Методическая статья

Стандартизированный протокол ранней кардиометаболической оценки при стеатозе печени, связанном с метаболической дисфункцией

0 просмотров

⸱

DOI:

10.3791/70593

⸱

29 сентября 2026 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Clinical Research Department, Experimental Metabolism and Clinical Research Laboratory, 2Instituto de Seguridad y Servicios Sociales de los Trabajadores del Estado (ISSSTE), Laboratory of Biochemistry and Experimental Medicine, 3Cardiology Department, Instituto de Seguridad y Servicios Sociales de los Trabajadores del Estado (ISSSTE), 4Facultad de Enfermería y Nutrición, Universidad Autónoma de San Luis Potosí, 5Centro de Investigación en Ciencia Aplicada y Tecnología Avanzada (CICATA), Instituto Politécnico Nacional (IPN)

В этой статье

Краткое содержание

В данном протоколе описывается стандартизированный рабочий процесс для ранней кардиометаболической оценки у взрослых с метаболически ассоциированной стеатотической болезнью печени (MASLD), включающий оценку воспалительного воздействия диеты, анализ биохимических биомаркеров, эхокардиографию и ультразвуковое исследование сонных артерий, а также стандартизированные процедуры сбора данных, контроля качества и валидации данных для повышения воспроизводимости результатов.

Аннотация

Стеатотическая болезнь печени, связанная с метаболической дисфункцией (MASLD), сопровождается хроническим вялотекущим воспалением и повышенным риском сердечно-сосудистых заболеваний. Раннее выявление субклинических кардиометаболических изменений остается сложной задачей из-за ограниченного количества стандартизированных протоколов, объединяющих оценку воспалительного потенциала питания с объективной визуализацией сердечно-сосудистой системы. В данном протоколе описывается воспроизводимый рабочий процесс для оценки связи между воспалительным потенциалом рациона и ранними кардиометаболическими изменениями у взрослых с подтвержденным диагнозом MASLD. Участники отбираются в соответствии со стандартизированными критериями приемлемости, а стеатоз печени подтверждается с помощью ультразвукового исследования. Потребление пищевых продуктов оценивается с использованием валидированного полуколичественного опросника частоты питания (FFQ), на основании которого рассчитывается диетический воспалительный индекс (DII) с использованием оригинальной методологии, основанной на литературных данных. Кардиометаболическая оценка включает антропометрические измерения, биохимический анализ крови натощак, расчет соотношения триглицеридов к холестерину липопротеинов высокой плотности (TG/HDL-C) и атерогенного индекса плазмы (AIP), количественное определение воспалительных биомаркеров методом иммуноферментного анализа (ELISA), трансторакальную эхокардиографическую оценку диастолической функции левого желудочка с использованием показателя E/e′, полученного методом тканевого допплерографического исследования, а также двустороннее ультразвуковое исследование сонных артерий для измерения толщины комплекса интима-медиа сонных артерий (CIMT). Для обеспечения методологической согласованности и воспроизводимости предусмотрены стандартизированные процедуры сбора данных, заранее определенные контрольные точки проверки качества и этапы валидации данных. Репрезентативные результаты демонстрируют стандартизированные данные, полученные с помощью протокола, включая классификацию по DII, профили воспалительных биомаркеров, эхокардиографические индексы и измерения CIMT, и не подразумевают подтвержденных биологических взаимосвязей. Данный протокол представляет собой детальную, воспроизводимую методологическую основу для проведения клинических и трансляционных исследований, изучающих взаимосвязь между воспалительной нагрузкой рациона и ранними кардиометаболическими изменениями у взрослых пациентов с MASLD.

Введение

Стеатотическая болезнь печени, связанная с метаболической дисфункцией (MASLD), является наиболее распространенным хроническим заболеванием печени в мире, затрагивающим примерно одну треть взрослого населения. Помимо прогрессирующего поражения печени, MASLD характеризуется хроническим низкоинтенсивным воспалением, инсулинорезистентностью, эндотелиальной дисфункцией и ускоренным атеросклерозом1,2. Сердечно-сосудистые заболевания являются основной причиной заболеваемости и смертности среди лиц с MASLD, что подчеркивает необходимость надежных подходов для выявления ранних кардиометаболических изменений до развития клинически выраженных сердечно-сосудистых заболеваний3,4. Целью данного протокола является предоставление стандартизированного и воспроизводимого рабочего процесса для комплексной оценки диетического воспалительного бремени, системного воспаления и ранней субклинической сердечно-сосудистой дисфункции у взрослых с MASLD. Этот протокол предназначен для клинических и трансляционных исследований, изучающих ранний кардиометаболический риск, предшествующий клинически значимым сердечно-сосудистым заболеваниям в данной популяции.

Накапливающиеся данные свидетельствуют о том, что диета играет ключевую роль в возникновении и прогрессировании MASLD. Типы питания, характеризующиеся высоким потреблением ультрапереработанных продуктов, насыщенных жиров, рафинированных углеводов и добавленных сахаров, способствуют развитию окислительного стресса, эндотелиальной дисфункции, иммунной активации и хронического системного воспаления5,6. Напротив, рационы, богатые клетчаткой, полифенолами, омега-3 жирными кислотами и антиоксидантными микронутриентами, ослабляют воспалительные пути, связанные с метаболической дисфункцией и сердечно-сосудистыми заболеваниями6,7.

Диетический воспалительный индекс (DII) был разработан для оценки воспалительного потенциала привычного рациона питания с использованием системы подсчета баллов на основе литературных данных об эффектах 45 компонентов питания на биомаркеры воспаления, включая С-реактивный белок (CRP), интерлейкин (IL)-1β, IL-4, IL-6, IL-10 и фактор некроза опухоли-α (TNF-α)8. Более высокие значения DII были связаны с повышением уровня циркулирующих медиаторов воспаления, инсулинорезистентностью, метаболическим синдромом, сахарным диабетом 2 типа и сердечно-сосудистыми заболеваниями у различных групп населения9,10.

Несмотря на то, что DII ассоциируется с неблагоприятными метаболическими исходами, относительно немного исследований объединяли оценку влияния диеты на воспаление с объективной сердечно-сосудистой визуализацией для выявления ранних сердечно-сосудистых изменений у лиц с MASLD4,11. К числу самых ранних проявлений кардиометаболического поражения относятся субклиническая диастолическая дисфункция левого желудочка, оцениваемая по соотношению E/e′, полученному с помощью тканевого допплера, которое отражает повышенное давление наполнения левого желудочка и представляет собой ранний признак диабетической и метаболической кардиомиопатии12,13, а также толщина комплекса интима-медиа общей сонной артерии (CIMT), валидированный суррогатный маркер субклинического атеросклероза, который независимо предсказывает будущие сердечно-сосудистые события14,15.

По сравнению с традиционной кардиометаболической оценкой, которая в основном опирается на антропометрические измерения, рутинные биохимические тесты и отдельные факторы сердечно-сосудистого риска, данный протокол объединяет оценку воспалительного потенциала диеты, профилирование воспалительных биомаркеров, эхокардиографическую оценку диастолической функции и ультразвуковое исследование сонных артерий в единый стандартизированный рабочий процесс. Такой комплексный подход позволяет одновременно оценивать влияние диеты, системное воспаление и субклиническое ремоделирование сердечно-сосудистой системы с использованием неинвазивных методов, широко доступных в условиях клинических исследований. Несмотря на то, что для улучшения характеристики ранней сердечно-сосудистой дисфункции при метаболических заболеваниях были предложены мультимодальные подходы, стандартизированные протоколы их реализации остаются ограниченными.

Для дополнения традиционной оценки липидного профиля в данный протокол также включены отношение триглицеридов к холестерину липопротеинов высокой плотности (TG/HDL-C) и атерогенный индекс плазмы (AIP), который рассчитывается как log (TG/HDL-C). AIP отражает баланс между атерогенными и антиатерогенными липопротеинами и стал суррогатным маркером наличия мелких плотных частиц липопротеинов низкой плотности (LDL), инсулинорезистентности, эндотелиальной дисфункции и остаточного сердечно-сосудистого риска. Следовательно, AIP обеспечивает более комплексную оценку атерогенной дислипидемии и продемонстрировал высокую разделительную способность при выявлении лиц с повышенным сердечно-сосудистым риском, особенно людей с такими метаболическими нарушениями, как MASLD16,17.

Кроме того, данный протокол включает панель циркулирующих воспалительных биомаркеров для дальнейшей характеристики биологических механизмов, связывающих воспалительный потенциал рациона с кардиометаболическими повреждениями при MASLD. Эти биомаркеры были выбраны, поскольку они играют центральную роль в привлечении лейкоцитов, активации врожденного иммунитета, про- и противовоспалительной сигнализации, эндотелиальной дисфункции и инсулинорезистентности. Одновременная оценка этих медиаторов обеспечивает более комплексную характеристику системного воспаления, чем определение только СРБ, и углубляет понимание механизмов взаимосвязи между воспалительной нагрузкой рациона и ранними сердечно-сосудистыми повреждениями при MASLD1,18,19.

Таким образом, данный протокол представляет собой стандартизированную и воспроизводимую методологию для оценки связи между воспалительным потенциалом рациона питания и ранними кардиометаболическими изменениями у взрослых с MASLD путем интеграции оценки питания, профилирования воспалительных биомаркеров, биохимических анализов, эхокардиографии и ультразвукового исследования сонных артерий. Благодаря внедрению стандартизированных процедур измерения и заранее определенных контрольных точек контроля качества, данный рабочий процесс разработан для обеспечения воспроизводимости между исследователями и центрами изучения, поддерживая при этом клинические и трансляционные исследования раннего кардиометаболического риска при MASLD.

Протокол

Протокол исследования был одобрен Институциональным советом по исследованиям и комитетом по этике исследований Национального медицинского центра «20 de Noviembre», Instituto de Seguridad y Servicios Sociales de los Trabajadores del Estado (ISSSTE), Мехико, Мексика (ID одобрения: 04-118-2025). Все процедуры должны проводиться в соответствии с Хельсинкской декларацией и применимыми национальными правилами, регулирующими исследования с участием людей. Перед включением в исследование необходимо получить письменное информированное согласие от всех участников. Конфиденциальность участников должна быть обеспечена путем использования кодированных идентификаторов исследования для всех клинических, лабораторных, диетических данных и данных визуализации.

1. Набор участников и оценка соответствия критериям

  1. Набор участников
    1. Набрать взрослых участников в возрасте ≥18 лет с подозрением на стеатозную болезнь печени, связанную с метаболической дисфункцией (MASLD), в период с 2025 по 2026 год.
    2. До включения в исследование разъяснить цели исследования, процедуры, потенциальные риски и меры по обеспечению конфиденциальности.
    3. Получить письменное информированное согласие от каждого участника перед выполнением любых процедур исследования.
  2. Подтверждение MASLD
    1. Провести ультразвуковое исследование органов брюшной полости в соответствии со стандартизированными протоколами учреждения.
    2. Подтвердить стеатоз печени, выявив повышение эхогенности печени по сравнению с корковым веществом почек в сочетании с затуханием ультразвукового сигнала в глубоких отделах.
    3. Диагностировать MASLD, подтвердив наличие стеатоза печени и как минимум одного кардиометаболического фактора риска в соответствии с текущими консенсусными критериями.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Все ультразвуковые исследования следует проводить с использованием одного и того же протокола сканирования и, по возможности, силами одного опытного рентгенолога для минимизации вариабельности, зависящей от оператора.
  3. Оценка соответствия критериям отбора
    1. Включить участников, которые соответствуют всем заранее определенным критериям отбора и предоставили письменное информированное согласие.
    2. Исключить участников со значительным потреблением алкоголя.
    3. Исключить участников с вирусным гепатитом (HBV или HCV), аутоиммунными заболеваниями печени, лекарственным поражением печени, наследственными заболеваниями печени, беременностью, активным злокачественным новообразованием, декомпенсированной сердечной недостаточностью или другими хроническими заболеваниями печени, которые могут помешать кардиометаболической оценке.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Для обеспечения конфиденциальности участников каждому из них должен быть присвоен кодированный идентификатор исследования; имена, номера медицинских карт и другие персональные идентификаторы должны быть удалены из исследовательских баз данных, а изображения эхокардиографии и УЗИ сонных артерий должны храниться в защищенной базе данных учреждения.

2. Опросник частоты приема пищи

  1. Выбор инструмента оценки питания
    1. Выберите валидированный полуколичественный опросник по частоте потребления продуктов питания (FFQ), подходящий для исследуемой популяции.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Используйте FFQ, которые были ранее валидированы по сравнению с данными многократных 24-часовых суточных опросов о питании или пищевыми дневниками. В данном протоколе для оценки привычного потребления за предыдущие 7 дней использовался полуколичественный FFQ ENSANUT из 140 пунктов20,21.
  2. Подготовка к оценке питания
    1. Обучите всех интервьюеров с использованием стандартизированных письменных инструкций до начала набора участников.
    2. Стандартизируйте процедуру проведения опроса, оценку размера порций, интерпретацию ответов и запись данных для всех интервьюеров.
  3. Проведение FFQ
    1. Проведите FFQ в формате очного интервью.
    2. Попросите участников сообщить о привычном потреблении продуктов питания и напитков в течение референтного периода, указанного в FFQ.
    3. Учтите продукты, употребляемые как в будние, так и в выходные дни.
    4. Исключите временные изменения в питании, связанные с острыми заболеваниями, госпитализацией или краткосрочными терапевтическими вмешательствами.
  4. Регистрация данных о питании
    1. Зафиксируйте потребление продуктов, используя предопределенные категории частоты FFQ.
    2. Оцените размер порций с помощью стандартизированной бытовой утвари, моделей продуктов, фотографий или справочников по размерам порций.
    3. Уточняйте информацию о незнакомых продуктах, размерах порций или категориях частоты, не оказывая влияния на ответы участника.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Проверяйте качество данных, просматривая каждый заполненный FFQ сразу после интервью. Выявляйте пропущенные ответы или противоречивые сведения и устраняйте расхождения непосредственно с участником перед вводом данных в базу данных исследования.
  5. Расчет суточного потребления пищевых веществ
    1. Переведите указанную частоту потребления в среднее суточное потребление (порций/день).
    2. Переведите размеры порций в граммы или миллилитры в день в соответствии с руководством к FFQ.
    3. Рассчитайте суточное потребление нутриентов, используя соответствующую базу данных состава продуктов и программное обеспечение для нутрициологического анализа.
    4. Применяйте одну и ту же процедуру расчета нутриентов для всех участников.
      ТОЧКА ОСТАНОВКИ: Надежно сохраните заполненные FFQ после проверки качества, чтобы позже обработать их для анализа нутриентов и расчета диетического воспалительного индекса (DII).

3. Оценка диетического воспалительного индекса

ПРИМЕЧАНИЕ: Диетический воспалительный индекс (DII) представляет собой основанный на литературных данных алгоритм, который оценивает воспалительный потенциал привычного рациона питания на основе данных, собранных с помощью валидированного инструмента оценки питания8.

  1. Подготовка данных о потреблении пищевых продуктов
    1. Преобразуйте все ответы FFQ в показатели суточного потребления нутриентов, используя стандартизированную базу данных о составе пищевых продуктов и программное обеспечение для нутрициологического анализа.
    2. Применяйте одну и ту же процедуру расчета нутриентов для всех участников.
  2. Выбор компонентов питания
    1. Определите компоненты питания, доступные для расчета DII.
    2. Рассчитайте DII, используя только те компоненты питания, которые были достоверно зафиксированы выбранным FFQ и базой данных о составе пищевых продуктов.
    3. Применяйте один и тот же набор компонентов питания для всех участников.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Не присваивайте нулевое значение компонентам питания, которые не измерялись.
  3. Расчет стандартизированных показателей
    1. Сравните потребление каждого компонента питания с соответствующим глобальным эталонным средним значением и стандартным отклонением, описанными в оригинальной методологии DII8.
    2. Рассчитайте стандартизированный показатель по следующему уравнению:
    3. Стандартизированный показатель = (Потребление участника − Глобальное эталонное среднее) ÷ Глобальное эталонное стандартное отклонение
  4. Расчет центрированных процентилей
    1. Преобразуйте каждый стандартизированный показатель в центрированный процентиль в соответствии с оригинальной методологией DII.
    2. Рассчитайте центрированный процентиль по следующему уравнению:
    3. Центрированный процентиль = (Процентиль × 2) − 1
  5. Расчет компонентных показателей DII
    1. Умножьте центрированный процентиль на показатель воспалительного эффекта, присвоенный каждому компоненту питания в оригинальной базе данных DII8.
    2. Повторите расчет для всех доступных компонентов питания.
    3. Компонентный показатель DII = Центрированный процентиль × Показатель воспалительного эффекта
  6. Расчет общего диетического воспалительного индекса
    1. Просуммируйте компонентные показатели DII, чтобы получить общий показатель DII для каждого участника.
    2. Отрицательные значения интерпретируйте как более противовоспалительный характер питания.
    3. Положительные значения интерпретируйте как более провоспалительный характер питания.
  7. Классификация участников
    1. Ранжируйте участников в соответствии с их показателями DII.
    2. Разделите участников на квартили на основе распределения в исследуемой популяции.
  8. Контроль качества
    1. Используйте один и тот же FFQ, базу данных о составе пищевых продуктов, программное обеспечение для нутрициологического анализа и метод расчета DII для всех участников.
    2. Перед началом анализа проверьте все записи о питании на предмет отсутствующей информации, неправдоподобного потребления энергии и ошибок при вводе данных.
    3. Независимо пересчитайте DII для случайной выборки участников, чтобы проверить точность вычислений.
    4. Задокументируйте все компоненты питания, включенные в расчет DII, и укажите компоненты, которые были недоступны.

4. Оценка MASLD

  1. Подтвердить наличие стеатоза печени, как указано в разделе 1.2.2.
    ПРИМЕЧАНИЕ: По возможности все обследования должен проводить один и тот же опытный рентгенолог с использованием идентичных параметров сбора данных, чтобы минимизировать вариативность, зависящую от оператора.
  2. Оценить потребление алкоголя
    1. Оценить потребление алкоголя с помощью стандартизированного клинического интервью.
    2. Исключить участников, чье потребление алкоголя превышает текущие диагностические пороги для MASLD.
  3. Исключить вторичные причины стеатоза печени
    1. Исключить участников с хроническим вирусным гепатитом (HBV или HCV).
    2. Исключить участников с аутоиммунными заболеваниями печени, лекарственным поражением печени, наследственными заболеваниями печени, беременностью, активным злокачественным новообразованием или другими хроническими заболеваниями печени, которые могут повлиять на кардиометаболическую оценку.
  4. Оценить кардиометаболические факторы риска
    1. Определить индекс массы тела (BMI) и классифицировать избыточную массу тела или ожирение при BMI ≥25 kg/m2.
    2. Оценить наличие сахарного диабета 2 типа, используя показатель глюкозы плазмы натощак >125 mg/dL.
    3. Оценить метаболическую дисрегуляцию, подтвердив наличие как минимум двух из следующих критериев: увеличение окружности талии, артериальное давление ≥130/85 mmHg, триглицериды ≥150 mg/dL, HDL-C <40 mg/dL у мужчин или <50 mg/dL у женщин, глюкоза плазмы натощак 100–125 mg/dL или HbA1c 5.7%–6.4%, либо повышенные маркеры инсулинорезистентности, такие как HOMA-IR.
  5. Диагностировать MASLD при подтвержденном стеатозе печени в сочетании с по крайней мере одним кардиометаболическим фактором риска в соответствии с текущими консенсусными критериями.

5. Оценка кардиометаболического риска

  1. Сбор демографических и антропометрических данных
    1. Зафиксируйте возраст, пол, историю болезни, принимаемые препараты и диагностированные кардиометаболические заболевания участника, включая сахарный диабет 2 типа и гипертонию.
    2. Измерьте рост и массу тела с помощью откалиброванного оборудования.
    3. Рассчитайте индекс массы тела (ИМТ), разделив массу тела (кг) на квадрат роста (м2).
    4. Измерьте окружность талии на уровне середины расстояния между нижним краем последнего ребра и гребнем подвздошной кости с помощью нерастяжимой измерительной ленты.
  2. Определение биохимических маркеров кардиометаболического риска с использованием стандартных автоматизированных методов клинической лаборатории.
    1. Соберите образцы крови натощак в соответствии с внутренними лабораторными процедурами учреждения.
    2. Измерьте биохимические маркеры, включая общий холестерин, ХС-ЛПВП, ХС-ЛПНП, триглицериды, глюкозу плазмы натощак, HbA1c и инсулин натощак, используя стандартные автоматизированные методы клинического лабораторного анализа.
      ПРИМЕЧАНИЕ: В автоматизированных клинических лабораторных анализах общий холестерин и триглицериды обычно определяют с помощью ферментативных колориметрических методов; ХС-ЛПВП и ХС-ЛПНП — с помощью прямых гомогенных ферментативных колориметрических методов; глюкозу плазмы натощак — гексокиназным ферментативным методом; HbA1c — методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ); а инсулин натощак — методом хемилюминесцентного иммуноанализа.
    3. Рассчитайте индекс инсулинорезистентности по модели HOMA-IR.
    4. Рассчитайте отношение триглицеридов к холестерину ЛПВП (ТГ/ХС-ЛПВП).
    5. Рассчитайте атерогенный индекс плазмы (АИП) по формуле:
      АИП = log (ТГ/ХС-ЛПВП)
  3. Измерение воспалительных биомаркеров плазмы
    ПРИМЕЧАНИЕ: Работа с биологическими образцами человека должна проводиться в соответствии с правилами биобезопасности учреждения и стандартными мерами предосторожности. Используйте соответствующие СИЗ, стерильные материалы и методы асептики, транспортируйте образцы в герметичных контейнерах и утилизируйте биологические отходы в соответствии с внутренними регламентами учреждения.
    1. Получение и обработка образцов крови
      1. Соберите 15 мл венозной крови натощак из локтевой вены, используя стерильную технику, в соответствующие пробирки с антикоагулянтом.
      2. Осторожно переверните пробирки 8–10 раз. Центрифугируйте при 2 000 × g в течение 10 мин при 4 °C.
      3. Перенесите супернатант плазмы в маркированную стерильную пробирку и разлейте по аликвотам по мере необходимости. Храните аликвоты при −80 °C до проведения анализа.
    2. Проведение ИФА
      1. Подготовьте стандарты и разведения образцов. Добавьте по 100 µL стандартов, контролей и соответствующим образом разведенных образцов плазмы в дубликатах в назначенные лунки, покрытые антителами.
      2. Инкубируйте в течение 2,5 ч при комнатной температуре при осторожном перемешивании. Аспирируйте содержимое и промойте лунки 3 раза 300 µL PBS, содержащего 0,05% полисорбата 20 (PBST), pH 7,2–7,4, удалив остатки жидкости после последнего промывания.
      3. Добавьте 100 µL детектирующих антител и инкубируйте в течение 1 ч при комнатной температуре. Промойте планшет, добавьте 100 µL стрептавидин-HRP и инкубируйте в течение 30–60 мин при комнатной температуре. Повторите стадию промывки.
      4. Добавьте 100 µL субстрата TMB для проявления цвета. Инкубируйте в течение 20–30 мин при комнатной температуре в темноте. Добавьте стоп-раствор.
      5. Измерьте оптическую плотность при 450 нм с помощью микропланшетного ридера. Рассчитайте концентрацию аналита по стандартной кривой.
      6. Проанализируйте каждый образец плазмы в дубликатах и рассчитайте среднее значение для статистического анализа.
      7. Включайте калибровочные стандарты и образцы контроля качества в каждый аналитический цикл.
      8. Убедитесь, что параллельные измерения соответствуют заданному критерию коэффициента вариации. Повторите измерения, если критерий превышен или обнаружены технические ошибки.
      9. Запишите окончательные результаты, используя закодированные идентификаторы участников. Обеспечьте анонимность образцов на протяжении всего лабораторного анализа.
  4. Оценка диастолической функции левого желудочка с помощью эхокардиографии
    1. Подготовка участника и оборудования
      1. Обеспечьте участнику спокойный отдых в течение не менее 10 мин перед получением изображений.
      2. Положите участника в левый боковой декобитус и закрепите электроды ЭКГ для синхронизации с сердечным циклом.
      3. Получайте все изображения при спокойном дыхании, сводя к минимуму дыхательную подвижность.
      4. Используйте систему УЗИ высокого разрешения, оснащенную фазированным датчиком с частотой 2–5 МГц, поддерживающим импульсно-волновую допплерографию и тканевую допплерографию.
      5. По возможности используйте идентичное оборудование УЗИ, настройки датчика и параметры сбора данных на протяжении всего исследования.
        ПРИМЕЧАНИЕ: Проводите все исследования в соответствии с действующими рекомендациями Американского общества эхокардиографии и Европейской ассоциации сердечно-сосудистой визуализации12,22.
    2. Получение стандартных эхокардиографических изображений
      1. Получите стандартные виды: парастернальный длинный срез, парастернальный короткий срез, апикальный четырехкамерный срез, апикальный двухкамерный срез и апикальный длинный срез.
      2. Оптимизируйте усиление, глубину, ширину сектора и частоту кадров перед началом допплерографии.
    3. Измерение митрального притока
      1. Расположите контрольный объем импульсно-волнового допплера между кончиками створок митрального клапана в апикальном четырехкамерном виде.
      2. Запишите скорости раннего (E) и позднего (A) трансмитрального притока.
      3. Запишите как минимум три последовательных сердечных цикла для анализа.
    4. Проведение тканевой допплерографии
      1. Активируйте импульсно-волновую тканевую допплерографию в апикальном четырехкамерном виде.
      2. Последовательно расположите контрольный объем у септального и латерального колец митрального клапана.
      3. Располагайте ультразвуковой луч максимально параллельно движению миокарда.
      4. Запишите три последовательных сердечных цикла в каждой позиции кольца.
    5. Расчет скоростей кольца
      1. Измерьте скорости e′ в септальной и латеральной областях.
      2. Вычислите среднее значение за три сердечных цикла для каждой области кольца.
      3. Рассчитайте среднюю скорость e′ кольца.
    6. Расчет отношения E/e′
      1. Рассчитайте среднее отношение E/e′, разделив скорость митрального притока E на среднюю скорость e′ кольца.
      2. При наличии данных отдельно укажите отношения E/e′ для септальной и латеральной областей.
        ПРИМЕЧАНИЕ: Для контроля качества запишите не менее трех последовательных сердечных циклов при стабильном дыхании и вычислите среднее из трех независимых измерений для каждого эхокардиографического показателя. Сохраните все цифровые изображения для офлайн-анализа двумя обученными операторами, не имеющими доступа к лабораторным и диетическим данным, и оцените воспроизводимость между операторами перед окончательным анализом данных.
  5. Оценка субклинического атерогенеза путем измерения толщины комплекса интима-медиа сонных артерий
    1. Подготовка участника и оборудования
      1. Проведите ультразвуковое исследование сонных артерий с использованием системы УЗИ высокого разрешения, оснащенной линейным сосудистым датчиком с частотой 7–15 МГц.
      2. Обеспечьте участнику отдых в положении лежа на спине в течение не менее 10 мин перед получением изображений.
      3. Расположите шею в состоянии легкого разгибания и поверните голову примерно на 30–45° в сторону, противоположную исследуемой.
      4. Избегайте чрезмерного поворота головы для сохранения геометрии сосудов и оптимизации качества изображения.
      5. По возможности используйте одну и ту же систему УЗИ, датчик, настройки сбора данных и программное обеспечение для анализа для всех участников.
    2. Проведение ультразвукового исследования сонных артерий
      1. Независимо обследуйте правую и левую сонные артерии.
      2. Идентифицируйте общую сонную артерию, сонный синус, внутреннюю сонную артерию и наружную сонную артерию в поперечной плоскости.
      3. Поверните датчик для получения продольного изображения с четко выраженными границами просвет–интима и медиа–адвентиция.
      4. Оптимизируйте глубину изображения, фокусную зону и общее усиление перед проведением измерений.
    3. Измерение толщины комплекса интима-медиа (ТИМ)
      1. Определите ТИМ как расстояние между передним краем границы просвет–интима и передним краем границы медиа–адвентиция.
      2. Выберите сегмент дальней стенки дистального отдела общей сонной артерии, свободный от бляшек, примерно на 10 мм проксимальнее сонного синуса.
        ПРИМЕЧАНИЕ: Не включайте сонный синус или внутреннюю сонную артерию в основное измерение ТИМ общей сонной артерии, если эти области не являются заранее определенными конечными точками исследования.
    4. Расчет ТИМ
      1. Выполните не менее трех измерений для каждой сонной артерии.
      2. Рассчитайте среднюю ТИМ отдельно для правой и левой сонных артерий.
      3. Рассчитайте общую среднюю ТИМ как среднее арифметическое между средними значениями правой и левой сторон.
      4. Запишите максимальную ТИМ на каждом боку в участках без бляшек в качестве вторичной описательной переменной.
    5. Интерпретация ТИМ
      1. Анализируйте ТИМ преимущественно как непрерывную переменную.
      2. Применяйте заранее определенный порог ТИМ для конкретного исследования (<0,7 мм или ≥0,7 мм) только для репрезентативного категориального анализа, если это уместно.
      3. Регистрируйте наличие сонных бляшек отдельно от измерений ТИМ.
        ПРИМЕЧАНИЕ: Используйте порог ТИМ ≥0,7 мм только для репрезентативного анализа; при наличии используйте референсные значения с учетом возраста и пола. Обеспечьте контроль качества с помощью обученных сонографистов, кодированных изображений и слепого независимого анализа как минимум двумя исследователями. Оцените меж- и внутринаблюдательную надежность с помощью коэффициентов внутриклассовой корреляции (ICC) с 95% доверительными интервалами и повторите измерения, если границы артерий визуализируются недостаточно четко.

6. Статистический анализ

  1. Оцените размер выборки
    1. Определите необходимый размер выборки в соответствии с основной целью исследования и ожидаемой величиной эффекта.
    2. Используйте уровень значимости (α) 0,05 и статистической мощностью не менее 80%.
  2. Оцените распределение непрерывных переменных с помощью подходящего теста на нормальность, например, теста Шапиро–Уилка.
  3. Выбор статистических критериев
    1. Проанализируйте непрерывные переменные с нормальным распределением с помощью t-критерия Стьюдента t-тест.
    2. Анализ непрерывных переменных с ненормальным распределением с использованием критерия Манна — Уитни U Тест.
    3. Сравните более двух групп с помощью однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA) или критерия Краскела — Уоллиса, в зависимости от ситуации.
    4. Проведите анализ категориальных переменных с помощью критерия хи-квадрат или точного критерия Фишера.
    5. Оцените взаимосвязь между нормально распределенными переменными с помощью корреляционного анализа Пирсона.
    6. Оценка взаимосвязей между переменными с ненормальным распределением с помощью корреляционного анализа Спирмена23,24,25.
  4. Корректировка с учетом вмешивающихся факторов
    1. При необходимости проведите многофакторный регрессионный анализ для оценки независимой связи между диетическим воспалительным индексом и кардиометаболическими исходами.
    2. Скорректируйте регрессионные модели с учетом клинически значимых смешивающих переменных, включая возраст, пол, индекс массы тела, окружность талии, сопутствующие заболевания, статус курения, физическую активность и прием препаратов, которые могут влиять на биомаркеры воспаления.26.
  5. Рассмотрите двусторонний p значение <0,05 статистически значимо.
  6. Представление результатов статистического анализа
    1. Представьте непрерывные переменные в виде среднего значения ± стандартное отклонение или медиана (межквартильный размах), в зависимости от ситуации.
    2. Представьте категориальные переменные в виде частот и процентов.
    3. Приводите оценки эффекта вместе с соответствующими 95% доверительными интервалами, где это применимо.

Результаты

У всех участников MASLD была подтверждена с помощью стандартизированной ультрасонографии печени. Популяция исследования была сопоставима по возрасту и полу; наиболее распространенными сопутствующими заболеваниями были сахарный диабет 2 типа, системная артериальная гипертензия и дислипидемия, как обобщено в Таблице 1. Исходные данные, лежащие в основе репрезентативного анализа, представлены в Дополнительном файле 1.

В качестве репрезентативного применения протокола в качестве показателя воспалительного потенциала рациона был проанализирован диетический воспалительный индекс (DII). Поисковый анализ продемонстрировал умеренную положительную корреляцию между DII и соотношением E/e′ (ρ Спирмена = 0.50, p < 0.05), тогда как значимой корреляции между DII и CIMT обнаружено не было (ρ Спирмена = 0.40, p = 0.81; Рисунок 1). Соответственно, корреляцию между DII и CIMT следует интерпретировать как предварительный, статистически не значимый результат.

Репрезентативные биохимические анализы показали, что у участников с MASLD наблюдались более высокие уровни глюкозы в плазме, HbA1c, концентрации триглицеридов и более высокий сердечно-сосудистый риск, о чем свидетельствуют повышенные отношения триглицеридов к холестерину ЛПВП (TG/HDL-C) и атерогенный индекс плазмы. Субклинический атеросклероз дополнительно оценивали путем стратификации участников по показателю CIMT. Репрезентативный анализ показал, что увеличение CIMT не было связано с массой тела, индексом массы тела или окружностью талии, но было ассоциировано с наличием MASLD (Таблица 2).

Применимость данного протокола дополнительно иллюстрируется заранее определенными критериями классификации участников. Участники, отнесенные к самому высокому квартилю DII (Q4), представляли подгруппу с наибольшей диетической воспалительной нагрузкой, тогда как участники группы Q1 характеризовались наименьшим воздействием факторов воспаления. Аналогично, участники с CIMT ≥0,7 mm были классифицированы как лица с повышенным уровнем субклинического атеросклероза, в то время как значения E/e′ >14 указывали на повышенное давление наполнения левого желудочка и диастолическую дисфункцию. Эти заранее определенные пороговые значения обеспечивают стандартизированную основу для интерпретации диетических, сосудистых и кардиальных показателей, а также способствуют воспроизводимому сравнению кардиометаболического риска в различных группах участников.

figure-results-1
Рисунок 1: Репрезентативные взаимосвязи между диетическим воспалительным индексом и ранними кардиометаболическими показателями. (A) Корреляция между диетическим воспалительным индексом (DII) и соотношением E/e′ — эхокардиографическим маркером давления наполнения левого желудочка. (B) Корреляция между DII и толщиной комплекса интима-медиа сонных артерий (CIMT), проанализированной как непрерывная переменная. Предустановленный порог CIMT 0,7 mm использовался только для репрезентативного категориального анализа и не должен интерпретироваться как универсальный диагностический критерий. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

без MASLDс MASLDp-значение
(n = 10)(n = 15)
Возраст (лет) 42 (37 – 48)41 (39 – 43)0.37
Мужской пол n (%)4 (40.0)8 (53.3)0.4
Глюкоза натощак (mg/dL)88 (83 – 94)105 (98 – 125)0.01
HbA1c5.9 (5.5 - 6.1)6.4 (6.0 – 7.2)0.02
ТГ (mg/dL)120 (74 – 147)219 (108 – 297)0.02
ХС-ЛПВП (mg/dL)41 (37 – 46)48 (30 – 57)0.43
Отношение ТГ/ХС-ЛПВП2.5 (1.8 – 4.9)5.1 (2.6 – 6.7)0.04
AIP0.32 (0.24 – 0.41)0.42 (0.35 – 0.62)0.04
СРБ (mg/dL)0.8 (0.4 – 1.0)1.1 (0.2 – 1.3)0.23

Таблица 1: Репрезентативные демографические, биохимические и кардиометаболические характеристики в зависимости от статуса MASLD. Исходные демографические характеристики, а также репрезентативные биохимические и кардиометаболические параметры участников без MASLD и с MASLD. Непрерывные переменные представлены в виде медианы (межквартильный размах), категориальные переменные представлены как н (%). Сравнение групп проводили с использованием t-критерия Стьюдента t—тест или критерий Манна — Уитни U критерий для непрерывных переменных и точный критерий Фишера для категориальных переменных. Сокращения: MASLD = стеатоз печени, связанный с метаболической дисфункцией; HbA1c = гликированный гемоглобин; TG = триглицериды; HDL-C = холестерин липопротеинов высокой плотности; AIP = атерогенный индекс плазмы; CRP = С-реактивный белок.

Ранний атерогенезПоздние стадии атерогенезаp-значение
КИМС (комплексное исследование толщины комплекса интима-медиа) < 0,7 (n = 18)ТИК СМ ≥ 0,7 (n = 7)
Вес (кг) 73.4 ± 18.070.0 ± 10.60.4
ИМТ (кг/м2) 30.0 ± 5.2429.0 ± 4.430.46
ОТ (см)90.5 ± 7.596.5 ± 2.890.48
МАЖБП (метаболически ассоциированная стеатотическая болезнь печени)8 (44.4)7 (100)0.01

Таблица 2: Репрезентативные антропометрические характеристики в зависимости от толщины комплекса интима-медиа сонных артерий. Репрезентативные антропометрические характеристики и распространенность MASLD в стратификации по толщине комплекса интима-медиа сонных артерий (CIMT). Участники были классифицированы как имеющие ранний субклинический атеросклероз (CIMT <0,7 мм) или выраженный субклинический атеросклероз (КИМС ≥0,7 мм). Непрерывные переменные представлены в виде среднего значения ± стандартное отклонение, а категориальные переменные представлены как н (%). Сравнение групп проводили с помощью t-критерия Стьюдента t—критерий Манна — Уитни U тест или критерий хи-квадрат, в зависимости от ситуации. Сокращения: ИМТ = индекс массы тела; ОТ = окружность талии; ТИМС = толщина комплекса интима-медиа сонных артерий.

Дополнительный файл 1: Исходные данные, использованные для анализов, описанных в данном исследовании. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы скачать этот файл.

Обсуждение

Методы, описанные в данной работе, представляют собой стандартизированный рабочий процесс для исследования того, связаны ли кардиометаболическая и атерогенная нагрузка со стеатозной болезнью печени, связанной с метаболической дисфункцией (MASLD), исходя из гипотезы о том, что метаболическая дисфункция печени способствует раннему атерогенезу27,28. Предложенный рабочий процесс устанавливает стандартизированные процедуры отбора участников, оценки питания, количественного определения биомаркеров, сердечно-сосудистой визуализации, контроля качества и валидации данных для повышения методологической согласованности и воспроизводимости. По возможности все измерения выполняются с использованием идентичного оборудования, стандартизированных параметров сбора данных, обученного персонала, дублирующей проверки и слепого анализа изображений, чтобы минимизировать вариабельность, зависящую от оператора, между исследователями и учреждениями. Оценка питания с помощью структурированного частотного опросника по питанию (FFQ) с визуальной поддержкой является критически важным компонентом, так как расчет DII зависит от точности данных о рационе, сообщаемых участниками. Использование стандартизированных эталонных порций и визуальных пособий снижает ошибку воспоминаний и улучшает сопоставимость между отдельными людьми29,30. Аналогичным образом, оценка диетического воспалительного индекса (DII) с использованием глобальной справочной базы данных из 45 диетических параметров позволяет проводить стандартизированную оценку воспалительного потенциала питания в различных популяциях8,9. Ошибочная классификация потребления пищи на этом этапе может ослабить связь с кардиометаболическими исходами. Кроме того, интеграция биохимических маркеров, эхокардиографической оценки диастолической функции левого желудочка (E/e′) и толщины комплекса интима-медиа общих сонных артерий (CIMT) обеспечивает комплексную оценку раннего кардиометаболического риска. Строгое соблюдение протоколов, рекомендованных руководствами, сводит к минимуму вариабельность, зависящую от оператора, и обеспечивает надежность и воспроизводимость сердечно-сосудистых измерений12,15,22.

Важно подчеркнуть, что индекс воспаления диеты (DII) предназначен для характеристики индивидуальной вариабельности воспалительного потенциала питания, а не для диагностики MASLD или независимого прогнозирования кардиометаболических заболеваний. Следовательно, не все пациенты с MASLD обязательно будут иметь повышенные значения DII, а высокий DII не всегда указывает на выраженные кардиометаболические нарушения. Вместо этого в данном протоколе DII используется в качестве переменной стратификации для изучения того, связан ли рост воспалительной нагрузки диеты с прогрессирующими субклиническими сердечно-сосудистыми изменениями в спектре MASLD. Для повышения практической осуществимости в протоколе используется адаптированный под популяцию опросник по частоте потребления пищевых продуктов (FFQ), что облегчает его внедрение в клинических условиях. Хотя комплексные инструменты оценки питания охватывают более широкий спектр питательных веществ, упрощенные FFQ продемонстрировали приемлемую валидность при оценке DII и связанных с диетой воспалительных паттернов31.

Протокол также включает стандартизированные процедуры контроля качества для повышения воспроизводимости результатов лабораторных исследований и визуализационных обследований. Стандартизированный забор крови, своевременная обработка образцов, соответствующие условия хранения, кодированная идентификация образцов, дублирование лабораторных измерений и включение контрольных образцов позволяют минимизировать аналитическую вариабельность. Аналогичным образом, стандартизированное позиционирование пациента, настройка допплеровского угла, плоскости сканирования и усреднение данных по нескольким сердечным циклам снижают вариабельность эхокардиографических измерений, в то время как двусторонняя оценка CIMT с использованием стандартизированного безатероматозного сегмента дальней стенки общей сонной артерии и независимый слепой анализ изображений повышают воспроизводимость сосудистых измерений. Данный рабочий процесс adaptable к различным исследовательским условиям, что позволяет центрам с ограниченной лабораторной инфраструктурой внедрять оценку рациона питания, антропометрические измерения и ультразвуковую сердечно-сосудистую диагностику перед добавлением дополнительных молекулярных или воспалительных биомаркеров в зависимости от имеющихся ресурсов и целей исследования.

Дополнительным преимуществом данного рабочего процесса является возможность выявления участников с дискордантными фенотипами, например, лиц с выраженным провоспалительным характером питания, но без признаков кардиометаболических нарушений или, напротив, лиц с относительно низкими значениями DII, несмотря на установленное кардиометаболическое нарушение. Такие результаты могут дать представление о сложном взаимодействии между характером питания, чувствительностью к инсулину, висцеральным ожирением, физической активностью, генетическими и эпигенетическими факторами, фармакологической терапией, качеством сна и другими средовыми детерминантами кардиометаболического здоровья. Лонгитюдные исследования, использующие данный стандартизированный протокол, могут дополнительно прояснить взаимосвязь между воспалительной нагрузкой от рациона питания и прогрессированием кардиометаболических заболеваний при MASLD.

Следует учитывать несколько ограничений данного протокола. Поперечный дизайн исследования исключает возможность установления причинно-следственной связи между воспалительным потенциалом диеты и кардиометаболическим повреждением. Кроме того, DII отражает привычные особенности питания, а не острые воспалительные реакции, а самоотчет об этом питании подвержен ошибкам воспоминания32. Использование С-реактивного белка (CRP) в качестве системного маркера воспаления может привести к недооценке незначительных воспалительных изменений по сравнению с более широким профилированием цитокинов33. Аналогично, воспроизводимость ТИМК зависит от оцениваемого сегмента артерии, выбора стенки, времени сердечного цикла и количества полученных измерений. Поэтому предпочтительны непрерывный анализ ТИМК и интерпретация на основе процентилей для конкретной популяции, в то время как порог ≥0.7 mm, использованный в репрезентативных результатах, следует рассматривать как предопределенный аналитический порог для данного исследования, а не как универсальный клинический критерий. Важно отметить, что данный протокол предназначен для рабочего процесса ранней оценки кардиометаболического риска, а не как диагностический или прогностический алгоритм. В отличие от традиционных подходов к кардиометаболическому скринингу пациентов с MASLD, которые в основном опираются на антропометрические измерения, оценку артериального давления, гликемический статус, биохимические тесты печени и липидный профиль для оценки сердечно-сосудистого риска34,35, данный рабочий процесс объединяет пять взаимодополняющих областей: (i) воспалительная нагрузка диеты, количественно определенная с помощью DII, (ii) биохимическое кардиометаболическое профилирование, (iii) циркулирующие биомаркеры воспаления, (iv) эхокардиографическая оценка диастолической функции левого желудочка с использованием соотношения E/e′ и (v) ТИМК как маркер раннего субклинического атеросклероза. В совокупности эти дополняющие друг друга методы обеспечивают стандартизированную, неинвазивную и воспроизводимую основу для выявления ранних метаболических и сосудистых изменений до развития клинически выраженных сердечно-сосудистых заболеваний, дополняя, а не заменяя традиционный кардиометаболический скрининг1,3,12,15,34,35,36,37,38,39.

Раскрытие информации

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Благодарности

Авторы выражают благодарность за финансовую поддержку в рамках институциональной программы E015.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Набор для ИФА-анализа Abcamab65328ELISA Assay Kits, Colorimetric, Abcam для 96-луночных планшетов
Микропланшетный ридер для измерения абсорбции, SunriseTecan 30190079Режим детектирования: абсорбция; диапазон длин волн: 340 nm - 750 nm; длина волны фильтра: 405 nm, 450 nm, 492 nm, 620 nm; формат планшета: 96 лунок
СфигмоманометрHomecareANEROIDE 1000Саморегулирующийся браслет из 100% хлопка с крючком, манжета с индикатором артерии для взрослых.
УЗИ-аппарат для измерения CIMTPhilips EPIQ7L12-3 Broadband Linear Array TransducerЛинейный датчик (Broadband Linear Array Transducer)

Ссылки

  1. Rinella ME, et al. A multisociety Delphi consensus statement on new fatty liver disease nomenclature. J Hepatol. 2023;79(6):1542-1556.
  2. Younossi ZM, et al. The global epidemiology of nonalcoholic fatty liver disease and nonalcoholic steatohepatitis: a systematic review. Hepatology. 2023;77(4):1335-1347.
  3. Byrne CD, Targher G. NAFLD: a multisystem disease. J Hepatol. 2015;62(1 Suppl).
  4. Paik JM, et al. Changes in the global burden of chronic liver diseases from 2012 to 2017: the growing impact of NAFLD. Hepatology. 2020;72(5):1605-1616.
  5. Monteiro CA, Cannon G, Lawrence M, Costa Louzada ML. Ultra-processed foods, diet quality, and health using the NOVA classification system. Food and Agriculture Organization of the United Nations; Rome; 2019.
  6. Schwingshackl L, et al. Adherence to healthy dietary patterns and risk of chronic diseases: an updated umbrella review of meta-analyses of prospective cohort studies. Nutrients. 2021;13(10):3395.
  7. Medina-Remón A, et al. Polyphenol intake from a Mediterranean diet decreases inflammatory biomarkers related to atherosclerosis: a substudy of the PREDIMED trial. Br J Clin Pharmacol. 2017;83(1):114-128.
  8. Shivappa N, et al. Designing and developing a literature-derived, population-based Dietary Inflammatory Index. Public Health Nutr. 2014;17(8):1689-1696.
  9. Shivappa N, et al. Dietary inflammatory index and cardiovascular risk and mortality: a meta-analysis. Nutrition. 2019;59:56-64.
  10. Vissers LET, et al. The relationship between the Dietary Inflammatory Index and risk of cardiovascular disease, cardiovascular mortality, and all-cause mortality: a prospective cohort study. Am J Clin Nutr. 2017;105(5):1113-1119.
  11. Mazidi M, et al. Dietary inflammatory index and cardiometabolic risk in US adults. Atherosclerosis. 2018;276:23-27.
  12. Nagueh SF, et al. Recommendations for the evaluation of left ventricular diastolic function by echocardiography: an update from the American Society of Echocardiography and the European Association of Cardiovascular Imaging. J Am Soc Echocardiogr. 2016;29(4):277-314.
  13. Paulus WJ, Tschöpe C. A novel paradigm for heart failure with preserved ejection fraction: comorbidities drive myocardial dysfunction and remodeling through coronary microvascular endothelial inflammation. J Am Coll Cardiol. 2013;62(4):263-271.
  14. Lorenz MW, et al. Prediction of clinical cardiovascular events with carotid intima-media thickness: a systematic review and meta-analysis. Circulation. 2007;115(4):459-467.
  15. Touboul PJ, et al. Mannheim carotid intima-media thickness and plaque consensus (2004-2006-2011): an update on behalf of the Advisory Board of the 3rd, 4th and 5th Watching the Risk Symposia. Cerebrovasc Dis. 2012;34(4):290-296.
  16. Dobiásová M. Atherogenic index of plasma [log(triglycerides/HDL-cholesterol)]: theoretical and practical implications. Clin Chem. 2004;50(7):1113-1115.
  17. Niroumand S, et al. Atherogenic index of plasma: a marker of cardiovascular disease. Med J Islam Repub Iran. 2015;29:240.
  18. Tilg H, Moschen AR. Evolution of inflammation in nonalcoholic fatty liver disease: the multiple parallel hits hypothesis. Hepatology. 2010;52(5):1836-1846.
  19. Francque SM, et al. Non-alcoholic fatty liver disease: a patient guideline. JHEP Rep. 2021;3(5):100322.
  20. Denova-Gutiérrez E, et al. Validity of a food frequency questionnaire to assess food intake in Mexican adolescent and adult population. Salud Publica Mex. 2016;58(6):617-628.
  21. Denova-Gutiérrez E, et al. Relative validity of a food frequency questionnaire to identify dietary patterns in an adult Mexican population. Salud Publica Mex. 2016;58(6):608-616.
  22. Lang RM, et al. Recommendations for cardiac chamber quantification by echocardiography in adults: an update from the American Society of Echocardiography and the European Association of Cardiovascular Imaging. Eur Heart J Cardiovasc Imaging. 2015;16(3):233-270.
  23. Cohen J. Statistical power analysis for the behavioral sciences. 2nd ed. Lawrence Erlbaum Associates; Hillsdale, NJ; 1988.
  24. Shapiro SS, Wilk MB. An analysis of variance test for normality: complete samples. Biometrika. 1965;52(3-4):591-611.
  25. Benjamini Y, Hochberg Y. Controlling the false discovery rate: a practical and powerful approach to multiple testing. J R Stat Soc Series B Stat Methodol. 1995;57(1):289-300.
  26. Greenland S, Pearce N. Statistical foundations for model-based adjustments. Annu Rev Public Health. 2015;36:89-108.
  27. Targher G, et al. Increased prevalence of cardiovascular disease in type 2 diabetic patients with non-alcoholic fatty liver disease. Diabet Med. 2006;23(4):403-409.
  28. Lonardo A, et al. Hypertension, diabetes, atherosclerosis and NASH: Cause or consequence J Hepatol. 2018;68(2):335-352.
  29. Willett W. Nutritional epidemiology. 3rd ed. Oxford University Press; New York; 2013.
  30. Thompson FE, Subar AF. Dietary assessment methodology. In: Coulston AM, Boushey CJ, Ferruzzi MG, Delahanty LM, editors. Nutrition in the prevention and treatment of disease. 4th ed. Academic Press; London; 2017:5-48.
  31. Cavicchia PP, et al. A new dietary inflammatory index predicts interval changes in serum high-sensitivity C-reactive protein. J Nutr. 2009;139(12):2365-2372.
  32. Freedman LS, et al. Pooled results from 5 validation studies of dietary self-report instruments using recovery biomarkers for energy and protein intake. Am J Epidemiol. 2014;180(2):172-188.
  33. Pearson TA, et al. Markers of inflammation and cardiovascular disease: application to clinical and public health practice: a statement for healthcare professionals from the Centers for Disease Control and Prevention and the American Heart Association. Circulation. 2003;107(3):499-511.
  34. European Association for the Study of the Liver, European Association for the Study of Diabetes, European Association for the Study of Obesity. EASL-EASD-EASO clinical practice guidelines on the management of metabolic dysfunction-associated steatotic liver disease. J Hepatol. 2024;81(3):492-542.
  35. Arnett DK, et al. 2019 ACC/AHA guideline on the primary prevention of cardiovascular disease: a report of the American College of Cardiology/American Heart Association Task Force on Clinical Practice Guidelines. Circulation. 2019;140(11).
  36. Ruiz-Canela M, Bes-Rastrollo M, Martínez-González MA. The role of dietary inflammatory index in cardiovascular disease, metabolic syndrome and mortality. Curr Cardiol Rep. 2016;18(7):60.
  37. Targher G, Day CP, Bonora E. Risk of cardiovascular disease in patients with nonalcoholic fatty liver disease. N Engl J Med. 2010;363(14):1341-1350.
  38. Calder PC, et al. Dietary factors and low-grade inflammation in relation to overweight and obesity. Br J Nutr. 2011;106(Suppl 3).
  39. Estruch R, et al. Primary prevention of cardiovascular disease with a Mediterranean diet supplemented with extra-virgin olive oil or nuts. N Engl J Med. 2018;378(25).

Перепечатки и разрешения

Теги

Диетический воспалительный индексстеатоз печениультразвуковое исследование сонных артерийэхокардиографическая оценкавоспалительные биомаркерысоотношение триглицеридов и ЛПВПатерогенный индекс

Эта статья была опубликована

Видео скоро будет доступно

Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.