, а механически обработанный стром-сосудистый фракция (SVF) микрожир может быть получен внутриоперационно без ферментативного пищеварения.
В данном исследовании представлен стандартизированный клинический протокол извлечения аутологичной жировой ткани и переработки её в микрожир, обогащённый SVF, для инъекции в кариестообразные травматические дефекты мягких тканей. Жир извлекается вручную с бедра или живота под низким отрицательным давлением, механически фрагментируется с помощью разрезания и эмульсификации шприц-шприц, фильтруется для достижения равномерной микрожировой консистенции и центрифугируется для выделения фракции, содержащей SVF. Обработанный микрожир вводится по всей полости раны в многослойном порядке. Послеоперационная оценка включает серийную клиническую оценку, фотодокументацию и измерение уменьшения площади раны до эпителизации.
В небольшой когорте метод сопровождался прогрессирующим сокращением раны и полной эпителиализацией примерно в течение 4-8 недель без серьёзных осложнений. Хотя состав и жизнеспособность клеток не были количественно измерены, метод предоставил реалистичный внутриоперационный подход, подходящий для условий без доступа к ферментативной обработке или лабораторным помещениям. Этот протокол предлагает практический, минимально манипулируемый метод доставки микрожира, обогащённого SVF, в управлении травматическими дефектами типа кариеса и может служить основой для дальнейших контролируемых исследований.
Травматические дефекты мягких тканей типа полости остаются серьёзной реконструктивной проблемой, поскольку сочетают в себе потерю тканей, нарушенную локальную перфузию и высокий риск инфекции и образования мёртвого пространства. Традиционные методы покрытия, такие как кожные трансплантаты с разделённой толщиной или перенос лоскута, во многих случаях обеспечивают прочное покрытие. Однако они часто ограничены заболеваемостью донор-участок, технической сложностью и вариабельными долгосрочными исходами, особенно в загрязнённых или рубцовыхслоях 1,2,3.
Жировая ткань — это обильный и легко доступный источник гетерогенной клеточной популяции, называемой стромальной сосудистой фракцией (SVF). SVF включает мезенхимальные стромальные клетки, эндотелиальные предшественники, перициты и поддерживающие стромальные элементы. При удержании в жировых частицах естественный внеклеточный контекст SVF сохраняется во время обработки и клиническойпоставки 4. Клинически жировочные трансплантаты, обогащённые на SVF (микрожиры, обогащённые SVF), были отмечены как улучшение удержания трансплантата и связаны с ускоренной эпителиализацией ран по различнымпоказаниям 5,6,7.
Существуют две основные стратегии получения SVF из липоаспирата. Ферментативное переваривание обычно даёт большее количество ядерных клеток на единицу объёма, но требует выделенных реагентов, лабораторной инфраструктуры, более длительных сроков обработки и подчиняется нормативным ограничениям во многих юрисдикциях 4,8. В отличие от этого, методы механической обработки включают нарезку, эмульгию от шприца к шприцу, фильтрацию и использование механических устройств с закрытой системой. Эти методы позволяют быстро и быстро получать микрожир, обогащённый SVF, с минимальными манипуляциями и сокращением сроковобработки 6,9,10,11. Недавние механические системы сообщают о времени обработки <15 минут и дают результаты, близкие к ферментативным методам в некоторых сериях, хотя измеренное количество ячеек и жизнеспособность могут различаться в зависимости от устройства иоператора 9.
Несмотря на растущее количество литературы по механически обработанной SVF и по пересадке жира при хронических язвах и диабетической болезни стопы, стандартизированные, воспроизводимые протоколы, специально направленные на кариесные травматические дефекты мягких тканей, встречаютсяредко 7,12. Опубликованные клинические отчёты обычно затрагивают хронические язвы, диабетические раны или эстетическую пересадку жира. Однако лишь немногие предлагают интраоперационный поэтапный протокол, который определяет параметры сбора, конечные точки эмульгации, размеры фильтрационных пор, силу центрифугации (× г), дозировку на область раны и критерии готовности к инъекции втравматических условиях 7,13.
Поэтому практическое руководство по применимости важно для хирургических команд, рассматривающих этот подход. Основываясь на доступной литературе и нашем оперативном опыте, типичные интраоперационные аспиратные объёмы для одной полости составляют ~20-40 мл. Этот объём обычно даёт достаточно обработанного микрожира для заполнения малых и умеренных полости. В отличие от этого, реконструкции большого объема, вероятно, выходят за рамки механической обработки на месте оказания помощи и могут требовать поэтапных процедур или альтернативныхстратегий 9,12. Механические методы SVF также менее подходят для сильно загрязнённых ран до контроля инфекции; В таких случаях следует предшествовать трансплантации дополнительное дебридментное лечение и управление инфекциями (включая таргетные антибиотики и, при необходимости, терапию ранами с отрицательным давлением).
Настоящая работа направлена на создание детального, воспроизводимого внутриоперационного протокола для получения микрожира, обогащённого SVF, механической обработкой и для инъекции этого продукта в дефекты мягких тканей типа кариесного типа. Протокол подчеркивает явные операционные параметры (забор, механическая фрагментация и эмульгация, фильтрация, центрифугирование, выраженное в × g, техника инъекции и объективное измерение площади раны), чтобы другие хирургические команды могли принять и подтвердить метод в своих условиях.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Все процедуры были утверждены Комитетом по институциональной этике (Утверждение No KL-2025062) и проводится в соответствии с Хельсинкской декларацией. Письменное информированное согласие было получено от всех пациентов до участия.
1. Отбор пациентов и предоперационная оценка
2. Предоперационная подготовка
3. Сбор жира
4. Механическая обработка микрожиров, обогащённых SVF
5. Инъекция в участок дефекта
6. Послеоперационный уход и последующее наблюдение
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Всего восемь пациентов с кариозными травматическими дефектами мягких тканей были пролечены по описанному протоколу.
Характеристики когорты
В когорту было пять мужчин и три женщины, средний возраст 51,5 ± 11,7 лет (диапазон 38-74 года). Дефекты были обнаружены на нижней конечности (n = 5), верхней конечности (n = 2) и т...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
В данном исследовании описывается клинически применимый и воспроизводимый протокол механической обработки и трансплантации микрожира, обогащённого SVF, при лечении дефектов мягких тканей типа кариеса. Протокол предназначен для реализации на месте оказания помощи в стандартной операционной и ставит в приоритет процедурную простоту, безопасность и осуществимость над биологической характеристикой. В этой небольшой клинической серии все лечённые дефекты демонстрировали прогрессирующее закрыт...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
У авторов нет конфликта интересов, которые можно было бы заявлять.
Это исследование было поддержано Специальной программой инноваций в области науки и технологий провинции Хубэй для международного сотрудничества в области науки и технологий (грант No 2023EHA043) и отделением травматологии и микроортопедии больницы Чжуннань Университета Ухань, Национальным ключевым проектом клинических исследований 2025 года (проект No 2025LCYJZX-ZD003). Авторы искренне благодарят доктора Ци Байвэня за его предыдущую работу, вдохновившую на это исследование, и за ценные рекомендации по клинической методологии. Мы также благодарим сестринскую и хирургическую команды больницы Чжуннань за их помощь в уходе за пациентами и последующее наблюдение.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| 0,9% физиологического раствора | Baxter Healthcare (или аналог) | Различные | Используется как базовый раствор для тумесцентного раствора |
| Канюля с инъекцией с тупым наконечником (22G и 50 мм) | CONPUVON ( ;), Китай | DZ 22 и раза; 50-C5 | Используется для многослойной инъекции микрожиров, обогащённых SVF |
| Центрифуга | Долгосрочная биотехнология ( ), Китай | LTA-1600 | Клиническая центрифуга, способная генерировать примерно 400 и больше раз; g |
| Цифровая камера / смартфон | Любой | Н/Д | Стандартизированная фотография ран во время последующего наблюдения |
| Адреналин | Местная аптека больницы | Различные | Добавлен в физиологический раствор для достижения конечной концентрации 1:500 000 |
| Программное обеспечение ImageJ (версия 1.53 и новее) | Национальные институты здравоохранения (США) | Свободное программное обеспечение | Используется для измерения площади раны в планиметрической области |
| Липосакционная канюля (2– 3 мм) | Стандартный медицинский поставщик | Н/Д | Используется для извлечения жировой ткани с донорского места |
| Разъём Luer-lock (женский к женский) | Бектон Дикинсон (или эквивалент) | Различные | Используется для механической эмульгификации шприца в шприц |
| Шприц Luer-lock (1, 5, 10, 20 мл) | Hongda Medical Devices ( ), Китай | Не указано (институциональное снабжение) | Используется для аспирации, механической обработки и впрыска |
| Стерильная повязка / бинт | Госпитальная аптека | Н/Д | Для покрытия послеоперационных ран |
| Хирургические ножницы (стерильные) | Guangzhou Baitang Medical Devices Co., Ltd. | BT00301 (или аналогичная репрезентативная модель) | Используется для механической фрагментации жировой ткани |
| Вазелиновая марля (10 см и 10 см) | Huaxi Medical Dressing Co., Ltd. ( ), Китай | Не указано (институциональное снабжение) | Неприлипающая повязка, используемая для послеоперационного ухода за ранами |
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request Permission
;), Китай
), Китай
), Китай
), Китай