Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Модель энтероколита, ускоренного пироксикамом, у мышей с интерлейкином-10 для изучения метаболических изменений, вызванных воспалением

74 просмотров

⸱

DOI:

10.3791/71448

⸱

11 августа 2026 г.

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Pediatrics, The University of Texas Southwestern Medical Center, 2Department of Pathology, University of Texas Southwestern Medical Center, 3Department of Internal Medicine, University of Texas Southwestern Medical Center

В этой статье

Краткое содержание

Этот протокол использует пироксикам для ускорения развития колита в модели мышей с интерлейкином (IL-10)-нокаут. Протокол обеспечивает синхронизацию колита, что приводит к строгим, воспроизводимым результатам независимо от пола, фонового напряжения или условий вивария. Он служит полезной моделью для изучения метаболических изменений во время воспаления кишечника.

Аннотация

Воспалительные заболевания кишечника (ВЗК) — это хроническое воспалительное заболевание пищеварительного тракта, поражающее более 10 миллионов человек по всему миру. Хотя значительные исследования сосредоточены на иммунологических механизмах и последствиях ВЗК, меньше известно, как слизистое воспаление способствует метаболической дисрегуляции, включая потерю веса и снижение аппетита. Здесь авторы описывают мышиную модель энтероколита, ускоренного пироксикамом, у мышей интерлейкина-10-нокаут (IL-10-KO) для изучения метаболической дисрегуляции, вызванной воспалением. Известно, что мыши IL-10-KO развивают спонтанный энтероколит и повышенную восприимчивость к энтероколиту, вызванному инфекциями или лекарствами. Однако условия вивариума и фон деформации были отмечены как факторы смешивания при развитии колита в этой модели. Пироксикам, нестероидный противовоспалительный препарат (НПВС), доказано способен вызывать или ускорять энтероколит на животных моделях, увеличивая воздействие люминальных бактерий на слизистое слизистое. В этом протоколе самцов и самок мышей с IL-10-KO кормили рационом, обогащённым пироксикамом, вместо обычной пищи. Ежедневно измерялись потребление пищи и масса тела с учётом метаболических изменений всего тела, а также клинических проявлений энтероколита, таких как диарея и ректальное кровотечение. Протокол эффективен и воспроизводим, одновременно вызывая энтероколит у нескольких мышей и позволяет оценивать метаболическую дисрегуляцию в модели воспалительных заболеваний кишечника. Дальнейшие исследования с использованием этого протокола могут изучить влияние энтероколита на другие компоненты метаболической дисрегуляции, такие как расход энергии и состав тела, выявляя более широкие связи между воспалительными заболеваниями кишечника и метаболизмом хозяина.

Введение

Болезнь Крона и язвенный колит, в совокупности известные как воспалительное заболевание кишечника (ВЗК), представляют собой хронические аутоиммунные заболевания желудочно-кишечного тракта, характеризующиеся воспалением слизистой слизистой с клиническими проявлениями, включая боль в животе, потерю веса, гематохезию и диарею. ВЗК затрагивает миллионы людей по всему миру, при этом наибольшая распространённость наблюдается в западныхобществах. 1. В США, по оценкам, более 3 миллионов человек страдаютот 2,3, при этом частота и распространённость увеличиваются, особенно среди детей имолодежи, 4,5.

Точные механизмы, лежащие в основе патогенеза ВЗК, до сих пор не до конца изучены, но широко считается, что заболевание является результатом преувеличенного иммунного ответа на кишечную микробиоту у генетически восприимчивых людей. Цитокина, модулирующие воспалительные реакции, играют ключевую роль в поддержании гомеостаза кишечника и развитии ВЗК. Среди них интерлейкин-10 (IL-10) — хорошо изученный противовоспалительный цитокин, который помогает поддерживать иммунологический гомеостаз у человека, регулируя как врождённые, так и адаптивные руки иммунногоответа 6,7. В частности, полиморфизмы в IL-10 и его рецепторе (IL-10RA/B) были выявлены у младенцев с очень ранним началом ВЗК (VEO-IBD), классически проявляющейся перианальной болезнью в первые несколько месяцевжизни 8. Эта связь дополнительно подтверждается крупномасштабным экзомным секвенированием взрослых пациентов с болезнью Крона, которое выявило IL-10RA как локус восприимчивости к болезни при немоногенномВЗК 9. Кроме того, у пациентов с VEO-IBD описан негенетический путь, связанный с нейтрализующими антителами к IL-10, что дополнительно подчёркивает важность этого пути для поддержания гомеостаза слизистойиммунной слизистой 10.

Основываясь на исследованиях на людях, указывающих на участие IL-10 в ВЗК, были разработаны мыши интерлейкина-10-нокаут (IL-10-KO) в качестве модели для изучения роли IL-10 в ВЗК. Известно, что мыши IL-10-KO развивают спонтанный энтероколит с преувеличенным ответом CD4+ Th1 на стимулы, обычно начиная с 8–12 недель ввозрасте 11 лет. Однако развитие спонтанного энтероколита у мышей с IL-10-KO может быть непредсказуемым при отсутствии ускоряющегоагента 12,13,14, в зависимости от генетического штамма, состава микробиоты и условийсодержания 15,16. Использование надёжного протокола для вызова колита критически важно для практической эффективности модели IL-10-KO. В предыдущих исследованиях использовались нестероидные противовоспалительные препараты (НПВС), такие как пироксикам, для индукции энтероколита у мышей сIL-10-KO 17,18. Однако эти исследования в основном сосредоточены на иммунологических изменениях, с относительно небольшим акцентом на влияние энтероколита на метаболизм или роль пола при тяжестиколита 19. Авторы описывают использование диеты, обогащённой пироксикамом, для индукции энтероколита у мышей с IL-10-KO, а также характеризуют метаболическую дисрегуляцию и слизисто-воспалительные реакции в этой модели с использованием как самцов, так и самок мышей. Этот протокол измеряет массу тела и потребление пищи, чтобы отразить метаболические изменения всего организма, а также клинические проявления колита и гистологические и транскриптомические изменения, отражающие воспаление слизистой железы. Эта эффективная и воспроизводимая модель предоставляет ценный инструмент для изучения связи между ВЗК и метаболизмом хозяина.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все эксперименты на животных проводились в соответствии с протоколом, утверждённым Институциональным комитетом по уходу и использованию животных (IACUC) при Медицинском центре Юго-Западного университета Техаса, в соответствии с «Руководством по уходу и использованию лабораторных животных» [Номер одобрения: 2017-102011]. Эвтаназия проводилась в соответствии с институциональными рекомендациями. Для проведения процедур анестезия не требовалась. Конкретные детали материалов описаны в Таблице материалов.

1. Установление модели энтероколита, ускоренного пироксикамом у мышей IL-10-KO

  1. Содержать мышей IL-10-KO в специализированном помещении без патогенов (SPF) в 12-часовом световом цикле с импровированным доступом к еде и воде.
  2. Индивидуально содержат мышей возраста 7–8 недель, соответствующих возрасту и полу в микроизоляторных клетках. Позвольте мышам привыкнуть к одиночному содержанию и ежедневному обращению как минимум за неделю до начала эксперимента.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Убедитесь, что вес тела составляет >20 г для мужчин или >17 г для самок, а мыши свободны от боевых ран.
  3. Распределите мышей в экспериментальную и контрольную группу. Для экспериментальной группы замените стандартную еду на еду, усиленную пироксикамом. Для контрольной группы дайте свежую стандартную еду. Добавьте 50 г еды в каждый бункер клетки.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Выделяйте не менее пяти мышей на каждую группу. Обогащённая пироксикамом чау (200 ppm) была приготовлена компанией Teklad с использованием пироксикама, предоставленного исследователями, для приготовления индивидуального рациона лабораторных животных. Чтобы минимизировать вариативность от партии к партии, рекомендуется, чтобы все животные в данном эксперименте получали пищу из одной и той же производственной партии. По возможности одна и та же партия следует использовать в разных экспериментах для повышения воспроизводимости.

2. Мониторинг массы тела и поведения в питании

  1. Используя аналитические весы, записывайте вес тела каждой мыши. Взвешивайте каждую мышь по отдельности в одно и то же время каждый день, ежедневно в течение 7 дней подряд. На 0-й день сообщайте о суточной массе тела в процентах от базового веса (установите 100%).
    ПРИМЕЧАНИЕ: Потеря веса более 20% указывает на чрезмерный стресс и риск неминуемой смерти. Мышей следует усыпить, если этот порог достигнут.
  2. С помощью аналитических весов зафиксируйте начальный вес еды, усиленной пироксикамом, и стандартного чау в каждой клетке.
  3. Затем измеряйте оставшуюся еду в каждом контейнере клетки в одно и то же время каждый день, ежедневно в течение 7 дней подряд.
  4. Рассчитайте ежедневное потребление чау, вычитая дневной вес чау из оставшегося чау за предыдущий день.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Регулярно проверяйте количество еды и пополняйте еду, если оно ниже 10 г. Вкусность пироксикам-чау не влияет на употребление и должна быть очень похожа на стандартную еду.

3. Мониторинг активности заболеваний

  1. На 0 и 7 дни визуально осмотрите фекальные гранулы отдельных мышей и определите наличие крови в кале.
  2. Если не видно крови, проведите тест на скрытую кровь калом, нанеся гранулу на тест-карту, затем добавив предоставленный проявительный реагент. Результаты результатов по таблице 1.
  3. На 0 и 7 дни визуально осматривайте свежевыпущенные фекальные гранулы для оценки консистенции кала. Используйте плоские щипцы для определения консистенции. Результаты результатов по таблице 1.
  4. В дни 0 и 7 определите степень пролапса прямой кишки, осматривая перианальную область. Результаты результатов по таблице 1.
  5. Измерьте массу тела, как описано выше. Результаты результатов по таблице 1.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Оценка индекса активности заболевания (DAI) должна проводиться вслепым образом одним и тем же исследователем на протяжении всего эксперимента для обеспечения последовательности, минимизации смещения наблюдателей и повышения надёжности оценки.

4. Извлечение тканей толстой кишки

  1. Усыпить мышей с помощью асфиксииCO2 и вывиха шейки матки, как сообщалось вдругих источниках 20.
  2. Положите мышь в положение на спине и распылите 70% этанола на брюшную область живота.
  3. Поднимите кожу щипцами и используйте хирургические ножницы для режения по средней линии. Обнажите брюшную полость и найдите толстую кишку.
  4. Обнажите толстой кишку и слепую цепь с помощью тупой вскрытия. Удалите толстой кишку в блоке, включая слепую и анальную манжету.
  5. Положите кишку на ровную поверхность и удалите соединительные ткани.
  6. Измерьте и запишите длину толчья кишки.
  7. После измерения длины толстой кишки удаляйте слепую грудь, разрезав в месте пересечения цеко-толстой кишки.
  8. Приготовьте шприц объемом 10 мл, наполненный фосфатно-буферным физиологическим раствором (PBS), с прикреплённой 22-калиметровой шаровой иглой с многоразовой стальной иглой. Введите иглу в кишечник и выведите содержимое кишечника.
  9. Поместите промытый кишечник в чашку Петри с PBS и прополоскайте, чтобы удалить остатки. После очистки используйте его для дальнейших анализов.

5. Гистологический анализ

  1. Положите толстую кишку ровно на стеклянную горку. Используйте щипцы, чтобы обернуть ткань вокруг себя, начиная с дистального конца, чтобы получить «швейцарский рулон». Таким образом, дистальный или анальный конец останется во внутреннем роле, а более проксимальные области будут проходить к внешнему.
  2. Используя иглу 27 калибра, закрепите свернутую кишку для поддержания рулона и поместите её внутрь кассету для встраивающей ткани.
  3. Для фиксации тканей погружайте тканевые кассеты в 10% буферный раствор формалина на 16 часов при 4 °C.
    ВНИМАНИЕ: 10% формалина вреден при контакте с кожей и может вызвать сильные ожоги и повреждение глаз. Обращайтесь осторожно в защитных перчатках и научных очках. Остаточный формалин должен утилизироваться соответствующим образом в соответствии с институциональными рекомендациями.
  4. После фиксации формалина обрабатывайте ткани для вложения парафина и разрезайте их для установки на стеклянные стекла.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Образцы должны быть отправлены в гистологическую лабораторию с необходимым оборудованием для обработки тканевых кассет в парафине, сечения свитков, монтажа на стекли и окрашивания гематоксилином и эозином.
  5. Окрашивать тканевые слайды гематоксилином и эозином (HE) согласно установленнымпротоколам 21.
  6. Используя гистологическую систему оценки, описанную в Таблице 2, оцените следующие гистологические особенности в каждом разделе: повреждение тканей от энтероколита, инфильтрация воспалительных клеток Lamina propria и процент задействованной площади. Объедините баллы в каждом разделе, чтобы получить общий балл (Таблица 2).
    Общий балл = Признаки × вовлечённости (повреждение тканей) + признаки × вовлечённости (инфильтрация воспалительных клеток Lamina Propria) (1)
  7. Репрезентативные гистопатологические изображения повреждения тканей и инфильтрации клеток можно найти в публикации Эрбена идр. 22.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Гистологическая оценка должна проводиться вслепую, желательно обученным патологом, чтобы обеспечить последовательность и надёжность оценки.

6. Иммунофлуоресцентное окрашивание формалин-фиксированной парафиновой ткани

  1. Положите салфетки в стойку для слайдов и в сушилку при температуре 55 °C на 1 час, чтобы парафин расплавился.
  2. Положите слайды на решетку для окрашивания и последовательно погружайте её на 3 минуты в банки для морилки с ксилолом. Повторяйте этот шаг три раза.
  3. Окуните решётку для окрашивания на 3 минуты в банки с 100% этанолом. Повторяйте этот шаг три раза.
  4. Окуните решётку для окрашивания на 3 минуты в банку с 95% этанолом.
  5. Окуните решётку для морилки на 3 минуты в банку с 80% этанолом.
  6. Погрузите решётку для окрашивания на 5 минут в банки с деионизированной (DI) водой.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Все предыдущие этапы должны выполняться в вентилируемой вытяжке из-за паров ксилола. Обращайтесь осторожно в защитных перчатках и научных очках. Остаточный ксилол следует правильно утилизировать в соответствии с институциональными нормами.
  7. Перенесите стекла на стойку для стекла и погрузите в банку для окрашивания с раствором для извлечения 1× цитрата.
  8. Поместите банку с окрашиванием в опору для окрашивающей посуды.
  9. Поставьте опору для окрашивания посуды в скороварку.
  10. Готовьте 15 минут в скороварке.
  11. Уберите стекла из скороварки и дайте им остыть до комнатной температуры.
  12. Инкубировать стекли с блокирующим буфером объемом 300 мкл (3,5% козьей сыворотки, разбавленной в PBS) в течение 1 часа в увлажнённой камере. Убедитесь, что ткань полностью покрыта блокирующим буфером.
  13. Подвергайте стекла воздействию 300 мкл первичного антитела, разбавленных в блокирующем буфере, в течение 16 часов при 4 °C внутри увлажнённой камеры. Убедитесь, что ткань полностью покрыта первичным антителом. Использовалось следующее первичное антитело: Anti-S100A8/S100A9 (1:500).
    ПРИМЕЧАНИЕ: Разбавление антител будет специфичным для реагента и должно соответствовать рекомендациям поставщика.
  14. Промывайте слайды, последовательно погружая их в PBS на 5 минут, три раза в банке с пятнами.
  15. Подвергайте стекла воздействию 300 мкл разбавленной флуоресцентной вторичной антитела в блокирующем буфере в течение 1 часа при комнатной температуре в увлажнённой камере. Убедитесь, что ткань полностью покрыта вторичным антителом. Использовалось следующее флуоресцентное вторичное антитело: козьий анти-Rabbit Alexa Fluor 555 (разбавление 1:150).
    ПРИМЕЧАНИЕ: С этого момента стекли должны быть защищены от света, чтобы предотвратить фотоотбеливание флуорофоров. Разбавление вторичных антител будет специфичным к реагентам и должно соответствовать рекомендациям поставщика.
  16. Промывайте слайды, последовательно погружая их в PBS на 5 минут, три раза в банке с пятнами.
  17. Подвергайте стекла ядерному окрашиванию, погружая в раствор Hoechst, разбавленный 1:5000 в PBS, на 20 минут в банке для окрашивания.
  18. Промывайте слайды, последовательно погружая их в PBS на 5 минут, три раза в банке с пятнами.
  19. Аккуратно стирайте все PBS с стекло с помощью неабразивной салфетки. Добавьте 50 мкл монтажного материала против фейда и накладку.

7. Экстракция РНК

  1. Заморозьте всю кишку или фрагмент в жидком азоте и храните при -80 °C. В качестве альтернативы погрузите в 1,5 мл раствора для сохранения RNALater и храните в соответствии с инструкциями производителя.
  2. Разморозьте ранее замороженную кишку и положите на ровную поверхность. Разрушать и гомогенизировать ткань с помощью ручного гомогенизатора.
  3. Изолируйте РНК с помощью набора, следуя инструкциям производителя.
  4. Измеряйте концентрацию РНК с помощью спектрофотометра. Соотношения260/A 280 > 1,8 иA 260/A 230 2,0–2,2 указывают на приемлемую чистоту РНК.
  5. Проводите обратную транскрипцию, затем qPCR с SYBR зелёным интеркалирующим красителем.
  6. Анализируйте результаты с помощью платформы количественной оценки или аналогичного инструмента.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Самцы и самки мышей IL-10-KO развивают энтероколит после краткого воздействия диеты, обогащённой пироксикамом (рисунок 1A–E). Ко второму дню мыши, подвергшиеся воздействию пироксикама, статистически значительно увеличили потерю веса, чем их контрольные группы того же пола, регулярно кормленные едой, и сопоставимая потеря веса наблюдалась у всех полов (рисунок 1B). Очевидное ежедневное потребление пищи оставалось...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Воспалительное заболевание кишечника — это сложное полигенное заболевание, при котором доклинические модели служат бесценным инструментом для анализа путей, способствующих патогенезу ВЗК, и разработки новых диагностических и терапевтических стратегий. В настоящее время многие доклинические модели ВЗК используют химическое воздействие, такие как декстрансульфат натрия (DSS), оксазолон и тринитробензол сульфоновая кислота (TNBS), благодаря их простоте использования. Также доступны генетиче...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы не объявляют никаких соответствующих раскрытий.

Благодарности

Мы хотим поблагодарить основные учреждения UTSW, которые внесли вклад в представленную здесь работу. Эта работа была поддержана следующими источниками финансирования: NIH через K08DK127197 (LS-D), T32DK007745 (JW) и премия Southwestern Foundation through Docstars (LS-D).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
10% buffered formalinStatLab28600-11 Galllon
27 G needlesBD305109
Anti-S100A8 + S100A9 antibodyAbcamAB288715
BalanceFisher scientificS94792DFisher Science Education Portable Balances, 300 g
Citrate bufferSigma AldrichC9999-1000mL
DI waterFisher scientificSTLSL301
Dissecting forcepsFisher scientific22-327379
Ethanol, 100% 200 proofFisher scientificNC1675398Pharmco Products ETHYL ALCOHOL 200 PROOF
Ethanol, 190 proof, 95%Fisher scientificAC615110010
Ethanol, 80%Fisher scientificT08204K7
EZ-Quick Slide Staining DishIHC worldIW-2511Staining jar
EZ-Quick Slide Staining RackIHC worldIW-2512Slide rack
Feeding needleFisher scientificNC992498622 gauge, 25 mm
Fine scissorsFisher scientific14060-11
Flat forcepsFisher scientific21-125-109
Goat anti-Rabbit IgG (H+L) Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor™ 555Thermo FisherAB_2535849
Handheld homogenizerFisher scientific15-340-167
HemoCueDanlee Medical Products, Inc.BCK 64151AHemoccult Dev/ Single Slide Test Cards - CLIA Waived
Hoechst 33342Invitrogen62249
IL-10 KO MiceThe Jason LaboratoryStrain #: 002251IL10-KO mice, genotype: B6.129P2-IL-10tm1Cgn/J
IVC mouse cagingAllentownMouse 500
Liquid nitrogenAirgasNI UHP300
Microscope cover glassFisher scientific12541033
NanodropThermo FisherND-ONE-W
Normal Goat serumVector labsS-1000-20
Phosphate buffered saline (PBS)Sigma AldrichD8537
Petri dishesFisher scientificFB0875713
PiroxicamSigma AldrichP0847supply to inotiv for preparation of custom animal diet
Piroxicam-fortified chowInotivCustom200 ppm
Primer: Mouse GAPDH forwardSigma AldrichN/A5' AGGTCGGTGTGAACGGATTTG 3' forward
Primer: Mouse GAPDH reverseSigma AldrichN/A5' TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA 3' reverse
Primer: Mouse IFN-G forwardSigma AldrichN/A5' ACTGGCAAAAGGATGGTGAC 3' forward
Primer: Mouse IFN-G reverseSigma AldrichN/A5' TGAGCTCATTGAATGCTTGG 3' reverse
Primer: Mouse IL-10 forwardSigma AldrichN/A5' CTTGCACTACCAAAGCCACA 3' (common)
Primer: Mouse IL-10 reverseSigma AldrichN/A5' GTTATTGTCTTCCCGGCTGT 3' (Wild type reverse)
Primer: Mouse IL-10 reverse (2)Sigma AldrichN/A5' CCACACGCGTCACCTTAATA 3' (Mutant reverse)
Primer: Mouse IL-1B forwardSigma AldrichN/A5' GCTGAAAGCTCTCCACCTCA 3' forward
Primer: Mouse IL-1B reverseSigma AldrichN/A5' AGGCCACAGGTATTTTGTCG 3' reverse
Primer: Mouse IL-6 forwardSigma AldrichN/A5' GTTCTCTGGGAAATCGTGGA 3' forward
Primer: Mouse IL-6 reverseSigma AldrichN/A5' TTTCTGCAAGTGCATCATCG 3' reverse
Primer: Mouse TNF forwardSigma AldrichN/A5' GCAGGTTCTGTCCCTTTCAC 3' forward
Primer: Mouse TNF reverseSigma AldrichN/A5' AGTGCCTCTTCTGCCAGTTC 3' reverse
QuantStudio 7 ProThermo FisherA43183
RNAlater solutionInvitrogenAM7020RNA Stabilization Solution, 100 mL
Rneasy mini kitQiagen74104
SHURDry SD-II Slide DryerGeneral dataSD-ll-120
Simport Scientific EasyDip Slide Staining RackFisher scientific22-038-494Staining rack
SlowFade Gold antifade reagentInvitrogenS36936
Staining dish supportBioSBBSB7086
Staintray IHC slide staining systemIHC worldM918-1Humidified chamber for IHC
SuperScript VILOInvitrogen11755050
SYBR Green Master mixApplied BiosystemsA46109
Tintoretriever pressure cookerBioSBBSB7008
Tissue cassettesFisher scientific 50-197-8152Research Products International Corp Tissue Processing Cassette, Pink, 500 per Case
XylenePharmco3990000001 Gallon

Ссылки

  1. Hracs L, Windsor JW, Gorospe J, et al. Global evolution of inflammatory bowel disease across epidemiologic stages. Nature. 2025;642(8067):458-466.
  2. Dahlhamer JM, Zammitti EP, Ward BW, Wheaton AG, Croft JB. Prevalence of Inflammatory Bowel Disease Among Adults Aged ≥18 Years - United States, 2015. MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 2016;65(42):1166-1169.
  3. Ng SC, Shi HY, Hamidi N, et al. Worldwide incidence and prevalence of inflammatory bowel disease in the 21st century: a systematic review of population-based studies. Lancet. 2017;390(10114):2769-2778.
  4. Caron B, Honap S, Peyrin-Biroulet L. Epidemiology of Inflammatory Bowel Disease across the Ages in the Era of Advanced Therapies. J Crohns Colitis. 2024;18(Supplement_2):ii3-ii15.
  5. Ye Y, Manne S, Treem WR, Bennett D. Prevalence of Inflammatory Bowel Disease in Pediatric and Adult Populations: Recent Estimates From Large National Databases in the United States, 2007-2016. Inflamm Bowel Dis. 2020;26(4):619-625.
  6. Rubtsov YP, Rasmussen JP, Chi EY, et al. Regulatory T cell-derived interleukin-10 limits inflammation at environmental interfaces. Immunity. 2008;28(4):546-558.
  7. Shouval DS, Biswas A, Goettel JA, et al. Interleukin-10 receptor signaling in innate immune cells regulates mucosal immune tolerance and anti-inflammatory macrophage function. Immunity. 2014;40(5):706-719.
  8. Glocker EO, Kotlarz D, Boztug K, et al. Inflammatory bowel disease and mutations affecting the interleukin-10 receptor. N Engl J Med. 2009;361(21):2033-2045.
  9. Sazonovs A, Stevens CR, Venkataraman GR, et al. Large-scale sequencing identifies multiple genes and rare variants associated with Crohn’s disease susceptibility. Nat Genet. 2022;54(9):1275-1283.
  10. Griffin H, Ceron-Gutierrez L, Gharahdaghi N, et al. Neutralizing Autoantibodies against Interleukin-10 in Inflammatory Bowel Disease. N Engl J Med. 2024;391(5):434-441.
  11. Kühn R, Löhler J, Rennick D, Rajewsky K, Müller W. Interleukin-10-deficient mice develop chronic enterocolitis. Cell. 1993;75(2):263-274.
  12. Berg DJ, Davidson N, Kühn R, et al. Enterocolitis and colon cancer in interleukin-10-deficient mice are associated with aberrant cytokine production and CD4(+) TH1-like responses. J Clin Invest. 1996;98(4):1010-1020.
  13. Mizoguchi A. Animal models of inflammatory bowel disease. Prog Mol Biol Transl Sci. 2012;105:263-320.
  14. Hart ML, Ericsson AC, Franklin CL. Differing Complex Microbiota Alter Disease Severity of the IL-10-/- Mouse Model of Inflammatory Bowel Disease. Front Microbiol. 2017;8:792.
  15. Keubler LM, Buettner M, Häger C, Bleich A. A Multihit Model: Colitis Lessons from the Interleukin-10-deficient Mouse. Inflamm Bowel Dis. 2015;21(8):1967-1975.
  16. Büchler G, Wos-Oxley ML, Smoczek A, et al. Strain-specific colitis susceptibility in IL10-deficient mice depends on complex gut microbiota-host interactions. Inflamm Bowel Dis. 2012;18(5):943-954.
  17. Berg DJ, Zhang J, Weinstock JV, et al. Rapid development of colitis in NSAID-treated IL-10-deficient mice. Gastroenterology. 2002;123(5):1527-1542.
  18. Hale LP, Gottfried MR, Swidsinski A. Piroxicam treatment of IL-10-deficient mice enhances colonic epithelial apoptosis and mucosal exposure to intestinal bacteria. Inflamm Bowel Dis. 2005;11(12):1060-1069.
  19. Holgersen K, Kvist PH, Markholst H, Hansen AK, Holm TL. Characterization of enterocolitis in the piroxicam-accelerated interleukin-10 knock-out mouse--a model mimicking inflammatory bowel disease. J Crohns Colitis. 2014;8(2):147-160.
  20. B C, K B, V B, et al. Recommendations for euthanasia of experimental animals: Part 2. DGXT of the European Commission. Laboratory animals. 1997;31(1).
  21. Ellis JL, Yin C. Histological Analyses of Acute Alcoholic Liver Injury in Zebrafish. J Vis Exp. 2017;(123):55630.
  22. Erben U, Loddenkemper C, Doerfel K, et al. A guide to histomorphological evaluation of intestinal inflammation in mouse models. Int J Clin Exp Pathol. 2014;7(8):4557-4576.
  23. Holgersen K, Kutlu B, Fox B, et al. High-resolution gene expression profiling using RNA sequencing in patients with inflammatory bowel disease and in mouse models of colitis. J Crohns Colitis. 2015;9(6):492-506.
  24. Ananthakrishnan AN, Adler J, Chachu KA, et al. AGA Clinical Practice Guideline on the Role of Biomarkers for the Management of Crohn’s Disease. Gastroenterology. 2023;165(6):1367-1399.
  25. Singh S, Ananthakrishnan AN, Nguyen NH, et al. AGA Clinical Practice Guideline on the Role of Biomarkers for the Management of Ulcerative Colitis. Gastroenterology. 2023;164(3):344-372.
  26. Sifuentes-Dominguez LF, Li H, Llano E, et al. SCGN deficiency results in colitis susceptibility. eLife. 2019;8:e49910.
  27. Sellon RK, Tonkonogy S, Schultz M, et al. Resident enteric bacteria are necessary for development of spontaneous colitis and immune system activation in interleukin-10-deficient mice. Infect Immun. 1998;66(11):5224-5231.
  28. Bábíčková J, Tóthová Ľ, Lengyelová E, et al. Sex Differences in Experimentally Induced Colitis in Mice: a Role for Estrogens. Inflammation. 2015;38(5):1996-2006.
  29. Wagnerova A, Babickova J, Liptak R, Vlkova B, Celec P, Gardlik R. Sex Differences in the Effect of Resveratrol on DSS-Induced Colitis in Mice. Gastroenterol Res Pract. 2017;2017:8051870.
  30. Maite CB, Roy M, Emilie V. The Effect of Sex-Specific Differences on IL-10-/- Mouse Colitis Phenotype and Microbiota. Int J Mol Sci. 2023;24(12):10364.
  31. Dokoshi T, Seidman JS, Cavagnero KJ, et al. Skin inflammation activates intestinal stromal fibroblasts and promotes colitis. J Clin Invest. 2021;131(21):e147614.
  32. Dokoshi T, Chen Y, Cavagnero KJ, et al. Dermal injury drives a skin-to-gut axis that disrupts the intestinal microbiome and intestinal immune homeostasis in mice. Nat Commun. 2024;15(1):3009.
  33. Allard C, Zizzari P, Quarta C, Cota D. Food intake and body weight in rodent studies: the devil is in the details. Nat Metab. 2022;4(11):1424-1426.
  34. M W, R L, S S, et al. Combination therapy using intestinal organoids and their extracellular vesicles for inflammatory bowel disease complicated with osteoporosis. Journal of Orthopedic Translation. 2025;53.
  35. Y G, H Z, Y Y, et al. Injectable body temperature-responsive hydrogel for encephalitis treatment via sustained release of nano-anti-inflammatory agents. Biomaterials translational. 2024;5(3).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Эта статья была опубликована

Видео скоро будет доступно

Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.