Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Исследовательская статья
В данном ретроспективном исследовании было установлено, что иммунная дисфункция и внелегочные осложнения являются независимыми предикторами неблагоприятного прогноза у детей с тяжелой пневмонией, вызванной Mycoplasma pneumoniae. Сывороточные IgA, IgG, IgM и C-реактивный белок (CRP) продемонстрировали предварительную прогностическую значимость, однако для подтверждения их клинической применимости необходимы проспективные исследования.
Тяжелая пневмония, вызванная Mycoplasma pneumoniae (MPP), у детей связана с иммунной дисрегуляцией и неблагоприятными исходами; однако клиническая значимость рутинно измеряемых иммунных и воспалительных маркеров остается неопределенной. В данном ретроспективном поисковом исследовании оценивались факторы, связанные с плохим прогнозом, а также индивидуальная дискриминационная способность иммуноглобулина A (IgA), иммуноглобулина G (IgG), иммуноглобулина M (IgM) и С-реактивного белка (CRP). В исследование было включено в общей сложности 172 ребенка с MPP, проходивших лечение в период с апреля 2018 по апрель 2021 года, и 40 здоровых добровольцев в контрольной группе. Уровни биомаркеров сравнивались в зависимости от степени тяжести заболевания и прогностических групп. Был проведен анализ индивидуальных рабочих характеристик (ROC-кривых) и поисковая логистическая регрессия. Уровни сывороточного IgA, IgG и IgM были значимо ниже, тогда как уровни CRP были значимо выше у детей с тяжелым течением болезни и плохим прогнозом по сравнению с соответствующими контрольными группами (P < 0.05). Площади под ROC-кривой (AUC) для IgA, IgG, IgM и CRP составили 0,78, 0,707, 0,696 и 0,796 соответственно. Продолжительность лихорадки, тип поражения, иммунная дисфункция, повышенный уровень CRP и экстрапульмональные осложнения значимо различались между прогностическими группами. Поисковый многофакторный анализ выявил иммунную дисфункцию и экстрапульмональные осложнения как независимые факторы, связанные с плохим прогнозом. Эти результаты обосновывают необходимость дальнейшего изучения иммунных и воспалительных биомаркеров для стратификации рисков у детей с тяжелой MPP; тем не менее, для подтверждения их клинической значимости необходимы проспективные исследования, а полученные данные не следует интерпретировать как валидированную модель клинического прогнозирования.
Тяжелая пневмония остается основной причиной заболеваемости у детей и возникает в результате сложных взаимодействий между возбудителем инфекции, иммунным ответом хозяина и воспалительным каскадом1,2,3. Mycoplasma pneumoniae (MP) является распространенной причиной внебольничной пневмонии у детей, и пневмония, вызванная M. pneumoniae (MPP), составляет значительную долю всех случаев детских пневмоний4. Несмотря на то, что большинство детей выздоравливают при надлежащем лечении, у некоторых развивается тяжелая или рефрактерная форма заболевания, характеризующаяся стойкой лихорадкой, прогрессирующими поражениями легких, экстрапульмональными осложнениями и другими неблагоприятными исходами5,6,7,8. Таким образом, раннее выявление детей с повышенным риском неблагоприятных исходов имеет большое клиническое значение.
В предыдущих исследованиях изучались воспалительные биомаркеры, данные визуализации и клинические характеристики, связанные с тяжестью и прогнозом MPP; однако сообщаемые прогностические значения иммунных показателей были противоречивыми9. Вместо разработки клинической прогностической модели в настоящем исследовании приводится стратифицированное сравнение уровней рутинно измеряемых иммуноглобулина A (IgA), иммуноглобулина G (IgG), иммуноглобулина M (IgM) и С-реактивного белка (CRP) у здоровых лиц контрольной группы, детей с легкой и среднетяжелой формой MPP, детей с тяжелой формой MPP и в прогностических группах. Кроме того, был проведен эксплораторный анализ факторов, связанных с неблагоприятным прогнозом у детей с тяжелой формой MPP. Основная цель заключалась в том, чтобы определить, связаны ли эти рутинно измеряемые биомаркеры и клинические характеристики с неблагоприятным прогнозом. Была выдвинута гипотеза, что более низкие уровни иммуноглобулинов, более высокий уровень CRP, иммунная дисфункция и внелегочные осложнения будут ассоциированы с неблагоприятными исходами.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Данное ретроспективное исследование было проведено в соответствии с требованиями учреждения и Хельсинкской декларацией и одобрено Комитетом по этике госпиталя Нанкин Тонрен при медицинской школе Юго-восточного университета (номер одобрения 2024-03-039-K01). Требование о получении индивидуального информированного согласия было отменено в связи с ретроспективным дизайном исследования и использованием анонимизированных данных.
Клинические данные
В качестве основной группы были включены в общей сложности 172 ребенка с MPP, проходивших лечение в период с апреля 2018 г. по апрель 2021 г., а также 40 здоровых детей в качестве контрольной группы. Основная группа состояла из 103 мальчиков и 69 девочек со средним возрастом 7,15 ± 2,97 года; контрольная группа состояла из 24 мальчиков и 16 девочек со средним возрастом 7,02 ± 2,31 года. Исходный возраст и пол значимо не различались между группами (P > 0,05). Согласно описанным критериям10, MPP классифицировали как тяжелую форму при наличии как минимум двух из следующих признаков: выраженная одышка, частота сердечных сокращений >120 ударов/мин, лихорадка продолжительностью >10 дней, поражение нескольких долей легких или обширная легочная инфильтрация. Остальные случаи классифицировали как легкую или среднетяжелую форму MPP.
Критерии включения
Все дети с MPP соответствовали клиническим диагностическим критериям MPP11. Диагноз подтверждался титром антител к MP >1:160, положительным тестом на ДНК MP или четырехкратным и более увеличением уровня специфических IgG к MP в сыворотке крови между острой фазой и фазой выздоровления. Клинические проявления включали кашель, одышку, тахикардию, цианоз или диспноэ, а визуализация грудной клетки выявила односторонние или двусторонние поражения легких. В исследование были включены участники в возрасте от 8 месяцев до 10 лет.
Дети исключались из исследования при наличии подтвержденной вирусной, бактериальной или грибковой пневмонии; тяжелой дисфункции основных органов, включая сердце, мозг, печень или почки; другого заболевания легких; злокачественной опухоли; врожденной иммунной дисфункции или недостаточности клинических данных для проведения необходимых анализов.
Дети в контрольной группе были в возрасте от 8 месяцев до 10 лет, были здоровы и имели нормальные показатели при физикальном обследовании. Контрольная группа использовалась только для сравнения биомаркеров и не принимала участия в прогностическом или регрессионном анализе.
Сбор данных
В госпитальной информационной системе были проанализированы такие данные, как возраст, пол, продолжительность лихорадки, тип и локализация очагов поражения, статус иммунной функции, уровень СРБ, внелегочные осложнения, сведения о лечении и результаты последующего наблюдения. Иммунная дисфункция определялась на основании данных медицинских записей, сделанных до оценки исходов, исходя из значений иммуноглобулинов, которые были ниже возрастных референсных интервалов лабораторной службы госпиталя. Первичный сбор данных осуществлял Boling Han, после чего Rui Wang провел перекрестную проверку по оригиналам медицинских карт. Все расхождения устранялись путем обсуждения между двумя исследователями. Перед началом анализа была подтверждена полнота данных. Полные определения переменных, правила кодирования и обезличенный набор данных когорты представлены в Дополнительном файле 1.
Измерение показателей иммунной функции и маркеров воспаления
В течение 24 часов после включения в исследование у каждого участника было отобрано 4 mL венозной крови натощак. Образцы центрифугировали при 1,50 × g в течение 10 min при 4°C, и полученную сыворотку хранили в соответствии с протоколом институциональной лаборатории до проведения анализа. Концентрации IgA, IgG и IgM в сыворотке определяли методом иммунотурбидиметрии, а уровень CRP — методом иммуноферментного анализа. В частности, образцы сыворотки хранили при –80 °C не более 3 месяцев до анализа, избегая повторных циклов замораживания-оттаивания.
Протокол лечения
Лечение назначалось индивидуально в зависимости от степени клинической тяжести и действующей практики учреждения. Стандартная терапия включала противоинфекционную терапию и поддерживающий уход, в том числе кислородную терапию, ингаляции через небулайзер, введение растворов и поддержание водно-электролитного баланса, жаропонижающее лечение и другие симптоматические меры по клиническим показаниям. Детям с тяжелой формой MPP назначали азитромицин, а метилпреднизолон использовался в качестве вспомогательного противовоспалительного средства при наличии клинических показаний. Несмотря на то, что лечение всех пациентов проводилось в соответствии с едиными принципами учреждения, конкретные поддерживающие меры подбирались индивидуально, а не по строгому стандарту. В связи с ретроспективным дизайном исследования точные сроки лечения и подробности режимов терапии были доступны не для всех участников.
Последующее наблюдение за прогнозом
Дети с тяжелой формой MPP наблюдались ежемесячно в ходе амбулаторных визитов и телефонных контактов до апреля 202 года. Прогноз считался благоприятным при нормализации температуры тела, уменьшении респираторных симптомов и рассасывании или исчезновении легочных очагов. Неблагоприятный прогноз определялся как комбинированный исход, включающий стойкую лихорадку, усиление кашля или одышки, отсутствие рентгенологического улучшения или рентгенологическое ухудшение, перевод в другую больницу или летальный исход12. Данные компоненты могли перекрываться и не анализировались как взаимоисключающие исходы. Все 14 детей с тяжелой формой MPP прошли полное последующее наблюдение; потерь участников в процессе наблюдения не было.
Статистический анализ
Анализ данных проводили с использованием программы IBM SPSS Statistics версии 2.0. Непрерывные переменные были представлены в виде среднего значения ± стандартного отклонения. Для сравнения двух групп использовали t-критерий для независимых выборок, а для сравнения более чем двух групп — однофакторный дисперсионный анализ. Категориальные переменные были представлены в виде n (%) и сравнивались с помощью критерия хи-квадрат. Для индивидуальной оценки IgA, IgG, IgM и CRP использовали ROC-кривые, при этом указывались AUC, 95% доверительные интервалы, пороговые значения, чувствительность и специфичность. Четыре биомаркера не объединялись в многофакторную прогностическую модель. Переменные, связанные с прогнозом при одномерном анализе, включались в исследовательскую пошаговую бинарную логистическую регрессию. Результаты регрессии были представлены в виде бета-коэффициентов, стандартных ошибок, статистики Уолда, отношений шансов (OR), 95% доверительных интервалов и значений P. В связи с ограниченным количеством случаев неблагоприятного прогноза, регрессионный анализ интерпретировался как исследовательский анализ ассоциаций, а не как валидированная прогностическая модель. Двустороннее значение P < 0,05 считалось статистически значимым. Нормальность распределения непрерывных переменных оценивали с помощью критерия Шапиро-Уилка, а гомогенность дисперсии — с помощью критерия Ливена. В переменных, включенных в анализ, отсутствовали пропущенные значения, поэтому импутация не проводилась и использовался анализ полных случаев.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Сравнение иммунных и воспалительных маркеров между группами
Уровни IgA, IgG и IgM были ниже в группе с тяжелым течением, чем в группе с легким или среднетяжелым течением, и ниже в группе с легким или среднетяжелым течением, чем в контрольной группе. Для СРБ наблюдалась противоположная тенденция. Попарные различия были статистически значимыми (P < 0.05; Таблица 1).
Сравнение иммунных и воспалительных маркеров меж...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
В настоящем ретроспективном исследовании изучались общедоступные иммунные и воспалительные маркеры, а также клинические факторы, связанные с неблагоприятным прогнозом у детей с тяжелой формой MPP. Основным вкладом работы является не создание нового валидированного инструмента прогнозирования, а стратифицированное описание уровней IgA, IgG, IgM и CRP в зависимости от степени тяжести и прогностических групп, наряду с предварительной оценкой клинических факторов, связанных с неблагоприятными исходами. Такое позиционирование...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов, связанного с данным исследованием. Финансовые или нефинансовые конфликты, включая трудоустройство, консультирование, владение акциями, гонорары или оплачиваемые экспертные заключения, отсутствуют.
Неприменимо. Данное исследование не получало специального финансирования.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Клинический химический/иммунотурбидиметрический анализатор | Siemens Healthineers | BN II | Прибор, используемый для определения IgA, IgG и IgM |
| Набор для ИФА на С-реактивный белок | Thermo Fisher Scientific / Invitrogen | BMS28INST | Рутинное клиническое лабораторное измерение уровня CRP в сыворотке крови |
| IBM SPSS Statistics | IBM Corp. | Version 2.0 | Статистический анализ |
| Иммунотурбидиметрический тест/реагент на IgA | Siemens Healthineers | NA | Рутинное клиническое лабораторное измерение уровня IgA в сыворотке крови |
| Иммунотурбидиметрический тест/реагент на IgG | Siemens Healthineers | NA | Рутинное клиническое лабораторное измерение уровня IgG в сыворотке крови |
| Иммунотурбидиметрический тест/реагент на IgM | Siemens Healthineers | NA | Рутинное клиническое лабораторное измерение уровня IgM в сыворотке крови |
| Микропланшетный ридер | Thermo Fisher Scientific | Multiskan FC | Прибор, используемый для проведения ИФА |
| Microsoft Excel | Microsoft Corporation | Version 2024 | Организация данных и подготовка таблиц |
| Microsoft Word | Microsoft Corporation | Version 2024 | Подготовка рукописи |
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.