Исследовательская статья
В этом ретроспективном исследовании оценивалось добавление витамина D к терапии валсартаном, аторвастатином и пробуколом у 150 пациентов с диабетической нефропатией III стадии в течение 8 месяцев. Пациенты, получающие витамин D, демонстрировали большее улучшение функции почек, метаболических параметров, иммунных маркеров и воспалительных показателей, чем пациенты, получающие только стандартную терапию.
Целью данного исследования было изучение терапевтической эффективности витамина D как дополнения к тройной терапии на основе пробукола (валсартан + аторвастатин + пробукол) у пациентов с диабетической нефропатией (ДН) и оценить его влияние на иммунную функцию. Всего с июля 2022 по май 2024 года ретроспективно было зарегистрировано 150 пациентов с DN (стадия Могенсена). В зависимости от различных схем медикаментозного применения в клинической практике их делили на контрольную группу (n = 56), получающую тройную терапию (валсартан + аторвастатин + пробукол), и наблюдательную группу (n = 94), получающую четвёрную терапию (тройная терапия + витамин D). Распределение групп определялось по фактическому назначению лечения, а не по рандомизации. Обе группы получали ежедневные инфузии инсулина одновременно в течение 8 месяцев. Клинические параметры, включая функцию почек (SCr, 24 часа UPE, UAlb/UCR), профили глюкозы и липид, иммунные маркеры (CD3+, CD4+ клетки, соотношение CD4+/CD8+) и воспалительные факторы (hs-CRP, IL-6, TNF-α, MCP-1), оценивались до и после лечения. Результаты показали, что наблюдательная группа показала значительно большее улучшение функции почек, гликемического контроля, липидного профиля и иммунной модуляции (повышенные доли CD3+ и CD4+, более высокое соотношение CD4+/CD8+ и снижение воспалительных маркеров) по сравнению с контрольной группой (все P<0,05). Что касается клинических выписок, наблюдательная группа показала более высокий уровень (45,74% против 39,29%), но эта разница не была статистически значимой (χ2 = 0,596, P = 0,440). В заключение, добавление витамина D было связано с большими клиническими преимуществами, чем тройная терапия на основе пробукола в этой ретроспективной когорте пациентов с ДН, включая улучшение функции почек, глюкозы и липидного профиля, а также индикаторов иммунной функции. Эти результаты свидетельствуют о том, что витамин D может быть перспективным дополнительным агентом для управления ДН, однако для подтверждения причинности необходимы дальнейшие перспективные рандомизированные контролируемые исследования.
Диабетическая нефропатия (ДН), крайне тяжёлая микроваскулярная проблема при диабете, сейчас является ведущим фактором почечной недостаточности во всёммире 1. По мере роста числа случаев диабета всё больше внимания уделяется управлению и решению DN2. Однако, несмотря на достижения в лечении DN, результаты для пациентов остаются неблагоприятными, что существенно влияет на их самочувствие и наносит серьёзные финансовые потери. Поэтому поиск более эффективных методов терапии для остановки прогрессирования ДНР и снижения частоты ЭСР имеет решающее клиническое и социальноезначение 3,4.
DN возникает и прогрессирует через множество сложных процессов, включая дисрегуляцию глюкозы, окислительное повреждение, воспалительные реакции и нарушениякровотока 5. Эти механизмы взаимодействуют, способствуя повреждениям почек и фиброзу. В настоящее время лечение DN в основном включает контроль уровня глюкозы в крови, артериального давления и липид, а также применение ACEI или ARB для задержки прогрессирования заболевания 6,7. Однако эффективность этих методов ограничена, и пациенты часто сталкиваются с ESRD, требующей диализа или пересадкипочки 8.
В последние годы роль витамина D в управлении DN привлекла внимание. Это жирорастворимое питательное вещество, важное для баланса кальция и фосфора, роста и специализации клеток, а также для иммунной функции9. Исследования показывают тесную связь между дефицитом витамина D и повреждением микрососудов при диабете. Витамин D защищает здоровье почек через различные механизмы, такие как улучшение инсулинорезистентности, подавление воспалительного ответа, снижение окислительного стресса и регуляцияRAS-10. Кроме того, витамин D может снижать уровень протеинурии и предотвращать повреждение подоцитов, тем самым замедляя прогрессирование ДН. Поэтому приём витамина D может стать новым подходом к лечению DN11. Пробукол — это антиоксидант, который противодействует окислительному стрессу главным образом за счёт ингибирования окисления жирных кислот и уменьшения образованиярадикалов. В ДНК окислительный стресс значительно способствует повреждению почек. Исследования показывают, что пробукол эффективно снижает уровень протеинурии и улучшает функцию почек у людей сэтим заболеванием 13. Кроме того, пробукол также регулирует липиды крови и ингибирует атеросклероз, что дополнительно поддерживает его применение в леченииDN-14.
Помимо локальных почечных механизмов, недавние системные исследования показали, что окислительный стресс и воспалительная сигнализация играют центральную роль в нейровоспалительных и периферических невропатических процессах, особенно при метаболических и сосудистыхзаболеваниях 15. Интегративный анализ окислительно-окислённой сигнализации и взаимодействия оксида азота с ROS дополнительно предоставляет механистическую структуру, связывающую дисфункцию эндотелия, окислительный дисбаланс и повреждение органов при сердечно-сосудистых и неврологическихзаболеваниях 16. Кроме того, участие гипоталамуса в нейровоспаление, связанное со стрессом, и нейроэндокринная регуляция может влиять на системный метаболический гомеостаз и почечныеисходы 17. Эти более широкие взгляды подтверждают, что нацеление на воспаление и окислительный стресс, как это происходит с витамином D и пробуколом, может иметь многосистемные преимущества, выходящие за пределы почек, особенно у диабетических пациентов со сложными сопутствующимизаболеваниями 18.
В заключение, и витамин D, и пробукол эффективны для управления ДН, и их сочетание может обеспечить идеальный терапевтический эффект. Поэтому исследование совместного использования витамина D и пробукола для достижения синергии получило популярность в исследованиях DN-терапии. Витамин D и пробукол дополняют друг друга в своих режимах действия, и совместное применение может дополнительно усилить действие антиоксидантного стресса, противовоспалительных и регуляции иммунного ответа, чтобы более комплексно защитить функциюпочек 19. Кроме того, витамин D может снижать воспаление у пациентов с ДН, регулируя иммунную функцию, тем самым улучшая прогноз. Исследования показали, что у пациентов с DN иммунная дисфункция, проявляющаяся дисбалансом подмножеств Т-клеток и аномальными уровнямицитокинов 20,21. Эти иммунные нарушения не только участвуют в процессе повреждения почек, но и могут влиять на реакцию пациента на лечение и прогноз22. Поэтому оценка индикаторов иммунной функции крайне важна для управления DN.
Учитывая ограниченные прямые доказательства сочетания витамина D и пробукола в ДН, настоящее исследование было направлено на изучение, приносит ли этот комбинированный режим дополнительные клинические преимущества и иммуномодуляторные эффекты по сравнению с одной только тройной терапией. Используя тщательное проектирование экспериментов и научные аналитические методы, это исследование тщательно изучит терапевтические преимущества витамина D в сочетании с пробуколом у пациентов с DN и его влияние на маркеры иммунной функции. В соответствии с вышеуказанным исходом, в настоящем исследовании в качестве базовой схемы выбрали валсартан (ARB) для контроля артериального давления и задержки прогрессирования почек, аторвастатин для контроля дислипидемии и инсулин для контроля гликемии. Пробукол был добавлен как антиоксидант для борьбы с окислительным стрессом — ключевым механизмом прогрессирования DN. Витамин D дополнительно дополнялся в наблюдательной группе из-за его новой роли в иммуномодуляции и ренопротекции. Соответственно, контрольная группа получила тройную терапию (валсартан + аторвастатин + пробукол), а наблюдательная группа — четверную терапию (валсартан + аторвастатин + пробукол + витамин D). Обе группы получали ежедневную инфузию инсулина в течение 8-месячного периода лечения. После лечения в обеих группах наблюдались изменения функции почек, уровня глюкозы и липидов в крови, иммунных клеток и воспалительных индексов. Клиническая значимость витамина D в сочетании с пробуколом для ведения ДН оценивалась с помощью противопоставленных терапевтических результатов. Её цель — внедрить инновационные стратегии ДН-терапии, предлагая пациентам более эффективные варианты лечения, повышая качество их жизни и снижая медицинские расходы.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Это исследование было одобрено Этическим комитетом Хэбэйской общей больницы (номер одобрения: 2025-LW-0265). Из-за ретроспективного характера исследования одобрение этики было получено после периода сбора данных, что было разрешено комитетом для неинтервенционных исследований с использованием анонимизированных клинических данных. Требование письменного информированного согласия было отменено.
Отбор участников
Потенциальные участники были набраны из отделения нефрологии Хэбэйской общей больницы с июля 2022 по май 2024 года. Все пациенты проходили скрининг по заранее установленным критериям включения и исключения.
Критерии включения были следующими: диагноз диабетической нефропатии (ДН) на стадии III23 по синдрому Могенсена, определяемой как персистированная альбуминурия с соотношением альбумина к креатинину (UAlb/UCR) 30–300 мг/г как минимум в двух из трёх точечных образцов мочи, собранных в течение 3–6 месяцев, без гематурии или быстрого снижения функции почек, указывающих на недиабетическое заболевание почек; рассчитанная коэффициент гломерулярной фильтрации (eGFR) ≥45 мл/мин/1,73м² , рассчитанный с использованием уравнения CKD-EPI; первый диагноз ДН без предыдущей терапии витамином D, пробуколом или иммуносупрессантами для ДН; возраст <75 лет; и клинически стабильное состояние без острых диабетических осложнений, таких как диабетический кетоацидоз или гипергликемическое гиперосмолярное состояние, а также активных серьёзных инфекций в течение 4 недель до регистрации. Биопсия почки не требовалась для поступления; Однако пациенты с подозрением на недиабетическое заболевание почек, включая активный осадок мочи, быстро прогрессирующий гломерулонефрит или системное аутоиммунное заболевание, были исключены.
Критерии исключения включали серьёзные системные заболевания, такие как злокачественные опухоли, тяжёлые сердечно-сосудистые заболевания или аутоиммунные заболевания; известная аллергия на витамин D, пробукол, валсартан, аторвастатин или инсулин; беременность или лактация; а также недавнее применение лекарств в течение 4 недель, которые могут повлиять на результаты исследований, включая иммуносупрессанты или кортикостероиды.
Распределение групп
Врач, проходящий скрининг, оставался ослеплым к окончательному распределению групп до подтверждения права на получение.
Были зафиксированы исходные демографические и клинические характеристики, включая возраст, пол, продолжительность диабета и ДН, а также анамнез гипертонии или гиперлипидемии.
В этом исследовании использовался ретроспективный, нерандомизированный контролируемый дизайн. Для минимизации смещения отбора и устранения потенциальных факторов, включая временные изменения и вариабельность, связанную с врачом, распределение групп основывалось на хронологическом порядке поступления, а не по предпочтениям врача или пациента.
Пациенты, принятые с июля 2022 по декабрь 2023 года, получали стандартную тройную терапию, включающую валсартан, аторвастатин и пробукол, и были распределены в контрольную группу (n = 56). Пациенты, принятые с января 2024 по май 2024 года и получавшие четырёхкратную терапию (валсартан, аторвастатин, пробукол и витамин D), были распределены в группу наблюдения (n = 94).
Большее количество пациентов в наблюдательной группе отражало увеличение клинического применения дополнительной терапии витамином D в исследовательском центре, начиная с начала 2024 года, после появления новых данных. Исходные демографические и клинические характеристики были сопоставимы между группами (Таблица 1; P>0.05), и в течение исследования не наблюдалось значимых изменений в диагностических критериях, лабораторных методах или составе врачебной команды.
Введение схемы лечения
Все участники получали стандартизированную ежедневную схему инфузии подкожного инсулина для контроля гликемии в течение 8-месячного периода исследования. Дозировка инсулина корректировалась индивидуально в соответствии с ежедневным мониторингом капиллярного уровня глюкозы в крови. Пациенты в контрольной группе получали валсартан (80 мг один раз в день на голодный желудок), аторвастатин (20 мг один раз в день) и пробукол (250 мг два раза в день) в течение 8 месяцев. Пациенты в наблюдательной группе получали одинаковую схему валсартан, аторвастатина и пробукола с одинаковыми дозировками и графиками, а также ежедневное пероральное приём витамина D.
Дозировка витамина D была определена на основе базового уровня 25-гидроксивитамина D в сыворотке [25(OH)D], измеренных при введении с помощью электрохемилюминесцентного иммуноанализа (ECLIA). Достаточность витамина D определялась как 25(OH)D ≥30 нг/мл, недостаточность — 20 нг/мл ≤25(OH)D <30 нг/мл, а дефицит — 25(OH)D <20 нг/мл. Пациенты, получавшие добавки для предотвращения дефицита, получали 600–800 МЕ в день, тогда как пациенты с установленной недостаточностью или дефицитом витамина D — 2000 МЕ/сутки.
Критерии мониторинга безопасности и остановки
Для обеспечения безопасности участников в течение 8-месячного периода лечения уровни кальция, фосфора и паратиреоидного гормона (ПТГ) в сыворотке измерялись на исходном уровне и каждые 4 недели для мониторинга гиперкальциемии, вызванной витамином D, и дисбаланса кальция-фосфора. На начальном этапе и через 8 месяцев была проведена 12-проводная электрокардиограмма (ЭКГ) для оценки продления интервала QTc, связанного с пробуколом. У пациентов с исходным QTc ≥450 мс у мужчин или ≥460 мс у женщин ЭКГ повторялась на первом месяце.
Параметры функции почек, включая креатинин в сыворотке и eGFR, а также электролиты сыворотки, отслеживались раз в две недели в течение первого месяца и ежемесячно после этого. Участникам было рекомендовано немедленно сообщать о новых симптомах. Критерии прекращения лечения включали скорректированный кальций в сыворотке >10,5 мг/дл (2,62 ммоль/л), подтверждённый повторным тестированием в течение 48 часов; Интервал QTc >500 мс или увеличение >60 мс по сравнению с исходным уровнем при двух последовательных ЭКГ; удвоение уровня креатинина в сыворотке с исходного уровня или развитие острой почечной травмы по критериям заболеваний почек: улучшение глобальных результатов (KDIGO); а также любое неблагоприятное событие ≥3 степени согласно Общим терминологическим критериям для побочных эффектов (CTCAE), считающееся возможно, вероятной или однозначно связанной с витамином D или пробуколом. Серьёзные побочные события были сообщены в этический комитет больницы в течение 24 часов.
Сбор и обработка биологических образцов
Образцы крови и мочи были собраны перед началом лечения и после завершения 8-месячного периода. Все образцы собирались утром после ночного голодания продолжительностью 8–12 часов. Примерно 20 мл венозной крови было собрано с использованием стандартных методов флеботомии в сывороточные сепараторы и ЭДТА-трубки. Образцы крови свертывались при комнатной температуре в течение 30 минут и центрифугировали при 1000 × г в течение 15 минут при 4 °C. Прозрачные сывороточные супернатанты тщательно аспирировались, не нарушая тромб или шерсть баффи, аквитировали в криовиалы для различных анализов, маркировали идентификатором участника, датой и типом образца, и хранили при −80 °C до анализа. Образцы сыворотки могли храниться при −80 °C до 12 месяцев.
Для 24-часового выделения белка из мочи (24 часа UPE) участники выбрасывали первый утренний образец мочи в 7:00 утра первого дня, а затем собирали всю мочу, включая первый утренний образец мочи в 7:00 утра второго дня, в специальный контейнер. Участникам было поручено хранить контейнер для сбора в холодильник в период сбора данных. Общий объём мочи был зафиксирован, тщательно смешан и аликотирован для лабораторного анализа. Образцы хранили при 4 °C при анализе в течение 24 часов или при −20 °C для последующего анализа.
Для соотношения альбумина к креатинину (UAlb/UCR) образцы мочи в первом утреннем состоянии были собраны в стерильных контейнерах и обработаны аналогично. Те же процедуры повторялись после окончания 8-месячного периода лечения.
Биохимический и клинический анализ параметров
Замороженные образцы сыворотки размораживались на льду или при 4 °C перед анализом креатинина (SCr). SCr измерялся с помощью ферментативного колориметрического анализа на автоматическом биохимическом анализаторе согласно инструкциям производителя. Ежедневная калибровка проводилась с использованием многоуровневых калибраторов, и в каждую партию входили два уровня коммерческих материалов для контроля качества. Образцы анализировались в дубликате, а анализы с коэффициентом вариации >5% повторялись. Нижний предел обнаружения SCr составлял 2,0 мкмоль/л.
Концентрация белка в 24-часовых аликвотах мочи измерялась с помощью метода пирогалола с красно-молибдатным методом. Образцы анализировались в дубликатах, а материалы контроля качества включались в каждый запуск. Образцы выше калибровочного диапазона (>3,0 г/л) разбавлялись обычным физиологическим раствором и переоценивались. 24-часовой UPE рассчитывался с учётом концентрации белка мочи и общего объёма мочи.
Концентрации альбумина и креатинина в образцах мочи в первое утро были измерены с помощью биохимического анализатора, а затем рассчитано соотношение UAlb/UCR.
Плазменная глюкоза натощак (FPG) и 2-часовая пост-едальная глюкоза (2h-PPG) измерялись с помощью валидированного глюкометра и образцов капиллярных пальцев в соответствии с инструкциями производителя.
Гликированный гемоглобин (HbA1c) был проанализирован с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием специализированной системы анализа HbA1c. Участникам было рекомендовано избегать препаратов для снижения липидов в течение 7 дней и пищи с высоким содержанием жиров или алкоголя в течение 24 часов до забора крови после лечения. Общий холестерин в сыворотке (TC), триглицериды (TG), липопротеиновый холестерин высокой плотности (HDL-C) и липопротеиновый холестерин низкой плотности (LDL-C) измерялись с помощью ферментативных анализов. Двухуровневые материалы контроля качества анализировались ежедневно. Параметры липидов изначально измерялись в сингликации, а образцы с коэффициентом вариации >10% переоценивались в дубликате. Пределы обнаружения составляли 0,1 ммоль/л для ТС, 0,05 ммоль/л для ТГ, 0,08 ммоль/л для ЛПВП и 0,10 ммоль/л для ЛПНП. Значения LDL-C определялись прямым анализом или уравнением Фридевальда, когда уровень триглицеридов составлял <400 мг/дл.
Анализ иммунной функции и воспалительных маркеров
Концентрации иммуноглобулина G (IgG) в сыворотке измерялись с помощью коммерческого набора для IgG для ИФА у человека. Диапазон обнаружения анализов составлял 1,37–1000 нг/мл, чувствительность — 0,52 нг/мл, коэффициент вариации внутри анализа — <6%, а межтестовый коэффициент вариации — <9%. Все образцы анализировались в дубликате, а на каждой пластине были включены материалы высокого и низкого качества контроля, поставлявшиеся в комплекте. Пластины с значениями качества вне 2 стандартных отклонений от целевых значений отклонялись и повторялись. Образцы выше верхнего стандартного предела были разбавлены в соотношении 1:2 и переоценены.
Все реагенты и образцы сыворотки были уравновешены до комнатной температуры перед анализом. Образцы сыворотки разбавлялись согласно инструкции набора, обычно с разбавлением 1:100 000. Стандарты, разбавленные образцы и заготовки (100 мкл) добавлялись в соответствующие ямы предварительно покрытых микропластин и инкубировали при 37 °C в течение 90 минут. Колодцы промывались три раза перед инкубацией с помощью биотинилированного обнаружения антител в течение 60 минут при 37 °C. После дополнительной промывки был добавлен конъюгат хрена пероксидазы, который инкубировался 30 минут в темноте. После промывки добавляли раствор субстрата, и смесь инкубировали в темноте в течение 15 минут, прежде чем добавить стоп-раствор. Оптическая плотность измерялась на 450 нм с эталонными длинами волн 570 нм или 630 нм. Для расчёта концентраций IgG были созданы стандартные кривые.
Подмножества лимфоцитов анализировались с помощью потоковой цитометрии на BD FACSCanto II, оснащённом лазерами 488 нм и 640 нм. Прямое рассеяние напряжения было установлено на 300 В, боковое рассеяние на 350 В, а напряжения в лампах фотоумножителя для каналов FITC, APC и PE — на 400 В, 550 В и 480 В соответственно. Дублеты были исключены с помощью FSC-A против FSC-H.
Окрашивание жизнеспособности проводилось с использованием 7-аминоактиномицина D (7-AAD), при этом анализировали только 7-AAD-отрицательные события. Образцы цельной крови распределялись по неокрашенным, изотипно-контрольным и пробиркам. Антитела к CD3-FITC, CD4-APC и CD8-PE добавлялись в пробирки, а в контрольные пробирки добавлялись соответствующие антитела к контролю изотипов. Образцы инкубировали в темноте при комнатной температуре в течение 30 минут. Компенсационные контроли были подготовлены с помощью BD CompBeads, а автоматическая компенсация выполнялась в программном обеспечении FACSDiva. Эритроциты лизировались с буфером лизиса эритроцитов, затем промывались и возвращались в буфер для окрашивания с 7-AAD.
Для контроля качества использовались ежедневные установки цитометра и отслеживающие шарики. Иерархия гейтинга включала исключение дублетов, отбор лимфоцитов, гейтинг жизнеспособности, гейтинг CD3+ и идентификацию подмножеств CD4/CD8. На образец было получено не менее 50 000 живых лимфоцитных событий, при общем количестве приобретённых событий от 100 000 до 150 000. Данные были проанализированы с помощью программного обеспечения FlowJo, а также рассчитаны проценты ячеек CD3+, CD4+ и CD8+ вместе с соотношением CD4+/CD8+.
Концентрации HS-CRP, IL-6, TNF-α и MCP-1 в сыворотке измерялись с помощью коммерческих наборов ИФА. Диапазоны обнаружения и чувствительность были следующими: hs-CRP (0,07–12,5 нг/мл; чувствительность 0,022 нг/мл), IL-6 (0,7–300 пг/мл; чувствительность 0,35 пг/мл), TNF-α (1,6–100 пг/мл; чувствительность 0,8 пг/мл) и MCP-1 (5–1000 пг/мл; чувствительность 2,5 пг/мл). Все анализы проводились в дубликате. На каждой пластине были размещены материалы низкого и высокого качества контроля. Внутрипробные коэффициенты вариации составляли <8%, а межпробиральные — <10%. Значения ниже пределов обнаружения фиксировались как половина нижней границы количественной оценки, тогда как значения выше самого высокого стандарта были разбавлены и переоценены. Образцы прошли только один цикл замораживания-оттаивания перед анализом. Процедуры с цитокином ELISA следовали протоколам, идентичным описаним для IgG ELISA, согласно инструкциям производителя относительно факторов разбавления, условий инкубации и температуры.
Оценка клинических результатов и управление данными
В конце 8-месячного периода лечения лечащие врачи, не обращая внимания на распределение групп, оценивали клинический статус участников. Пациенты были классифицированы как выписанные, когда все заранее определённые критерии клинического улучшения диабетической нефропатии были выполнены как минимум две последовательные недели: ≥30% снижение 24-часового УПЭ по сравнению с исходным, стабилизация или улучшение eGFR, определяемое как снижение <5 мл/мин/1,73м² по сравнению с исходным уровнем, и отсутствие острых диабетических осложнений или других состояний, требующих продолжения стационарного лечения. Участники, не соответствующие всем критериям, классифицировались как не выписанные. Впоследствии для каждой группы рассчитывались клинические показатели ответа.
Все собранные демографические, лабораторные и клинические данные были внесены в электронную базу данных с использованием двойного ввода данных двумя независимыми исследователями. Проводились проверки дальности и согласованности для обеспечения точности данных. Основные конечные показатели включали изменения параметров функции почек с исходного до 8 месяцев, включая 24 часа UPE и UAlb/UCR, а также параметры иммунной функции, включая процент CD3+ T-клеток и соотношение CD4+/CD8+. Вторичные конечные показатели включали изменения от исходного до 8 месяцев гликемических параметров (FPG, 2h-PPG, HbA1c), липидного профиля (TC, TG, LDL-C, HDL-C), воспалительных маркеров (hs-CRP, IL-6, TNF-α, MCP-1) и частоты клинического ответа. Все показатели исхода оценивались на исходном уровне, в течение 48 часов до начала лечения и после лечения, в течение 1 недели после окончания 8-месячного периода.
Статистический анализ
Все статистические анализы проводились с помощью программного обеспечения SPSS. Непрерывные переменные с нормальным распределением выражались как среднее ± стандартном отклонении, тогда как категориальные переменные выражались как частота и процент. Для сравнения между группами использовались t-тесты независимых выборок, а хи-квадратные тесты — для категориальных переменных. Статистическая значимость была определена как P<0,05. Учитывая исследовательский характер исследования и большое количество оценённых исходов, вторичные результаты не были скорректированы с учётом множественности. Поэтому P-значения считались скорее описательными, чем подтверждающими. Из-за ретроспективного нерандомизированного дизайна исследования все сравнения между контрольной и наблюдательной группами не были скорректированы для потенциальных смешивателей, и остаточное смешивание могло остаться. Все 150 зарегистрированных пациентов (56 в контрольной группе и 94 в группе наблюдения) прошли полный 8-месячный период лечения и наблюдения. После зачисления пациентов не было потеряно на последовае, не было исключено или не было исключено. Отсутствующих данных по исходным характеристикам или показателям исхода, включая функцию почек, глюкозный и липидный профиль, иммунные маркеры и воспалительные факторы не выявлено. Поэтому процедуры импутации не требовались.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Всего с июля 2022 по май 2024 года было первоначально обследовано 238 пациентов с диабетической нефропатией (стадия Могенсена III). После исключения 88 пациентов (44 не соответствовали критериям включения, 28 соответствовали критериям исключения, а 16 имели неполные записи) было зачислено 150 подходящих пациентов. В хронологическом порядке поступления 56 пациентов, принятых с июля 2022 по декабрь 2023 года, были распределены в контрольную группу (валсартан + аторвастатин + пробукол), а 9...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Возможный механизм действия витамина D в ДН
В этом исследовании было установлено, что добавление витамина D в режим на основе пробукола связано с большим улучшением метаболизма глюкозы, функции почек, уровня липидов и иммунных маркеров у пациентов с ДН. Эти данные указывают на потенциальную дополнительную роль витамина D в управлении ДН, хотя причинные механизмы не могут быть определены по этому ретроспективному дизайну.
Во-первых, положите...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
У авторов нет конфликта интересов, которые можно было бы заявлять.
Ни одного.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| –20°С Морозилка | Стандартный лабораторный поставщик (напр., Haier, Thermo) | ULT -20°С серии | Хранение аликотов мочи |
| 7-аминоактиномицин D (7-AAD) | BioLegend, Inc. | 420403 | Окрашивание для определения жизнеспособности; конечная концентрация 1 мкг/мл |
| –80°С Морозилка | Thermo Fisher Scientific (напр., Revco) | Revco RDE -80°С | Долгосрочное хранение аликотов сыворотки и плазмы |
| 96-лунковые ELISA микропластмассовые пластинки (с высокой связывающей способностью) | Corning Inc. (Costar) | 3590 | Высокая связывающая поверхность; для ELISA анализов |
| Анти-человеческий CD3-FITC антитело | BioLegend, Inc., Сан-Диего, Калифорния, США | 300306 (клон OKT3, типичный) | 5 мкл на тест; цитометрия потоков |
| Анти-человеческий CD4-APC антитело | BioLegend, Inc., Сан-Диего, Калифорния, США | 317416 (клон RPA-T4, типичный) | 5 мкл на тест; цитометрия потоков |
| Анти-человеческий CD8-PE антитело | BioLegend, Inc., Сан-Диего, Калифорния, США | 301008 (клон HIT8a, типичный) | 5 мкл на тест; цитометрия потоков |
| Аторвастатин | Pfizer Inc. | H20051407 | 20 мг, перорально, один раз в день |
| BD FACSCanto II анализатор потоковой цитометрии | BD Biosciences, Сан-Хосе, Калифорния, США | 338960 | Оснастка 488 нм (синий) и 640 нм (красный) лазерами |
| Глюкометр и тест-полоски | Roche Diagnostics (Accu-Chek) | Accu-Chek Guide Kit | Для определения FPG и 2h-PPG из капиллярной крови с пальца |
| Центрифугальные пробирки (15 мл, конические) | Corning Inc. | 352096 | Полипропилен, стерильные; для обработки образцов |
| Центрифугальные пробирки (50 мл, конические) | Corning Inc. | 352070 | Полипропилен, стерильные; для обработки образцов больших объемов |
| Компенсационные частицы CompBeads | BD Biosciences | 552843 | Однократные окрашенные контроли для компенсации в потоковой цитометрии |
| Криовставки (2 мл, с наружной резьбой) | Thermo Fisher Scientific (Nalgene) | 5000-0020 | Для аликотов сыворотки/мочи; хранение при –80°С или –20°С |
| CS&T частицы (настройка цитометра и отслеживание) | BD Biosciences | 641319 | Ежедневный контроль качества для производительности цитометра |
| Вакуумные пробирки EDTA (K2 EDTA) | BD Vacutainer | 367863 | 3 мл, с лавандовой пробкой; для сбора цельной крови (цитометрия потоков, HbA1c) |
| Комплект ферментативного колориметрического анализа для сывороточного креатинина | Roche Diagnostics GmbH | 4492161190 | Калибраторы: Cfas (Roche); QC: Precinorm U, Precipath U (Roche) |
| Буфер для окрашивания в потоковой цитометрии | BD Biosciences | 554656 | Фосфатно-буферный раствор с 1% BSA и 0,1% азид натрия |
| Пробирки для потоковой цитометрии (12 × 75 мм) | BD Biosciences (Falcon) | 352058 | Полистирол, круглодонные; для окрашивания антител и анализа |
| Программное обеспечение FlowJo | BD Biosciences | версия 10.8 | Анализ и визуализация данных потоковой цитометрии |
| Комплект для определения HDL-C (прямой метод) | Wako Pure Chemical Industries, Ltd., Осака, Япония | 431-52501 | Для измерения липопротеинов высокой плотности холестерина |
| Система высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC) для определения HbA1c | Bio-Rad Laboratories, Inc. | D-10 | Для измерения HbA1c из цельной крови в EDTA |
| Автоматизированный биохимический анализатор Hitachi 7180 | Hitachi, Ltd., Токио, Япония | 7180 | Для измерения SCr, липидного профиля и уровня альбумина/креатинина в моче |
| Набор для ELISA определения высокочувствительного С-реактивного белка (hs-CRP) | R&D Systems, Inc., Миннеаполис, Миннесота, США | DCRP00 | Диапазон определения: 0,07–12,5 нг/мл; чувствительность: 0,022 нг/мл |
| Набор для ELISA определения человеческого IgG | Cloud-Clone Corp., Хьюстон, Техас, США | E-80HU | Диапазон определения: 1,37–1000 нг/мл; чувствительность: 0,52 нг/мл; CV внутри анализа <6%; CV между анализами <9% |
| Программное обеспечение IBM SPSS Statistics | IBM Corporation | версия 22.0 | Платформа для статистического анализа -2 |
| Набор для ELISA определения IL-6 | R&D Systems, Inc. | D6050 | Диапазон определения: 0,7–300 пг/мл; чувствительность: 0,35 пг/мл |
| Инсулин (для подкожного введения) | Novo Nordisk A/S | 00169-3004-01 | Ежедневная под |
Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE
Запросить разрешение