Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Исследовательская статья

Рускогенин подавляет прогрессирование носоглоточной карциномы путем снижения экспрессии KDM1A для ко-индукции ферроптоза и апоптоза

64 просмотров

⸱

DOI:

10.3791/72523

⸱

3 сентября 2026 г.

1School of Stomatology and Optometry, Hubei University of Science and Technology

В этой статье

Краткое содержание

Данный протокол предназначен для оценки противоопухолевой эффективности русцогенина в клетках носоглоточной карциномы. В нем подробно описаны комплексные методологии, включая анализы жизнеспособности, миграции, апоптоза и ферроптоза, для систематического выяснения того, как данное соединение индуцирует двойную гибель клеток путем таргетирования и снижения экспрессии KDM1A.

Аннотация

Назофарингеальная карцинома (НФК) представляет собой крайне агрессивное злокачественное новообразование. Природное соединение русцогенин (Rus) обладает противоопухолевым потенциалом. В данном исследовании раскрывается специфический механизм его действия при назофарингеальной карциноме (НФК) путем изучения его влияния на клетки НФК и лежащего в основе молекулярного пути. Клетки линии назофарингеальной карциномы человека C666-1 подвергали воздействию Rus в различных концентрациях. Была проведена серия анализов in vitro для оценки жизнеспособности, пролиферации, миграции, инвазии, апоптоза и ферроптоза клеток. Роль лизин-специфической деметилазы 1A (KDM1A) изучали с помощью вестерн-блоттинга и молекулярного докинга, а ее опосредующая роль была подтверждена экспериментами по спасению (rescue) посредством гиперэкспрессии. Русцогенин дозозависимо снижал пролиферативную, клоногенную, миграционную и инвазивную способности клеток C666-1. С точки зрения механизмов, обработка Rus индуцировала как апоптоз, о чем свидетельствовала активация эффекторной каспазы-3 и сдвиг в сторону проапоптотической сигнализации через баланс Bax/Bcl-2, так и ферроптоз, характеризующийся повышенным перекисным окислением липидов и содержанием внутриклеточного железа. Эти противоопухолевые эффекты были тесно связаны с понижением экспрессии KDM1A. Важно отметить, что принудительная гиперэкспрессия KDM1A значительно ослабляла индуцированный Rus апоптоз и ферроптоз, а также нивелировала подавление злокачественных фенотипов, что подтверждает критическую опосредующую роль KDM1A. Русцогенин ингибирует злокачественное прогрессирование назофарингеальной карциномы путем подавления экспрессии KDM1A, стимулируя тем самым апоптоз и ферроптоз. Полученные результаты позволяют рассматривать ось Rus-KDM1A как перспективную терапевтическую мишень для лечения НФК.

Введение

Назофарингеальная карцинома (НФК) представляет собой вид рака, вызванный совокупным действием генетических факторов и факторов окружающей среды1. Несмотря на значительные успехи лучевой терапии в лечении этого заболевания, общая выживаемость пациентов с НФК остается неудовлетворительной. Вероятно, это связано с тем, что клетки НФК способны к быстрой пролиферации и склонны к активному метастазированию в регионарные лимфатические узлы и отдаленные органы2. Следовательно, крайне важно изучить молекулярные механизмы, способствующие прогрессированию НФК. Недавно было обнаружено, что ферроптоз — новый вид гибели клеток, регулируемый Fe2⁺ и перекисями липидов железозависимым образом, — играет критическую роль при НФК3. Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что ферроптоз играет важную роль в развитии НФК, а его индукция может повысить эффективность лучевой терапии рака4,5.

Благодаря минимальной токсичности и меньшему количеству побочных эффектов китайские травяные сборы на протяжении тысяч лет широко используются для лечения рака6,7. Будучи многокомпонентными препаратами с множеством мишеней и синергическим эффектом, рецепты традиционной китайской медицины (ТКМ) применяются в качестве эффективной дополнительной терапии при профилактике и лечении рака, включая NPC8,9,10. Сообщалось, что Radix ophiopogonis (RO), корень многолетнего травянистого растения Ophiopogon japonicus, эффективно облегчает течение NPC при использовании в качестве адъювантной терапии11,12. Было отмечено, что русцогенин (Rus), основной компонент RO, обладает мощным противоопухолевым действием13. На моделях колоректального рака у мышей Rus может уменьшать повреждение плотных контактов и подавлять миграцию опухоли14. Важно отметить, что Rus также может снижать жизнеспособность клеток рака поджелудочной железы путем индукции ферроптоза. Однако влияние Rus на NPC все еще остается неясным.

Эпигенетика является основной областью исследований патогенеза рака и предлагает множество эффективных методов лечения15. Как одна из хорошо изученных эпигенетических модификаций, метилирование гистонов участвует в развитии рака и также является важной мишенью для разработки лекарственных препаратов16. Динамическая модуляция метилирования гистонов осуществляется метилтрансферазами и деметилазами17. KDM1A представляет собой лизин-деметилазу гистонов, которая, как было обнаружено, играет критическую роль в канцерогенезе благодаря своему участию в эпигенетической модуляции18. Кроме того, KDM1A является онкобелком с высоким уровнем экспрессии при различных видах рака, таких как рак легких и рак поджелудочной железы19. Guo и др. сообщили, что повышение уровня KDM1A может подавлять экспрессию гомолога фосфатазы и тенсина (PTEN) и усиливать пролиферацию и миграцию клеток NPC, одновременно ингибируя апоптоз20. В то же время было обнаружено, что ап-регуляция KDM1A может подавлять ферроптоз при раке легких21. Анализ базы данных Super-PRED показал, что KDM1A является потенциальной мишенью Rus.

Несмотря на признанный противоопухолевый потенциал Rus при других видах рака, его конкретная роль и молекулярные механизмы при назофарингеальной карциноме остаются совершенно неизученными, что представляет собой значительный пробел в исследованиях. Кроме того, хотя в предыдущих сообщениях KDM1A по отдельности связывали с пролиферацией опухоли и устойчивостью к ферроптозу, ни в одном исследовании до сих пор не изучалось, может ли воздействие на KDM1A одновременно запустить несколько путей гибели клеток при NPC. Таким образом, данное исследование дает веские основания выдвинуть гипотезу о том, что Rus может подавлять злокачественную прогрессию клеток NPC путем прямого снижения экспрессии KDM1A.

Данное исследование было направлено на устранение этого пробела путем систематической оценки влияния Rus на пролиферацию, миграцию и инвазию клеток NPC. Основная новизна данной работы заключается в выявлении стратегии двойного механизма. Особое внимание было уделено способности Rus одновременно индуцировать как классический апоптоз, так и железозависимый ферроптоз. Путем подтверждения новой сигнальной оси Rus-KDM1A данное исследование значительно расширяет современные знания, демонстрируя, как одно природное соединение может преодолеть устойчивость опухоли за счет одновременной блокады нескольких путей, что обеспечивает многообещающее доклиническое обоснование для таргетной терапии NPC.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Культивирование, обработка и трансфекция клеток

Линию клеток носоглоточной карциномы человека (NPC) C666-1 (RRID: CVCL_M597) и линию незлокачественных эпителиальных клеток носоглотки человека NP69 (RRID: CVCL_F755) приобрели у коммерческого поставщика. Обе клеточные линии прошли аутентификацию методом профилирования коротких тандемных повторов (STR), и перед использованием было подтверждено отсутствие контаминации микоплазмой. Для рутинного культивирования клетки C666-1 размножали в среде RPMI 1640 с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS) и 1% пенициллина-стрептомицина. Клетки NP69 культивировали в бессывороточной среде для кератиноцитов с добавлением 10% FBS, 10 ng/mL рекомбинантного эпидермального фактора роста и 1% пенициллина-стрептомицина. Рускогенин (Rus; чистота ≥ 98%) был приобретен у коммерческого поставщика. Обе клеточные линии содержали в увлажненном инкубаторе при 37 °C в атмосфере 5% CO₂. Для проведения экспериментов клетки подвергали воздействию рускогенина (Rus) в различных концентрациях (10, 20, 50 µM) в течение 24 ч22. Для трансфекции в клетки C666-1 при достижении конфлюэнтности 70–80% вводили плазмиды, кодирующие лизин-специфическую деметилазу 1A для гиперэкспрессии (oe-KDM1A), и соответствующий отрицательный контроль в виде пустого вектора (oe-NC), полученные от коммерческого поставщика. В частности, 2,5 µg плазмидной ДНК и 5 µL липидного реагента для трансфекции разводили в 150 µL среды с пониженным содержанием сыворотки, осторожно перемешивали, инкубировали в течение 20 мин при комнатной температуре, а затем добавляли в каждую лунку 6-луночного планшета согласно протоколу производителя. Клетки инкубировали в течение 48 ч при 37 °C, после чего подтверждали эффективность трансфекции.

Анализ с использованием набора для подсчета клеток-8 (CCK-8)

Жизнеспособность клеток после обработки Rus оценивали с помощью анализа CCK-8. Для этой процедуры клетки сначала высевали в 96-луночные планшеты и культивировали в течение ночи. Анализ начинали с добавления 10 µL раствора CCK-8, а после 2 ч инкубации измеряли результирующее колориметрическое изменение как оптическую плотность (OD) при 450 nm с помощью планшетного ридера.

Анализ формирования колоний

Для оценки клоногенной выживаемости клетки C666-1 высевали в 6-луночные планшеты и культивировали в течение 14 дней. После периода инкубации полученные колонии фиксировали 100% метанолом в течение 10 мин, затем окрашивали 0,5% кристаллическим фиолетовым в течение 30 мин. Количество окрашенных колоний определяют с помощью микроскопической визуализации и подсчета.

Вестерн-блоттинг

Для вестерн-блот-анализа сначала экстрагировали общий белок из клеток с помощью буфера RIPA, и полученные лизаты центрифугировали (12,000 × g) для сбора супернатанта. Для количественного определения уровня белка использовали BCA-анализ. Равные количества общего белка (30 µg на лунку) наносили на гель и разделяли методом 10% электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE). После разделения белки переносили на поливинилиденфторидные (PVDF) мембраны при постоянном напряжении 100 V в течение 90 мин на льду. Затем мембраны блокировали в 5% бычьем сывороточном альбумине (BSA), приготовленном в трис-солевом буфере с 0,1% Tween 20 (TBST), в течение 2 ч при комнатной температуре. После этого мембраны инкубировали в течение ночи при 4°C со следующими первичными антителами, разведенными в блокирующем буфере (все в соотношении 1:1000): Ki67, PCNA, MMP2, MMP9, Bcl-2, Bax, KDM1A, SLC7A11, GPX4, ACSL4, TFR1 и β-actin. Наконец, после 2-часовой инкубации с конъюгированными с HRP вторичными антителами иммунореактивные полосы визуализировали с помощью реагента для усиленной хемилюминесценции (ECL), а денситометрический анализ проводили с использованием программного обеспечения для анализа изображений.

Метод заживления раны (scratch-тест)

Для анализа заживления ран клетки C666-1 культивировали в 6-луночных планшетах до достижения 80% конфлюэнтности. В монослое создавали равномерную «рану» путем соскабливания клеток наконечником пипетки на 200 µL. Отделившиеся клетки удаляли промывкой с использованием PBS, после чего культуральную среду заменяли бессывороточной средой для инкубации в течение 24 ч. Для оценки миграции клеток с помощью светового микроскопа получали изображения области раны в моменты 0 ч и 24 ч.

Анализ в системе Transwell

Инвазию клеток оценивали с использованием камер Transwell (размер пор 8 µm), предварительно покрытых 50 µL матрикса базальной мембраны. Инвазивная способность клеток C666-1 анализировалась с помощью камер Transwell. В верхние вставки высевали клетки, суспендированные в среде без сыворотки, в то время как в нижние лунки помещали DMEM с 10% FBS. После 24-часовой инкубации клетки, оставшиеся на апикальной стороне мембраны, осторожно удаляли. Для количественного анализа клетки на базалатеральной поверхности фиксировали в метаноле, окрашивали 0,1% раствором кристаллического фиолетового и подсчитывали по изображениям, полученным с помощью световой микроскопии.

Проточная цитометрия

Апоптоз количественно определяли с помощью проточной цитометрии. Для подготовки образцов клетки C666-1 собирали, промывали ледяным PBS, а затем ресуспендировали в 100 µL связывающего буфера. Затем клетки подвергали двойному окрашиванию Annexin-V-FITC (20 µg/mL) и пропидийиодидом (PI). Окрашивание проводили в течение 15 min на льду в защищенном от света месте. Данные регистрировали на проточном цитометре незамедлительно для определения процента апоптотических клеток.

Определение активности каспазы-3

Активность каспазы-3 измеряли с помощью коммерческого набора для анализа в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, клетки C666-1 подвергали лизису, после чего собирали супернатанты путем центрифугирования при 14,000 × g. После 2-часовой инкубации с прилагаемым реагентом измеряли оптическую плотность каждого супернатанта при 405 nm.

ОТ-ПЦР в реальном времени

Общую РНК выделяли из клеток C666-1 с использованием коммерческого реагента для экстракции РНК. Полученную РНК подвергали обратной транскрипции для синтеза первой цепи кДНК с помощью коммерческого набора согласно протоколу производителя. Анализ экспрессии генов впоследствии проводили методом количественной ПЦР (кПЦР) на системе ПЦР в реальном времени с использованием мастер-микса на основе SYBR Green. Для определения относительных уровней транскриптов применяли метод сравнительного Ct (2⁻△△Ct). Последовательности праймеров, использованных для амплификации, были следующими: β-actin (прямой: 5'-CATGTACGTTGCTATCCAGGC-3'; обратный: 5'-CTCCTTAATGTCACGCACGAT-3') и KDM1A (прямой: 5'-TGACCGGATGACTTCTCAAGA-3'; обратный: 5'-GTTGGAGAGTAGCCTC AAATGTC-3').

Анализ на содержание веществ, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (TBARS)

Для измерения перекисного окисления липидов сначала готовили супернатанты из клеток C666-1 путем осаждения (15% TCA, 500 mM BHA) и центрифугирования в течение 10 мин при 10,000 × g. Затем эти супернатанты смешивали с 0,375% тиобарбитуровой кислотой и нагревали при 100 °C в течение 10 мин для образования аддукта MDA-TBA. Уровень этого аддукта, свидетельствующий о перекисном окислении липидов, определяли путем измерения абсорбции при 532 nm на микропланшетном ридере23.

Определение липидных активных форм кислорода (АФК)

Перекисное окисление липидов определяли с помощью флуоресцентного зонда на перекисное окисление липидов. Клетки C666-1 высевали в 6-луночные планшеты, культивировали в течение ночи, а затем подвергали воздействию флуоресцентного зонда (2 µM). Данный зонд демонстрирует сдвиг флуоресценции из красного спектра в зеленый при окислении. Отношение зеленой флуоресценции к красной анализировали с помощью лазерного сканирующего конфокального микроскопа и программного обеспечения для анализа изображений. Построенный график отношения зеленой флуоресценции к красной был четко определен и использовался в качестве количественного индикатора уровней перекисного окисления липидов24.

Определение Fe2+

Уровень внутриклеточного двухвалентного железа (Fe2⁺) измеряли с помощью внутриклеточного флуоресцентного зонда на железо. Клетки C666-1 инкубировали с 10 µM флуоресцентного зонда в течение 10 min. После промывки в PBS для удаления избытка зонда клетки анализировали методом флуоресцентной микроскопии.

Молекулярный докинг-анализ

Молекулярный докинг является ключевым вычислительным методом, который упрощает разработку новых лекарственных препаратов путем прогнозирования аффинности связывания и взаимодействия между лигандом и его белком-мишенью посредством оценки режимов их связывания25. С веб-страницы RCSB PDB (https://www.rcsb.org/) была получена 3D-структура KDM1A (PDB ID: 6NQU). Для подготовки структуры белка KDM1A была удалена вода и посторонние малые лиганды. Симуляция молекулярного докинга была выполнена с помощью программного обеспечения для молекулярного докинга с использованием ламаркианского генетического алгоритма, а визуализация осуществлялась с помощью программного обеспечения для молекулярной визуализации26.

Статистический анализ

Все эксперименты проводились с использованием как минимум трех независимых биологических повторностей, и результаты представлены в виде среднего значения ± стандартного отклонения (SD). Статистический анализ выполнялся с помощью программного обеспечения для статистической обработки данных. Различия между несколькими группами оценивали с помощью однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA) с последующим апостериорным тестом Тьюки для множественных сравнений. Значение P менее 0,05 считалось показателем статистически значимого различия.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Рускогенин селективно подавляет жизнеспособность и пролиферацию клеток назофарингеальной карциномы

В данном исследовании сначала изучалось влияние рускогенина (Rus) на жизнеспособность как нормальных эпителиальных клеток носоглотки (NP69), так и клеток носоглоточной карциномы (NPC) (C666-1). Как было определено с помощью анализа CCK-8, обработка Rus в концентрациях 10, 20 и 50 µM не вызвала значимой токсичности по отношению к нормальным клеткам NP69. Напротив, рускогенин (Rus)...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Назофарингеальная карцинома (НФК) представляет собой тяжелое злокачественное новообразование с высокой частотой метастазирования, что обуславливает острую необходимость в разработке более эффективных методов терапии27. В данной работе показано, что рускогенин (Rus), природное соединение, полученное как производное Radix ophiopogonis, оказывает выраженное противоопухолевое действие на клетки НФК. Сделан вывод о том, что Rus препятствует прогрессированию НФК путем подавления гистон-деметила...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют об отсутствии конфликта финансовых интересов. Авторы заявляют, что инструменты генеративного ИИ не использовались при разработке концепции исследования, сборе данных, анализе данных или создании рисунков. Технологии с поддержкой ИИ использовались исключительно для незначительного редактирования языка и исправления грамматики при подготовке данной рукописи. Авторы несут полную ответственность за содержание и целостность опубликованной работы.

Благодарности

Неприменимо.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Система ПЦР в реальном времени 7500 FastApplied Biosystems4351106Анализ методом ОТ-кПЦР
Набор для анализа апоптоза Annexin-V-FITC/PIBD Biosciences556547Детекция апоптоза методом проточной цитометрии
Антитела к ACSL4Abcamab155282Первичные антитела для вестерн-блоттинга
антитела к BaxCell Signaling Technology (CST)5023Первичные антитела для вестерн-блоттинга
Антитело к Bcl-2Cell Signaling Technology (CST)15071Первичные антитела для вестерн-блоттинга
Антитела
антитела к GPX4Abcamab125066Первичные антитела для вестерн-блоттинга
Антитела к KDM1A (LSD1)Cell Signaling Technology (CST)2139Первичные антитела для вестерн-блоттинга
Антитела к Ki67Abcamab16667Первичные антитела для вестерн-блоттинга
Антитела к MMP2Abcamab92536Первичные антитела для вестерн-блоттинга
Антитела к MMP9Abcamab76003Первичные антитела для вестерн-блоттинга
Антитела к PCNACell Signaling Technology (CST)13110Первичные антитела для вестерн-блоттинга
Антитела к IgG кролика, конъюгированные с HRPCell Signaling Technology (CST)7074Вторичное антитело
антитело к SLC7A11 (xCT)Abcamab175186Первичные антитела для вестерн-блоттинга
антитело к TFR1Abcamab84036Первичные антитела для вестерн-блоттинга
Анти-βантитела к $\alpha$-актинуCell Signaling Technology (CST)4970Первичные антитела для контроля нагрузки
Наборы для анализа
AutoDock 4.2Исследовательский институт СкриппсаДанные отсутствуютМоделирование молекулярного докинга
Набор для определения концентрации белка методом BCABeyotime BiotechnologyP0012Количественное определение белков
зонд BODIPY 581/591 C11Invitrogen (Thermo Fisher Scientific)D3861Детекция липидных АФК (2 μM)
клеточная линия C666-1iCell Bioscience Inc.iCell-h378Линия клеток назофарингеальной карциномы человека
Набор для анализа активности каспазы-3Beyotime BiotechnologyC1115Оценка апоптоза
Набор для анализа CCK-8Dojindo Molecular TechnologiesCK04Измерение жизнеспособности клеток
Химические вещества & Реагенты
Проточный цитометр CytoFLEXBeckman CoulterCytoFLEXАнализ апоптоза
реагент для ЭХЛ-детектированияMilliporeSigmaWBKLS0500Визуализация вестерн-блоттинга (Immobilon)
Оборудование
Фетальная бычья сыворотка (ФБС)Gibco (Thermo Fisher Scientific)10099141Добавка для культивирования клеток
GraphPad Prism 8.0Программное обеспечение GraphPadНет данныхСтатистический анализ и построение графиков
программное обеспечение ImageJNIHНет данныхДенситометрический анализ изображений
Бессывороточная среда для кератиноцитовiCell Bioscience Inc.iCell-019Для культивирования клеток линии NP69
Лазерный сканирующий конфокальный микроскопCarl ZeissLSM 880Флуоресцентная визуализация с использованием BODIPY C11
Световой / флуоресцентный микроскопOlympusIX73Метод «заживления царапины» (wound scratch), Transwell & Визуализация Fe2+
LightCycler 480 SYBR Green I MasterRoche Diagnostics4887352001Количественная ПЦР в реальном времени
реагент Lipofectamine 2000Invitrogen (Thermo Fisher Scientific)11668019Реагент для трансфекции клеток
MatrigelCorning356234Матрикс базальной мембраны для анализа инвазии
Микропланшетный ридерMolecular DevicesSpectraMax M5Измерение оптической плотности (405, 450, 532 нм)
линия клеток NP69iCell Bioscience Inc.iCell-h431Линия нормальных эпителиальных клеток носоглотки человека
о экспрессия KDM1A & плазмиды oe-NCShanghai GenePharma Co., Ltd.Синтез на заказПлазмиды для гиперэкспрессии KDM1A
зонд Phen Green SK (PGSK)Invitrogen (Thermo Fisher Scientific)P14312Определение внутриклеточного Fe2+ (10 μM)
Pymol 3.0ШрöдингерПоскольку исходный текст не был предоставлен, пожалуйста, отправьте контент, который необходимо перевести.Визуализация молекулярного докинга
Набор для обратной транскрипцииRoche Diagnostics4379012001Набор для синтеза первой цепи кДНК Transcriptor
лизирующий буфер RIPASolarbio (Пекин, Китай)R0010Экстракция общего белка
среда RPMI 1640iCell Bioscience Inc.iCell-0002Для культивирования клеток C666-1
Рускогенин (Rus)MedChemExpress (MCE)HY-N0193Лекарственная терапия, чистота ≥ 98%
Программное обеспечение
Набор для анализа ТБАРСCayman Chemical10009055Измерение перекисного окисления липидов
реагент TRizolInvitrogen (Thermo Fisher Scientific)*15596026Экстракция тотальной РНК

Ссылки

  1. Zhou R, Qiu L, Zhou L, Geng R, Yang S, Wu J. P4HA1 activates HMGCS1 to promote nasopharyngeal carcinoma ferroptosis resistance and progression. Cell Signal. 2023;105:110609.
  2. Cao JY, Liu L, Chen SP, Zhang X, Mi YJ, Liu ZG, et al. Prognostic significance and therapeutic implications of centromere protein F expression in human nasopharyngeal carcinoma. Mol Cancer. 2010;9:237.
  3. Dixon SJ, Lemberg KM, Lamprecht MR, Skouta R, Zaitsev EM, Gleason CE, et al. Ferroptosis: an iron-dependent form of nonapoptotic cell death. Cell. 2012;149(5):1060-72.
  4. Liu S, Zhang HL, Li J, Ye ZP, Du T, Li LC, et al. Tubastatin A potently inhibits GPX4 activity to potentiate cancer radiotherapy through boosting ferroptosis. Redox Biol. 2023;62:102677.
  5. Amos A, Jiang N, Zong D, Gu J, Zhou J, Yin L, et al. Depletion of SOD2 enhances nasopharyngeal carcinoma cell radiosensitivity via ferroptosis induction modulated by DHODH inhibition. BMC Cancer. 2023;23(1):117.
  6. Jiang H, Li M, Du K, Ma C, Cheng Y, Wang S, et al. Traditional Chinese medicine for adjuvant treatment of breast cancer: Taohong Siwu decoction. Chin Med. 2021;16(1):129.
  7. Shang L, Wang Y, Li J, Zhou F, Xiao K, Liu Y, et al. Mechanism of Sijunzi decoction in the treatment of colorectal cancer based on network pharmacology and experimental validation. J Ethnopharmacol. 2023;302(Pt A):115876.
  8. Yang CH, Tung KL, Wu YT, Liu C, Lin SC, Yang CC, et al. Qing Yan Li Ge Tang, a Chinese herbal formula, induces autophagic cell death through the PI3K/Akt/mTOR pathway in nasopharyngeal carcinoma cells in vitro. Evid Based Complement Alternat Med. 2021;2021:9925684.
  9. Ren T, Bai XY, Yang MZ, Xu N, Guo XZ, Qin LJ, et al. Gambogic acid suppresses nasopharyngeal carcinoma via rewiring the molecular network of cancer malignancy and immunosurveillance. Biomed Pharmacother. 2022;150:113012.
  10. Zhou T, Zhao S, Tang S, Wang Y, Wu R, Zeng X, et al. Guggulsterone promotes nasopharyngeal carcinoma cells' exosomal Circfip1L1 to mediate miR-125a-5p/VEGFA, affecting tumor angiogenesis. Curr Mol Pharmacol. 2023;16(8):870-80.
  11. Feng X, Shi H, Chao X, Zhao F, Song L, Wei M, et al. Deciphering the pharmacological mechanism of the herb Radix Ophiopogonis in the treatment of nasopharyngeal carcinoma by integrating iTRAQ-coupled 2-D LC-MS/MS analysis and network investigation. Front Pharmacol. 2019;10:253.
  12. Kim W, Lee WB, Lee J, Min BI, Lee H, Cho SH. Traditional herbal medicine as adjunctive therapy for nasopharyngeal cancer: a systematic review and meta-analysis. Integr Cancer Ther. 2015;14(3):212-20.
  13. Zhao J, He B, Seshadri VD, Xu S. Anticancer effect of ruscogenin in B(a)P-induced lung cancer in mice via modulation of proinflammatory cytokines and mitochondrial enzymes. Appl Biochem Biotechnol. 2022;194(12):5862-77.
  14. Rabitha R, Shivani S, Showket Y, Sudhandiran G. Ferroptosis regulates key signaling pathways in gastrointestinal tumors: underlying mechanisms and therapeutic strategies. World J Gastroenterol. 2023;29(16):2433-51.
  15. Feinberg AP, Koldobskiy MA, Göndör A. Epigenetic modulators, modifiers and mediators in cancer etiology and progression. Nat Rev Genet. 2016;17(5):284-99.
  16. Song Y, Wu F, Wu J. Targeting histone methylation for cancer therapy: enzymes, inhibitors, biological activity and perspectives. J Hematol Oncol. 2016;9(1):49.
  17. Zhang W, Ruan X, Li Y, Zhi J, Hu L, Hou X, et al. KDM1A promotes thyroid cancer progression and maintains stemness through the Wnt/β-catenin signaling pathway. Theranostics. 2022;12(4):1500-17.
  18. Ismail T, Lee HK, Kim C, Kwon T, Park TJ, Lee HS. KDM1A microenvironment, its oncogenic potential, and therapeutic significance. Epigenetics Chromatin. 2018;11(1):33.
  19. Hou X, Li Q, Yang L, Yang Z, He J, Li Q, et al. KDM1A and KDM3A promote tumor growth by upregulating cell cycle-associated genes in pancreatic cancer. Exp Biol Med (Maywood). 2021;246(17):1869-83.
  20. Guo D, Liu F, Zhang L, Bian N, Liu L, Kong L, et al. Long non-coding RNA AWPPH enhances malignant phenotypes in nasopharyngeal carcinoma via silencing PTEN through interacting with LSD1 and EZH2. Biochem Cell Biol. 2021;99(2):195-202.
  21. Lu C, Cai Y, Liu W, Peng B, Liang Q, Yan Y, et al. Aberrant expression of KDM1A inhibits ferroptosis of lung cancer cells through up-regulating c-Myc. Sci Rep. 2022;12(1):19168.
  22. Hua H, Zhu Y, Song YH. Ruscogenin suppressed the hepatocellular carcinoma metastasis via PI3K/Akt/mTOR signaling pathway. Biomed Pharmacother. 2018;101:115-22.
  23. Sun Q, Zhen P, Li D, Liu X, Ding X, Liu H. Amentoflavone promotes ferroptosis by regulating reactive oxygen species (ROS) /5'AMP-activated protein kinase (AMPK)/mammalian target of rapamycin (mTOR) to inhibit the malignant progression of endometrial carcinoma cells. Bioengineered. 2022;13(5):13269-79.
  24. Carlsen CU, Kurtmann L, Brüggemann DA, Hoff S, Risbo J, Skibsted LH. Investigation of oxidation in freeze-dried membranes using the fluorescent probe C11-BODIPY(581/591). Cryobiology. 2009;58(3):262-7.
  25. Liu J, Yuan S, Yao Y, Wang J, Scalabrino G, Jiang S, et al. Network pharmacology and molecular docking elucidate the underlying pharmacological mechanisms of Houttuynia cordata in treating SARS-CoV-2 pneumonia. Viruses. 2022;14(7).
  26. Zhu W, Li Y, Zhao J, Wang Y, Li Y, Wang Y. The mechanism of triptolide in the treatment of connective tissue disease-related interstitial lung disease based on network pharmacology and molecular docking. Ann Med. 2022;54(1):541-52.
  27. Lee AWM, Ng WT, Chan JYW, Corry J, Mäkitie A, Mendenhall WM, et al. Management of locally recurrent nasopharyngeal carcinoma. Cancer Treat Rev. 2019;79:101890.
  28. Li BH, Ma H, Zhu J, Chen J, Dai YQ, Zhang XJ, et al. Semisynthesis and anti-cancer properties of novel honokiol derivatives in human nasopharyngeal carcinoma CNE-2Z cells. J Enzyme Inhib Med Chem. 2023;38(1):2244694.
  29. Qiao H, Zhang W, Liu P, Zhu R, Zhang J, Gao J, et al. Ropivacaine inhibits proliferation and invasion and promotes apoptosis and autophagy in bladder cancer cells via inhibiting the PI3K/AKT pathway. J Biochem Mol Toxicol. 2023;37(1):e23233.
  30. Zhao L, Han S, Hou J, Shi W, Zhao Y, Chen Y. The local anesthetic ropivacaine suppresses the progression of breast cancer by regulating miR-27b-3p/YAP axis. Aging (Albany, NY). 2021;13(12):16341-52.
  31. Ghasemi A, Khanzadeh T, Zadi Heydarabad M, Khorrami A, Jahanban Esfahlan A, Ghavipanjeh S, et al. Evaluation of BAX and BCL-2 gene expression and apoptosis induction in acute lymphoblastic leukemia cell line CCRFCEM after high-dose prednisolone treatment. Asian Pac J Cancer Prev. 2018;19(8):2319-23.
  32. Wadey KS, Johnson JL, George SJ. Monitoring cellular proliferation and apoptosis in atherosclerotic plaques and intimal thickenings. Methods Mol Biol. 2022;2419:507-19.
  33. Chen P, Wang D, Xiao T, Gu W, Yang H, Yang M, et al. ACSL4 promotes ferroptosis and M1 macrophage polarization to regulate nasopharyngeal carcinoma tumorigenesis. Int Immunopharmacol. 2023;122:110629.
  34. Forcina GC, Dixon SJ. GPX4 at the crossroads of lipid homeostasis and ferroptosis. Proteomics. 2019;19(18):e1800311.
  35. Zhao Y, Li Y, Zhang R, Wang F, Wang T, Jiao Y. The role of erastin in ferroptosis and its prospects in cancer therapy. Onco Targets Ther. 2020;13:5429-41.
  36. Sareddy GR, Nair BC, Krishnan SK, Gonugunta VK, Zhang QG, Suzuki T, et al. KDM1 is a novel therapeutic target for glioma treatment. Oncotarget. 2013;4(1):18-28.
  37. Ferrari-Amorotti G, Fragliasso V, Esteki R, Prudente Z, Soliera AR, Cattelani S, et al. Inhibiting the interactions between the lysine demethylase LSD1 and snail/slug blocks cancer cell invasion. Cancer Res. 2013;73(1):235-45.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Обработка русцогениномснижение экспрессии KDM1Aиндукция ферроптозаиндукция апоптозаклетки C666-1пролиферация клетоквестерн-блоттингперекисное окисление липидовактивация каспазы-3
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.