$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Этическое одобрение было получено от Совета по обзору IATRC. Все процедуры, связанные с взятием образцов человеческой мочи, соответствовали принципам Хельсинкской декларации. Письменное информированное согласие было получено от всех участников, а все образцы были анонимизированы для защиты конфиденциальности.
Проектирование датчиков и численное моделирование
Первым шагом в проектировании датчика является проведение электромагнитного моделирования. Для создания компоновки используется CST Microwave Studio, в которую входит резонатор, состоящий из круглого спирального индуктивности (CSI), соединенного последовательно с межцифровым конденсатором (IDC). Между этими частями есть точка соединения для отдалённого расстояния, которая позволяет им работать вместеоптически 25. Для повышения производительности к переходу CSI-IDC добавляются два гильбертовых фрактальных открытых заглушка, чтобы уменьшить окрамы и искажение электромагнитного поля. В плоскости земли также добавляется структура обратного контура для повышения стабильности фильтра с отвержением полос и повышения точностиизмерений 26. Конструкция лучше всего работает на стандартной, недорогой подложке FR4 (εr≈ 4,3, толщина 1,6 мм) и имеет основной операционный резонанс на частоте 1,22 ГГц. Мы использовали программное обеспечение для создания и анализа эквивалентной модели схемы с объединёнными элементами с целью проверки симулируемых S-параметров. Это обеспечило то, что результаты полноволновых электромагнитных и схемных моделей соответствовалитем же 27. Выбор LDR в качестве оптического элемента преобразования был обусловлен его явными преимуществами в этой архитектуре микроволнового датчика. В отличие от фотодиодов или фототранзисторов, которые требуют сложных схем смещения и обеспечивают нелинейную связь тока к свету, LDR обеспечивает пассивную, линейную и широкодиапазонную резистивную модуляцию в ответ на интенсивность падающего света. Этот линейный сдвиг сопротивления напрямую модулируетS 21 соседнего микроволнового резонатора без добавления активного шума и необходимости дополнительной кондиционирования сигнала. Кроме того, низкая стоимость, компактная площадь и бесшовная интеграция с подложкой FR4 — не требующая внешних линий смещения — соответствуют общей цели проектирования простого, недорогого и неинвазивного датчика для точки ухода.
Для контекстуализации предлагаемого датчика в более широком спектре технологий обнаружения мочевины необходимо краткое сравнение с устоявшимися методами. Биохимические анализы, такие как метод ферментативной уреазы, представляют собой клинический золотой стандарт, обеспечивая высокую точность и чувствительность (пределы обнаружения до 1–5 мг/дл), но требующие специализированного лабораторного оборудования, обученного персонала и типичных сроков выполнения 30–60 минут, что ограничивает их использование в местах оказания оказания помощи. Ферментные тест-полоски обеспечивают быструю (2–5 минут) недорогую, полуколичественную альтернативу, подходящую для домашнего использования; однако они опираются на колориметрическую интерпретацию, которая может быть субъективной и обладает ограниченной чувствительностью к точному измерению концентрации. Электрохимические сенсоры, включая амперометрические и потенциометрические биосенсоры мочевины, обеспечивают высокую чувствительность и обеспечивают обнаружение в реальном времени, однако часто требуют сложного изготовления электродов и иммобилизации ферментов, а также испытывают проблемы со стабильностью из-за деградации ферментов со временем. В отличие от этого, предложенный оптически управляемый микроволновый датчик предлагает уникальное сочетание характеристик: неинвазивное оптическое соединение устраняет прямой контакт образца с сенсорными элементами, снижая риск загрязнения; время измерения составляет менее 30 секунд; изготовление на недорогом субстрате FR4 минимизирует затраты; а линейная зависимость между концентрацией мочевины и потерями при вставке (S21) упрощает калибровку. Хотя чувствительность к току (1,42 × 10-4 на мг/моль/см 3) подходит для категориальной классификации клинически значимых диапазонов мочевины (150–450 мг/дл), дальнейшая оптимизация может повысить пределы обнаружения, сравнимые с электрохимическими аналогами. В целом, датчик занимает дополнительную нишу, отдавая приоритет простоте, скорости и портативности для точек оказания медицинской помощи, где лабораторная точность не является обязательной.
Изготовление датчиков
Стандартная фотолитография переносит готовый дизайн на одностороннюю плату FR4 с медным покрытием. Высокоразрешающая фотомаска используется для создания узора сенсора на подложке, ламинированной фоторезистом. Затем узор проявляют и травят в растворе железного хлорида (FeCl₃). После травления и очистки разъёмы SubMiniature версии A (SMA) аккуратно припаиваются к входным и выходным микрополосным портам, чтобы измерительное оборудование можно было подключить28. Этот процесс создаёт рабочий, низкопрофильный датчик, готовый к тестированию.
Экспериментальная настройка и калибровка
С помощью высококачественных коаксиальных кабелей созданный датчик подключается к векторному сетевому анализатору (VNA), аналогичному серии Agilent PNA. С помощью механического калибровочного комплекта проводится полная двухпортовая калибровка (Open, Short, Load, Through) на концах кабеля для устранения систематических ошибок измерения. Для измерения S-параметров датчика VNA настроен на диапазон от 0,1 ГГц до 4 ГГц с выходной мощностью -10дБм 29.
Подготовка образцов мочи и процедура измерения
Участники, согласившиеся сдавать образцы мочи, просят это сделать. Для измерения устанавливается фиксированная тестовая платформа: LDR размещается непосредственно под чистым стеклянным затвором, центрированным над активной областью датчика. Сначала проводится базовое измерение S21 при освещении LDR источником света с постоянной интенсивностью и отсутствием образца. Затем капля мочи размером 0,01 мл наносится на центр стеклянного стекла. СпектрS 21 записывается снова с тем же объёмом света. Оптические свойства образца, зависящие от мочевины, изменяют сопротивление LDR, что приводит к измеряемому изменению |S21| на частоте 1,22ГГц 30. Чтобы избежать перекрёстного загрязнения, стеклянное стекло очищается дистиллированной водой и этанолом между каждым измерением образца. Были собраны свежие образцы мочи у десяти здоровых добровольцев (пять мужчин, пять женщин; возраст 25–45 лет). Исходные концентрации мочевины, измеряемые с помощью клинического химического анализатора, варьировались от 150 до 450 мг/дл. Для установления контролируемого диапазона тестирования образцы были разделены на три концентрационные группы: низкие (150–250 мг/дл), промежуточные (251–350 мг/дл) и высокие (351–450 мг/дл), по десять образцов в каждой категории. Все образцы анализировались в течение 2 часов после сбора, хранили при 4 °C при отсутствии использования и уравновешивались до комнатной температуры перед измерением. Для каждого теста на чистое стеклянное стекло наносилось аликвот объёмом 0,01 мл, а стекли очищались с использованием 70% этанола и дистиллированной воды между измерениями для предотвращения перекрёстногозагрязнения 30.
Сбор и анализ данных
Основная информация, полученная из каждого измерения, — это размерS 21 (в дБ) при резонансе 1,22 ГГц. Этот набор данных используется для обучения алгоритму K-ближайших соседей (KNN), который работает в программе вроде MATLAB. Модель использует величину S21 для распределения уровней мочевины по группам, таким как «низкий», «промежуточный» и «высокий»31. Также чувствительность датчика к концентрации можно измерить, построив изменение в |S21| (Δ|S21|) против изменения концентрации мочевины (ΔC). Наклон этой линейной зависимости, C = ΔS / ΔC, показывает чувствительность. Для оценки надёжности датчика и надёжности измерений было проведено исследование повторяемости с 45 измерениями по категории концентрации мочевины (низкая: 150–250 мг/дл, промежуточная: 251–350 мг/дл, высокая: 351–450 мг/дл) в течение трёх независимых дней, всего 135 измерений. Коэффициент вариации варьировался от 0,67% до 1,07% во всех категориях, что свидетельствует о отличной повторяемости измерений. Неопределённость измерений количественно оценивалась в рамках Руководства по выражению неопределённости в измерениях (GUM), сочетая неопределённость типа A (статистические изменения от повторных измерений) с вкладом типа B от калибровки VNA (±0,05 дБ), колебаний температуры (±0,01 дБ/°C) и вариаций позиционирования образца (±0,02 дБ). Расширенная неопределённость (k=2, 95% доверительный интервал) варьировалась от ±0,38 дБ до ±0,56 дБ, в зависимости от категории концентрации. Чувствительность к концентрации, полученная из линейной регрессии Δ|S21| по сравнению с ΔC рассчитано как 1,42 × 10-4 на (мг/моль/см³ 3), с 95% доверительным интервалом 1,35 × 10-4 до 1,49 × 10-4 на (мг/моль/см³) и коэффициентом определения (R 2) 0,94. Относительная расширенная неопределённость чувствительности составила ±6,2% (k = 2), что подтверждает статистически надёжную чувствительность и демонстрирование воспроизводимой производительности, подходящей для точечных приложений в местах оказания помощи.