В данном исследовании представлен желатиновый метод кормления, который позволяет точную, неинвазивную, на основе массы тела введение пероральных препаратов взрослым данио-рерио. Протокол демонстрирует надёжное принятие сигнала и, как доказательство принципа, успешную доставку MK-801, что привело к ожидаемым поведенческим эффектам.
Методическая статья
Простой и точный подход на основе кормов к пероральной подаче лекарств рыбам
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Типичные методы доставки лекарств рыбам (например, дозировка стаканами, внутрибрюшинные инъекции или оральная гаважа) занимают много времени, неточны и/или расточительны. Поскольку эти методы также вызывают стресс у животных, они плохо подходят для повторного или долгосрочного введения лекарств и поведенческих экспериментов, чувствительных к проблемам, связанным с обращением, что ограничивает полезность рыбных моделей в биомедицинских исследованиях. Для преодоления этих препятствий был разработан желатиновый метод кормления, позволяющий быстро и точно дозировать рыбу с минимальными нарушениями. Метод включает приготовление индивидуально приготовленных кусочков корма, состоящих из желатина, экстракта рассола креветок, спирулины и выбранного препарата. Термоподатливые свойства желатина позволяют сжиживать один однородный препарат, точно порционировать по массе каждого тела и затвердеть в индивидуальные кусочки. В качестве доказательства принципа антагонист рецепторов NMDA MK-801 (4 мг кг⁻1) был введён взрослым данио-рерибу перед новым тестом в аквариуме, что привело к поведенческим эффектам, соответствующим снижению тревожного поведения. Этот подход хорошо подходит для поведенческой фармакологии и легко адаптируется к другим водным моделям организмов.
Введение
Данио (Danio rerio) широко используются в биомедицинских исследованиях для изучения развития, физиологии, поведения ифармакологии 1,2,3. Однако полезность данио-рерио для фармакологических исследований, особенно у взрослых животных, ограничена доступностью методов доставки лекарств, которые одновременно являются точными и минимальноразрушительными 4.
Широко используемые методы введения лекарств у данио-рерио, такие как дозировка стаканов, внутрибрюшинная инъекция и оральная гаважа, имеют значительные недостатки. Воздействие при погружении всего тела с помощью дозировки в стакане обеспечивает ограниченный контроль над поглощением препарата, приводит к значительным отходам соединения и вносит изменчивость из-за различий в скорости всасывания и стабильности соединения 5,6,7. Инъекционные методы и оральная вентиляция позволяют более точно назначить дозировку, но требуют анестезии, сдержанности и многократного обращения, что может вызывать стрессовые реакции и одновременно увеличивать риск травмы или гипоксии, что потенциально запутывает поведенческие и физиологическиепоказатели 8,9,10. Эти ограничения особенно проблематични для экспериментов с повторным или длительным введением лекарств.
Для решения этих проблем был разработан желатиновый метод кормления, который позволяет быстро, точно и неинвазивно вводить препаратданио-рерио. Этот подход позволяет включать фармакологические соединения в небольшие, индивидуально приготовленные кормовые кусочки, состоящие из желатина, экстракта рассола и спирулины. Доставка лекарств на основе корма — это неинвазивная альтернатива, которая соответствует принципам 3R (замена, сокращение и совершенствование) в этических исследованиях на животных. Хотя предыдущие исследования показали возможность доставки препаратов на основе кормов взрослымданио-рерио-рерио-рерио, 12,13,14, существующие подходы опираются на гетерогенные пищевые матрицы или фиксированные объёмы корма, которые не учитывают индивидуальные различия в массе тела. Описанный здесь метод решает эти ограничения, позволяя калибровку дозы по весу.
Этот протокол предоставляет подробное, пошаговое описание приготовления и применения корма на основе желатина у взрослых данио-рерио. Хотя метод демонстрируется с помощью поведенческого анализа — нового теста в аквариуме, он широко применим в других областях биологии данио-рерио, и ожидается, что он будет адаптирован для использования в других водных модельных организмах. Этот протокол предлагает практическое решение для исследователей, ищущих эффективную, воспроизводимую и низкострессовую доставку лекарств у данио-рерио, особенно для исследований, требующих точных, повторяющихся и/или долгосрочных фармакологических методов.
Протокол
В этом исследовании использовались взрослые самцы и самки AB и TL данио (4–12 месяцев). Все животные были разведены и содержались в Университете Уэйн Стейт. Все процедуры были одобрены Институциональным комитетом по уходу и использованию животных в соответствии с руководящими принципами Университета штата Уэйн. Рыбу содержали в стандартных условиях на плотных стеллажах (температура 27,5 ± 0,5 °C, проводимость воды 500 мкС ± 10 мкС, pH 7,5 ± 0,2) с циклом свет/темнота 14 ч:10 ч (свет включается в 08:00). Рыбу кормили дважды в день: утром — сухой корм, а днём — свежевылупившиеся солёные креветки. Реагенты и используемое оборудование перечислены в Таблице материалов.
1. Взвешивание рыбы и расчёт объёма корма
- Наполните стеклянный стакан объёмом 100 мл примерно 50 мл системной воды и разместите её на цифровых масштабах. Смотрите на масштабы.
- Аккуратно поймите одну рыбу из их домашнего аквариума с помощью мелкой сетки. Ненадолго коснитесь сеткой сухого бумажного полотенца, чтобы удалить лишнюю воду.
- Аккуратно переложите рыбу в стакан, чтобы вода не пролилась на чешую.
- Запишите вес и используйте этот измеренный вес для расчёта необходимого объема корма на основе 1% объёма на вес тела (V/BW) для каждой отдельной рыбы.
2. Приготовление экстракта рассола из креветок
- Взвешивают порошок рассола в дистиллированной воде до конечной концентрации 250 мг/мл. Помешивайте 1 час при комнатной температуре. Центрифугуйте подвеску при 12 500 × г в течение 10 минут при комнатной температуре и сохраняйте супернатант.
- Повторите центрифугирование ещё раз и снова собирайте супернатант.
- Храните экстракт рассола при −20 °C до 6 месяцев.
3. Подготовка желатинового корма
- Разморозьте экстракт рассола перед приготовлением и рассчитывайте целевые массы желатина (12% w/v), спирулины (4% w/v) и, если применимо, фармакологических соединений, необходимых для желаемого объёма желатинового корма.
- Взвешивают спирулину и желатиновый порошок (производится из свинины; Блум ≈300 г) в отдельные микроцентрифугные трубки по 1,5 мл и записывает фактическую массу в каждой трубке. Убедитесь, что измеренная масса соответствует или превышает целевую массу для предполагаемого конечного объёма.
- Добавьте соответствующие объёмы экстракта рассола, лекарственного соединения и воды в пробирку с спирулиной, чтобы получить конечные концентрации 4% w/v спирулины и 80 мг/мл экстракта рассола креветок.
- Тщательно выкрутите вихрь для гомогенизации. Перенесите необходимый объём смеси с предыдущего этапа в желатинсодержащую трубку, чтобы получить конечную концентрацию желатина 12% w/v.
- Поместите трубку на предварительно нагретый нагревательный блок при температуре 45 °C на 5 минут, периодически создавая вихрь, пока желатин полностью не растворится. Если растворение неполное, аккуратно перемешайте стерильной деревянной или металлической палочкой для гомогенизации.
- Аликвот полностью гомогенизированную смесь (до 100 мкл на пробирку) разведите в маркированные микроцентрифугные трубки объемом 1,5 мл.
- Храните аликвоты на ночь при −20 °C для полного затвердевания и облегчения обращения во время кормления.
4. Формирование отдельных кусочков корма
- Разогрейте алицитированную желатиновую смесь до 45 °C до полной жидкости перед кормлением.
- Тщательно вторьте жидкую желатиновую смесь.
- Пипет, объём, соответствующий 1% массы тела рыбы, на лист парафиновой плёнки, образуя отдельные кусочки (рисунок 1).
ПРИМЕЧАНИЕ: Для облегчения обращения и хранения поместите лист парафиновой пленки внутрь чашки Петри перед подачей объёма. Это позволяет парафину оставаться плоским и облегчает перенос приготовленных кусочков до −20 °C для хранения. - Размещайте кусочки при −20 °C минимум на 20 минут, чтобы обеспечить повторное затвердевание.
- Держите кусочки на льду до кормления.
5. Введение желатинового корма
- Перенесите рыбу с стойки для хранения в комнату поведения и дайте ей привыкнуть 1 час.
- Временно изолируйте каждую рыбу в аквариуме с помощью прозрачных барьеров на 2–5 минут перед кормлением.
- С помощью щипцев поместите индивидуальный желатиновый кусочек, соответствующий 1% от массы тела рыбы, на поверхность воды перед каждой изолированной рыбой.
- Наблюдайте за каждой рыбой, чтобы подтвердить съедание всего кусочка корма в течение 5 минут.
- После того как рыбы съедят корм, уберите барьеры и либо возвращайте рыбу в домашние аквариумы, либо приступайте к экспериментальным процедурам.
ПРИМЕЧАНИЕ: Разработанный пример, описывающий подготовку корма и расчёт целевых и фактических дозировок, приведён в дополнительном файле 1, примеры значений также приведены в таблице 1.
Результаты
Вкусовкусие желатинового кормления
Для оценки вкусности кормления взрослым данио-рерио-рерио-рерио-ревио-ревио-рего давали желатиновый корм в течение пяти последовательных дней вместо утреннего кормления (см. рисунок 2). Все рыбы с TL съели корм в течение 5 минут при первом контакте, тогда как AB рыбы требовали повторного воздействия, при этом 15 из 16 особей стабильно ели корм после четырёх последовательных дней адаптации (рисунок 2A). Анализ времени потребления кормления с помощью трёхстороннего ANOVA (штамм × пол × день) выявил значимые основные эффекты напряжения (F₁,₁₂₅ = 19,4, P < 0,0001) и дня (F₄,₁₂₅ = 5,80, P < 0,001), но отсутствие основного эффекта секса (F₁,₁₂₅ = 0,24, P = 0,63). Наблюдались значимые взаимодействия между деформацией и днём (F₄,₁₂₅ = 3,35, P = 0,012) и между деформациями, днём и полом (F₄,₁₂₅ = 2,55, P = 0,04). Рыба TL обоих полов потребляла корм быстро с первого контакта (4–20 с), тогда как рыба AB показывала более длительное начальное употребление (7–144 с), которое уменьшалось с каждым днём (рисунок 2B). К четвёртому и пятому дням все рыбы, кроме одного самца AB, съели корм в течение 10 секунд. Примерно 95% рыб потребляют желатиновый корм в течение 30 секунд после 2–3 дней акклиматизации, как сообщалосьранее 15,16.
Поведенческий эффект MK-801, введённого с помощью желатинового кормления
Для демонстрации эффективности доставки препаратов на основе желатина MK-801, антагониста N-метил-D-аспартата (NMDAR), был введён с использованием желатинового корма. Дно при исследовании нового резервуара измерялось как поведенческий показаний. Известно, что MK-801 изменяет движение и поведение, похожее на тревогу или избегание хищников, у взрослыхданио-рерио. Взрослые AB данио акклиматизировались к процедуре кормления, получая желатиновые кусочки без препарата в течение двух дней подряд для обеспечения привыкшения и надёжного употребления. На третий день рыбы, назначенные в группу лечения, получили одну дозу MK-801 (4 мг кг⁻1), добавленную в желатиновый корм. Контрольная рыба получила идентичный желатиновый кусочек, содержащий только воду. Корм был введён за 30 минут до поведенческой оценки в новом тесте в аквариуме.
Поведение, похожее на тревогу или избегание хищников, измеряемое как расстояние от дна, было проанализировано с помощью ANOVA 2 × 2 (половой × препарат), что выявило значительный основной эффект MK-801 (рисунок 3) (F₁,₆₉ = 24,5, P < 0,001). Обработанные наркотиками рыбы проводили больше времени ближе к верхней части аквариума, что обычно воспринимается как снижение тревожного поведения или избегания хищников. Основного эффекта секса (F 1,69=2,52, P=0,12) или лекарственного вещества при взаимодействии полового пола (F 1,69=1,0, P=0,32) не было. Парные t-тесты, скорректированные FDR, подтвердили, что MK-801 увеличивает расстояние до низа как у самок (P = 0,0076), так и у самцов (P = 0,023).
В совокупности эти результаты показывают, что корм на основе желатина позволяет эффективно вводить фармакологические соединения перорально, вызывая ожидаемые изменения поведения дна в новом тесте с аквариумом.
Рисунок 1: Подготовка желатинового корма. Желатиновая подача пипетировалась на парафиновую плёнку в индивидуально подобранных кусочках, соответствующих 1% массы тела, и оставлялась при −20 °C. Эта цифра была изменена из Ochocki et al.11. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этой фигуры.
Рисунок 2: Потребление кормов на основе желатина взрослыми данио-рериоми. (A) Процент рыб AB и TL обоих полов, которые потребили корм в течение 5 минут после введения. (B) Время кормить AB и TL рыб по полу. Рыбы, которые не употребляли корм, были исключены из анализа времени еды. Данные отображаются как средние ± s.e.m.; n = 8 рыб на сорт и пол. Эта цифра была изменена из Ochocki et al.11. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этой фигуры.
Рисунок 3: Поведенческие эффекты введения антагониста NMDA-рецепторов. MK-801 (4 мг/кг) был введён за 30 минут до нового теста в аквариуме взрослой AB данио-рерио обоих полов. Расстояние от дна аквариума использовалось как мера тревожного поведения/избегания хищника. Данные представлены в виде графиков «коробки и усы», показывающих медиану (центральную линию), межквартильный диапазон (коробка) и ±1,5× межквартильный диапазон (усы). *P < 0,05 на основе парных t-тестов, скорректированных с коэффициентом ложного обнаружения. Размеры выборки: женское транспортное средство, n = 20; женский MK-801, n = 19; мужское транспортное средство, n = 19; мужской MK-801, n = 15. Пять животных были исключены из анализа из-за того, что они не употребляли желатиновый корм. Эта цифра была изменена из Ochocki et al.11. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этой фигуры.
| Компонент | Концентрация запасов | Целевая концентрация | Целевая масса/объём | Фактическая масса/объём |
| Желатин | - | 12% (в/в) | 60 мг | 62 мг |
| Спирулина | - | 4% (с в/в) | 20 мг | 25 мг |
| Экстракт солёных креветок | 250 мг/мл | 80 мг/мл | 160 мкл | 200 мкл |
| Наркотики | 10 мг/мл | 0,4 мг/мкл (4 мг/кг при 1% BW) | 20 мкл | 25 мкл |
| Вода | - | - | 320 мкл | 400 мкл |
| Общий объём жидкого подачи | - | - | 500 мкл | 625 мкл |
| TOtal Volume готового корма | - | - | 500 мкл | 516,7 мкл |
Таблица 1: Пример приготовления желатинового корма .Концентрации запасов, целевые и гипотетические фактические массы или объёмы, используемые для подготовки желатинового корма для доставки препарата 4 мг/кг при 1% массы тела.
Дополнительный файл 1: Пример приготовления желатинового корма для нескольких рыб. Пример исследования, демонстрирующий формулировку корма, содержащего препарат, и расчёт индивидуальных объёмов дозировки на основе индивидуальной массы тела. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы скачать этот файл.
Обсуждение
Представленный здесь метод кормления на основе желатина преодолевает ключевые ограничения распространённых методов доставки лекарств у данио-рерио, позволяя индивидуализированное дозирование, основанное на массе тела, с минимальным контролем. Это улучшает экспериментальную точность и воспроизводимость. Термоподатливый характер желатина позволяет сжиживать один однородный препарат точно, равномерно порционировать и затвердеть в индивидуальные кусочки, обеспечивая равномерное распределение препаратов при учте вариативности размеров между отдельными особями. Кроме того, пероральная доставка через желатин позволяет избежать стресса и потенциальных повреждений, связанных с инъекционными методами, что является важным усовершенствованием в рамках 3Rs4.
Преимущества этого подхода зависят от точного исполнения. Для успешной реализации критически важны несколько процедурных факторов. Точное измерение индивидуальной массы тела крайне важно, так как взрослые данио-рерио могут демонстрировать значительную гетерогенность размеров даже в группах с соответствующими возрастом, полу и штаммами, при этом масса тела варьируется почти втрое уособей 11,18,19. Тщательная гомогенизация соединения внутри желатиновой матрицы не менее важна для обеспечения равномерного дозирования по частям кормления. Наконец, акклиматизация рыбы к желатиновому корму до введения препарата снижает отказ от корма; Рекомендуется визуальное подтверждение приема корма для точной подачи дозы.
Однако даже при правильном применении существуют практические трудности с доставкой препаратов на основе корма. Одной из возможных проблем является неправильная подготовка кусочков корма, что может привести к быстрому распаду кормления после размещения в воде. Обычно это происходит из-за недостаточного контроля температуры и/или смешивания во время подготовки, длительного нагрева или повторных циклов замораживания и оттаивания сырья. Чтобы избежать этого, необходимо обеспечить полное растворение желатина путём правильного нагрева и смешивания, а готовые бульоны должны быть переложены в порции для одноразового использования, которые размораживаются только один раз и используются быстро. Для чувствительных препаратов рекомендуется подготовить дополнительный кусочек корма, который можно добавить в стакан с водой, чтобы убедиться в правильной посадке перед экспериментами. Для соединений, снижающих вкусовкусность корма, можно улучшить прием, включив притяжающие вещества, такие как сокмоллюсков 12˒13 или коммерческие рыбныеаттрактанты 20. В настоящем исследовании экстракт рассола был использован для повышения вкусоприемности и доказал свою эффективность. В качестве альтернативы введение нескольких меньших доз может улучшить потребление при достижении желаемого совокупного воздействия. Помимо этих практических соображений, доставка кормов также имеет врожденные фармакокинетические ограничения. Как и при всех методах пероральной доставки, всасывание желудочно-кишечным трактом может задерживать или снижать биодоступность по сравнению с инъекционными методами, а стабильность соединения в матриксе корма может варьироваться.
Несмотря на адаптацию, небольшая часть животных может не употреблять желатиновый корм и должна быть исключена из анализа, так как они могут не получить ожидаемую дозу лекарства. Показатели отказов обычно варьируются от 2,4% до 6,4%15,16, поэтому не являются серьёзным методологическим препятствием. Поступление кормов также может различаться в зависимости от сорта. Этот эффект штамма соответствует предыдущим сообщениям, указывающим на то, что генетический фон может влиять на задержку к приближению ккорму 20. Эти факторы следует учитывать при проектировании экспериментов. Рекомендуется сообщать о соблюдении питания вместе с идентификацией штамма для повышения прозрачности и воспроизводимости.
Ещё одним важным недостатком настоящего исследования является то, что протокол был разработан и валидирован исключительно у взрослых данио-рерио, поэтому напрямую не переносится на личиночную стадию. Этот метод основан на индивидуализированном дозировании и употреблении отдельных желатиновых частиц на основе массы тела. Это возможно у взрослых, но непрактично для личинок из-за их небольшого размера зазора, пищевого поведения на основе подвешивания и сложности получения достоверных измерений индивидуальной массы тела. Следовательно, адаптация для личиночных применений потребует значительных изменений. Эти изменения могут включать разработку микромасштабных частиц и альтернативные стратегии доставки.
По сравнению с ранее описанными методами на кормах, этот подход обеспечивает лучшую точность дозирования и простоту использования. Коммерческие желатиновые корма требуют порций гетерогенного вещества, ограничивая точностьдозы 12, в то время как другие методы дают одинаковые количества всем животным и предполагают одинаковую массутела 14,21. Позволяя индивидуализированную дозировку, описанный здесь желатиновый метод кормления избегает недостаточной или чрезмерной дозировки и улучшает экспериментальный контроль; Это также позволяет дозировать взрослых даниов в соответствии с лучшими практиками у грызунов, которые обычно дозируют в зависимости от веса. Этот метод также хорошо подходит для исследований, требующих точных, многократных фармакологических манипуляций, поскольку приводит к минимальному стрессу. Это включает применения в поведенческой нейронауке, нейрофармакологии и исследованиях старения. Он также полезен для соединений, взаимодействующих с анестетиками или демонстрирующих низкую стабильность в водных средах. Хотя это демонстрируется здесь у взрослых данио-рерио, этот подход легко адаптируется к другим водным модельным организмам. В целом эта методика повышает точность дозирования, благополучие животных и методологическую гибкость, расширяя полезность рыбных моделей в биомедицинских исследованиях.
Раскрытие информации
Этот протокол основан на работах, ранее опубликованных в Journal of Experimental Biology, Ochocki AJ, Kenney JW, 202311. Настоящая статья предоставляет подробные и расширенные методологические рекомендации по воспроизводимости.
Благодарности
Эта работа была поддержана Национальными институтами здоровья (R35GM142566) при J.W.K.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| (+) MK-801 hydrogen maleate powder | SIGMA-ALDRICH | M107-5MG | |
| Гелатин из порошка свиной кожи | SIGMA-ALDRICH | G1890-100G | Сила геля ~300 г Bloom, Тип А, Биореагент |
| Mikro Fine сушеные артемии | Brine Shrimp Direct | https://www.brineshrimpdirect.com/mikro-fine-dried-brine-shrimp-16-ounce | Мелкий < 400 микрон |
| Порошок спирулины | Brine Shrimp Direct | https://www.brineshrimpdirect.com/spirulina-powder-spirulina-powder-2-oz | 99% Чистые сине-зеленые водоросли |
Ссылки
- Grunwald, D. J., Eisen, J. S. Headwaters of the zebrafish emergence of a new model vertebrate. Nat Rev Genet. 3 (9), 717-724 (2002).
- Norton, W., Bally-Cuif, L. Adult zebrafish as a model organism for behavioural genetics. BMC Neurosci. 11 (1), 90 (2010).
- Gerlai, R. Evolutionary conservation translational relevance and cognitive function the future of zebrafish in behavioral neuroscience. Neurosci Biobehav Rev. 116, 426-435 (2020).
- Sneddon, L. U., Halsey, L. G., Bury, N. R. Considering aspects of the 3Rs principles within experimental animal biology. J Exp Biol. 220 (17), 3007-3016 (2017).
- Levin, E. D., Limpuangthip, J., Rachakonda, T., Peterson, M. Timing of nicotine effects on learning in zebrafish. Psychopharmacology (Berl). 184 (3-4), 547-552 (2006).
- Montgomery, J. E., Parsons, M. J., Hyde, D. R. A novel model of retinal ablation demonstrates that the extent of rod cell death regulates the origin of the regenerated zebrafish rod photoreceptors. J Comp Neurol. 518 (6), 800-814 (2010).
- Sison, M., Gerlai, R. Behavioral performance altering effects of MK-801 in zebrafish (Danio rerio). Behav Brain Res. 220 (2), 331-337 (2011).
- Neely, M. N., Pfeifer, J. D., Caparon, M. Streptococcus zebrafish model of bacterial pathogenesis. Infect Immun. 70 (7), 3904-3914 (2002).
- Kinkel, M. D., Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E. Intraperitoneal injection into adult zebrafish. J Vis Exp. (42), e2126 (2010).
- Collymore, C., Rasmussen, S., Tolwani, R. J. Gavaging adult zebrafish. J Vis Exp. (78), e50691 (2013).
- Ochocki, A. J., Kenney, J. W. A gelatin-based feed for precise and non-invasive drug delivery to adult zebrafish. J Exp Biol. 226 (2), jeb245186 (2023).
- Sciarra, J. B., Tyler, A., Kolb, A. A gelatin-based diet for oral dosing juvenile to adult zebrafish. Lab Anim Sci Prof. 32, 35 (2014).
- Chang, C. T., Doerr, K. M., Whipps, C. M. Antibiotic treatment of zebrafish mycobacteriosis tolerance and efficacy of treatments with tigecycline and clarithromycin. J Fish Dis. 40 (10), 1473-1485 (2017).
- Zang, L., Morikane, D., Shimada, Y., Tanaka, T., Nishimura, N. A novel protocol for the oral administration of test chemicals to adult zebrafish. Zebrafish. 8 (4), 203-210 (2011).
- Atiratana, T., Goldson, A. R., Samosorn, S., Rajput, N., Praphairaksit, N., et al. The effects of Arabian jasmine on zebrafish behavior depends on strain sex and personality. PLoS One. 20 (9), e0332642 (2025).
- Beigloo, F., Davidson, C. J., Gjonaj, J., Perrine, S. A., Kenney, J. W. Individual differences in the boldness of female zebrafish are associated with alterations in serotonin function. bioRxiv. , (2024).
- Benvenutti, R., Gallas-Lopes, M., Marcon, M., Reschke, C. R., Herrmann, A. P., et al. Glutamate NMDA receptor antagonists with relevance to schizophrenia a review of zebrafish behavioral studies. Curr Neuropharmacol. 20 (3), 494-509 (2022).
- Fowler, L. A., Williams, M. B., Dennis-Cornelius, L. N., Farmer, S., Barry, R. J., et al. Influence of commercial and laboratory diets on growth body composition and reproduction in the zebrafish Danio rerio. Zebrafish. 16 (6), 508-521 (2019).
- Siccardi, A. J., Garris, H. W., Jones, W. T., Moseley, D. B., D’Abramo, L. R., et al. Growth and survival of zebrafish Danio rerio fed different commercial and laboratory diets. Zebrafish. 6 (3), 275-280 (2009).
- Oswald, M., Robison, B. D. Strain-specific alteration of zebrafish feeding behavior in response to aversive stimuli. Can J Zool. 86 (10), 1085-1094 (2008).
- Lu, Y., Patton, E. E. Long-term non-invasive drug treatments in adult zebrafish that lead to melanoma drug resistance. Dis Model Mech. 15 (5), dmm049401 (2022).
Перепечатки и разрешения
