Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Исследовательская статья

Механизм и экспериментальная валидация тотальных флавоноидов Rhizoma drynariae в лечении подагры

111 просмотров

⸱

DOI:

10.3791/70849

⸱

5 июня 2026 г.

 ,  , 
1School of Chinese Materia Medica, Beijing University of Chinese Medicine, 2Quality department, Beijing Tongrentang Kangyang Industry Development Co., Ltd, 3Engineering Research Center of Good Agricultural Practice for Chinese Crude Drugs, Ministry of Education

В этой статье

Краткое содержание

Тотальные флавоноиды Rhizoma drynariae (TFRD) облегчают подагровый артрит (GA), подавляя инфильтрацию воспалительных клеток и снижая уровень TNF-α, IL-6 и IL-17A, главным образом за счёт ингибирования сигнальных путей AKT, MAPK и NF-κB, что подчеркивает их противовоспалительный и иммуномодуляторный терапевтический потенциал.

Аннотация

Подагра (ГА) — это воспалительное заболевание суставов, вызванное отложением кристаллов мононатрия урата (МС) в суставном пространстве и окружающих тканях. В традиционной китайской медицине Rhizoma Drynariae (Gusuibu) давно широко используется в клиническом лечении ГА, и флавоноиды считаются её ключевыми биоактивными компонентами. В этом исследовании использовалась сетевая фармакология для построения компонентно-мишенной сети полных флавоноидов Rhizoma Drynariae (TFRD) против GA, тем самым выявляя ключевые компоненты, основные мишени и связанные пути. Модели на крыс были созданы путём внутрисуставной инъекции кристаллической суспензии мононатрия урата и обработки TFRD или положительным контролем колхицином с помощью орального гаважа. После сбора образцов результаты прогнозирования на основе сетевой фармакологии были подтверждены с использованием метаболомики сыворотки крыс, ферментно-связанного иммуносорбентного анализа (ELISA) и анализа западных блотов. Анализ сетевой фармакологии показал, что анти-ГА эффекты TFRD опосредованы ключевыми мишенями, включая IL6, AKT1, TNF, EGFR, JUN и PTGS2, и в основном связаны с воспалением, иммунным и апоптозом путями, такими как IL-17, TNF, NF-κB, MAPK, PI3K-AKT, JAK-STAT и пути сигнализации Т-клеточных рецепторов. Аналогично, метаболомика также выявила ключевые роли воспалительного ответа. Окрашивание гематоксилином и эозином (H&E) подтвердило, что TFRD снижает инфильтрацию воспалительных клеток. Анализ ELISA подтвердил, что группа TFRD значительно ингибирует экспрессию воспалительных факторов TNF-α, IL-6 и IL-17A в синовиальной ткани. Вестерн-блот показал, что TFRD ингибирует индуцированную GA-индуцированной гиперфосфорилированием AKT, MAPK p38 и NF-κB p65 в синовиальной ткани крыс. TFRD может эффективно смягчать изменения, вызванные воспалением, у крыс с GA, напрямую модулируя связанные воспалительные факторы и пути.

Введение

Подагровый артрит (ГА) — это воспалительное заболевание суставов, вызываемое отложением кристаллов мононатрия урата (МС) внутри и вокруг суставов, которые стимулируют областьсуставов 1,2. Патогенез ГА включает сложное взаимодействие генетической предрасположенности, влияния окружающей среды и метаболической дисрегуляции, характеризующееся преимущественно гиперурикемией, вызванной либо чрезмерным выработкой мочевой кислоты, либо недостаточным выделениемпочек 3,4. Это приводит к системному накоплению кристаллов урата в почечных тканях и суставных пространствах, где они активируют врождённую иммунную систему и вызывают интенсивные воспалительныекаскады 5,6. В последние годы серия исследований показала, что глобальная распространённость ГА росла параллельно с ростом числа ожирения и метаболических синдромов, что приводит к функциональным нарушениям и накладывает значительную социально-экономическую нагрузку на пострадавшихлюдей 7. Стратегия лечения подагры сосредоточена на контроле острого локального воспаления суставов и контроле долгосрочного уровня мочевойкислоты 8,9. Тем не менее, полезность существующих фармакотерапий часто ограничивается их профилями побочных эффектов и специфическими противопоказаниями. Например, нестероидные противовоспалительные препараты обычно избегают у пациентов с хроническими заболеваниями почек из-за риска высадки или усугубления острой почки10,11. Аналогично, препарат, снижающий урат, аллопуринол, несёт хорошо задокументированный риск тяжёлых кожных побочных реакций, таких как синдром Стивенса–Джонсона, тогда как бензбромарон может вызывать значительную гепатотоксичность 11,12,13,14,15. Поэтому сохраняется острая необходимость в разработке более безопасных, широко применимых и механистически целенаправленных терапевтических средств для эффективного управления ГА.

В традиционной китайской медицине (ТКМ) ГА относится к диагностическим категориям, таким как «болезнь Лицзе» (боль при беге в суставах), «подагра би» (барьер подагры) и «юй чжо би» (препятствие стазиса и мутности). Вмешательства ТКМ при ГА обеспечивают синергетический эффект через противовоспалительные и обезболивающие действия, модуляцию метаболизма мочевой кислоты, улучшение микроциркуляции и сохранение функции суставов, что делает их заметной областью современныхисследований 16,17,18,19. Rhizoma Drynariae (Gusuibu), полученная из высушенного корневища Drynaria fortunei (Kunze) J.Sm., многолетнего папоротника семейства Polypodiaceae, широко используется в клинической практике для лечения ГА. Биоактивные соединения Rhizoma drynariae в основном содержат флавоноиды, фенилпропаноиды, тритерпеноиды, фенольные кислоты и их гликозиды20,21. Среди них флавоноиды представляют собой самый широко изученный класс соединений за последниегоды — 22, 23 и 24. Предыдущие исследования показали, что флавоноиды обладают заметными противовоспалительными и антиоксидантнымисвойствами 25.

Предварительные исследования показали, что тотальные флавоноиды Rhizoma drynariae (TFRD) могут эффективно подавлять воспалительные реакции при остеоартрите, ревматоидном артрите и других воспалительных заболеванияхсуставов 26,27,28. Однако основные механизмы TFRD против GA еще предстоит тщательно изучены. Поэтому данное исследование направлено на использование интегрированного подхода, объединяющего сетевую фармакологию, метаболомику и эксперименты в молекулярной биологии, для изучения и подтверждения специфических механизмов и терапевтической эффективности TFRD в лечении GA. Систематическое исследование многокомпонентных, многоцелевых и многопутных механизмов, лежащих в основе лечения TFRD при ГА, ожидается, способствует открытию лекарств и предоставит инновационные варианты и практические решения для клинического ведения ГА.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Это исследование было рассмотрено и одобрено Комитетом по этике животных Китайско-японской дружбной больницы (номер одобрения: zryhyy21-22-08-10) и проведено в соответствии с институциональными рекомендациями по этическому уходу и использованию лабораторных животных.

Прогнозирование и скрининг целей, связанных с TFRD и GA,
Химические составляющие Rhizoma Drynariae были извлечены из базы данных и платформы анализа традиционных китайских медицинских систем фармакологии (TCMSP) с использованием запроса «Rhizoma Drynariae»в качестве поискового запроса 29. Скрининг на потенциально биоактивные компоненты проводился на основе критериев пероральной биодоступности (OB) ≥ 30% и подобия препарата (DL) ≥ 0,18 30,31,32. Из полученного пула соединений были впоследствии идентифицированы и отобраны флавоноидные компоненты в соответствии с их химической структурой. Эти флавоноидные компоненты, далее называемые полными флавоноидами Rhizoma Drynariae (TFRD), были включены в дальнейший анализ. После извлечения целевых генов, связанных с TFRD, из базы данных TCMSP, соответствующие стандартизированные символы генов были аннотированы с помощью базы данныхUniProt 33. Используя термин «подагра» в качестве поискового запроса, из базы данных GeneCards были извлечены заболевающие мишени для установления набора кандидатныхгенов 34.

Создание сети составных целей
Пересечение мишеней, связанных с TFRD, и мишенями, связанными с GA, было выявлено и определено как ключевые терапевтические цели, опосредующие анти-GA-эффекты TFRD, а перекрывающийся набор визуализировался с помощью диаграммы Венна. Кроме того, была построена и проанализирована регулирующая сеть «TFRD - targets - GA» с использованием программного обеспечения Cytoscape35.

Сеть взаимодействия белок-белок
Ключевые терапевтические цели TFRD против GA импортировались в онлайн-базу данных для создания сети взаимодействия белков и белков (PPI), при этом минимально требуемый балл взаимодействия был установлен как «высокая уверенность (0,700)»36. Сеть PPI была оптимизирована с помощью программного обеспечения Cytoscape, а топ-30 целей ядра, ранжированных по степени централизации, были выбраны для создания столбчатогографика 37,38.

Анализ обогащения путей KEGG
Анализ обогащения путей KEGG проводился на этих основных целях с использованием программного обеспечения R и базы данныхBioconductor 38,39. Пути с p-значением < 0,05 считались статистически значимыми. После исключения путей, связанных с заболеваниями и метаболизмом, в Cytoscape была визуализирована сеть взаимодействия между путями и целью. Среди этих путей топ-20 путей, ранжированных по возрастающему значению P, были представлены в виде барного графика.

Подготовка лекарств
Для приготовления кристаллической суспензии мононатриевого урата (MSU) 500 мг кристаллов MSU взвешивались с помощью аналитических весов, дисперсировали в 10 мл обычного физиологического раствора и 2 мл Tween 80, а затем нагревались при магнитном помешивании. Затем смесь была скорректирована до конечного объёма 20 мл с обычным физиологическим раствором для получения суспензии 25 мг/мл. После автоклавирования подвеска хранилась при 4 °C до начала использования. Обычная клиническая доза TFRD составляет 750 мг в день для взрослого человека весом 70 кг, что соответствует дозе крыс в 67,5 мг/кг массы тела в день. TFRD растворялся в дистиллированной воде до концентрации 6,75 мг/мл и хранился при 4 °C для последующего использования. Согласно методу нормализации поверхности тела, эквивалентная пероральная доза колхицина (положительного препарата) у крыс, преобразованная из клинической человеческой дозы (0,6 мг/60 кг), составляет 0,062 мг/кг. Раствор колхицина был приготовлен в дистиллированной воде в концентрации 0,0062 мг/мл и хранён при 4 °C для последующего использования.

Животные
В этом исследовании было использовано всего 36 шестинедельных самцов крыс Sprague–Dawley (SD) (220 ± 10 г) (лицензирование животных No SCXK [Jing] 2025-0008). Животные содержались в Центре лабораторных животных Китайско-японской больницы дружбы в стандартном рационе при температуре 22–24 °C и влажности 50–70%.

Создание модели и вмешательство
После одной недели акклиматизации крыс случайным образом делили на четыре группы (n = 9 каждая): контрольная, модельная, TFRD и положительный препарат. Рандомизация проводилась с использованием таблицы случайных чисел. Сбор и анализ данных проводились в условиях «слепых». Все процедуры проводились один раз в день с помощью орального гаважа. Все вмешательства проводились один раз в день оральной гаважной процедурой в 08:00 в течение семи последовательных дней. Пустые контрольные и модельные группы получили нормальный физиологический раствор (10 мл/кг), тогда как TFRD и положительные группы препаратов получили соответствующие суспензии в эквивалентном объёме (10 мл/кг). На четвёртый день вмешательства в контрольную группу с пустыми глазами была введена внутрисуставная инъекция стерильного физиологического раствора, а крысам из модели, TFRD и положительных групп препаратов ввели кристаллическую суспензию MSU для индуцирования острого подагры. Перед инъекцией крыс анестезиировали с помощью системы анестезии изофлурана. Каждая крыса в модели, TFRD и положительных группах препаратов получила по 200 мкл суспензии MSU в полость левого голеностопного сустава. После удаления иглы на место инъекции несколько секунд применялось мягкое давление стерильной ватной палочкой для предотвращения протечки.

Сбор и обработка образцов
Через 72 часа после модельной индукции крыс были анестезиированы и уложены на спине. После абдоминальной дезинфекции брюшную полость открывали, а кишечник аккуратно убирали, чтобы обнажить брюшную аорту. Параллельно сосуду вводилась игла для забора крови в брюшной аорте, которая немедленно переливалась в гепаринизированные трубки, предварительно охлаждённые в ванне со льдом. Образцы центрифугировали при температуре 3000 × г в течение 10 минут при 4 °C для получения сыворотки, которая была аликотирована и сохранена при -80 °C для последующего метаболомного профилирования. Животных затем усыпляли с помощью CO₂ асфиксии. Шерсть вокруг левого голеностопного сустава была выбрита, а окружающая кожа и мышцы аккуратно удалены, чтобы обнажить целую структуру сустава. Синовиальная ткань, выглядящая как тонкая беловатая мембрана, выстилающая суставную капсулу, была аккуратно выделена от соседней фасции с помощью тонких щипцов. Собранные совместные образцы фиксировались в 4% параформальдегиде при 4 °C в течение 72 часов. Затем часть ткани сустава декальцифицировала в растворе декальцификации ЭДТА, а раствор обновлялся еженедельно в течение 8 недель. Полная декальцификация подтверждалась тестом на прокол иглой: при обнаружении сопротивления декальцификация продолжалась до полного проникновения ткани.

После декальцификации суставы голеностопа были сагиттально разрезаны, помещены в обработочные кассеты и подвергались градиентной дегидраации этанолом. Ткани очищались в ксилоле, инфильтровались парафином и встраивались в парафиновые блоки. Секции толщиной 6 мкм вырезали с помощью автоматизированного микротома, плавали на водяной бане при температуре 40 °C и крепили на клеевые стекла. После высыхания при 60 °C в течение 30 минут секции были депарафинированы, окрашены гематоксилином и эозином (H&E) согласно стандартным протоколам, а затем покрыты нейтральным бальзамом. Целые слайдовые изображения были получены с помощью цифрового слайд-сканера.

Анализ метаболомики сыворотки
Образцы сыворотки из моделей и групп TFRD были разморажены при 4 °C перед обработкой. Для каждого образца 100 мкл сыворотки передавалось в микроцентрифугную трубку и комбинировалось с 400 мкл предварительно охлаждённого экстракционного растворителя (метанол: ацетонитрил, 1:1, v/v), содержащего внутренние стандарты. Смесь подвергалась вихрю в течение 1 минуты, после чего следовала звуковая обработка в ледяно-водяной бане в течение 10 минут. Затем инкубировали при -40 °C в течение 1 часа для облегчения осадка белками, а затем центрифугировали при 12 000 × г в течение 15 минут при 4 °C. Супернатант, полученный после центрифугирования, тщательно собирался и перемещался в автосэмплерные флаконы для анализа UHPLC–MS. Кроме того, равные объёмы супернатантов из каждого образца в одной группе объединялись для получения образцов контроля качества (QC).

После обнаружения метаболитов в образцах сыворотки обеих групп исходные данные масс-спектрометрии обрабатывались специализированным программным обеспечением для автоматизированного обнаружения, извлечения, выравнивания и интеграции пиков, что дало структурированную матрицу с спектральными признаками ионов. Обнаруженные спектральные признаки сопоставили с устоявшимися спектральными библиотеками метаболомики для идентификации метаболитов, происходящих из TFRD, которые вошли в системную циркуляцию. Неопознанные признаки и те, что содержали чрезмерно отсутствующие значения, были удалены из набора данных. Кураторский набор данных был переиндексирован и структурирован в стандартизированный формат40.

Дифференциальное выражение метаболитов между двумя группами оценивалось путём вычисления как fold shift (FC, выраженное как межгрупповое отношение), так и статистической значимости (p-значение). Метаболиты, достигающие порога |log₂FC| ≥ 1 и P < 0,05 были определены как дифференциально экспрессируемые метаболиты (ДЭП). Результаты скрининга были визуально обобщены с использованием таких методов, как диаграммы вулканов. Отфильтрованные дифференциальные метаболиты впоследствии импортировались в базу данных PubChem для получения их канонических идентификаторов (CIDs)41. Соответствующие идентификаторы KEGG затем были получены на основе CID. Наконец, идентификаторы KEGG были импортированы в платформу метаболомического анализа для проведения анализа обогащения метаболических путей и выявления сигнальных путей, существенно связанных с ДЭП.

ЭЛИЗА
Образцы синовиальных тканей мгновенно замораживались в жидком азоте и измельчались в мелкий порошок. Примерно 100 мг порошка взвешивали с помощью электронного точного веса, смешивали с 1 мл ледяного PBS и гомогенизировали на льду с помощью стеклянного гомогенизатора. Гомогенат был центрифугирован при 10 000 × г в течение 5 минут при 4 °C, а супернатант был собран для последующего обнаружения ИФС. Перед анализом набор ELISA позволяли уравновеситься до комнатной температуры в течение 30 минут. Все реагенты, включая серийно разбавленные стандарты, буфер для мойки, рабочий раствор для антител с маркировкой биотина и конъюгатный раствор фермента, были подготовлены в соответствии с инструкциями производителя. Впоследствии в назначенные скважины предварительно покрытой микропластины добавляли 100 мкл стандартов и образцов различных концентраций и образцов. Пластина была запечатана и инкубирована при 37 °C в течение 90 минут. После инкубации содержимое выбрасывалось, а колодцы промывались четыре раза. Затем в каждую скважину добавляли 100 мкл рабочего раствора с биотинилированными антителами, после чего следовала инкубация при 37 °C в течение 60 минут и ещё один этап промывки. Затем был введён 100 мкл ферментного сопряжённого рабочего раствора, и пластину инкубировали при 37 °C в течение 30 минут, после чего следовала дополнительная промывка. Затем добавляли хромогенный субстрат, и пластину инкубировали в темноте при 37 °C в течение 10 минут. Реакция завершалась добавлением 100 мкл стоп-раствора, а поглощение измерялось на 450 нм с помощью считывателя микропластин. Стандартная кривая была построена путём согласования значений оптической плотности (OD) стандартов с соответствующими концентрациями, и соответственно рассчитаны концентрации образцов.

Вестерн блот
Синовиальные ткани быстро замораживались и механически измельчались в мелкий порошок. Измеренная часть порошка лизировала в соответствующем объёме ледяного буфера RIPA с дополнением ингибиторов протеазы и фосфатазы (1:100, v/v), после чего следовала инкубация на льду в течение 30 минут. Лизаты затем центрифугировали при 10 000 × г в течение 5 минут при 4 °C, а супернатанты тщательно собирались. Концентрации белков были количественно измерены с помощью анализа BCA, а все образцы скорректировались до равных концентраций с помощью буфера RIPA. Белки разделялись с помощью SDS-PAGE и переносились на мембраны PVDF. Мембраны блокировались и инкубировали первичными антителами (разбавление 1:1000), затем вторичные антитела (разбавление 1:5000). Сигналы белков визуализировались с помощью системы обнаружения ECL, а интенсивность полос количественно определялась с помощью программного обеспечения Image Lab (версия 5.2.1). Относительные уровни экспрессии нормализовались относительно β-актина.

Статистический анализ
Статистический анализ проводился с использованием программного обеспечения SPSS (версия 20.0). Данные представлены в виде среднего ± стандартного отклонения (SD). Для сравнений между несколькими группами использовался односторонний анализ дисперсии (ANOVA), когда предположение о однородности дисперсии было выполнено, а затем тест LSD для пост-хок парных сравнений. Если дисперсионная однородность не была достигнута, проводился тест ANOVA Уэлча, а затем тест T3 Даннетта для множественных сравнений. p-значение < 0,05 считалось статистически значимым.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Ключевые компоненты TFRD
Потенциальные биоактивные ингредиенты Rhizoma Drynariae были получены из базы данных TCMSP, получив 71 кандидат. Эти 71 активный компонент затем подверглись скринингу на основе пероральной биодоступности (OB ≥ 30%) и подобия препарата (DL ≥ 0,18), что привело к выявлению 18 соединений. Дальнейшее уточнение этого списка показало, что 10 из этих активных соединений были флавоноидами, включая: (2R)-5,7-дигидрокси-2-(4-гидроксифенил)хрома...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

GA — распространённая форма воспалительного артрита. В настоящее время клиническое лечение в основном опирается на нестероидные противовоспалительные препараты (НПВС), кортикостероиды и препараты для сниженияурата 42. Однако совместное введение этих препаратов вызывает у пациентов ряд побочных эффектов и накладывает значительную метаболическую нагрузку на печень ипочки 43. Это особенно вредно для пациентов с предшествующими заболеваниями пе...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы отмечают, что в этой работе нет конфликтов интересов.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
4% параформальдегидSolarbioP1110
5-кратный буфер загрузки белкаSolarbioP1040
Антитела к AKTТехнология клеточной сигнализации4691S
Раствор разбавления антителBeyotime BiotechnologyP0268
База данных биопроводников https://www.bioconductor.org/
колхицинShanghai Yuanye Co., Ltd
база данных GeneCards https://www.genecards.org/
Гематоксилин и эозин (H& E) Набор для окрашиванияSolarbioG1120
MetaboAnalyst 6.0 онлайн-платформа https://www.metaboanalyst.ca/
Набор мыши IL-17A ELISA4a Biotech Co LtdCME0041
Набор мыши IL-6 ELISA4a Biotech Co LtdCME0006
Мыши TNF-и альфа; ELISA Kit4a Biotech Co LtdCME0004
NF-κ Антитела к B p65Технология клеточной сигнализации8242T
Обезжиренное сухое молокоSolarbioD8340
p38 MAPK антителаAbclonalA14401
Коктейль с ингибиторами фосфатазыBeyotime BiotechnologyP1081
Антитело к фосфо-АКТ (Ser473)Технология клеточной сигнализации4060-Е
Фосфо-NF-и каппа; Антитела к B p65Технология клеточной сигнализации3031S
Антитело к фосфо-p38 MAPKAbclonalAP0526
Фенилметилсульфонилфторид (ПМСФ)SolarbioR0010
Мембрана поливинилиденфторида (PVDF)МиллипорIPVH00010
PubChem databashttps://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/
R software www.r project.org/
RIPA Lysis BufferSolarbioR0010
Вода без РНазыАмбионAM9937
Крысы SDBeijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd. 
Буфер электрофореза SDS-PAGEServicebioG2144
База данных STRINGhttps://string-db.org/
TBST Buffer (10X)SolarbioT1085
TCMSPhttps://old.tcmsp-e.com
Буфер переноса триглицинаServicebioG2017
TFRDBeijing Qihuang Pharmaceutical Co., Ltd.
UniProt database https://www.uniprot.org/
&бета;-Антитела актинаЧжуншань Цзинцяо БиотехнологияTA-09

Ссылки

  1. Keller, S. F., Mandell, B. F. Management and cure of gouty arthritis. Rheum Dis Clin North Am. 48 (2), 479-492 (2022).
  2. Ma, C., et al. Metabolic reprogramming of macrophages by biomimetic melatonin-loaded liposomes effectively attenuates acute gouty arthritis in a mouse model. Adv Sci (Weinh). , e2410107 (2024).
  3. Li, C., et al. Targeting neutrophil extracellular traps in gouty arthritis: insights into pathogenesis and therapeutic potential. J Inflamm Res. 17, 1735-1763 (2024).
  4. Zhang, Y., Chen, S., Yuan, M., Xu, Y., Xu, H. Gout and diet: a comprehensive review of mechanisms and management. Nutrients. 14 (17), 3525 (2022).
  5. Wang, R., et al. Sulforaphane-driven reprogramming of gut microbiome and metabolome ameliorates the progression of hyperuricemia. J Adv Res. 52, 19-28 (2023).
  6. Zhang, S., et al. Mechanism of reactive oxygen species-guided immune responses in gouty arthritis and potential therapeutic targets. Biomolecules. 14 (8), 978 (2024).
  7. GBD 2021 Gout Collaborators. Global, regional, and national burden of gout, 1990-2020, and projections to 2050: a systematic analysis of the Global Burden of Disease Study 2021. Lancet Rheumatol. 6 (8), e507-e517 (2024).
  8. Towiwat, P., Li, Z. Long-term remission in gout: challenges and future opportunities. Rheumatol Autoimmun. 6, 7-15 (2026).
  9. Chen, S., Li, Z., Deng, X., Gao, L. Advances in understanding the mechanisms of treatment for gouty arthritis: a comprehensive review. Physiol Res. 74 (5), 693-710 (2025).
  10. LaForge, J. M., et al. Non-steroidal anti-inflammatory drugs: clinical implications, renal impairment risks, and AKI. Adv Ther. 40 (5), 2082-2096 (2023).
  11. Klomjit, N., Ungprasert, P. Acute kidney injury associated with non-steroidal anti-inflammatory drugs. Eur J Intern Med. 101, 21-28 (2022).
  12. Anis, T. R., Meher, J. Allopurinol-induced Stevens-Johnson syndrome (SJS). Clin Pharmacol. 15, 99-105 (2023).
  13. Hasegawa, A., Abe, R. Stevens-Johnson syndrome and toxic epidermal necrolysis: updates in pathophysiology and management. Chin Med J (Engl). 137 (19), 2294-2307 (2024).
  14. Gupta, S. S., Sabharwal, N., Patti, R., Kupfer, Y. Allopurinol-induced Stevens-Johnson syndrome. Am J Med Sci. 357 (4), 348-351 (2019).
  15. Sun, W., et al. Risk of hepatotoxicity in patients with gout treated with febuxostat or benzbromarone: a propensity score-matched cohort study. Arthritis Care Res (Hoboken). 77 (9), 1149-1156 (2025).
  16. Guo, J. W., et al. Therapeutic potential and pharmacological mechanisms of traditional Chinese medicine in gout treatment. Acta Pharmacol Sin. 46 (5), 1156-1176 (2025).
  17. Jiang, Z., et al. The correlation between traditional Chinese medicine constitution and hyperuricemia and gout: a systematic review and meta-analysis. Evid Based Complement Alternat Med. 2023, 5097490 (2023).
  18. Wang, S., et al. Traditional herbal medicine: therapeutic potential in acute gouty arthritis. J Ethnopharmacol. 330, 118182 (2024).
  19. Wang, Y. B., Jin, C. Z. Roles of traditional Chinese medicine extracts in hyperuricemia and gout treatment: mechanisms and clinical applications. World J Gastroenterol. 30 (47), 5076-5080 (2024).
  20. Jingying, G., et al. A comprehensive review of Drynariae Rhizoma: botany, traditional applications, and active flavonoid components. J Pharm Pharmacol. 77 (10), 1319-1337 (2025).
  21. Chen, G. Y., et al. Prediction of Rhizoma Drynariae targets in the treatment of osteoarthritis based on network pharmacology and experimental verification. Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 5233462 (2021).
  22. Zhang, Y., et al. Total flavonoids from Rhizoma Drynariae (Gusuibu) for treating osteoporotic fractures: implication in clinical practice. Drug Des Devel Ther. 11, 1881-1890 (2017).
  23. Yu, X. B., et al. Chondroprotective effects of Gubitong Recipe via inhibiting excessive mitophagy of chondrocytes. Evid Based Complement Alternat Med. 2022, 8922021 (2022).
  24. Zhang, F., et al. Total flavonoids of Drynariae Rhizoma improve glucocorticoid-induced osteoporosis of rats: UHPLC-MS-based qualitative analysis, network pharmacology strategy and pharmacodynamic validation. Front Endocrinol (Lausanne). 13, 920931 (2022).
  25. Liu, F., et al. Mechanism of flavonoids in the treatment of gouty arthritis (review). Mol Med Rep. 30 (2), 132 (2024).
  26. Chen, G. Y., et al. Network pharmacology analysis and experimental validation to investigate the mechanism of total flavonoids of Rhizoma Drynariae in treating rheumatoid arthritis. Drug Des Devel Ther. 16, 1743-1766 (2022).
  27. Chen, G. Y., et al. Total flavonoids of Rhizoma Drynariae restore the MMP/TIMP balance in models of osteoarthritis by inhibiting the activation of the NF-λB and PI3K/AKT pathways. Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 6634837 (2021).
  28. Chen, G. Y., et al. Total flavonoids of Rhizoma Drynariae treat osteoarthritis by inhibiting arachidonic acid metabolites through AMPK/NFλB pathway. J Inflamm Res. 16, 4123-4140 (2023).
  29. Ru, J., et al. TCMSP: a database of systems pharmacology for drug discovery from herbal medicines. J Cheminform. 6, 13 (2014).
  30. Chen, G. Y., et al. Mechanisms of total glucosides of paeony in alleviating methotrexate-induced liver injury. Drug Des Devel Ther. 19, 3407-3423 (2025).
  31. Zhang, P., et al. Network pharmacology: towards the artificial intelligence-based precision traditional Chinese medicine. Brief Bioinform. 25 (1), bbad518 (2023).
  32. Luo, W., et al. Integration of molecular docking, molecular dynamics, and network pharmacology to explore the multi-target pharmacology of fenugreek against diabetes. J Cell Mol Med. 27 (14), 1959-1974 (2023).
  33. UniProt Consortium. UniProt: the universal protein knowledgebase in 2023. Nucleic Acids Res. 51 (D1), D523-D531 (2023).
  34. Stelzer, G., et al. The GeneCards suite: from gene data mining to disease genome sequence analyses. Curr Protoc Bioinformatics. 54, 1.30.1-1.30.33 (2016).
  35. Chen, G. Y., et al. Integrating network pharmacology and experimental validation to explore the key mechanism of Gubitong Recipe in the treatment of osteoarthritis. Comput Math Methods Med. 2022, 7858925 (2022).
  36. Szklarczyk, D., et al. The STRING database in 2023: protein-protein association networks and functional enrichment analyses for any sequenced genome of interest. Nucleic Acids Res. 51 (D1), D638-D646 (2023).
  37. Chen, G. Y., et al. Network pharmacology-based strategy to investigate the mechanisms of Cibotium barometz in treating osteoarthritis. Evid Based Complement Alternat Med. 2022, 1826299 (2022).
  38. Robinson, M. D., McCarthy, D. J., Smyth, G. K. edgeR: a Bioconductor package for differential expression analysis of digital gene expression data. Bioinformatics. 26 (1), 139-140 (2010).
  39. Jin, Q., et al. Network and experimental pharmacology to decode the action of Wendan Decoction against generalized anxiety disorder. Drug Des Devel Ther. 16, 3297-3314 (2022).
  40. Pang, Z., et al. MetaboAnalyst 6.0: towards a unified platform for metabolomics data processing, analysis, and interpretation. Nucleic Acids Res. 52 (W1), W398-W406 (2024).
  41. Kim, S., et al. PubChem in 2021: new data content and improved web interfaces. Nucleic Acids Res. 49 (D1), D1388-D1395 (2021).
  42. Pillinger, M. H., Mandell, B. F. Therapeutic approaches in the treatment of gout. Semin Arthritis Rheum. 50 (3S), S24-S30 (2020).
  43. Yao, T. K., et al. Advances in gouty arthritis management: integration of established therapies, emerging treatments, and lifestyle interventions. Int J Mol Sci. 25 (19), 10853 (2024).
  44. Li, W., et al. Effects of total flavonoids of Rhizoma Drynariae on biochemical indicators of bone metabolism: a systematic review and meta-analysis. Front Pharmacol. 15, 1443235 (2024).
  45. Mohammed, H. S., et al. Investating the involvement of the NLRP3/ASC/caspase-1 and NF-λB/MAPK pathways in the pathogenesis of gouty arthritis: insights from irradiated and non-irradiated Trifolium alexandrium L. extracts and some metabolites. J Ethnopharmacol. 334, 118566 (2024).
  46. Shi, M. F., et al. Study on the effect and mechanism of Zexie Decoction in treating MSU-induced acute gouty arthritis model through PI3K-AKT-mTOR signaling pathway. Int Immunopharmacol. 150, 114214 (2025).
  47. Cui, L., et al. Selenium suppressed the LPS-induced inflammation of bovine endometrial epithelial cells through NF-λB and MAPK pathways under high cortisol background. J Cell Mol Med. 27 (10), 1373-1383 (2023).
  48. Balakin, E., et al. Regulation of stress-induced immunosuppression in the context of neuroendocrine, cytokine, and cellular processes. Biology (Basel). 14 (1), 76 (2025).
  49. Chen, L., et al. AMPK signaling in osteoarthritis: from mechanisms to targeted therapeutics. Front Pharmacol. 16, 1681610 (2025).
  50. FitzGerald, J. D., et al. 2020 American College of Rheumatology guideline for the management of gout. Arthritis Care Res (Hoboken). 72 (6), 744-760 (2020).
  51. Limbachia, V., et al. The effect of different types of oral or intravenous corticosteroids on capillary blood glucose levels in hospitalized inpatients with and without diabetes. Clin Ther. 46 (2), e59-e63 (2024).
  52. Xue, Y., et al. Association of serum glucocorticoids with various blood pressure indices in patients with dysglycemia and hypertension: the Henan Rural Cohort Study. Biomed Environ Sci. 34 (12), 952-962 (2021).
  53. Uson, J., et al. EULAR recommendations for intra-articular therapies. Ann Rheum Dis. 80 (10), 1299-1305 (2021).
  54. Lucenti, L., et al. Do preoperative corticosteroid injections increase the risk of infection after shoulder arthroscopy or shoulder arthroplasty? A systematic review. Healthcare (Basel). 12 (5), 543 (2024).
  55. Feng, W., Cui, D., Yang, T. Interpretation of key points of Chinese guidelines for diagnosis and management of hyperuricemia and gout (2019). J Clin Intern Med. 37 (07), 528-531 (2020).
  56. Lin, Y., et al. Luteolin-4'-O-glucoside and its aglycone, two major flavones of Gnaphalium affine D. Don, resist hyperuricemia and acute gouty arthritis activity in animal models. Phytomedicine. 41, 54-61 (2018).
  57. Wang, Y., et al. A luteolin-loaded electrospun fibrous implantable device for potential therapy of gout attacks. Macromol Biosci. 16 (11), 1598-1609 (2016).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Свяжитесь с нами
Рекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия эксплуатации

Политика

Авторские права © 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.