Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Исследовательская статья
В этом исследовании анализировались мужчины-пациенты, посещавшие амбулаторное отделение Народной больницы Хэюань и проходившие тестирование на нуклеиновую кислоту вируса человека (ВПЧ), что дало предварительное представление об эпидемиологических характеристиках и распределении генотипов инфекции ВПЧ в регионе. Эти результаты обеспечивают поддержку профилактики и контроля заболеваний, связанных с ВПЧ.
Целью данного исследования было изучение распространённости и распределения генотипов вируса папилломы человека (ВПЧ) среди амбулаторных мужчин в Хэйюане и сравнение уровней заражения по возрастным группам с целью информирования местных стратегий профилактики и лечения. Всего было зарегистрировано 1 559 мужчин, прошедших тестирование на ВПЧ в Народной больнице Хэюань с 2021 по 2024 год, и были включены только результаты первых визитов. Двадцать три генотипа ВПЧ были выявлены методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) — обратной точечной блочной гибридизации. Был проведён ретроспективный поперечный анализ для оценки общей распространённости ВПЧ, возрастных уровней инфекции, паттернов инфекции, распределения подтипов и охвата генотипов, релевантного для вакцины. Статистический анализ проводился с использованием версии SPSS 23.0. Данные подсчёта были суммированы в числах и процентах, а различия в группах оценивались с помощью теста хи-квадрата, при этом статистическая значимость была определена как p < 0,05. Общий уровень заражения ВПЧ составил 45,3% (707/1 559). Показатели заражения в возрастных группах (≤24, 25–34, 35–44, 45–54, 55–64 и ≥65 лет) составили соответственно 42,8%, 43,1%, 45,8%, 48,2%, 68,3% и 46,4%. Самое распространённое число случаев составляло 57,0% положительных случаев — однотипные инфекции. Пять наиболее часто выявляемых высокорисковых генотипов — это HPV52 (9,05%), 16 (5,90%), 53 (5,09%), 51 (5,01%) и 59 (4,93%), а преобладающими низкорисковыми генотипами были HPV6 (21,24%), 11 (9,85%) и 43 (5,17%). Теоретические показатели охвата бивалентных, четырехвалентных и девятивалентных вакцин составляли соответственно 8,65%, 39,74% и 55,41%. Распространённость инфекции ВПЧ среди амбулаторных мужчин в Хэйюане была относительно высокой, при этом доминирующим типом были инфекции одного типа. Наиболее распространёнными генотипами высокого риска были HPV52, 16, 53, 51 и 59, а ведущими низкорисковыми генотипами были HPV6, 11 и 43. Самый высокий уровень заражения наблюдался в возрастной группе 55–64 года. Эти результаты предоставляют региональные данные, которые могут поддержать разработку индивидуальных стратегий профилактики и вакцинации ВПЧ для мужчин в этой группе.
Вирус папилломы человека (ВПЧ) — это ДНК-вирус, который передаётся преимущественно через половой контакт, при этом его единственный носитель является человек. Распространённость ВПЧ схожа среди мужчин и женщин по всему миру — от 3,5% до 45% среди мужчин и от 2% до 44% среди женщин1. Почти 80% сексуально активных мужчин и женщин заражаются вирусом хотя бы один раз в течение жизни, поскольку пути передачи включают не только половой контакт, но и трение или контакт с поверхностью кожи и слизистыми оболочками, вертикальную передачу между матерью и младенцем ит.д. 2. На сегодняшний день описано более 200 различных генотипов ВПЧ, классифицированных как высокорисковые на основе их связи с началом рака шейки матки, влагалища, вульвы, анального, головы и шеи, а также пениса, а также низкого риска, связанного с генитальными бородавками или кондиломойакумината. В большинстве случаев инфекция может быть полностью устранена иммунной системой в течение 12–24 месяцев без клинических осложнений. Однако, если иммунная система не удаётся избавиться от вируса, развивается устойчивая инфекция, закладывающая основу для появления неопластических гиперпластическихпоражений 4. В частности, персистированная инфекция вирусом папилломы человека с высоким риском (HR-HPV) связана с развитием плоских внутриэпителиальных поражений (SILs), а также интраэпителиальной неоплазии полового члена (PeiN); Оба этих поражения являются предраковыми состояниями для рака шейки матки у женщин и рака пениса у мужчин 5,6. Кроме того, факторы образа жизни, такие как длительное использование оральных контрацептивов, курение, иммунодефицит или параллельные инфекции, передающиеся половым путем, также могут способствовать пролиферациинеопластов 7.
В настоящее время в Китае проводится множество исследований по распространённости, факторам риска и стратегиям профилактики инфекции ВПЧ у женщин, а уровень осведомлённости и вакцинации вакцины против ВПЧ у женщин также значительно выросли. ВПЧ легко распространяется между половыми партнёрами, и во многих случаях между супругами могут происходить несколько невыявленных событийпередачи 8. Последние клинические рекомендации в Китае отдают приоритет вакцинации против ВПЧ для женщин в возрасте 9–26 лет, с особым вниманием к девочкам в возрасте от 9 до 14 лет. Кроме того, рекомендуется вакцинация женщинам в возрасте от 27 до 45 лет и мужчинам в возрасте от 9 до 26 лет для продвижения совместных профилактических усилий между9 полами.
Инфекция ВПЧ у мужчин может быть причиной инфекции ВПЧ и повторяющихся инфекций уженщин-половых партнёров 10. Кроме того, инфекция ВПЧ может вызывать такие заболевания, как мужские бородавки, генитальные бородавки, генитальные раки, рак ротоглотки и анальногорта, а также может быть связана с мужскимбесплодием 12. Однако в Китае относительно мало исследований по заражению ВПЧ у мужчин. Кроме того, у Китая обширная территория и большое количество этнических групп. Понятия брака и жизненных привычек различаются в разных регионах. Инфекция ВПЧ также имеет региональную, расовую иразнообразную 13. Другие исследования показали, что вакцинация против ВПЧ у мужчин обладает значительным профилактическим потенциалом против шейных поражений у сексуальныхпартнёров 14. Всестороннее понимание паттернов заражения ВПЧ у мужчин и профилей генотипов может улучшить системы общественного здравоохранения и снизить затраты, связанные с управлением и лечением как мужчин, так и женщин. Отчёты показывают, что заболевания, связанные с ВПЧ, у мужчин накладывают более значительную экономическую нагрузку на общие расходы на здравоохранение вИталии 15.
Поэтому данное исследование направлено на изучение распространённости, возрастно-стратифицированного уровня положительных результатов, частоты генотипа, распределения инфекционных паттернов и охват типами вакцин у мужчин-амбулаторных пациентов, проходивших тестирование в регионе Хэюань с 2021 по 2024 год, что обеспечивает важную основу для раннего скрининга, диагностики, профилактики и лечения мужской инфекции ВПЧ в регионе.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Это исследование было рассмотрено и одобрено Комитетом по этике медицинских исследований Народной больницы Хэюань (номер одобрения: YXYJLL-SFKJ202461; Дата утверждения: 15 мая 2024 года). Этический сертификат был загружен в качестве дополнительного файла. Пациент, родитель или опекун несовершеннолетнего подписал заявление при регистрации, в котором говорится: «Я согласен, что мои клинические биологические образцы и данные будут использоваться для научных исследований, технологических инноваций и клинических исследований, одобренных Комитетом по этике медицинских исследований после удаления идентифицируемой личной информации», и этот анализ не будет представлять дополнительных рисков для пациента и соответствует соответствующим нормативам. Все материалы, использованные в этом исследовании, перечислены в Таблице материалов.
Предметы
В исследование было включено 1 559 мужчин, посетивших амбулаторное отделение Народной больницы Хэюань и прошедших тестирование на ВПЧ с января 2021 по декабрь 2024 года. Участники были в возрасте от 2 до 80 лет (В состав всех пациентов-мужчин с действительными результатами теста на нуклеиновые кислоты ВПЧ при амбулаторных визитах в этом медицинском учреждении с 2021 по 2024 годы; Основная цель — предоставить всесторонний обзор тестирования на ВПЧ и паттернов инфекций среди мужчин в регионе; Кроме того, пути заражения ВПЧ включают не только половую активность, но и трение или контакт с поверхностью кожи и слизистыми оболочками, а также вертикальную передачу от матери к ребёнку. Поэтому возрастных ограничений не вводилось, средний возраст составлял (34,2 ± 10,7 года).
Методы
В этом исследовании использовался ретроспективный поперечный дизайн для анализа всех мужчин-пациентов, посещавших амбулаторное отделение нашей больницы и проходивших тестирование на ВПЧ; Были включены только первоначальные результаты выборки для тех, кто проходил повторное тестирование.
Коллекция образцов
Эксфолиированные образцы клеток были получены обученными клиницистами с использованием стерильных специализированных кистей. Места сбора включали дорсальные и вентральные поверхности пениса, внутренние и наружные корональные сульсы, головку пениса, дистальную уретру и любые видимые веррукообразные поражения, при этом выбор места определялся на основе индивидуальных находок пациента; После сбора щётки разбивались в специальном растворе для сохранения образцов. Условия сохранения образцов: после отбора образцов образцы немедленно хранились в холодильнике при температуре 2–8 °C, а тест был завершён в течение 3 дней.
Экстракция ДНК
После колебаний и смешивания каждого образца последовательно добавлялось 200 мкл в реагент для экстракции или очистки нуклеиновых кислот. Экстракция ДНК проводилась с использованием технологии магнитных шариков с использованием реагента для экстракции в полностью автоматизированном приборе для экстракции нуклеиновых кислот SP96.
Обнаружение ВПЧ
Тестирование на ДНК на ВПЧ проводилось с использованием набора для обнаружения генотипирования вируса папилломы человека (тип 23), который сочетает амплификацию in vitro на основе ПЦР и обратной гибридизации с точки блота ДНК для генотипирования ВПЧ. Специфические праймеры были разработаны на основе генетических характеристик ВПЧ, а фрагменты мишени из 23 генотипов ВПЧ были амплифицированы. Усиленные продукты были гибридизированы с типизационными зондами, закреплёнными на мембране, включая 17 HR-HPV (HPV16,51,52,53,18,58,59,31,33,45,56,66,35,39,68,73,82) и 6 LR-HPV (HPV6,11,42,43,81,83). На основе наличия или отсутствия сигналов гибридизации был определен статус инфекции этих генотипов ВПЧ. Специфическая лабораторная процедура заключалась в использовании фильтрованного кончика пипетки для добавления 5 мкл экстрированной ДНК в смесь ПЦР, что увеличивало общий объём до 25 мкл. Впоследствии была проведена ПЦР-усиление. После амплификации все усиленные продукты добавлялись в изотермальный гибридизатор с мембранными полосами для колориметрической гибридизации. После завершения цветопроработки результаты можно интерпретировать.
Статистический анализ
Для статистического анализа использовалось программное обеспечение SPSS 23.0. Данные по подсчёту выражались в виде числа случаев (n) и процента (%). Сравнение между группами проводилось с помощью теста χ2 . p < 0,05 считался статистически значимым. Среди 23 генотипов ВПЧ положительный результат для любого отдельного генотипа указывает на заражение ВПЧ; положительный показатель только одного генотипа указывает на одну инфекцию; а положительный результат по двум или более генотипам указывает на множественную инфекцию. Множественные инфекции дополнительно классифицируются по количеству сосуществующих генотипов: двойная инфекция, тройная инфекция, четверная инфекция, пентупальная инфекция, гексупальная инфекция и выше.» Отношение к общей частоте обнаружения было рассчитано с использованием общего числа обнаружений генотипов (1 238) в качестве знаменателя, поскольку пациенты с несколькими инфекциями вносили несколько генотипов.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Общая распространённость положительных симптомов на ВПЧ в исследуемой популяции
Из 1559 мужчин-амбулаторных пациентов 707 случаев были положительными на ДНК ВПЧ, с положительным показателем 45,3%. Годовые показатели заражения ВПЧ: в 2021 году (44,8%, 100/223), в 2022 году (45,5%, 231/508), в 2023 году (45,3%, 182/402) и в 2024 году (45,5%, 194/426). Значимой разницы в частоте заражения ВПЧ между разными годами не выявлено (χ2 <...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
ВПЧ — самый распространённый вирус, передающийся половым путём у мужчин и женщин. Высокорисковая инфекция тесно связана с раком шейки матки, вульвы и влагалища у женщин, а также раком пениса, анального и ротоглотки у мужчин. Устойчивые типы низкого риска могут привести к большинству анальных генитальных бородавок и респираторному папилломатозу16. Анализ заболеваний, связанных с инфекцией ВПЧ у мужчин, показал высокую распространённость ВПЧ в мужском пенисе, головк...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
У авторов нет конфликта интересов, которые можно было бы заявлять.
Авторы благодарят Проект социального развития города Хэюань в области науки и технологий за финансирование этого исследования (грант No 241029161472532).
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Обнаружение нуклеиновой кислоты Mycoplasma pneumoniae и гена устойчивости к лекарствам | Guangzhou Da 'an Gene Co., Ltd. | Stream SP96 | |
| Фильтровальные наконечники | Coring Life Science Co., Ltd. | 29822001 | 0–10 µL |
| Фильтровальные наконечники | Coring Life Science Co., Ltd. | 05623001 | 5–300 µL |
| Набор для определения генотипы вируса папилломы человека (тип 23) | Shenzhen Ya Neng Biotechnology Co., Ltd. | 20193401918 | |
| Реагент для извлечения нуклеиновых кислот (метод магнитных частиц) | Guangzhou Da'an Gene Co., Ltd. | 20170583 | |
| ПЦР-усилитель | Thermo Fisher Scientific | ABI Veriti DX 96 | |
| ПЦР-гибридизатор | Shenzhen Ya Neng Biotechnology Co., Ltd. | YN-H16 | |
| Щетка для отбора проб | Shenzhen Ya Neng Biotechnology Co., Ltd. | ||
| Раствор для хранения образцов | Shenzhen Ya Neng Biotechnology Co., Ltd. |
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.