Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Исследовательская статья

Сетевая фармакология и экспериментальные исследования β-ситостерола в лечении хронической обструктивной болезни лёгких с помощью глюкокортикоидного рецептора

104 просмотров

⸱

DOI:

10.3791/72018

⸱

7 августа 2026 г.

 ,  ,  , 
1Bishan Hospital of Chongqing Medical University, Bishan Hospital of Chongqing, 2Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 3Geriatrics Department, The Second Affiliated Hospital Zhejiang University School of Medicine, 4Department of Traditional Chinese Medicine, Nanjing Yuhua Hospital

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

β-ситостерол облегчал ХОБЛ и усилил эффективность дексаметазона, при этом глюкокортикоидный рецептор опосредовал этот эффект. Кроме того, β-ситостерол снижал воспаление, окисляющий стресс и старение клеток как у бронхиальных эпителиальных клеток, стимулируемых КСЭ, так и у мышей, вызванных ХОБЛ, вызванных дымом сигарет.

Аннотация

Хроническая обструктивная болезнь лёгких (ХОБЛ) — это распространённое респираторное заболевание, характеризующееся устойчивым воспалением, окислительным стрессом и прогрессирующим снижением функции легких. Терапевтический потенциал β-ситостерола при ХОБЛ остаётся неясным. Целью этого исследования было изучение защитных эффектов β-ситостерола против ХОБЛ и прояснения его основного механизма. Скрининг базы данных выявил глюкокортикоидный рецептор (GR) как потенциальную мишень β-ситостерола. Были установлены модель мышей с ХОБЛ, вызванной дымом сигарет, и модель клеток BEAS-2B, стимулированная экстрактом сигаретного дыма (CSE). Функция лёгких, маркеры, связанные с повреждением лёгких, воспаление, окислительный стресс и клеточная старение оценивались с помощью (RT-qPCR), DCFH-DA флуоресцентных зондовых тестов и наборов для обнаружения старения. Также оценивались эффекты β-ситостерола отдельно или в сочетании с дексаметазоном (DEX). β-ситостерол значительно улучшил функцию лёгких, нормализовал маркеры, связанные с повреждением лёгких, а также ослабил воспаление, окисляющий стресс и старение клеток как в клетках BEAS-2B, стимулируемых КСЭ, так и у мышей, воздействовавших от сигаретного дыма. Эти защитные эффекты сопровождались повышенной экспрессией GR. Кроме того, β-ситостерол повысил чувствительность к DEX, а совместное лечение β-ситостеролом и DEX привело к большему улучшению функции лёгких, маркерам повреждения лёгких, воспалению, уровням реактивных кислородных форм и старению клеток, чем само лечение DEX. В совокупности эти результаты свидетельствуют о том, что β-ситостерол облегчает патологические изменения, связанные с ХОБЛ, по крайней мере частично, за счёт повышения экспрессии ГР и повышения терапевтической эффективности ХОБЛ, что подчеркивает его потенциал как адъювантной стратегии лечения ХОБЛ.

Введение

Хроническая обструктивная болезнь лёгких (ХОБЛ) — это прогрессирующее респираторное заболевание, характеризующееся устойчивым воспалением дыхательных путей, повреждением альвеоляр и необратимой обструкцией воздушного потока, что ухудшает функцию дыхания и снижает качествожизни. Его распространённость значительно увеличивается с возрастом, и риск для людей в возрасте шестидесяти пяти лет и старше примерно в пять раз выше, чем у людей младшесорока 2 лет. Эта демографическая тенденция связана с увеличением заболеваемости, смертности иинвалидности 3. Эпидемиологические прогнозы показывают, что к 2030 году ХОБЛ может стать четвёртой по величине причиной смерти в мире, составляя около 5% всех смертей (4,5,6). В настоящее время выявленными факторами риска являются генетическая чувствительность, дисплазия лёгких, воздействие твердых частиц, хронический бронхит и респираторныеинфекции 7.

Среди факторов риска самый важный патогенный фактор ХОБЛ 8 является сигаретныйдым. Он содержит тысячи химических веществ, способных вызывать повреждение эпителия бронхов, способствовать инфильтрации воспалительных клеток и приводить к ремоделированию лёгкойткани 9. Длительное воздействие может вызвать устойчивое и необратимое повреждение эпителия, способствовать выделению большого количества провоспалительных хемокинов, значительно увеличить выработку (ROS) и индуцировать апоптозклеток 10. Многие исследования показали, что повышенные уровни провоспалительных хемокинов, таких как интерлейкин-8 (IL-8) и фактор некроза опухолей α (TNF-α), а также повышенная выработка ROS и клеточное старение, тесно связаны с тяжестью ХОБЛ11,12. Это подчёркивает необходимость препаратов, способных эффективно и безопасно модулировать эти ключевые патогенные факторы для оказания защитного и терапевтического эффекта при ХОБЛ.

Фитостеролы — это естественные биоактивные соединения, широко распространённые в мембранах клеток растений. Среди них β-ситостерол является самым распространённым и широко распространён в растительных продуктах, богатых липидами, таких как овощи, орехи, семена и оливковоемасло 13,14,15,16. Исследования подтвердили, что введение β-ситостерола в дозах до 1000 мг/кг у крыс и мышей не связано с цитотоксичностью илигенотоксичностью 17. Кроме того, исследования показали, что β-ситостерол обладает антиоксидантными свойствами благодаря своему воздействию на антиоксидантные ферменты и эстрогенные рецепторычеловека 18.

β-ситостерол обладает широким спектром фармакологических эффектов, включая противовоспалительные19,антипиретические 20, анальгетик21 и противодиабетическиеэффекты 13. Он также проявил терапевтический потенциал в различных моделях заболеваний, таких как колит и воспалениекишечника 22, и обладает антиатеросклеротическими23 и иммуномодуляторнымисвойствами 24. Кроме того, у него благоприятный профиль безопасности. Учитывая эти характеристики, β-ситостерол вызвал значительный интерес как потенциальный кандидат в препарат. Однако его точная роль и механизмы при ХОБЛ остаются в значительной степени неясными.

Поэтому настоящее исследование было направлено на изучение потенциальных терапевтических эффектов и основных механизмов β-ситостерола при ХОБЛ. В частности, была использована модель повреждения клеток BEAS-2B, вызванная экстрактом сигаретного дыма (CSE), для оценки того, может ли β-ситостерол эффективно облегчить клеточное повреждение, опосредованное CSE, тем самым выявить новую кандидатскую молекулу для терапевтических стратегий ХОБЛ.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Исследование проводилось в соответствии с руководящими принципами по базовой и клинической фармакологии и токсикологии для экспериментальных и клиническихисследований 25. Все экспериментальные протоколы на животных были утверждены Комитетом по этике животных Второй аффилированной больницы Медицинской школы Чжэцзянского университета (Одобрение No 20230102), и все эксперименты проводились в соответствии с руководящими принципами Комитета по этике животных. Исследование проводилось в соответствии с руководящими принципами ARRIVE.

Скрининг ключевых компонентов и целей с помощью сетевой фармакологии

Активные компоненты Fritillaria cirrhosa D. Don, Lonicera japonica Thunb., Glehnia littoralis F. Schmidt ex Miq. и Adenophora stricta Miq. были извлечены из базы данных фармакологии традиционных китайских медицинских систем (TCMSP; дата обращения: 12 марта 2024 года). Кандидатные соединения были отбранены по следующим критериям ADME: пероральная биодоступность (OB) ≥ 30%, подобие препарату (DL) ≥ 0,18 и проницаемость Caco-2 ≥ −0,425. Соединения, соответствующие всем трём критериям, были сохранены в качестве кандидатов в качестве активных ингредиентов для последующих анализов.

Каноническая структура β-ситостерола Simplified Molecular Input Line Entry System (SMILES) была получена из PubChem (доступ 18 марта 2024) и импортирована в SwissTargetPrediction (дата обращения: 21 марта 2024) для прогнозирования цели. Homo sapiens был выбран в качестве целевого вида. Потенциальные мишени предсказывались на основе 2D и 3D структурного сходства между β-ситостеролом и известными лигандами в базе данных. Прогнозируемые цели с вероятностью выше 0 сохранялись, а дублирующиеся записи удалялись.

Гены, связанные с ХОБЛ, были извлечены из базы данных терапевтических целей (TTD; дата обращения: 25 марта 2024) и сравнительной токсикогеномной базы данных (CTD; дата обращения: 28 марта 2024 года) с использованием ключевого слова «хроническое обструктивное заболевание лёгких». После удаления дублирующих генов гены, связанные с ХОБЛ, были пересечени с предсказанными мишенями β ситостерола для выявления кандидатов, потенциально участвующих в терапевтическом эффекте β-ситостерола на ХОБЛ.

Молекулярное соединение β-ситостерола и GR

Трёхмерная структура β-ситостерола в формате SDF была извлечена из базы данных PubChem (дата обращения: 2 июня 2026 года), а кристаллическая структура глюкокортикоидного рецептора (GR) была получена из Исследовательской коллаборатории по Белковому банку структурной биоинформатики (RCSB PDB; доступ 3 июня 2026 года). После стандартной подготовки структур лиганда и рецепторов молекулярное стыковывание проводилось с помощью онлайн-платформы CB-Dock2 (дата обращения: 3 июня 2026 года). Подготовленные файлы лиганда и рецепторов были загружены на платформу, а расчёты стыковки проводились с использованием стандартных параметров.

Функциональный анализ генной онтологии (GO) и Киотской энциклопедии генов и геномов (KEGG)

Все предсказанные целевые гены β-ситостерола подвергались анализу функционального обогащения ГО и обогащения путей KEGG. Результаты обогащения, включая значительно обогащённые биологические процессы, клеточные компоненты, молекулярные функции и сигнальные пути, были отсортированы и сохранены в дополнительном файле 1 для последующего биоинформатического анализа.

Моделирование и группирование животных

Размер выборки был установлен в шесть животных на группу на основе предыдущего исследования, проведённого априорным энергетическим анализом с использованием программного обеспечения G*Power (α = 0,05, мощность = 0,80) и показало, что n = 6 достаточно для обнаружения биологически значимых различий в сопоставимыхэкспериментальных условиях 26. Самцы мышей C57BL/6 в возрасте 6–8 недель (20 ± 2 г) были случайным образом распределены в пять групп: контрольная группа, модельная группа ХОБЛ, группа ХОБЛ + дексаметазон (DEX), группа ХОБЛ + β-ситостерол и группа ХОБЛ + DEX + β-ситостерол. Мыши содержались в стандартных лабораторных условиях (25 °C, 12 часов цикл свет/темнота) с свободным доступом к стандартной еде и воде, и им разрешалось акклиматизироваться в течение 1 недели перед экспериментами.

Для установления модели ХОБЛ мышей помещали в камеру для отвержения сигаретного дыма по всему телу (63 см × 55 см × 45 см) и подвергали воздействию обычного сигаретного дыма в течение 12 недель. Каждая сигарета содержала 10 мг смолы, 0,9 мг никотина и 10 мг угарного газа. Экспозиция дыма проводилась дважды в день (5 дней в неделю) в 9:30 утра и 15:00, при этом дым выделялся от 18 сигарет, подаваемых в камеру на 90 минут засеанс 27.

Для оценки терапевтического эффекта вмешательств было начато введение лекарств после 8 недель воздействия сигаретного дыма и продолжалось в течение оставшихся 4 недель. Начиная с 9-й недели, мыши в соответствующих группах лечения получали ежедневное внутрижелудочное введение DEX (1 мг/кг)28 или β-ситостерола (50 мг/кг)29,30 за 1 час до воздействия сигаретного дыма. Предыдущие фармакокинетические исследования сообщали о пероральной биодоступности примерно 4% β-ситостерола угрызунов 31. Кроме того, в нескольких исследованиях на мышях использовались дозы от 20 до 50 мг/кг 32. Поэтому была выбрана доза 50 мг/кг для обеспечения достаточного системного воздействия, оставаясь в пределах широко используемого в доклинических исследованиях диапазона.

Мыши в контрольной группе подвергались воздействию фильтрованного воздуха в комнате, тогда как мыши в модельной и обработанной группах получили эквивалентный объём нормального физиологического раствора в качестве транспортного средства. В конце экспериментального периода мышей глубоко анестезировали изофлураном до потери педального рефлекса и эвтаназии с помощью экскрови с помощью забора крови из брюшной аорты. Грудная полость была немедленно открыта, а целые двусторонние ткани лёгких аккуратно удалены, промыты ледяным фосфатно-буферным физиологическим раствором (PBS) и положены на лёд. Для сбора бронхоальвеолярной жидкости для промывания (BALF) трахея была законсервирована и промывалась холодным стерильным PBS, который аккуратно вводился и многократно выводился для сбора жидкости для промывания. Ткани лёгких и образцы BALF хранились на льду и затем обработаны для дальнейших анализов.

Культура клеток BEAS-2B

Эпителиальные клетки BEAS-2B в бронхе человека содержались в Modified Eagle Medium/F12 от Dulbecco (DMEM/F12), содержащие 10% сыворотки плода бычьего скота (FBS) и 1% пенициллина/стрептомицина под 5% CO₂ при 37 °C.

Подготовка CSE и воздействие клеток BEAS-2B

Клетки BEAS-2B промывались солевым раствором, буферируемым фосфатами, и засеяны в пластины с 24 колодцами в тройном экземпляре с плотностью 5 ×10 4 клеток на колодцу. После 12 часов культуры клетки достигали примерно 60% совпадения и подвергались воздействию CSE. CSE был подготовлен свеже, как было описано ранее, с незначительными изменениями33. Кратко, одна нефильтрованая коммерческая сигарета постоянно горела, и массовый дым был вдзелен в 10 мл безсывороточной среды с помощью вакуумного насоса при постоянном расходе 1,05 л/мин (примерно −11 кПа отрицательное давление) примерно 5 минут, пока сигарета полностью не сгорала. Полученный раствор сначала подвергался предварительной фильтрации для удаления крупных примесей, затем стерилизовался с помощью стерильного микропористого фильтра диаметром 0,22 мкм для удаления остаточных частиц; полученный стандартный раствор был определен как 100% CSE. Вся свежеприготовленная CSE использовалась для обработки клеток сразу после фильтрации без хранения. Клетки стимулировались средой с 2,5% CSE. После 24 часов обработки CSE супернатанты были собраны и хранятся при -40 °C для последующего анализа34.

Количественная полимеразная цепная реакция в реальном времени (RT-qPCR)

Полная РНК была извлечена из клеток BEAS-2B с помощью комплекта для экстракции полной РНК и обратно транскрибирована в кДНК с помощью комплекта обратной транскрипции согласно инструкциям производителя. RT-qPCR впоследствии выполнялся с использованием системы обнаружения ПЦР в реальном времени и мастер-микса qPCR на базе SYBR Green. Все эксперименты RT-qPCR проводились с использованием трёх биологических и трёх технических репликий на образец для обеспечения надёжности данных.

Каждая qPCR-реакция проводилась в общим объёме 20 мкл, содержащем 10 мкл мастер-смеси SYBR Green qPCR, 0,4 мкл прямого праймера, 0,4 мкл обратного праймера, 2 мкл разбавленной кДНК-шаблона и 7,2 мкл воды без РНаз. Условия усиления были следующими: начальная денатурация при 95 °C в течение 3 минут, затем 40 циклов денатурации при 95 °C в течение 10 секунд и отжиг/удлинение при 60 °C в течение 30 секунд. Относительные уровни экспрессии генов рассчитывались с использованием метода 2−ΔΔCt, при этом GAPDH выступал в качестве внутреннего эталонного гена. Последовательности праймеров, используемые в этом исследовании, приведены в Дополнительной таблице 1.

Внутриклеточный анализ реактивных видов кислорода (ROS)

Внутриклеточная продукция ROS в клетках BEAS-2B оценивалась с помощью фторогенного зонда 2′,7′-дихлордигидрофлуоресцеинового диацетата (DCFH-DA) и анализировалась с помощью проточной цитометрии. Во время цитометрического сбора потока применялась стандартная стратегия прямого рассеяния (FSC) и бокового рассеяния (SSC) для исключения клеточного мусора и выбора целых отдельных клеток. Всего для каждого образца было получено 10 000 действительных клеточных событий. Длины волн возбуждения и излучения были установлены на уровне 488 нм и 525 нм соответственно. Впоследствии были проанализированы цитометрические данные потока для количественной оценки интенсивности флуоресценции внутриклеточной ROS.

Определение уровня малондиалдегида (MDA)

Внутриклеточное содержание MDA измерялось с помощью набора для перекисления липидов согласно инструкциям производителя. Кратко времени обработанные клетки BEAS-2B были собраны и лизированы, затем центрифугированы при низкой температуре для сбора супернатанта. Затем была проведена колориметрическая реакция тиобарбитуровой кислоты (TBA), а поглощение измерено на 532 нм с помощью считывателя микропластин. Относительные уровни MDA рассчитывались по стандартной кривой.

Оценка старения клеток

Клеточное старение оценивалось с помощью теста на диагностику старения на основе активности β-галактозидазы, ассоциированной с старением, (SA-β-gal). Клетки SA-β-гал-положительных были количественно измерены с помощью потоковой цитометрии. Параллельно уровни экспрессии мРНК маркеров, связанных со старением p53 и p21, были определены методом RT-qPCR.

Анализ клеточной пролиферации

Пролиферация клеток оценивалась с помощью колориметрического теста жизнеспособности клеток. Поглощение измерялось при 450 нм с помощью считывателя микропластин.

GR пробный анализ

Трансфекция клеток проводилась с использованием липидного трансфекционного реагента. Были трансфектированы следующие олигонуклеотиды: глюкокортикоидные рецепторы, нацеленные на малую интерферирующую РНК (si-GR), и отрицательную контрольную малую интерферирующую РНК (si-NC). Кандидатные последовательности siRNA, направленные на GR, были разработаны с использованием онлайн-платформы биоинформатики siDirect 2.0. После трансфекции клетки культивировались в течение 48 часов, и все siRNA использовались при конечной концентрации 50 нм. Эффективность нокдауна была проверена путём измерения экспрессии мРНК GR с помощью RT-qPCR.

Группы контроля транспортных средств были включены как в эксперименты с лечением β ситостеролом, так и в трансфекции. Для вмешательства β ситостерола клетки, обработанные только растворителем средств, выступали в качестве контрольной группы транспортных средств (обозначается как CSE+0). Статистический анализ подтвердил, что существенных различий между контрольной группой транспортного средства и пустыми контрольными группами не наблюдалось.

Статистический анализ

Все количественные результаты были выражены как среднее ± стандартное отклонение от трёх биологически независимых экспериментов in vitro. Статистический анализ проводился с использованием программного обеспечения для статистического анализа. Тест Шапиро–Уилка использовался для изучения нормальности распределения набора данных до проведения статистического тестирования; Была принята пост-хок коррекция Бонферрони для корректировки значений P при множественных сравнениях после анализа дисперсии (ANOVA). Сравнения между двумя группами оценивались с помощью t-теста студента без пары, а односторонний или двусторонний ANOVA применялся для многогрупповых сравнений. p-значение ≤ 0,05 считалось статистически значимым.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

β-ситостерол был потенциально натуральным продуктом для лечения ХОБЛ

Из-за сообщаемых целебных эффектов Fritillaria cirrhosa D. Don, засохшего цветка Lonicera japonica Thunb., высохшего корня Glehnia littoralis F. Schmidt ex Miq. и Adenophora stricta Miq. в лечении заболеваний лёгочных 35,36,37,38 в данном исследовании использовалась база данных TCMSP для систематического выявления активных компонентов этих ...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

ХОБЛ накладывает значительную глобальную нагрузку на болезни и остаётся серьёзной проблемой для глобальногоздравоохранения 1. Текущее лечение ХОБЛ охватывает как фармакологические, так и нефармакологическиевмешательства 42. Среди фармакологических методов лечения глюкокортикостероиды (ГК) широко применяются при хронических воспалительных заболеваниях. Они действуют, связываясь с GR и рекрутируя гистондеацетилазу 2 в транскрипционные комплек...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Автор(ы) заявляют, что конфликта интересов нет.

Благодарности

Авторы не имеют признаний.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
BEAS-2B human bronchial epithelial cellsSunnCell, ChinaSC-0218Human bronchial epithelial cell line for in vitro study
C57BL/6 miceVital River Laboratories, China213Animal model for COPD in vivo experiment
CB-DOCK2Chinahttps://cadd.labshare.cn/cb-dock2/php/index.phpfor molecular docking simulation between ligand and receptor protein
Cell Counting Kit-8 (CCK-8)Beyotime Biotechnology, ChinaC0038Detection of cell viability and proliferation
CellEvent™ Senescence Green Detection KitThermo Fisher, USAC10851Detection of cellular senescence
CigarettesHongta, ChinaNot providedCigarette used for smoke exposure and CSE preparation
CTDUSAhttps://ctdbase.org/for retrieving COPD-related genes
DCFH-DA fluorescent probeSigma-Aldrich, USAD6883-50MGDetection of intracellular ROS level
Dexamethasone (DEX)Yeasen, China40323ES03Glucocorticoid for combined intervention
DMEM/F12 mediumGibco, USA11330032Basal medium for BEAS-2B cell culture
Fetal bovine serum (FBS)Gibco, USA10270106Supplement for cell culture medium
GraphPad Prism GraphPad Software, USA9.3.1Data statistical analysis and graph drawing
IsofluraneRWD Life Science, ChinaR510-22-10Inhaled anesthetic for animal euthanasia
Lipid Peroxidation MDA Assay KitBeyotime Biotechnology, ChinaS0131SDetection of intracellular malondialdehyde (MDA) content
Lipofectamine 2000Thermo Fisher, USA11668030Transfection reagent for siRNA delivery
Multimode microplate readerThermo Fisher, USAVL0000D0Detection of absorbance and fluorescence value
Navios EX Flow CytometerBeckman Coulter, USAB80912Analysis of ROS and senescent cells
Penicillin/streptomycinHyClone, USASV30010Antibiotics to prevent bacterial contamination
Power SYBR™ Green Master MixThermo Fisher, USA4367659Fluorescent quantitative PCR amplification
PrimeScript™ RT reagent KitTakara, JapanRR037QReverse transcription for cDNA synthesis
PubChem databaseUSAhttps://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/for acquiring canonical SMILES sequence and downloading 3D SDF structural information of beta-sitosterol
QuantStudio Dx PCR InstrumentThermo Fisher, USA4479889Real-time RT-qPCR detection
RCSB PDBUSAhttps://www.rcsb.org/to obtain GR crystal 3D structure file
RNA/Protein Isolation KitBeyotime Biotechnology, ChinaR0018STotal RNA extraction from cell and lung tissue
si-GRDesigned in silico via siDirect 2.1Custom synthesisGuide: 5’-UUUUGAAUGGGUGUAGCAA-3’; Passenger: 5’-GCUUUCACCCAUUCAAAAGG-3’, knockdown for GR
si-NCThermo Fisher, USA4390843used as negative transfection control for cellular and in vivo assays
SwissTargetPrediction databaseSwitzerlandhttp://swisstargetprediction.ch/for in silico prediction of potential drug-related protein targets
TCMSP databaseChinahttps://www.tcmsp-e.com/for herbal ingredient screening and target prediction
TTDSingaporehttps://db.idrblab.net/ttd/for collection of validated COPD-associated disease genes
Whole-body smoke exposure chamberTeague Enterprise, USATE-2Establishment of cigarette smoke-induced COPD model
β-sitosterolChemicalBook, China83-46-5Active phytosterol for drug treatment

Ссылки

  1. Christenson SA, Smith BM, Bafadhel M, Putcha N. Chronic obstructive pulmonary disease. Lancet. 2022;10342:2227-2242.
  2. Raherison C, Girodet PO. Epidemiology of COPD. Eur Respir Rev. 2009;114:213-221.
  3. Kennedy BK et al. Geroscience: linking aging to chronic disease. Cell. 2014;4:709-713.
  4. Mathers CD, Loncar D. Projections of global mortality and burden of disease from 2002 to 2030. PLoS Med. 2006;11:e442.
  5. Hanania NA, Marciniuk DD. A unified front against COPD: clinical practice guidelines from the American College of Physicians, the American College of Chest Physicians, the American Thoracic Society, and the European Respiratory Society. Chest. 2011;3:565-566.
  6. Rabe KF et al. Global strategy for the diagnosis, management, and prevention of chronic obstructive pulmonary disease: GOLD executive summary. Am J Respir Crit Care Med. 2007;6:532-555.
  7. Szalontai K et al. Chronic obstructive pulmonary disease: Epidemiology, biomarkers, and paving the way to lung cancer. J Clin Med. 2021;13: 2889.
  8. Chen J et al. DNA of neutrophil extracellular traps promote NF-kappaB-dependent autoimmunity via cGAS/TLR9 in chronic obstructive pulmonary disease. Signal Transduct Target Ther. 2024;1:163.
  9. Vij N et al. Cigarette smoke-induced autophagy impairment accelerates lung aging, COPD-emphysema exacerbations and pathogenesis. Am J Physiol Cell Physiol. 2018;1:C73-C87.
  10. Zhu X et al. Cigarette smoke promotes interleukin-8 production in alveolar macrophages through the reactive oxygen species/stromal interaction molecule 1/Ca(2+) Axis. Front Physiol. 2021;12:733650.
  11. Cheng M et al. Qingke Pingchuan granules alleviate airway inflammation in COPD exacerbation by inhibiting neutrophil extracellular traps in mice. Phytomedicine. 2025;136:156283.
  12. Hikichi M, Mizumura K, Maruoka S, Gon Y. Pathogenesis of chronic obstructive pulmonary disease (COPD) induced by cigarette smoke. J Thorac Dis. 2019;Suppl 17:S2129-S2140.
  13. Babu S, Jayaraman S. An update on beta-sitosterol: A potential herbal nutraceutical for diabetic management. Biomed Pharmacother. 2020;131:110702.
  14. Cheng Y et al. Dietary beta-sitosterol regulates serum lipid level and improves immune function, antioxidant status, and intestinal morphology in broilers. Poult Sci. 2020;3:1400-1408.
  15. Takayasu BS et al. Biological effects of an oxyphytosterol generated by beta-Sitosterol ozonization. Arch Biochem Biophys. 2020;696:108654.
  16. Awad AB, Chinnam M, Fink CS, Bradford PG. Beta-sitosterol activates Fas signaling in human breast cancer cells. Phytomedicine. 2007;11:747-754.
  17. Paniagua-Perez R et al. Genotoxic and cytotoxic studies of beta-sitosterol and pteropodine in mouse. J Biomed Biotechnol. 2005;3:242-247.
  18. Moreno JJ, Mitjavila MT. The degree of unsaturation of dietary fatty acids and the development of atherosclerosis (review). J Nutr Biochem. 2003;4:182-195.
  19. Liao PC et al. Identification of beta-Sitosterol as in vitro anti-inflammatory constituent in Moringa oleifera. J Agric Food Chem. 2018;41:10748-10759.
  20. Gupta MB et al. Anti-inflammatory and antipyretic activities of beta-sitosterol. Planta Med. 1980;2:157-163.
  21. Nirmal SA, Pal SC, Mandal SC, Patil AN. Analgesic and anti-inflammatory activity of beta-sitosterol isolated from Nyctanthes arbortristis leaves. Inflammopharmacology. 2012;4:219-224.
  22. Kim KA et al. Beta-Sitosterol attenuates high-fat diet-induced intestinal inflammation in mice by inhibiting the binding of lipopolysaccharide to toll-like receptor 4 in the NF-kappaB pathway. Mol Nutr Food Res. 2014;5:963-972.
  23. Tada H et al. Sitosterolemia, Hypercholesterolemia, and Coronary Artery Disease. J Atheroscler Thromb. 2018;9:783-789.
  24. Efsa Panel on Nutrition NF, Food A et al. A combination of beta-sitosterol and beta-sitosterol glucoside and normal function of the immune system: evaluation of a health claim pursuant to Article 13(5) of Regulation (EC) No 1924/2006. EFSA J. 2019;7:e05776.
  25. Huang J et al. Identification of the active compounds and significant pathways of yinchenhao decoction based on network pharmacology. Mol Med Rep. 2017;4:4583-4592.
  26. Ashok V et al. Evaluation of 3D-printed polylactic acid as a bone substitute: An animal study in a rat model. Clin Exp Dent Res. 2025;4:e70201.
  27. Zhang R et al. Soyasaponin I alleviates inflammation and oxidative stress in chronic obstructive pulmonary disease through inhibiting the mitogen-activated protein kinase (MAPK) signaling pathway. Exp Anim. 2025;4:407-418.
  28. Liu R et al. Therapeutic effects of Hedyotis diffusa Willd in a COPD mouse model challenged with LPS and smoke. Exp Ther Med. 2018;4:3385-3391.
  29. Baraya YS, Yankuzo HM, Wong KK, Yaacob NS. Strobilanthes crispus bioactive subfraction inhibits tumor progression and improves hematological and morphological parameters in mouse mammary carcinoma model. J Ethnopharmacol. 2021;267:113522.
  30. Tang X et al. Treatment with beta-sitosterol ameliorates the effects of cerebral ischemia/reperfusion injury by suppressing cholesterol overload, endoplasmic reticulum stress, and apoptosis. Neural Regen Res. 2024;3:642-649.
  31. Sylven C, Borgstrom B. Absorption and lymphatic transport of cholesterol and sitosterol in the rat. J Lipid Res. 1969;2:179-182.
  32. Jayaraman S et al. Beta-Sitosterol circumvents obesity induced inflammation and insulin resistance by down-regulating IKKbeta/NF-kappaB and JNK signaling pathway in adipocytes of type 2 diabetic rats. Molecules. 2021;7:2101.
  33. Higashi T et al. A simple and rapid method for standard preparation of gas phase extract of cigarette smoke. PLoS One. 2014;9:e107856.
  34. Carvalho JL et al. Oral feeding with probiotic Lactobacillus rhamnosus attenuates cigarette smoke-induced COPD in C57Bl/6 mice: Relevance to inflammatory markers in human bronchial epithelial cells. PLoS One. 2020;4:e0225560.
  35. Li L et al. Fritillaria cirrhosa D. Don Alleviates Inflammatory Progression and Suppresses M1 Polarization of Macrophages in Chronic Obstructive Pulmonary Disease. Int Arch Allergy Immunol. 2025;3:243-251.
  36. Xiong L et al. The protective effect of Lonicera japonica Thunb. against lipopolysaccharide-induced acute lung injury in mice: Modulation of inflammation, oxidative stress, and ferroptosis. J Ethnopharmacol. 2024;331:118333.
  37. Park SM et al. Adenophora stricta Root Extract Protects Lung Injury from Exposure to Particulate Matter 2.5 in Mice. Antioxidants (Basel). 2022;7:1376.
  38. Park J et al. Cytotoxic activity of C(17) polyacetylenes from the roots of Glehnia littoralis against drug-resistant colorectal and lung cancer cells. J Nat Med. 2025;2:391-398.
  39. Barnes PJ. Corticosteroid resistance in patients with asthma and chronic obstructive pulmonary disease. J Allergy Clin Immunol. 2013;3:636-645.
  40. Aviles B et al. Markers of airway remodeling in induced sputum from healthy smokers. Arch Bronconeumol. 2006;5:235-240.
  41. Chen Q et al. Resveratrol inhibits lipopolysaccharide‑induced MUC5AC expression and airway inflammation via MAPK and Nrf2 pathways in human bronchial epithelial cells and an acute inflammatory mouse model. Mol Med Rep. 2025;6:157.
  42. Singh D, Higham A, Mathioudakis AG, Beech A. Chronic obstructive pulmonary disease (COPD): Developments in pharmacological treatments. Drugs. 2025;7:911-930.
  43. Rhen T, Cidlowski JA. Antiinflammatory action of glucocorticoids--new mechanisms for old drugs. N Engl J Med. 2005;16:1711-1723.
  44. Morjaria JB, Malerba M, Polosa R. Biologic and pharmacologic therapies in clinical development for the inflammatory response in COPD. Drug Discov Today. 2010;9-10:396-405.
  45. Barnes PJ. How corticosteroids control inflammation: Quintiles Prize Lecture 2005. Br J Pharmacol. 2006;3:245-254.
  46. Barnes PJ, Adcock IM. Glucocorticoid resistance in inflammatory diseases. Lancet. 2009;9678:1905-1917.
  47. Shen HF et al. MiR-361-5p/abca1 and MiR-196-5p/arhgef12 axis involved in gamma-Sitosterol inducing dual anti-proliferative effects on bronchial epithelial cells of chronic obstructive pulmonary disease. Int J Chron Obstruct Pulmon Dis. 2021;16:2741-2753.
  48. Sun Y, Gao L, Hou W, Wu J. Beta-sitosterol alleviates inflammatory response via inhibiting the activation of ERK/p38 and NF-kappaB pathways in LPS-exposed BV2 cells. Biomed Res Int. 2020;2020:7532306.
  49. Adcock IM, Mumby S. Glucocorticoids. Handb Exp Pharmacol. 2017;237:171-196.
  50. Reddy AT, Lakshmi SP, Banno A, Reddy RC. Glucocorticoid receptor alpha mediates Roflumilast's ability to restore dexamethasone sensitivity in COPD. Int J Chron Obstruct Pulmon Dis. 2020;15:125-134.
  51. Kadushkin AG et al. The effect of glucocorticoids in combination with azithromycin or theophylline on cytokine production by NK and NKT-like blood cells of patients with chronic obstructive pulmonary disease. Biomed Khim. 2021;4:352-359.
  52. Zhou L et al. Expression of glucocorticoid receptor and HDACs in airway smooth muscle cells is associated with response to steroids in COPD. Respir Res. 2024;1:227.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

234234
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.