В данном исследовании оценивается эффективность химического пилинга с использованием смешанных кислот у пациентов с акне обыкновенного средней степени тяжести. В ходе исследования с применением метода разделения лица у 30 пациентов лечение привело к снижению показателей по Глобальной системе оценки акне (Global Acne Grading System), уменьшению гиперемии кожи, уровня порфиринов и экспрессии IL-1α, IL-6, IL-17, TGF-β и TLR2. Разнообразие микробиома кожи снизилось, особенно в отношении Staphylococcus; в период последующего наблюдения нежелательных явлений зарегистрировано не было.
Исследовательская статья
Эффективность химического пилинга смесью кислот у пациентов с акне средней степени тяжести: проспективное исследование с комплексной оценкой состояния кожи лица
* These authors contributed equally
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Химический пилинг смесью кислот широко используется для лечения acne vulgaris (AV), однако биологические механизмы, лежащие в основе его клинического эффекта, остаются изученными не полностью. Мы выдвинули гипотезу о том, что химический пилинг смесью кислот уменьшит степень тяжести акне и будет связан с изменениями в микробиоме кожи и снижением локальных воспалительных реакций у пациентов с умеренным течением AV. Целью данного исследования было изучение клинического, микробиологического и противовоспалительного эффектов пилинга смесью кислот в данной популяции. Мы провели проспективное рандомизированное исследование по методу разделенного лица с участием 30 пациентов с умеренным AV. На одной половине лица проводили пилинг смесью кислот дважды в неделю в течение 3 недель (всего 6 сеансов), после чего следовал 9-недельный период наблюдения. Контралатеральная половина лица не получала лечения в первые 3 недели, а затем подвергалась тому же протоколу пилинга в течение 3 недель с последующим наблюдением в течение 6 недель. Показатели исхода включали глобальную систему оценки акне (GAGS), самооценку пациентов, стандартизированную визуализацию лица, биопсию кожи с иммуногистохимическим анализом, экстракцию бактериальной ДНК, ПЦР-амплификацию и секвенирование гена 16S rRNA. У пациентов наблюдалось статистически значимое улучшение показателей GAGS (P < 0.001). Анализ изображений лица выявил снижение гиперемии и показателей порфирина. Снизилась интенсивность иммуногистохимического окрашивания на интерлейкин (IL)-1α, IL-6, IL-17, трансформирующий ростовой фактор-β (TGF-β) и Toll-подобный рецептор 2 (TLR2). Альфа-разнообразие микробиома кожи снизилось, при этом отмечено заметное уменьшение относительной численности Staphylococcus (P < 0.05). На протяжении всего исследования не было зарегистрировано никаких нежелательных явлений. Пилинг смесью кислот оказался эффективным и хорошо переносимым в период наблюдения, а также был связан с изменениями в микробиоме кожи и окрашиванием локальных маркеров воспаления.
Введение
Acne vulgaris (AV), обычно называемая акне или угревой сыпью, представляет собой хроническое воспалительное заболевание кожи, поражающее преимущественно волосяные фолликулы и сальные железы. Она характеризуется развитием папул, пустул, узлов и кист, преимущественно на лице, груди и спине. Хотя акне чаще всего встречается у подростков и молодых людей, она может возникнуть в любом возрасте; при этом глобальная распространенность заболевания среди лиц в возрасте от 12 до 24 лет оценивается в диапазоне от 70% до 87%1,2. Примечательно, что акне может сохраняться и во взрослом возрасте, особенно у женщин, при этом наблюдается рост заболеваемости среди лиц в возрасте 25 лет и старше. На развитие акне влияет множество факторов, включая повышенную выработку кожного сала3, гиперкератоз фолликулов4, бактериальную колонизацию5 и воспаление6. Cutibacterium acnes (C. acnes) и Staphylococcus epidermidis (S. epidermidis) являются двумя ключевыми бактериями микробиоты кожи, которые играют важную роль в регуляции воспалительного ответа. Было установлено, что баланс между C. acnes и S. epidermidis имеет решающее значение для поддержания нормального воспалительного ответа в коже5. Нарушение равновесия между этими двумя видами активирует маркеры воспаления, что приводит к развитию акне.
Современные стратегии лечения акне включают как наружные, так и системные средства, направленные на воздействие на различные аспекты данного заболевания. К ним относятся наружные ретиноиды, перекись бензоила7, наружные антибиотики, а также системные препараты, такие как пероральные антибиотики и изотретиноин для более тяжелых случаев8. В последние годы химический пилинг зарекомендовал себя как перспективный метод лечения акне. Данная методика предполагает нанесение определенных кислот для эксфолиации кожи, улучшения её текстуры, а также уменьшения выраженности элементов акне и рубцов9. При химическом пилинге обычно используются альфа-гидроксикислоты (AHA), такие как гликолевая кислота, и бета-гидроксикислоты (BHA), например, салициловая кислота. Эти кислоты действуют посредством различных механизмов, включая снижение воспаления и предотвращение образования комедонов. В частности, внимание привлекли комбинированные составы кислот, сочетающие несколько типов кислот или различные концентрации одной кислоты, в связи с их потенциальной терапевтической эффективностью. Основным преимуществом комбинированных кислот является их способность одновременно воздействовать на несколько путей, вовлеченных в патогенез акне10.
Клинические исследования эффективности комбинированного кислотного пилинга при акне продемонстрировали многообещающие результаты, включая значительное снижение степени тяжести акне и количества высыпаний, а также улучшение текстуры кожи у пациентов, проходивших лечение11. Хотя в предыдущих работах сообщалось о клинических преимуществах химических пилингов при лечении акне, большинство имеющихся данных касалось составов на основе одной кислоты или таких клинических показателей, как количество высыпаний и степень тяжести акне. Несмотря на гипотезу о том, что сочетание эксфолиирующих, противовоспалительных и противомикробных свойств этих кислот способствует их эффективности, точные молекулярные пути этого процесса остаются недостаточно изученными. Насколько нам известно, данное исследование является первым, в котором изучается влияние комбинированных кислот на состав микробиоты кожи и воспалительные реакции у лиц с акне средней степени тяжести.
Протокол
Протокол исследования был рассмотрен и одобрен комитетом по этике Первой аффилированной больницы Чунцинского медицинского университета (№ 2024-020-01). Исследование было проспективно зарегистрировано в Национальном реестре медицинских исследований Китая (регистрационный номер: MR-50-24-036087; дата регистрации: 6 сентября 2024 г.). До включения в исследование от всех участников было получено письменное информированное согласие, включая согласие на публикацию деидентифицированных фотографий лиц. Исследование проводилось в соответствии с Хельсинкской декларацией.
Дизайн исследования
Данное исследование представляло собой 12-недельное рандомизированное проспективное клиническое исследование с разделением лица на зоны (split-face). Составный кислотный пилинг, использованный в этом исследовании, состоял из AHA (4%), салициловой кислоты (2%) и азелаиновой кислоты (1.5%), при этом общая концентрация кислот составляла примерно 7.5%. pH состава был равен 3.6. Перед началом исследования распределение участников по терапевтической группе и группе контроля определялось с помощью случайной последовательности, сгенерированной в электронной таблице ослепленным статистиком и реализованной ослепленным врачом. На сторону терапии дважды в неделю в течение 3 недель (всего шесть сеансов) наносился составной кислотный пилинг. Зону обработки осторожно очищали мягким неожирным очищающим средством и полностью высушивали, затем пилинг наносили тонким равномерным слоем (~2 mL на половину лица). Состав наносили в стандартной последовательности: от лба и висков к щекам, носу, периорбитальной области и подбородку, избегая век, губ, слизистых оболочек и поврежденных участков кожи. Препарат оставляли на коже на 15 min, после чего нейтрализовали водой. Клинической конечной точкой была умеренная равномерная эритема с переносимым ощущением покалывания или тепла, при отсутствии выраженного жжения, отека, появления пузырей или обширного «фростинга» (побеления). После удаления пилинга на 15 min накладывали успокаивающую и увлажняющую маску.
Участникам было рекомендовано избегать использования раздражающих наружных средств, эксфолиации, механического повреждения кожи и прямого воздействия солнечных лучей, а также использовать солнцезащитное средство широкого спектра в дневное время. За этой 3-недельной фазой лечения следовал 9-недельный период последующего наблюдения. На контрольной стороне в первые 3 недели никаких манипуляций не проводилось. После этого начального периода ожидания на контрольной стороне был проведен такой же 3-недельный курс комбинированного кислотного пилинга с последующим 6-недельным наблюдением. Пять сеансов на каждую половину лица проводились обученным медицинским персоналом в больнице, а один сеанс на каждую половину лица выполнялся участником дома в соответствии со стандартизированными инструкциями, предоставленными исследователями. Участнику были даны стандартизированные письменные и устные инструкции относительно количества и распределения продукта, последовательности нанесения и зоны обработки, предписанного времени экспозиции и процедуры удаления средства. Схематический обзор дизайна исследования и хода эксперимента представлен на Рисунке 1.
Подбор пациентов
В исследование было включено тридцать пациентов в возрасте 18–60 лет с клиническим диагнозом «обыкновенное акне (AV) средней степени тяжести». В группу подходящих участников входили лица любого пола, соответствующие диагностическим критериям AV средней степени тяжести, что соответствовало 2-й степени (31–50 высыпаний, включая комедоны, папулы и пустулы) или 3-й степени (51–100 высыпаний, включая многочисленные папулы и пустулы, отдельные крупные воспалительные поражения и менее трех узелков). Пациенты исключались из исследования, если у них была фоточувствительная кожа или если они принимали фотосенсибилизирующие препараты в течение предшествующих 4 недель; если в течение последнего месяца наблюдалось интенсивное воздействие солнечных лучей или ожидалось значительное воздействие солнца в течение 1 месяца после лечения; при наличии рубцов, активной инфекции или незаживающих ран в месте лечения; при диагностированном иммунодефицитном состоянии; тяжелой сердечной, печеночной или почечной недостаточности; или при документально подтвержденном психическом заболевании. Все 30 подходящих участников завершили исследование и были включены в окончательный анализ.
Оценка результатов
Объективная оценка
Анализ эритемы и порфиринов
В стандартизированных условиях окружающей среды (фиксированная температура, влажность и освещение) с помощью системы визуализации лица были получены изображения обеих сторон лба, щек, линии нижней челюсти и других пораженных областей при исходном обследовании и при каждом последующем визите. Данная система позволила объективно количественно оценить интенсивность эритемы и уровни порфиринов.
Отбор проб микробиоты и иммуногистохимия
Профилирование микробиома кожи проводили с использованием микробиологических мазков, взятых с обрабатываемой стороны до начала лечения и на 3-й неделе. Микробную ДНК экстрагировали из мазков с помощью указанного набора для экстракции согласно протоколу производителя, после чего определяли количество выделенной ДНК. Регион 16S рРНК бактерий амплифицировали с использованием универсальных праймеров 341F (5’-CCTACGGGNGGCWGCAG-3’) и 805R (5’-GACTACHVGGGTATCTAATCC-3’). Амплификацию начинали с денатурации при 98 °C в течение 30 s, затем проводили 32 цикла: 98 °C в течение 10 s, 54 °C в течение 30 s и 72 °C в течение 45 s. Финальную элонгацию выполняли при 72 °C в течение 10 min.
Ампликоны ПЦР были очищены с использованием указанных магнитных частиц и количественно определены перед оценкой библиотек. Качество продуктов оценивали с помощью биоанализатора и набора для количественной ПЦР, после чего подходящие ампликоны объединяли для секвенирования. Демультиплексированные необработанные чтения обрабатывали, предварительно удалив последовательности праймеров с помощью Cutadapt. Парноконцевые чтения собирали в FLASH, а fqtrim использовали для исключения чтений с показателем качества ниже 20, длиной менее 100 bp или содержащих более 5% неопределенных оснований. Очищенные теги, прошедшие фильтрацию по качеству, сохраняли для последующего анализа. Химеры удаляли с помощью Vsearch, а для денойзинга оставшихся чтений и генерации вариантов последовательностей ампликонов (ASVs) использовали DADA2.
Аннотация видов была выполнена в QIIME2 с помощью плагина feature-classifier по базам данных SILVA и NT-16S. QIIME2 также использовался для расчета альфа- и бета-разнообразия. Бактериальный состав оценивали по профилям относительного обилия. Различия в обилии на уровне рода проверяли с помощью критерия Вилкоксона, при этом значения P < 0.05 считались значимыми. Линейный дискриминантный анализ величины эффекта (LEfSe) проводили с помощью nsegata-lefse, используя пороговые значения LDA ≥3.0 и P < 0.05.
Из числа включенных участников было случайным образом отобрано 10 пациентов для иммуногистохимического анализа воспалительных медиаторов, включая IL-1α, IL-6, IL-17, TGF-β и TLR2. Образцы биопсии кожи (2 mm) были взяты из активных очагов акне на исходном этапе (неделя 0) и на 3-й неделе после дезинфекции иодофором. Образцы фиксировали в 4% параформальдегиде, заключали в парафин и нарезали на срезы толщиной 4‑μm. Парафиновые срезы (4 μm) подвергали депарафинизации и регидратации. Восстановление антигенов проводили с использованием буфера EDTA (pH 9.0) при микроволновом нагреве. Эндогенную пероксидазу блокировали 3% H2O2, после чего срезы обрабатывали 3% сывороткой козы для снижения неспецифического связывания антител. Затем срезы инкубировали с первичными антителами в течение ночи при 4 °C: IL-1α (1:400), IL-6 (1:400), IL-17A (1:400), TGF-β (1:400) и TLR2 (1:300). Впоследствии срезы инкубировали с набором вторичных антител Polymer-HRP в течение 30 min при комнатной температуре с последующим определением с помощью хромогена DAB и докрашиванием гематоксилином. Отрицательные контроли инкубировали с PBS вместо первичных антител. Изображения получали с помощью цифрового сканера при увеличении 400×. Для каждого среза случайным образом выбирали пять полей, после чего два дерматолога в режиме «слепого» метода проводили оценку.
Субъективные оценки
Общая оценка исследователя
В начале исследования и на 12-й неделе дерматолог, не владеющий информацией о распределении пациентов по группам лечения, оценивал степень тяжести акне на всей поверхности лица с помощью Глобальной системы оценки акне (GAGS).
Самооценка пациентов
По окончании периода лечения и последующего наблюдения участники оценили воспринимаемое клиническое улучшение по четырехбалльной шкале самооценки. Баллы были определены следующим образом: 0 — отсутствие улучшения или ухудшение; 1 — легкое улучшение; 2 — умеренное улучшение; 3 — выраженное улучшение.
Слепая оценка результатов
Для снижения систематической ошибки при оценке дерматолог, не знающий о распределении пациентов по группам лечения, независимо оценивал клиническое улучшение, используя фотографии, сделанные на исходном этапе.
Мониторинг безопасности
Для оценки безопасности лечения при каждом последующем визите оценивались нежелательные явления.
Статистический анализ
Перед началом исследования был проведен расчет размера выборки для выявления изменений общего балла GAGS для всего лица от исходного уровня к 12-й неделе. Расчет размера выборки основывался на пилотном исследовании пилинга комбинированными кислотами; при условии стандартизированного размера эффекта внутри группы участников 0,60, двустороннего уровня значимости 0,05 и мощности 80% потребовалось 24 оцениваемых участника. С учетом 20% выбывания участников, целевое число включенных в исследование составило 30 человек.
Статистический анализ проводили с использованием статистического и графического программного обеспечения (см. Таблицу материалов). Непрерывные данные описывали в соответствии с их распределением. Переменные с приблизительно нормальным распределением представляли в виде среднего значения ± стандартного отклонения, в то время как переменные с ненормальным распределением обобщали в виде медианы с межквартильным размахом или диапазоном, в зависимости от ситуации. Категориальные данные выражали в виде абсолютных значений и процентов.
Распределение данных оценивали с помощью критерия Шапиро-Уилка, что было подтверждено визуальным анализом гистограмм и графиков квантиль-квантиль (Q-Q plots). Поскольку размер выборки был малым и ряд переменных не имели нормального распределения, основные анализы проводились с использованием непараметрических критериев. Основные показатели, включая баллы GAGS, площадь красной зоны и уровни порфирина, анализировали с помощью парного критерия знаковых рангов Уилкоксона.
Для основных клинических исходов были рассчитаны величины эффекта и 95% доверительные интервалы. Для парных непараметрических сравнений в качестве меры величины эффекта использовалась ранго-бисериальная корреляция для парных выборок. Для оценки взаимосвязей между непрерывными или порядковыми переменными применялся ранговый коэффициент корреляции Спирмена. Статистические критерии были двухсторонними, и результаты считались значимыми при P < 0.05.
Анализ микробиома проводили на образцах, взятых у тех же участников в группе лечения. Альфа-разнообразие оценивали с помощью индексов Шеннона и Симпсона. Изменения показателей альфа-разнообразия между исходными образцами и образцами после лечения оценивали с помощью парного критерия знаковых рангов Уилкоксона.
Состав бактериального сообщества был обобщен по относительной численности на уровнях типа, семейства и рода. Таксоны с низкой численностью или низкой распространенностью были сохранены для описательного анализа. Различия в относительной численности конкретных таксонов между исходными образцами и образцами после лечения оценивали с помощью парных непараметрических критериев. Для микробиомного анализа тестирование на уровне таксонов носило исследовательский характер, и приводятся нескорректированные значения P. Все тесты были двусторонними с порогом значимости P < 0.05.
Результаты
Исходные характеристики пациентов
В исследование было включено тридцать пациентов, которые прошли все предусмотренные процедуры. Исходные демографические и клинические характеристики обобщены в Таблице 1.
Анализ кожи VISIA
Лечение с помощью комбинированного кислотного пилинга привело к заметному улучшению состояния акне на обеих половинах лица. Анализ VISIA подтвердил значительное снижение уровней эритемы и порфиринов при контрольном обследовании на 12-й неделе. Показатель площади покраснения снизился с 32,34 ± 6,32 в исходном состоянии до 18,34 ± 8,32 на 12-й неделе, что указывает на уменьшение воспаления кожи. Значения порфиринов снизились с 34,24 ± 9,53 до 17,34 ± 8,43 (P < 0,05). Репрезентативные изменения эритемы показаны на Рисунке 2.
Показатели клинической эффективности
На 12-й неделе общие показатели GAGS для всего лица были значительно ниже по сравнению с исходным уровнем (P < 0.001; Рисунок 3). Результаты самооценки пациентов показали, что 3,3% пациентов оценили улучшение как легкое (1 балл), 83,3% — как умеренное (2 балла) и 13,3% — как выраженное (3 балла) (Таблица 2). Слепая оценка исследователя дала почти идентичные результаты: 83,3% умеренного улучшения и 16,7% выраженного улучшения. Побочных эффектов, включая поствоспалительную гиперпигментацию, образование пузырей, корок, шелушение, гипертрофическое рубцевание или келоиды, не наблюдалось.
Изменения α-разнообразия микробиоты кожи
Комбинированный кислотный пилинг был связан со значительным снижением индексов Шеннона и Симпсона (P < 0.05; Рисунок 4), что указывает на снижение микробного разнообразия внутри образцов после процедуры.
Модуляция структуры микробиоты кожи
Секвенирование гена 16S рРНК показало, что микробиота кожи у пациентов с AV состояла преимущественно из пяти основных типов: Proteobacteria, Actinobacteria, Firmicutes, Bacteroidetes и Cyanobacteria (Рисунок 5A). Относительная численность Proteobacteria продемонстрировала значимую тенденцию к увеличению после лечения (P < 0.05).
На уровне семейств доминирующими таксонами были Burkholderiaceae, Staphylococcaceae, Corynebacteriaceae и Neisseriaceae (Рисунок 5B). Относительная численность Cutibacterium (ранее Propionibacterium) и Staphylococcus значительно снизилась после лечения (P < 0.05). Анализ корреляции Спирмена для 30 наиболее распространенных родов представлен на Рисунке 6.
Экспрессия маркеров воспаления
Иммуногистохимическое окрашивание показало более низкую интенсивность окрашивания IL‑1α, IL‑6, IL‑17, TGF‑β и TLR2 в поражениях кожи после лечения по сравнению с исходным уровнем (Рисунок 7).
Комбинированный кислотный пилинг оказался эффективным и хорошо переносимым методом лечения acne vulgaris средней степени тяжести в течение периода наблюдения. Клиническое улучшение сопровождалось изменениями в микробиоме кожи и снижением интенсивности окрашивания маркеров воспаления. Требуются дальнейшие исследования для уточнения точных молекулярных взаимодействий между модуляцией микробиоты и иммунной регуляцией после пилинга с целью оптимизации терапевтических протоколов для рутинного клинического применения.
Доступность данных:
Наборы данных, полученные и/или проанализированные в ходе настоящего исследования, не находятся в открытом доступе в связи с соблюдением конфиденциальности участников и этическими ограничениями, однако могут быть предоставлены автором, ответственным за переписку, по обоснованному запросу.
Рисунок 1. Схематический обзор дизайна исследования и хода эксперимента. Сокращения: GAGS = Глобальная система оценки акне (Global Acne Grading System); IHC = иммуногистохимия. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 2. Оценка эритемы левой и правой половин лица. (A) Исходное состояние и (B) 12-я неделя у пациентки 25 лет. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 3. Баллы GAGS для всего лица на исходном этапе и на 12-й неделе (n = 30). Группы сравнивали с помощью парного критерия знаковых рангов Вилкоксона; ***P < 0.001. Сокращение: GAGS = Global Acne Grading System (Глобальная система оценки акне). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 4. Индексы разнообразия до и после лечения. (A) индекс разнообразия Шеннона и (B) индекс Симпсона (n = 30). Данные представлены в виде медиан, планки погрешностей соответствуют межквартильному размаху (IQR). Группы сравнивали с помощью парного критерия знаковых рангов Уилкоксона; P = 0.021. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 5. Относительная численность бактерий до и после лечения (n = 30). (A) Бактериальные типы и (B) семейства до и после лечения. Различия в относительной численности оценивали с помощью парного знакового рангового критерия Вилкоксона. Относительная численность Proteobacteria значительно увеличилась после лечения (P = 0.024). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 6. Тепловая карта корреляции Спирмена для 30 наиболее представленных родов. Цветовая шкала варьируется от -1 до 1. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 7. Репрезентативное иммуногистохимическое окрашивание (A) на исходном уровне и (B) через 3 недели после лечения в подгруппе биопсии из 10 пациентов. Строки показывают IL-6, IL-17, TGF-β, TLR2 и IL-1α. Масштабные отрезки = 100 µm. Сокращения: IL = интерлейкин; TGF-β = трансформирующий ростовой фактор-β; TLR2 = Toll-подобный рецептор 2. Нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
| Параметр | Среднее ± СО (медиана; диапазон) или n (%) |
| Возраст (лет) | 23.77 ± 6.50 (18–42) |
| Пол | |
| Самка | 18 (62%) |
| Самец | 12 (38%) |
| Тип кожи по Фитцпатрику | |
| III | 22 (73%) |
| IV | 8 (27%) |
| Длительность заболевания (месяцы) | 29.80 ± 9.56 |
Таблица 1: Исходные характеристики пациентов с acne vulgaris. Значения представлены как среднее ± SD (диапазон) или n (%). Сокращения: n = количество участников; SD = стандартное отклонение.
| Измерить | 0 (без улучшения или с ухудшением) | 1 (незначительное улучшение) | 2 (умеренное улучшение) | 3 (заметное улучшение) | Среднее ± SD |
| Пациенты (n) | 0 | 1 | 25 | 4 | 2.10 ± 0.40 |
Таблица 2: Баллы самооценки пациентов. Сокращения: n = количество участников; SD = стандартное отклонение.
Обсуждение
Наши результаты дают новое представление о терапевтическом эффекте комбинированного кислотного пилинга при лечении AV средней степени тяжести. После проведения процедуры у пациентов наблюдалось заметное улучшение показателей по шкале GAGS. Также были отмечены улучшения показателей VISIA, в частности, в отношении красных зон и порфиринов. Кроме того, в тканях кожи после лечения снизился уровень экспрессии ключевых маркеров воспаления, включая IL-1α, IL-6, IL-17, TGF-β и toll-like receptor 2. Более того, было зафиксировано снижение как богатства, так и равномерности кожного микробиома, что сопровождалось значительным уменьшением доли Staphylococcus. Примечательно, что на протяжении всего исследования побочных реакций не наблюдалось. Эти улучшения свидетельствуют о том, что комбинированный кислотный пилинг не только эффективно уменьшает видимые поражения при акне, но и воздействует на лежащее в их основе воспаление, которое часто сопутствует данному заболеванию.
Микробиом кожи играет критическую роль в развитии акне, и дисбаланс этого микробного сообщества может усугублять заболевание. Предыдущие исследования показали, что кожа, склонная к акне, часто характеризуется чрезмерным ростом C. acnes и сокращением количества полезных бактерий. Этот микробный дисбаланс способствует развитию воспаления и выработке кожного сала, что дополнительно ускоряет прогрессирование акне. В имеющейся литературе отмечается увеличение количества Proteobacteria на коже с акне и их потенциальная связь с развитием заболевания. Proteobacteria ассоциированы с кожными патологиями благодаря их способности активировать воспалительные пути, тем самым обостряя течение акне12,13. Увеличение этой группы бактерий может отражать сдвиг в микробиоме кожи, потенциально связанный с изменениями, вызванными лечением, направленным на бактерии, связанные с акне, или с изменениями в среде кожи после уменьшения количества элементов акне.
Кроме того, снижение индексов Шеннона и Симпсона после терапии указывает на то, что комбинированный кислотный пилинг может эффективно упрощать микробный состав кожи. Такой сдвиг в сторону более стабильной микробной среды может способствовать терапевтическому успеху лечения. Наблюдаемое доминирование определенных типов бактерий дополнительно подтверждает предположение о том, что лечение акне может сопровождаться модуляцией микробиома14. Увеличение доли Proteobacteria может отражать изменение структуры микробного сообщества под воздействием терапии, что согласуется с данными предыдущих исследований15,16. Этот тип включает различные бактерии, некоторые из которых, как известно, связаны с заболеваниями кожи. Рост данной группы может указывать на ответ на лечение или быть связан с изменениями в среде кожи после уменьшения количества высыпаний при акне17.
Воспаление играет центральную роль в патогенезе акне. При чрезмерном размножении Cutibacterium acnes (ранее Propionibacterium acnes) в волосяных фолликулах запускается иммунный ответ, приводящий к высвобождению провоспалительных цитокинов, таких как IL-1α, IL-6 и IL-177,18. Это воспаление способствует формированию элементов акне, таких как папулы, пустулы и кисты. Хроническое воспаление также может привести к рубцеванию и повреждению кожи, что делает его ключевой мишенью при лечении акне. TGF-β участвует в различных процессах восстановления кожи19, в то время как TLR-2 связан с иммунным ответом на патогены кожи20. Анализ показал, что после лечения интенсивность окрашивания этих воспалительных факторов была значительно ниже, что указывает на снижение уровней их экспрессии21. Этот противовоспалительный эффект может усилить регенераторный ответ кожи и может быть основным механизмом, посредством которого комбинированный кислотный пилинг оказывает терапевтическое воздействие22,23.
Патогенез acne vulgaris тесно связан с нарушением взаимодействий между C. acnes и иммунным ответом хозяина. В частности, вирулентные штаммы C. acnes выступают в качестве ключевых микробных триггеров воспаления, активируя сигнализацию TLR-2/4 в кератиноцитах и себоцитах24,25, что запускает последующие провоспалительные каскады, характеризующиеся повышенным уровнем IL-1α, IL-6, IL-17 и TGF-β. В соответствии с этим механизмом, наши результаты выявили значительное снижение численности C. acnes после проведения комбинированного химического пилинга. Важно отметить, что этот микробный сдвиг сопровождался снижением тканевой экспрессии TLR-2 и связанных с ним цитокинов (IL-1α, IL-6, IL-17, TGF-β) в биоптатах кожи перилезиональных зон; это позволяет предположить, что терапевтическая эффективность комбинированного химического пилинга может быть частично обусловлена подавлением гиперактивации TLR-2/4, опосредованной C. acnes. Данные результаты показывают, что микробные и воспалительные изменения происходили параллельно после лечения; причинно-следственные связи требуют дальнейшего изучения.
Более низкий балл по шкале GAGS указывает на снижение степени тяжести акне у пациентов. Эти результаты подтверждают эффективность лечения при терапии AV и свидетельствуют о положительной реакции пациентов на него. Соответствие между самооценкой и клинической оценкой может указывать на то, что данный метод измерения является валидным и надежным для будущих исследований.
Что касается механизма действия комбинированных кислотных пилингов, данные методы терапии предлагают многогранный подход к лечению акне. Составы с комбинированными кислотами, активные ингредиенты которых включают α-гидроксикислоту, салициловую кислоту и азелаиновую кислоту, могут оказывать взаимодополняющее противоакневое действие, воздействуя на несколько патогенных факторов. α-гидроксикислота может стимулировать эксфолиацию эпидермиса, снижать адгезию корнеоцитов и улучшать аномальный кератинизационный процесс в фолликулах, тем самым способствуя устранению обструкции фолликулов и образованию комедонов24. Салициловая кислота представляет собой липофильную бета-гидроксикислоту, которая способна проникать в фолликулярный юнит и оказывать кератолитическое, комедолитическое и противовоспалительное действие. Азелаиновая кислота может дополнительно способствовать лечению за счет своего влияния на кератинизацию, рост микроорганизмов и кожное воспаление. При AV аномальное десквамация кератиноцитов приводит к обструкции фолликулов, создавая среду, благоприятную для формирования комедонов и воспалительных элементов. Стимулируя эксфолиацию и снижая избыточную выработку себума, комбинированные кислотные процедуры помогают устранить эти закупорки. Кроме того, противовоспалительные свойства этих кислот снижают экспрессию цитокинов и ингибируют воспалительные пути, включая те, в которых задействованы TLR2 и TGF-β25. Это приводит к уменьшению воспаления и улучшению внешнего вида кожи. Также комбинированные кислоты стимулируют обновление клеток эпидермиса, помогая удалять ороговевшие клетки и обновлять ткани кожи. Этот процесс улучшает общую текстуру и гладкость кожи, способствуя уменьшению поствоспалительной гиперпигментации, которая является частым следствием поражений при акне. Лечение также, по-видимому, помогает восстановить микробный баланс, подавляя избыточный рост C. acnes, что позволяет бороться с микробным дисбиозом и его воспалительными эффектами.
Тем не менее, данное исследование имеет ряд ограничений, включая небольшой размер выборки, короткий период последующего наблюдения и возможное влияние «фактора времени» на полученные результаты. В контрольной группе, которая не получала лечения в течение первых 3 недель, могло наблюдаться естественное улучшение со временем, что потенциально могло повлиять на результаты. Клинические данные о степени тяжести заболевания для каждой половины лица не регистрировались до перекрестного этапа; следовательно, результаты GAGS для всего лица не могут быть интерпретированы как прямое сравнение обработанной и контрольной сторон лица. Для подтверждения долгосрочной эффективности и безопасности данного метода лечения необходимы дальнейшие исследования с более длительными периодами наблюдения и более репрезентативными контрольными группами.
Раскрытие информации
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Благодарности
Данное исследование было поддержано Национальным фондом естественных наук Китая (№ 82573987).
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Agilent 2100 Bioanalyzer | Agilent, USA | ||
| Магнитные частицы AMPure XP | Beckman Coulter Genomics, Danvers, MA, USA | ||
| Биопсийный панч | 2 mm | ||
| Комбинированный кислотный пилинг | XIMEIEN | A363 | Альфа-гидроксикислота 4%, салициловая кислота 2% и азелаиновая кислота 1.5%; общая номинальная концентрация активных кислот приблизительно 7.5%; pH: 3.6, 12 g |
| cutadapt (v1.9) | удаление праймеров секвенирования | ||
| DADA2 | дешуминг и генерация вариантов ампликонных последовательностей | ||
| Частицы для очистки ДНК | Vazyme | VAHTS DNA Clean Beads; используются для очистки продуктов ПЦР | |
| Набор для экстракции ДНК | TIANGEN | DP302-02 | Набор для выделения ДНК из тканей кожи |
| Набор для количественного анализа ДНК | Invitrogen | Quant-iT PicoGreen dsDNA Assay Kit | |
| Система визуализации лица | Система VISIA; модель/версия не указаны | ||
| FLASH (v1.2.8) | слияние парноконцевых чтений | ||
| fqtrim (v0.94) | тримминг чтений, содержащих >5% записей N | ||
| Наборы для количественного анализа библиотек Illumina | Kapa Biosciences, Woburn, MA, USA | ||
| Антитела для иммуногистохимии | Proteintech; Youpin Biology | 66148-1-Ig; YP-Ab-01185; YP-Ab-04780; YP-Ab-16022; YP-Ab-01522; YP-Ab-15931 | Приведенные описания: моноклональное антитело к IL-17A; поликлональное антитело к TLR2; мышиное моноклональное антитело к TGF-β (1F12); поликлональное антитело к IL-6; поликлональное антитело к IL-1α |
| Йодофор | Lierkang, Shandong, China | Используется для дезинфекции мест забора биопсии | |
| Цифровой сканер KF-PRO-120 | Jiangfeng Bio | ||
| Световой микроскоп | Используется для исследования срезов иммуногистохимии | ||
| nsegata-lefse | LDA effect size | ||
| NT-16S | база данных для выравнивания | ||
| Платформа для парноконцевого секвенирования | Illumina (LC-Bio Technology Co., Ltd., Hangzhou, China) | NovaSeq 6000 SP Reagent Kit | Парноконцевое секвенирование 250-bp |
| Парафин | Используется для заливки образцов биопсии | ||
| Параформальдегид | 4% раствор, используемый для фиксации образцов биопсии | ||
| Праймеры ПЦР 338F и 806R | 338F: 5′-ACTCCTACGGGAGGCAGCA-3′; 806R: 5′-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3′ | ||
| Маска после пилинга | XIMEIEN | C85Y | Успокаивающая и увлажняющая маска; 28 mL × 6 штук |
| QIIME2 | выравнивание последовательностей для аннотации видов | ||
| Qubit | Invitrogen, USA | количественное определение ДНК | |
| Набор реагентов для секвенирования | Illumina | NovaSeq 6000 SP Reagent Kit | Используется для парноконцевого секвенирования |
| SILV A | база данных для выравнивания | ||
| Программное обеспечение для построения графиков | Origin Software Inc. | Origin 2021 | Программное обеспечение для построения графиков |
| Программное обеспечение для статистического анализа | IBM | SPSS 27.0 | Программное обеспечение для статистического анализа |
| Программное обеспечение Vsearch (v2.3.4) | фильтрация химерных последовательностей |
Ссылки
- Machiwala AN, Kamath G, Vaidya TP. Knowledge, belief, and perception among youths with acne vulgaris. Indian J Dermatol. 2019;64(5):389-91.
- Tayel K, Attia M, Agamia N, Fadl N. Acne vulgaris: prevalence, severity, and impact on quality of life and self-esteem among Egyptian adolescents. J Egypt Public Health Assoc. 2020;95(1):30.
- Cong TX, et al. From pathogenesis of acne vulgaris to anti-acne agents. Arch Dermatol Res. 2019;311(5):337-49.
- Erdei L, et al. TNIP1 regulates Cutibacterium acnes-induced innate immune functions in epidermal keratinocytes. Front Immunol. 2018;9:2155.
- Grech I. Susceptibility profiles of Propionibacterium acnes isolated from patients with acne vulgaris. J Glob Antimicrob Resist. 2014;2(1):35-8.
- Podwojniak A, et al. Acne and the cutaneous microbiome: a systematic review of mechanisms and implications for treatments. J Eur Acad Dermatol Venereol. 2025;39(4):793-805.
- Argenziano G, et al. Review: expert opinion on antibiotics and antibiotic resistance in dermatology. Dermatol Pract Concept. 2024;14(4):e2024282.
- Li Y, et al. Acne treatment: research progress and new perspectives. Front Med (Lausanne). 2024;11:1425675.
- Măgerușan ȘE, Hancu G, Rusu A. A comprehensive bibliographic review concerning the efficacy of organic acids for chemical peels treating acne vulgaris. Molecules. 2023;28(20):7219.
- Calvisi L. Efficacy of a combined chemical peel and topical salicylic acid-based gel combination in the treatment of active acne. J Cosmet Dermatol. 2021;20 Suppl 2:2-6.
- Shao X, et al. Effect of 30% supramolecular salicylic acid peel on skin microbiota and inflammation in patients with moderate-to-severe acne vulgaris. Dermatol Ther (Heidelb). 2023;13(1):155-68.
- Kistowska M, et al. Propionibacterium acnes promotes Th17 and Th17/Th1 responses in acne patients. J Invest Dermatol. 2015;135(1):110-8.
- Jahns AC, et al. An increased incidence of Propionibacterium acnes biofilms in acne vulgaris: a case-control study. Br J Dermatol. 2012;167(1):50-8.
- Thompson KG, et al. Comparison of the skin microbiota in acne and rosacea. Exp Dermatol. 2021;30(10):1375-80.
- Li CX, et al. Skin microbiome differences relate to the grade of acne vulgaris. J Dermatol. 2019;46(9):787-90.
- Guo Z, et al. New insights into the characteristic skin microorganisms in different grades of acne and different acne sites. Front Microbiol. 2023;14:1167923.
- Boyanova L. Cutibacterium acnes, formerly Propionibacterium acnes: friend or foe? Future Microbiol. 2023;18:235-44.
- ElAttar Y, et al. Study of interleukin-1 beta expression in acne vulgaris and acne scars. J Cosmet Dermatol. 2022;21(10):4864-70.
- Tan JKL, Stein Gold LF, Alexis AF, Harper JC. Current concepts in acne pathogenesis: pathways to inflammation. Semin Cutan Med Surg. 2018;37(3S):S60-2.
- Rodighiero E, et al. Do acne treatments affect insulin-like growth factor-1 serum levels? A clinical and laboratory study on patients with acne vulgaris. Dermatol Ther. 2020;33(3):e13439.
- Huang L, et al. Association of different cell types and inflammation in early acne vulgaris. Front Immunol. 2024;15:1275269.
- Platsidaki E, Dessinioti C. Recent advances in understanding Propionibacterium acnes (Cutibacterium acnes) in acne. F1000Res. 2018;7:1953.
- Esen M. Effect of isotretinoin treatment on inflammatory and hematological parameters in patients with acne vulgaris. Cutan Ocul Toxicol. 2024;43(1):27-32.
- Handog EB, Datuin MS, Singzon IA. Chemical peels for acne and acne scars in Asians: evidence-based review. J Cutan Aesthet Surg. 2012;5(4):239-46.
- Lekakh O, et al. Treatment of acne vulgaris with salicylic acid chemical peel and pulsed dye laser: a split-face, rater-blinded, randomized controlled trial. J Lasers Med Sci. 2015;6(4):167-70.