Тестирование Никотин толерантности в Тли Использование искусственного эксперимента диета

Summary

В этом видео и анализа показано, что тесты терпимости никотина на два типа тли который засоряет растения табака в поле и тот, который этого не делает.

Abstract

Растения могут upregulate производство многих различных метаболитов seconday в ответ на насекомых кормления. Одним из таких метаболитов, никотин, хорошо знать, чтобы иметь инсектицидные свойства. Один из ответов растений табака к herbivory, или быть грыз на насекомых, является увеличение производства этой нейротоксическое алкалоид. Здесь мы покажем, как настроить эксперимент, чтобы ответить на этот вопрос о том, табак адаптированных штамм персиковой тли, Myzus persicae, могут переносить более высокие уровни никотина, чем штамм этого насекомого, которое не заводятся табака в поле.

Protocol

В этом эксперименте, 4 взрослых тлей заключены в маленькую чашку пластика. Они питаются от жидкой диеты пипеткой между 2 слоями парафильмом натянутой поверх чашки. Через 3 дня кормления, токсичность диет, содержащих различные концентрации никотина по сравнению с контрольной диеты, считая имаго и личинок тли в каждой чашке.

1. Сделать растворы, содержащие сахарозы и 20 аминокислот. Тля может существовать на этой диете, воспроизводя на нормальном уровне, по крайней мере на 1 неделю. Пожалуйста, см. прилагаемый файл для искусственной диеты.
2. Алиготе 1 мл этой диеты на 6 различных труб Эппендорф, содержащих никотин. Этикетка к ним с уважением, с различной концентрацией никотина использоваться, начиная с 0-500 мкм.
3. Выберите 4 тля, красный или зеленый, и введен в этих экспериментальных чашки.
4. При выборе тли, важно, чтобы они были последовательной возраста. Как правило, искать тлей такого же размера и цвета (красный тли становятся темнее, когда станут старше).
5. Крышка чаши с куском парафильмом. Приложите диеты между 2 куска парафильмом. Частично растянуть второго уровня парафильмом по краям чашки. Алиготе жидкую диету между слоями, и уплотнение верхнего слоя вниз.
6. Храните эти чашки в насекомое комнату под огни в длинного дня фотопериода в течение 3 дней, после чего данные для эксперимента могут быть собраны.

Пожалуйста, посетите ежегодные обзоры биологии растений для получения дополнительной информации об этом протокол и иммунитета растений к насекомым herbivory.