Методическая статья

Электроакупунктура с помощью изофлурана в модели олигоастенозооспермии у крыс

DOI:

10.3791/71878

⸱

16 июня 2026 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Ningxia Medical University School of Traditional Chinese Medicine, 2Medical College of Acu-Moxi and Rehabilitation, Guangzhou University of Chinese Medicine, 3Key Laboratory of Dryness Syndrome in Chinese Medicine, Ministry of Education, Ningxia Regional Key Laboratory of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine for Prevention and Treatment of Regional High Incidence Disease, Ningxia Medical University

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Этот протокол подробно описывает установление модели олигоастенозооспермии, индуцированной аденином, у крыс и последующую доставку электроакупунктуры в CV3, CV4, ST36 и SP6 под анестезией изофлурана. Результаты были подтверждены с помощью компьютерного анализа сперматозоидов по количеству и подвижности, а также с помощью гистологии яичек с окрашиванием гематоксилина и эозина.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Олигоастенозооспермия — одна из самых распространённых форм мужской репродуктивной дисфункции. В исследованиях грызунов регулярное проведение электроакупунктуры (ЭА) на повторных сеансах представляет собой технические трудности, особенно при сочетании точок акупунктуры средней линии брюшной полости и задней конечности, где стабильный контакт с электродом критически важен. Чжунцзи (CV3), Гуаньюань (CV4), Цзусанли (ST36) и Саньиньцзяо (SP6) были выбраны, поскольку эти точки часто используются в протоколах акупунктуры при лечении бесплодия и аномалий спермы, а конфигурация брюшной средней линии и задних конечностей подходит для стандартизированной пары электродов. В этом отчёте описывается практический протокол установления модели олигоастенозооспермии у крыс с аденином и для применения ЭА с поддержкой изофлурана с парной стимуляцией CV3–CV4 и ST36–SP6. Самцы крыс рода Спраг-Доули получали аденин ежедневно в течение 28 дней для индуцирования репродуктивных нарушений. Впоследствии ЭА вводилась ежедневно в течение 28 дней под ингаляционной анестезией, с использованием 3% изофлурана для индукции и 1,5% для поддержания маски, чтобы обеспечить стабильное размещение иглы и соотношение электродов (CV3–CV4 и ST36–SP6) с определёнными параметрами стимуляции (2 Гц, 1,5 мА, 30 мин). Эффекты лечения оценивались с помощью компьютерного анализа спермы на количество и подвижность сперматозоидов, дополненное гистологией по тестикулярному гематоксилину и эозину (HE). Репрезентативные результаты показывают, что воздействие аденина снижало количество и подвижность сперматозоидов, а также нарушало архитектуру семенных канальцев, тогда как ЭА была связана с частичным восстановлением как параметров спермы, так и морфологии яичек. Этот протокол предоставляет готовый справочник для исследований, требующих последовательной доставки ЭА и проверки спермы/гистологии в модели олигоастенозооспермии у крыс.

Введение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Мужские факторы существенно влияют на бесплодие, составляя примерно половину всех бесплодных пар, при этом аномалии в составе сперматозоидов и подвижности являются одними из самых распространённых клиническихрезультатов 1,2. Олигоастенозооспермия, характеризующаяся снижением концентрации сперматозоидов и снижением подвижности, является одной из самых распространённых форм мужской репродуктивнойдисфункции 3,4. Несмотря на наличие вспомогательных репродуктивных методов и эмпирических медицинских терапий, эффективные стратегии улучшения качества спермы остаются ограниченными, что подчёркивает необходимость дальнейших доклиническихисследований 5,6,7. Эти клинические и трансляционные потребности мотивируют разработку воспроизводимых экспериментальных рабочих процессов для изучения мужских репродуктивных нарушений в контролируемых условиях.

Акупунктурные вмешательства изучались на выявление аномалий спермы и мужского бесплодия как в клиническом, так и в экспериментальномконтекстах 8. Хотя клинические исследования указывают на потенциальные преимущества для определённых параметров спермы, их конструкция, протоколы вмешательства и показатели исхода сильноразличаются 9. Электроакупунктура (ЭА) особенно подходит для лабораторных исследований, поскольку обеспечивает контролируемые параметры стимуляции и более равномерную регуляцию, чем ручная акупунктура, которая облегчает оценку изменений в измеримых репродуктивных результатах, связанных слечением. 10,11,12. Это процедурное преимущество делает EA хорошо подходящей для структурированных доклинических рабочих процессов в мужских репродуктивных исследованиях.

Животные модели играют центральную роль в такой оценке, но выбор модели остаётся ключевым методологическим вопросом в исследованиях олигоастенозооспермии. Недавний систематический обзор отметил, что методы моделирования, вызванные бусульфаном, вызывают споры и демонстрируют значительную гетерогенность в индексах оценки, что подчеркивает необходимость более чётких процедур и более последовательныхпоказаний 13. Модели на основе аденина предоставляют практический экспериментальный подход, поскольку аденинная гавага может вызывать репродуктивные нарушения у крыс, включая снижение конечных точек, связанных с спермой, и гистологическое повреждение тканияичек 14,15. В нашей предыдущей работе модель крысы олигоастенозооспермии, индуцированная аденином, была обработана ЭА в наборе акупунктучек мозга и почек Шу-Му (Эпангсаньсянь, BL23, GB25 и KI3), наряду с неакупунктичными и положительными лекарственными контролями состояний, с расширенными показателями, включающими коэффициенты органов и уровень гормонов в сыворотке, количественно оценённыеELISA 16. Опираясь на эту экспериментальную основу и признавая гетерогенность выбора акупунктурных точек, проектирования контроля, параметров стимуляции и показателей результатов в существующих исследованиях ЭА, настоящий протокол был разработан для уточнения и расширения методологического процесса для стабильной передачи ЭА.

Соответственно, настоящий протокол сосредоточен на доставке, учитывая две практические переменные, критически важные для повторных сеансов EA у грызунов. Во-первых, чтобы предотвратить смещение иглы и прерывистый контакт с электродом, вызванный движением животных и тягой свинцовой проволоки, мы описываем процедуру, поддерживаемую изофлураном, которая стабилизирует позиционирование во время стимуляции и обеспечивает надёжный контакт электрода на протяжении всех сеансов; Это особенно важно при сочетании средней линии живота с точками задних конечностей. Во-вторых, на основе предыдущих обзоров и анализов акупунктурных точек 9,17, определивших CV4, SP6, ST36 и CV3 как распространённые репродуктивные акупунктурные точки в протоколах бесплодия и аномалий спермы, мы выбрали CV3, CV4, ST36 и SP6 и применили парную стимуляцию к CV3-CV4 и ST36-SP6. Эта конфигурация, сочетающая среднюю и заднюю конечность брюшной полот, стандартизирует соединения электродов, минимизирует изменчивость, вызванную нестабильным прикреплением свинца, и поддерживает воспроизводимую доставку ЭА при повторных сеансах лечения. Для поддержания протокольно-ориентированного объёма и предотвращения дублирования ранее зарегистрированных эндокринных, механистических или положительных контрольных модулей, проверка результатов ограничена первичным набором показаний семенной и яичка. Этот набор включает компьютерный анализ сперматозоидов и окрашивание яичек HE, что достаточно для подтверждения успешной индукции фенотипов и изменений, связанных с лечением, в этом рабочем процессе.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Все процедуры на животных соответствовали институциональным рекомендациям по уходу и использованию лабораторных животных и были одобрены Этическим комитетом Медицинского университета Нинся (номер одобрения). IACUC-NYLAC-2021-130). Самцы крыс рода Спраг-Доули, возрастом 8 недель и весом 180–220 г, были получены в Экспериментальном зооцентре Медицинского университета Нинся (номер лицензии). SYXK (Ning) 2020-0001). Животных содержали в стандартных лабораторных условиях при температуре 22–24 °C и относительной влажности 52%–56% с циклом света 12 часов и 12 часов темноты, и у них был свободный доступ к корму и воде.

1. Подготовка животных, распределение групп и создание модели, индуцированной аденинами

  1. Акклиматизируйте крыс в течение 7 дней перед экспериментом и ежедневно контролируйте их общее состояние.
  2. После акклиматизации присвоите девяти крысам уникальные идентификационные номера и случайным образом распределите их в соотношении 1:1:1 на три группы с помощью компьютерной последовательности рандомизации: контрольную группу (n = 3), модельную группу (n = 3) и группу EA (n = 3). Используйте каждую крысу в качестве экспериментальной единицы и включайте всех животных и образцы в итоговый анализ, если не выполнены заранее заданные критерии исключения.
  3. Держите исследователей в процессе компьютерного анализа спермы и гистологической оценки, не обращая внимания на распределение групп.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Исследователи, проводящие ЭА, не могут быть ослеплены, поскольку вмешательство включает видимые групповые процедуры.
  4. Приготовьте суспензию 20 мг/мл аденина в нормальном физиологическом растворе, содержащую 0,5% (с в/в) гуммиарабика в качестве подвешиваемого агента, и тщательно перемешайте как до, так и во время отдыха, чтобы предотвратить осадкоотделение.
  5. Вводите нормальный физиологический раствор в контрольную группу и адениновую суспензию в модельные и EA группы по гаважу при 10 мл/кг, что эквивалентно 1 мл/100 г массы тела, один раз в день в течение 28 последовательных дней. Используйте дозу аденина 200 мг/кг в день.
  6. Фиксируйте массу тела и общее состояние на протяжении всего периода моделирования.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Аденин вводится в виде суспензии и склонен к образованию осадков при обработке. Поддерживайте непрерывное перемешивание во время гаважа, чтобы минимизировать осадки, которые могут привести к несогласованности дозировки и блокировке иглы для гава. Если возникает засор, тщательно подвесьте раствор и замените иглу гаваджа перед продолжением.

2. Анестезия изофлурана для электроакупунктуры (рисунок 1)

  1. Подготовьте систему анестезии изофлураном с индукционной камерой, носовой маской и грелкой.
  2. Индуцировать анестезию с 3% изофлураном в индукционной камере до заметного снижения спонтанной активности.
  3. Перенесите крысу на грелку в положении лежа на спине и поддерживайте анестезию с помощью 1,5% изофлурана через носовую маску во время ЭА.
  4. Подтвердите адекватную анестезию путём уменьшения спонтанных движений и потери рефлекса моргания при поддержании регулярного дыхания.

3. Точность и контроль качества, доставка стимуляции

  1. Используйте грелку, чтобы поддерживать температуру тела на протяжении всей сессии и уменьшать физиологическую изменчивость из-за гипотермии.
  2. Применяйте постоянные настройки анестезии для всех животных и сеансов, используя 3% изофлурана для индукции и 1,5% изофлурана для поддержания. Держите глубину анестезии на минимальном уровне, чтобы не испытывать трудности, при этом сохраняя регулярное дыхание.
  3. Вставьте стерильные одноразовые иглы для акупунктуры (0,25 мм × 13 мм) вертикально в выбранные акупунктурные точки. Ввести иглы на глубину примерно 2 мм в CV3 и CV4, 7 мм в ST36 и 5 мм в SP6.
  4. После введения иглы и соединения электрода визуально убедитесь, что каждая игла остаётся стабильно расположенной, без заметного ослабления из-за дыхания или движения конечностей. Если происходит смещение, введите иглу вертикально на исходную глубину и проверьте стабильный контакт с электродом, прежде чем возобновить стимуляцию.
  5. Зафиксируйте провода электрода у проксимального конца рукоятки иглы, затем проложите и закрепите их, чтобы минимизировать сцепление, так как вес свинца и дергание — частые причины отслоения.
  6. Подтвердите эффективную стимуляцию, наблюдая лёгкий локальный мышечный тремор в акупунктурной точке без грубого движения тела. Если тремор отсутствует, перепроверьте и подтвердите контакт электрода и установку иглы.
  7. Проведите одну стандартизированную проверку в середине сессии через 15 минут. При необходимости перенастройте иглы и подтвердите лёгкий локальный тремор, прежде чем приступить к снижению вариативности в подаче стимуляции у животных.
    ПРИМЕЧАНИЕ: При подключении устройства EA зажмите провода к проксимальному концу рукоятки иглы, чтобы уменьшить сцепление из-за веса кабеля. При необходимости закрепите поводок и/или иглу скотчем, чтобы предотвратить отслоение во время сессии.

4. Лечение электроакупунктурой (Рисунок 2)

  1. Начните ЭА на следующий день после 28-дневного периода аденина и вводите его один раз в день в течение 28 дней подряд.
  2. Под анестезией изофлурана обнажайте нижнюю часть живота и задние конечности, а также определите Чжундзи (CV3), Гуаньюань (CV4), Зусанли (ST36) и Саньинцзяо (SP6) с помощью поверхностных анатомических ориентиров.
  3. Вставьте стерильные одноразовые иглы для акупунктуры (0,25 мм × 13 мм) вертикально на глубину 2 мм в CV3 и CV4, 7 мм в ST36 и 5 мм в SP6.
  4. Подключите одну пару электродов к CV3 и CV4, а другую — к ST36 и SP6.
  5. Обеспечивать электрическую стимуляцию на частотах 2 Гц и 1,5 мА в течение 30 минут. Используйте эти параметры, чтобы соответствовать тем, что ранее применялись при адениндуцированной олигоастенозооспермии16.
  6. Примените проверки качества, описанные в разделе 3, включая одну проверку в середине сессии на 15 минут.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Локализовать акупунктурные точки крыс с использованием Yong Tang's Experimental Acupuncture and Moxibustion Science18, Приложение II («Акупунктурные точки, широко используемые у экспериментальных животных»), а также сравнительные анатомические ориентиры. Поскольку акупунктурные точки крыс представляют собой отдельные анатомические области, а не фиксированные геометрические точки, используйте согласованное положение тела, фиксированные анатомические точки отсчёта и измерения поверхности на основе миллиметров среди животных и сессий. Найдите Чжундзи (CV3) на вентральной средней линии примерно в 33 мм хвостовой части от центра пупка. Определите Гуаньюань (CV4) на вентральной средней линии примерно в 25 мм хвостовой части от центра пупка, рядом с подкожными поверхностными артериями брюшной стенки. Найдите Зусанли (ST36) на заднелатеральной стороне колена, примерно в 3 мм дистально от головки малоберцовой кости. Найдите Саньинцзяо (SP6) на медиальной стороне задней конечности, примерно в 10 мм проксимально от кончика медиального маллеолюса. Применяйте одинаковые ориентиры локализации, положение тела, угол входа и глубину вставки на всех животных и сеансы обработки.

5. Сбор образцов

  1. Постите крыс в течение 24 часов после финальной сессии EA.
  2. Индуцировать глубокую анестезию через внутрибрюшинную инъекцию 2% пентобарбитала натрия при 2 мл/кг перед сбором ткани. Подтвердите глубокую анестезию по отсутствию рефлектора отмены педали и спонтанного движения.
  3. Усыпить крысу путём обезглавливания под глубокой анестезией, следуя утверждённым институциональными протоколами.
  4. Немедленно экспонируйте репродуктивные органы асептически. Выделить один каудовый припидидим для анализа сперматозоидов и вырезать одно яичко для гистологического исследования.
  5. Зафиксируйте яичко в 4% параформальдегиде не менее 24 часов до гистологической обработки.

6. Анализ спермы

  1. Удалите окружающий жир из припадка хвоста и немедленно поместите ткань в 2 мл нормального физиологического раствора, предварительно нагретого до 37 °C.
  2. Инкубировать ткань в водяной бане при температуре 37 °C в течение 5 минут, измельчить её офтальмологическими ножницами, профильтровать суспензию через сетку с 200 сетками и аккуратно перемешать фильтрат.
  3. Загрузите 10 мкл аликвота сперматозоида в предварительно нагретую камеру подсчета и проанализируйте количество и подвижность сперматозоидов с помощью системы компьютерного анализа спермы (CASA).
  4. Используйте одинаковый тип камеры, условия нагрева и настройки сбора для всех образцов в данном эксперименте.

7. Гистологическое исследование ткани яичек

  1. Зафиксируйте ткань яичка в 4% параформальдегида минимум на 24 часа. Обрежьте целевую область и поместите её в маркированные кассеты.
  2. Обезвоживайте образцы через серию градируемого этанола, очищайте их в ксилоле, инфильтруйте парафином, встраивайте и разделяйте с размером 4 мкм.
  3. Поплавьте секции на водяной бане при температуре 40 °C, закрепите их на горках и сушите в духовке при температуре 60 °C.
  4. Для окрашивания гематоксилином и эозином обезвошьте эти срезы в ксилоле, увлажните их с помощью градированного этанола, окрашивайте гематоксилином в течение 5–10 минут и эозином 1–5 минут, затем обезвоживайте, очищайте и крепите.
  5. Изучить организацию семенных канальцочек и структуру сперматогенных клеток при равномерном увеличении во всех группах.

8. Оценка создания модели и изменений, связанных с лечением,

  1. Подтверждение формирования модели путём снижения количества и подвижности сперматозоидов, а также дезорганизованной структуры семениевых канальцев по сравнению с контрольной группой.
  2. Подтвердить изменения, связанные с лечением, увеличением количества и подвижности сперматозоидов, а также частичным восстановлением морфологии семеновидных канальцов в группе EA относительно модельной группы.
  3. Заранее определите технически скомпрометированные образцы, такие как те, с задержкой обработки спермы, неудачей загрузки камеры или низкокачественные участки, не связанные с моделированием, в качестве критериев исключения. Документируйте любые исключения во время анализа.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Анализ спермы (рисунок 3)
Суспензии сперматозоидов в эпидидимальной фазе анализировались с помощью компьютерной системы анализа спермы для количественного определения количества и подвижности сперматозоидов. В этом репрезентативном наборе данных введение аденина значительно снизило оба параметра относительно контрольной группы, что подтвердило успешное создание модели. Впоследствии вмешательство ЭА увеличило количество и подвижность сперматозоидов по сравнению с модельной группой (

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Учитывая многофакторную этиологию олигоастенозооспермии и ограниченную эффективность доступных фармакологических методов лечения, акупунктура и ЭА привлекают внимание как повторяемые, нефармакологическиевмешательства 19. Существующая клиническая и доклиническая литература предлагает несколько правдоподобных механизмов, посредством которых акупунктура или ЭА могут влиять на мужскую репродуктивную функцию, включая модуляцию нейроэндокринной регуляции, улучшение микр...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторы не заявляют о конкурирующих финансовых или нефинансовых интересах.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Эта работа была поддержана Региональным научным фондом Национального фонда естественных наук Китая на 2024 год (82460972) и Региональным научным фондом Национального фонда естественных наук Китая (82260967); Ключевую программу исследований и разработок автономного района Нинся Хуэй на 2022 год (2022BEG02040); первоклассный проект строительства дисциплин Школы традиционной китайской медицины Нинсяского медицинского университета (ZY0019110305); Ключевую исследовательскую и разработочную программу округа Янчи на 2023 год (2023YCYDCT003); и специальную программу «Наука и технологии, благотворяющие народ» автономного района Нинся Хуэй (2024CMG03054).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
АденинBeijing Solarbio Science & Technology Co.Ltd.A8330
CASA компьютерная система анализа спермыNanning Songjing Tianlun Biotechnology Co.,Ltd.VICOS-SPERM
ЦентрифугаSartoriusA-14C
Дифференцирующая жидкостьShanghai Biyuntian Biotechnology Co.,LtdC0163M
Одноразовые стерильные иглые иглыHanyi brand0.25 мм ´ 13 мм
Сушильная машинаLeicaHI1220
Электрический стимуляторChangzhou Yingdi Electronic Medical Device Co., LtdKWD-808I
Электронные весыHangzhou Youheng Weighing Equipment Co.,LtdHLD-6002
Эозин Y раствор окрашиванияLanke BiotechBS248
Раствор гематоксилинового окрашиванияZhuhai Beso Biotechnology Co. LTDBA-4041
ИзофлуранRWD Life Science Co., Ltd.R510-22-10
МикромLeicaRM2255
Нейтральный бальзамBeijing Zhongshan Jinqiao Biotechnology Co.,LtdZli-9555
Машина для парафинового вложенияLeicaHistoCore Arcadia H
SD крысыAnimal Center of Ningxia Medical University8-недельные, Мужские, 180-220 г
Сканер слайдовLeicaAperio LV1
Машина анестезии для малых животныхRWD Life Science Co., Ltd.R500
Вихревой осцилляторHaimen Qilin Bell Instrument Manufacturing Co.,LtdQL-902
Согревающий валикDongguan Hongda Electronics Co., Ltd.45W-80X28CM

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Björndahl, L., et al. The sixth edition of the WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen: ensuring quality and standardization in basic examination of human ejaculates. Fertil Steril. 117 (2), 246-251 (2022).
  2. Agarwal, A., et al. Male infertility. Lancet. 397 (10271), 319-333 (2021).
  3. Abu-Halima, M., et al. Sperm motility annotated genes: are they associated with impaired fecundity? Cells. 12 (9), 21(2023).
  4. Li, S. L., et al. Mechanisms of traditional Chinese medicine in regulating Nrf2-related signaling pathways for the treatment of oligoasthenozoospermia: a review. J Ethnopharmacol. 360, 21(2026).
  5. Pathak, U. I., Gabrielsen, J. S., Lipshultz, L. Cutting-edge evaluation of male infertility. Urol Clin North Am. 47 (2), 129(2020).
  6. Kimmins, S., et al. Frequency, morbidity and equity - the case for increased research on male fertility. Nat Rev Urol. 21 (2), 102-124 (2024).
  7. Assidi, M. Infertility in men: advances towards a comprehensive and integrative strategy for precision theranostics. Cells. 11 (10), 29(2022).
  8. Feng, J. X., et al. The efficacy and mechanism of acupuncture in the treatment of male infertility: a literature review. Front Endocrinol. 13, 14(2022).
  9. You, F., Ruan, L. G., Zeng, L., Zhang, Y. Efficacy and safety of acupuncture for the treatment of oligoasthenozoospermia: a systematic review. Andrologia. 52 (1), 9(2020).
  10. Wei, J. Q., et al. Bibliometric and visualized analysis of electroacupuncture in the past 10 years. Complement Ther Med. 69, 10(2022).
  11. Yu, Y., et al. Effects and mechanism of action of transcutaneous electrical acupuncture point stimulation in patients with abnormal semen parameters. Acupunct Med. 37 (1), 25-32 (2019).
  12. Jia, W., Wang, C. A., Yin, Y. Acupuncture for oligospermia and asthenozoospermia: a systematic review and meta-analysis. Medicine. 100 (48), 8(2021).
  13. Pu, R. Y., et al. Modeling methods for busulfan-induced oligospermia and asthenozoospermia in mice: a systematic review and meta-analysis. J Assist Reprod Genet. 40 (1), 19-32 (2023).
  14. Yu, Z. Z., Chen, J., Shou, P. Q., Feng, L. Effects of micronutrients on the reproduction of infertility rat model induced by adenine. Int J Clin Exp Med. 7 (9), 2754-2762 (2014).
  15. Zhu, C. Z., et al. Short-term oral gavage administration of adenine induces a model of fibrotic kidney disease in rats. J Pharmacol Toxicol Methods. 94, 34-43 (2018).
  16. Li, K. Y., et al. Mechanism of Shu-Mu brain-kidney acupoint in treating oligoasthenospermia in rats via the hypothalamic-pituitary-testicular axis. J Vis Exp. (219), e67912(2025).
  17. Liu, J., et al. Exploration of acupoint compatibility patterns in acupuncture treatment for infertility based on data mining. Int J Womens Health. 18, 15(2026).
  18. Tang, Y. Experimental Acupuncture and Moxibustion Science. , Shanghai Science and Technology Press. Shanghai. (2021).
  19. Wang, Z., et al. Efficacy and safety of nonpharmacological strategies for the treatment of oligoasthenozoospermia: a systematic review and Bayesian network meta-analysis. Eur J Med Res. 28 (1), 16(2023).
  20. He, Y., et al. Acupuncture treatment of male infertility: a systematic review. Zhonghua Nan Ke Xue. 21 (7), 637-645 (2015).
  21. Napadow, V., et al. Effects of electroacupuncture versus manual acupuncture on the human brain as measured by fMRI. Hum Brain Mapp. 24 (3), 193-205 (2005).
  22. Grimm, H., et al. Advancing the 3Rs: innovation, implementation, ethics and society. Front Vet Sci. 10, 13(2023).
  23. Rinwa, P., Eriksson, M., Cotgreave, I., Backberg, M. 3R-refinement principles: elevating rodent well-being and research quality. Lab Anim Res. 40 (1), 11(2024).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи