Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Исследовательская статья

Корреляционный анализ действия гранул Циммин в сочетании с сетью, центрированной на CMKLR1, и системным воспалением через ось «кишечник — сетчатка» при диабетической ретинопатии

121 просмотров

⸱

DOI:

10.3791/72700

⸱

15 сентября 2026 г.

 ,  ,  ,  ,  , 
1Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 2Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 3School of Acupuncture-Moxibustion and Tuina, Beijing University of Chinese Medicine

В этой статье

Краткое содержание

Данное исследование демонстрирует, что гранулы Циммин (Qiming Granule, QMG) облегчают течение диабетической ретинопатии (ДР) путем модуляции оси «кишечник–сетчатка». QMG изменили состав микробиоты кишечника, подавили системное воспаление и восстановили регуляторную сеть с центральной ролью CMKLR1, тем самым обратив вспять гистопатологические повреждения сетчатки. Эти результаты позволяют рассматривать QMG как перспективную терапевтическую стратегию лечения ДР, воздействующую на ось «кишечник–сетчатка».

Аннотация

Диабетическая ретинопатия (ДР) представляет собой нейроваскулярное осложнение, вызванное хронической гипергликемией и системным воспалением, при этом новые данные указывают на ось «кишечник-сетчатка» как на критическую, но недостаточно используемую терапевтическую мишень. В данном исследовании изучается, оказывает ли препарат Qiming Granule (QMG) свое защитное действие при ДР посредством модуляции оси «кишечник-сетчатка». Мыши линии C57BL/6 были рандомизированы по экспериментальным группам и подвергнуты различным воздействиям. Гистопатологические изменения сетчатки оценивали с помощью окрашивания гематоксилином и эозином (HE). Уровни воспалительных цитокинов (IL-1β, IL-6, TNF-α) в сыворотке крови измеряли методом иммуноферментного анализа (ELISA). Экспрессию ключевых регуляторных белков (CMKLR1, Wnt5a, PPAR-γ, AP-1, TP53) в тканях сетчатки и толстой кишки определяли методом вестерн-блоттинга (WB). Состав и разнообразие микробиоты кишечника характеризовали с помощью полноразмерного секвенирования 16S рДНК. Корреляционный анализ проводился для оценки взаимосвязей между микробиотой кишечника и воспалительными факторами или ключевыми белками. Лечение QMG привело к улучшению гистопатологических аномалий сетчатки, о чем свидетельствовало восстановление ламинарной архитектуры сетчатки, частичное восстановление количества ганглионарных клеток сетчатки (P < 0.001) и обращение процесса истончения сетчатки (P < 0.01). Также было отмечено значительное снижение уровней IL-1β, IL-6 и TNF-α в сыворотке крови (P < 0.0001). Вдоль оси «кишечник-сетчатка» QMG обратил аномальную экспрессию ключевых регуляторных белков, в частности сети с центральной ролью CMKLR1 (Wnt5a, PPAR-γ, AP-1, TP53). Кроме того, QMG восстановил состав, разнообразие и функцию микробиоты кишечника, а корреляционный анализ показал, что QMG связывает системное воспаление с этими регуляторными белками для модуляции оси «кишечник-сетчатка». Данное исследование предоставляет предварительные фармакологические доказательства того, что QMG облегчает течение ДР, связывая регуляторную сеть с центром в CMKLR1 (включая Wnt5a, PPAR-γ, AP-1 и TP53) и системное воспаление через ось «кишечник-сетчатка», что позиционирует QMG как перспективную терапевтическую стратегию воздействия на ось «кишечник-сетчатка» при ДР.

Введение

Диабетическая ретинопатия (ДР), одно из наиболее распространенных микрососудистых осложнений сахарного диабета (СД), является ведущей причиной слепоты среди взрослого трудоспособного населения во всем мире1. В глобальном масштабе ДР поражает примерно 20–30% людей с СД2. Хроническая гипергликемия определяет патогенез ДР, запуская каскад патологических событий, включая нарушение нейроваскулярного сопряжения, усиление воспалительных реакций и окислительный стресс3. В последнее время у пациентов с сахарным диабетом и ретинопатией наблюдались изменения разнообразия и состава микробиоты кишечника по сравнению с пациентами без ретинопатии4,5. Следовательно, ось «кишечник — сетчатка» — двунаправленная коммуникационная сеть, связывающая гомеостаз кишечника со здоровьем сетчатки, — стала рассматриваться как новый фактор прогрессирования ДР. Однако специфические молекулярные медиаторы, которые преобразуют сигналы оси «кишечник — сетчатка» в патологию сетчатки, остаются в значительной степени неизученными, что ограничивает поиск надежных биомаркеров и терапевтических мишеней.

Ось «кишечник-сетчатка» представляет собой сложную сеть двусторонней связи между микробиотой кишечника и ее метаболитами и тканями сетчатки через иммунологические, метаболические, нейроэндокринные и сосудистые пути, модулируя тем самым их гомеостатическое равновесие6. На молекулярном уровне ось «кишечник-сетчатка» характеризуется нарушением регуляции ключевых стресс-реактивных белков и белков, определяющих судьбу клеток, в частности AP-1 и TP537,8,9. Кроме того, CMKLR1, ключевой рецептор хемокина, выступает в качестве основного медиатора эндотелиальной дисфункции и метаболической дисрегуляции, устанавливая критическую связь между изменениями микробиоты кишечника и патогенезом диабетической ретинопатии10. Важно отметить, что Wnt-сигнализация играет двойную регуляторную роль в поддержании гомеостаза сосудов сетчатки и функции эпителиального барьера кишечника11, в то время как PPAR-сигнализация служит главным регулятором воспалительных ответов и метаболических процессов как в тканях глаза, так и кишечника12,13. Эти молекулярные компоненты в совокупности образуют взаимосвязанную сигнальную сеть в пределах оси «кишечник-сетчатка», предоставляя новые механистические представления и терапевтические возможности для лечения осложнений, связанных с диабетом. Таким образом, воздействие на структурные и функциональные изменения вдоль этой оси представляет собой перспективную стратегию лечения DR.

Традиционная китайская медицина (ТКМ) исторически играет значительную роль в лечении сахарного диабета и сопутствующей ретинопатии, при этом терапевтические решения основываются на дифференциации синдромов14. Гранулы Цимэнь (Qiming Granule, QMG), состоящие из Astragalus membranaceus, Pueraria lobata, Rehmannia glutinosa, Lycium barbarum, Senna obtusifolia, Leonurus japonicus, Typha angustifolia и Whitmania pigra, широко применяются при лечении диабетической ретинопатии (ДР). Одобренные Национальным управлением по медицинской продукции Китая (регистрационный номер Z20090036), гранулы QMG успешно прошли клинические испытания и получили разрешение на продажу. QMG оказывает защитный эффект, предотвращая утолщение базальной мембраны капилляров сетчатки, снижая повреждение перицитов и микрососудов сетчатки, а также сохраняя локальную патологическую морфологию глаза15, что делает этот препарат перспективным средством для терапии ДР. Воздействуя на ключевые белки и воспалительные факторы, активные компоненты QMG оказывают противовоспалительное, антиоксидантное и антиапоптотическое действие, создавая механизм для модуляции оси «кишечник — сетчатка»16. Эти свойства служат механистической основой для потенциальной модуляции оси «кишечник — сетчатка» с помощью QMG, однако лишь немногие исследования были посвящены изучению этой связи. Таким образом, данная работа направлена на подтверждение эффективности QMG в модуляции оси «кишечник — сетчатка» для получения экспериментальных доказательств ее терапевтического потенциала при ДР.

В данном исследовании теоретические прогнозы сопоставляются с экспериментальными данными in vivo для подтверждения эффективности QMG в модуляции оси «кишечник — сетчатка». Полученные результаты демонстрируют, что QMG облегчает течение DR, связывая регуляторную сеть с центром в CMKLR1 (включая Wnt5a, PPAR-γ, AP-1 и TP53) с системным воспалением через ось «кишечник — сетчатка», что позиционирует QMG как перспективную терапевтическую стратегию лечения DR, направленную на ось «кишечник — сетчатка». Графический абстракт представлен на Рисунке 1.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все эксперименты на животных проводились в соответствии с рекомендациями ARRIVE. Исследование было одобрено Комитетом по этике компании Sichuan Scientist Biotechnology Co., Ltd. (IACUC ISSUE SYST-2024-011).  Подробный график проведения экспериментов, обобщающий дизайн исследования, представлен в Дополнительный рисунок 1.

Подготовка и обработка животных

Мышей глубоко наркотизировали путем ингаляции 2% изофлурана. В состоянии глубокого наркоза проводили забор крови путем ретроорбитальной энуклеации. Сразу после забора крови выполняли энуклеацию глазных яблок для получения тканей сетчатки. Затем, для обеспечения эвтаназии, проводили вывих шейного позвонка в состоянии глубокого наркоза. После этого незамедлительно извлекали ткани толстой кишки. Животные с неблагоприятными явлениями были оперативно исключены из исследования и получили соответствующую ветеринарную помощь.

Рандомизация и ослепление

Самцов мышей линии C57BL/6 в возрасте 5 недель и массой от 20 до 30 граммов содержали в строго регулируемых условиях, включая температуру и влажность. После одной недели акклиматизации мышей C57BL/6 случайным образом распределили по трем группам (контрольная группа, группа модели и группа вмешательства), используя последовательность случайных чисел, сгенерированную компьютером. Последовательность рандомизации была создана исследователем, который не принимал участия в работе с животными или оценке результатов.

Для обеспечения ослепления весь уход за животными, введение препаратов и сбор данных осуществлялись исследователями, не знавшими о распределении по группам. Коды распределения по группам были раскрыты только после завершения всех экспериментов и статистического анализа. Ослепление применялось к: технику, выполнявшему пероральное зондирование; патологоанатому, оценивавшему гистологию сетчатки; и аналитику, количественно определявшему интенсивность полос вестерн-блоттинга (WB).

Расчет размера выборки

Размер выборки был определен на основании предварительного эксперимента по подсчету ганглионарных клеток сетчатки (RGC) при тех же экспериментальных условиях. При допущении двустороннего уровня значимости (α) 0,05 и статистической мощности (1-β) 0,80 для обнаружения клинически значимого различия в количестве RGC между модельной и интервенционной группами требовалось минимум 5 мышей в каждой группе. С учетом потенциального процента выбывания примерно 20%, размер каждой группы был установлен в количестве 6 мышей.

Создание моделей диабета у животных

Группа контроля получала стандартный рацион, в то время как группам вмешательства и модели в течение четырех недель давали диету с высоким содержанием жиров и сахаров (HFHSD). По окончании этого периода группам вмешательства и модели вводили внутрибрюшинно 1% раствор стрептозотоцина (STZ) в дозе 35 mg/kg17,18,19,20. Через семьдесят два часа после инъекции мыши с уровнем глюкозы в крови натощак выше 16.7 mmol/L считались имеющими успешно индуцированную модель сахарного диабета (СД) и были отобраны для дальнейших экспериментов. Животным с СД продолжали давать диету с высоким содержанием жиров и сахаров в течение следующих четырех месяцев, в то время как группа контроля оставалась на стандартном рационе.

Таксономическая валидация и оценка качества

Восемь ингредиентов в составе QMG были таксономически валидированы с помощью системы Modernized Plant Names Search (MPNS, http://mpns.kew.org/mpns-portal/). Качество отчетности о составе QMG оценивали с помощью инструмента ConPhYMP.

Методы введения

Животным в группе вмешательства перорально вводили QMG. Препарат QMG был приобретен у компании Zhejiang Sansheng Mandi Pharmaceutical Co., Ltd. (номер одобрения препарата в КНР Z20090036). Суспензию QMG готовили путем равномерного смешивания QMG с дистиллированной водой. Мышам в группе вмешательства вводили суспензию с помощью перорального зондирования в объеме, эквивалентном объему для модельной и контрольной групп. Дозировка была рассчитана на основе клинической разовой терапевтической дозы 4,5 g на 60 kg взрослого человека (стандартная единичная доза коммерческого препарата) с использованием метода нормализации по площади поверхности тела (BSA), рекомендованного FDA и Reagan-Shaw21. Коэффициент пересчета между взрослыми людьми (Km = 37) и мышами (Km = 3) составил 12,33, что соответствует дозе для мышей 0,9 g/kg массы тела. Животные в модельной и контрольной группах получали эквивалентный объем физиологического раствора путем перорального зондирования. Введение препарата проводили ежедневно с 9:00 до 11:00 в течение 3 месяцев подряд.

Показатели наблюдения и тестирования

Общий мониторинг показателей жизненно важных функций

Общие показатели жизненно важных функций и физиологические индикаторы, включая массу тела, уровень глюкозы в крови, потребление воды и корма, диурез, уровень активности и поведение, температуру тела, а также состояние шерсти и кожи, систематически наблюдались и фиксировались для комплексной оценки терапевтического воздействия и выявления возможных осложнений.

Наблюдение морфологических изменений в сетчатке с помощью анализа окрашивания гематоксилином и эозином

Все образцы после фиксации обрабатывали в автоматическом дегидраторе, используя серию растворов этанола и ксилола, с последующей заливкой в парафин. Затем нарезали парафиновые срезы толщиной 4 µm, окрашивали их гематоксилином и эозином (HE) и заключали в нейтральный канадский бальзам. Изображения сетчатки сканировали с помощью сканера 3DHISTECH Pannoramic SCAN. Анализ изображений и измерение данных выполняли с помощью программы Image-Pro Plus.

Определение уровней IL-6, TNF-α и IL-1β в сыворотке крови методом ИФА

Образцы крови собирали путем ретроорбитальной энуклеации. Сыворотку отделяли центрифугированием при 1,000 × g в течение 15 мин при 4 °C и хранили при -80 °C до проведения анализа. Уровни IL‑1β, IL‑6 и TNF‑α в сыворотке определяли по стандартным процедурам, включающим уравновешивание реагентов, внесение образцов, инкубацию, промывку, добавление конъюгата и субстрата, остановку реакции, измерение оптической плотности и расчет концентрации по стандартной кривой. Оптическую плотность измеряли при 450 nm с помощью микропланшетного ридера, а концентрации цитокинов рассчитывали по стандартным кривым.

Определение ключевых регуляторных белков в сетчатке и толстой кишке с помощью вестерн-блоттинга

Три независимых биологических повтора были выполнены на одной мембране, которую последовательно инкубировали с антителами к целевым белкам. Все повторы были получены из одной когорты животных, забитых одновременно. В случаях, когда молекулярная масса целевого белка была слишком близка к массе GAPDH (<(разница в 5 кДа), их анализировали на разных мембранах, чтобы избежать перекрытия сигналов. Каждая мембрана зондировалась исключительно либо на целевой белок, либо на GAPDH для обеспечения точного количественного определения. Использовались следующие первичные антитела: GAPDH поликлональный антитело (1:5000), поликлональное антитело к CMKLR1 (1:1000), поликлональное антитело к Wnt5a (1:1000), поликлональное антитело к TP53 (1:1000), моноклональное антитело к AP-1 (1:5000) и антитело к PPAR гамма (PPAR-γ) поликлональные антитела (1:1000). Общие белки получали путем лизиса клеток с последующим центрифугированием. Концентрации белков определяли с помощью анализа BCA. Экстрагированные белки разделяли методом SDS-PAGE с использованием разделяющего геля с концентрацией 12%, после чего переносили на мембраны. Мембраны блокировали в буфере TBST с добавлением 5% обезжиренного молока и инкубировали с соответствующими первичными антителами в течение ночи при 4 °CПосле промывки мембраны инкубировали с конъюгированными с HRP вторичными антителами к кролику или мыши в разведении 1:10 000. В завершение визуализацию и анализ белковых полос проводили с помощью хемилюминесцентной визуализации. При визуализации и обработке данных блоты обрезали по горизонтали для удаления областей с нерелевантным молекулярным весом; при этом все дорожки образцов были сохранены без удаления участков между ними. При обрезке нерелевантных областей геля могли возникнуть незначительные искажения краев.

Определение состава микробиоты кишечника с помощью анализа секвенирования 16S рДНК

Перед проведением терминальных процедур у каждой мыши собирали свежие образцы фекалий. Мышей individually помещали в стерильные клетки на 10–15 min для спонтанной дефекации. Фекальные гранулы немедленно собирали стерильным пинцетом, переносили в стерильные пробирки объемом 1.5 mL, подвергали мгновенной заморозке в жидком азоте и хранили при -80 °C до экстракции ДНК. Все процедуры проводились в стерильных условиях для минимизации перекрестного загрязнения. Интервал между дефекацией и замораживанием составлял не более 10 min для обеспечения сохранности микробного состава. Образцы геномной ДНК (гДНК) фекалий очищали с использованием набора для экстракции Fecal gDNA, после чего проводили амплификацию полноразмерного гена 16S рДНК методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с универсальными праймерами 8F (5’-AGAGTTTGATCATGGCTCAG-3’) и 1492R (5’-CGGTTACCTTGTTACGACTT-3’). Продукты ПЦР затем анализировали с помощью электрофореза в агарозном геле, очищали и количественно определяли для последующего использования. Высокопроизводительное секвенирование проводили на секвенаторе Nanopore GridION. Процесс анализа данных включал бейсколлинг, контроль качества данных, аннотацию видов, построение филогенетического дерева, анализ сообщества, анализ альфа- и бета-разнообразия, анализ дифференциально представленных видов и прогнозирование функций сообщества. В ходе анализа использовались различные инструменты и базы данных, такие как NanoFilt, Usearch, язык программирования R, Python и база данных SILVA.

Корреляционный анализ оси «кишечник — сетчатка» с системным воспалением и многоуровневым составом микробиоты кишечника

Для изучения потенциальных взаимосвязей между многоуровневым составом микробиоты кишечника, воспалительными цитокинами сыворотки и ключевыми регуляторными белками был проведен корреляционный анализ с использованием платформы Luoning Bio-Cloud. Сначала из результатов секвенирования были извлечены данные об обилии видов на уровнях царства, типа, класса, порядка, семейства, рода и вида. Физико-химические факторы, включая уровни воспалительных цитокинов сыворотки и экспрессию белков, были собраны в файл факторов окружающей среды. Для обеспечения достоверности и визуализации корреляций данные прошли процедуру нормализации, чтобы устранить различия в масштабах между обилием микроорганизмов и единицами клинических измерений. Были рассчитаны коэффициенты корреляции (R-значения) и соответствующие уровни значимости (P-значения). Результаты были визуализированы с помощью тепловой карты корреляций, где цветовые градиенты указывают на силу и направление корреляции (красный цвет — положительная корреляция, синий цвет — отрицательная корреляция), а звездочки (**) обозначают статистическую значимость (P < 0,01).

Статистические методы

Весь статистический анализ и визуализация данных выполнялись с помощью GraphPad Prism. Для данных с нормальным распределением для сравнения средних значений использовался t-критерий. В случаях отклонения данных от нормального распределения применялся критерий Краскела — Уоллиса. Для анализа взаимосвязей между переменными использовалась корреляция Спирмена или Пирсона. Все статистические тесты были двусторонними, уровень статистической значимости был установлен на уровне 0,05.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

General situation of experimental animals

Blood glucose levels were significantly elevated in the model group (27.21 ± 6.03 mmol/L) compared with the blank group (P < 0.001), indicating the successful induction of the DM model. During the study period, the experimental animals showed stable body weight, continuous water and food intake, normal urine output, body temperature, healthy fur and skin condition, and normal behavior during the experiment.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Диабетическая ретинопатия (ДР) представляет собой сложное нейроваскулярное осложнение, вызванное хронической гипергликемией, воспалением и метаболической дисрегуляцией22. Американская академия офтальмологии разделяет ДР на непролиферативную и пролиферативную, которая характеризуется началом неоваскуляризации23. Учитывая ограниченность современных терапевтических стратегий, поиск новых механизмов стал перспективным направлением в лечении ДР. Примечательно, что в результате п...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют, что у них нет известных конфликтов финансовых интересов или личных отношений, которые могли бы повлиять на работу, описанную в данной статье.

Благодарности

Автор выражает благодарность всем членам своей команды, которые оказали значительную поддержку и помощь в проведении данного исследования.

Данное исследование было поддержано Национальным фондом естественных наук Китая (грант № 82474580) и Проектом по свободным исследованиям Фонда больницы при Больнице Университета традиционной китайской медицины города Чэнду (№ 23ZYTS1601).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Моноклональное антитело к AP-1Proteintech66313-1-IG1:5000
Поликлональное антитело к CMKLR1AffinityAF52911:1000
Поликлональное антитело к GAPDHAffinityAF70211:5000
Козьи антитела GoatAnti-Mouse IgG(H+L) HRPMULTI SCIENCESGAM00721:10000
Козьи антитела GoatAnti-Rabbit IgG(H+L) HRPMULTI SCIENCESGAR00721:10000
GraphPad Prism/version 9.5
Image-Pro PlusMedia Cybernetics, Inc., Rockville, MD, USAversion 6.0
Платформа Luoning Bio-Cloud http://www.biomediv.cn/login.html
Набор ELISA для определения IL-1β(интерлейкина 1 бета) мышиElabscienceE-EL-M0037Определение цитокинов в сыворотке
Набор ELISA для определения IL-6(интерлейкина-6) мышиElabscienceE-EL-M0044Определение цитокинов в сыворотке
Набор ELISA для определения TNF-α(фактора некроза опухоли альфа) мышиElabscienceE-EL-M3063Определение цитокинов в сыворотке
NanoFilt/version 2.7.1
Секвенатор Nanopore GridIONOxford Nanopore Technologieshttps://store.nanoporetech.com/gridion.html
Pannoramic SCAN IIСканер 3DHISTECH Pannoramic SCAN https://www.3dhistech.com/scanners/pannoramic-scan-ii-digital-scanner/
Поликлональное антитело к PPAR гамма (PPAR-γ) ImmunoWaybs-0530R1:1000
Python/version 3.7.4
Гранулы QimingZhejiang Sansheng Mandi Pharmaceutical Co., Ltd.Chinese National Drug Approval No. Z200900360.9 g/kg, зондовое введение
Язык программирования R/version 4.0.3
База данных SILVA/version 138
Стрептозотоцин (STZ)Sigma-AldrichS013035 mg/kg, в/б
Поликлональное антитело к TP53Abcamab1314421:1000
Usearch/version 10.0.240
Поликлональное антитело к Wnt5aProteintech55184-1-AP1:1000
Набор Zymo Research BIOMICS DNA Microprep KitZymo ResearchD4301Экстракция гДНК из фекалий

Ссылки

  1. Lei C, et al. Homocysteine and diabetic retinopathy. Exp Eye Res. 2026;262:110729.
  2. Owens DR, et al. IDF diabetes Atlas: A worldwide review of studies utilizing retinal photography to screen for diabetic retinopathy from 2017 to 2024 inclusive. Diabetes Res Clin Pract. 2025;226:112346.
  3. Zhu J, Huang J, Sun Y, Xu W, Qian H. Emerging role of extracellular vesicles in diabetic retinopathy. Theranostics. 2024;14(4):1631–1646.
  4. Xie L, Lin W. The role of gut microbiota dysbiosis in the inflammatory pathogenesis of diabetic retinopathy. Front Immunol. 2025;16:1604315.
  5. Niu J, Liu Y, Peng H, Chen J, Chen L. Early-stage diabetic retinopathy: gut-metabolic triggers, immune-neurodegeneration, and interventions. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 2025;263(10):2723–2736.
  6. Rowan S, et al. Involvement of a gut-retina axis in protection against dietary glycemia-induced age-related macular degeneration. Proc Natl Acad Sci U S A. 2017;114(22):E4472–E4481.
  7. Rzeczycki P, Pęciak O, Plust M, Droździk M. Gut Microbiota in the Regulation of Intestinal Drug Transporters: Molecular Mechanisms and Pharmacokinetic Implications. Int J Mol Sci. 2025;26(24):11897.
  8. Yang H, et al. Mediating role of aging and obesity in the relationship between dietary index for gut microbiota and metabolic syndrome and its potential regulatory mechanisms. Eur J Med Res. 2025;31(1):137.
  9. Zahavi EE, et al. Repeat-element RNAs integrate a neuronal growth circuit. Cell. 2025;188(16):4350–4365.e22.
  10. Dander E, et al. The chemerin/CMKLR1 axis regulates intestinal graft-versus-host disease. JCI Insight. 2023;8(5):e154440.
  11. Zhang J, et al. Therapeutic targets in the Wnt signaling pathway: Treating cancer with specificity. Biochem Pharmacol. 2025;236:116848.
  12. Liu M, Lim ST, Song W, Coffman TM, Wang X. Beyond lipids: fenofibrate in diabetic retinopathy and nephropathy. Trends Pharmacol Sci. 2026;47(3):325–341.
  13. Wu Y, et al. The active ingredient β-sitosterol in the anti-inflammatory agents alleviates perianal inflammation in rats by inhibiting the expression of Srebf2, activating the PPAR signaling pathway, and altering the composition of gut microbiota. Int Immunopharmacol. 2025;152:114470.
  14. Lin T, Chen C, Zhao LC, Zhu HY, Li W. The beneficial effects of Traditional Chinese Medicine on diabetic retinopathy: mechanisms, therapeutics, and prospects. Acupunct Herb Med 2026;6(2):188–204.
  15. Huo J, et al. Evaluation of individualized treatment of nonproliferative diabetic retinopathy: a multicenter, randomized, parallel-controlled study. J Tradit Chin Med. 2022;42(1):90–95.
  16. Huang Y, et al. Pharmacological mechanism and clinical study of Qiming granules in treating diabetic retinopathy based on network pharmacology and literature review. J Ethnopharmacol. 2023;302(Pt A):115861.
  17. Salma B, et al. Ameliorative Efficacy of the Cassia auriculata Root Against High-Fat-Diet + STZ-Induced Type-2 Diabetes in C57BL/6 Mice. ACS Omega. 2020;6(1):492–504.
  18. Srinivasan K, Viswanad B, Asrat L, Kaul CL, Ramarao P. Combination of high-fat diet-fed and low-dose streptozotocin-treated rat: a model for type 2 diabetes and pharmacological screening. Pharmacol Res. 2005;52(4):313–320.
  19. Liu Y, Deng J, Fan D. Ginsenoside Rk3 ameliorates high-fat-diet/streptozocin-induced type 2 diabetes mellitus in mice via the AMPK/Akt signaling pathway. Food Funct. 2019;10(5):2538–2551.
  20. Hu RY, et al. AFG Ameliorates Diabetic Retinopathy through AMPK-Dependent Autolysosomal Pathway: From Network Pharmacology to In Vivo and In Vitro Validation. J Agric Food Chem. 2026;74(2):2124–2139.
  21. Reagan-Shaw S, Nihal M, Ahmad N. Dose translation from animal to human studies revisited. FASEB J. 2008;22(3):659–661.
  22. Zou Q, et al. Oxidative stress in diabetic retinopathy. Clin Chim Acta. 2026;584:120871.
  23. Clements JN, Mesawich J, Twisdale C. Current and Emerging Pharmacologic Therapies for Diabetic Retinopathy. Pharmacotherapy. 2026;46(3):e70119.
  24. Rezvani Z, Khani F, Afarid M, Asadian F, Takhshid MA. Clinical values of systemic inflammatory indices in diabetic retinopathy. Clin Exp Optom. 2026;109(3):371–385.
  25. Zhu Z, et al. Targeting the CMKLR1-Mediated Signaling Rebalances Immunometabolism State in Middle-Age Testicular Macrophages. Adv Sci (Weinh). 2026;13(14):e15166.
  26. Lin Y, et al. Epithelial chemerin-CMKLR1 signaling restricts microbiota-driven colonic neutrophilia and tumorigenesis by up-regulating lactoperoxidase. Proc Natl Acad Sci U S A. 2022;119(29):e2205574119.
  27. Puthanmadhom Narayanan S, et al. Epigenetic Alterations Are Associated With Gastric Emptying Disturbances in Diabetes Mellitus. Clin Transl Gastroenterol. 2020;11(3):e00136.
  28. Wang L, et al. Chemerin/CMKLR1 Axis Promotes the Progression of Proliferative Diabetic Retinopathy. Int J Endocrinol. 2021;2021:4468625.
  29. Zheng C, et al. α-NETA down-regulates CMKLR1 mRNA expression in ileum and prevents body weight gains collaborating with ERK inhibitor PD98059 in turn to alleviate hepatic steatosis in HFD-induced obese mice but no impact on ileal mucosal integrity and steatohepatitis progression. BMC Endocr Disord. 2023;23(1):9.
  30. Dranse HJ, et al. The impact of chemerin or chemokine-like receptor 1 loss on the mouse gut microbiome. PeerJ. 2018;6:e5494.
  31. Flores-Hernández E, et al. Canonical and non-canonical Wnt signaling are simultaneously activated by Wnts in colon cancer cells. Cell Signal. 2020;72:109636.
  32. Qi Y, et al. Heat-inactivated Bifidobacterium adolescentis ameliorates colon senescence through Paneth-like-cell-mediated stem cell activation. Nat Commun. 2023;14(1):6121.
  33. Ou W, et al. Cooperation of Wnt/β-catenin and Dll1-mediated Notch pathway in Lgr5-positive intestinal stem cells regulates the mucosal injury and repair in DSS-induced colitis mice model. Gastroenterol Rep (Oxf). 2024;12:goae090.
  34. Dong Y, et al. Berberine ameliorates DSS-induced intestinal mucosal barrier dysfunction through microbiota-dependence and Wnt/β-catenin pathway. Int J Biol Sci. 2022;18(4):1381–1397.
  35. Escandon P, et al. The role of peroxisome proliferator-activated receptors in healthy and diseased eyes. Exp Eye Res. 2021;208:108617.
  36. Blot G, et al. Perilipin 2-positive mononuclear phagocytes accumulate in the diabetic retina and promote PPARγ-dependent vasodegeneration. J Clin Invest. 2023;133(19):e161348.
  37. Zhou W, et al. TREM2-dependent activation of microglial cell protects photoreceptor cell during retinal degeneration via PPARγ and CD36. Cell Death Dis. 2024;15(8):623.
  38. Bala Kumar S, et al. Gut microbial metabolites targeting JUN in renal cell carcinoma via IL-17 signaling pathway: network pharmacology approach. Mol Divers. 2026;30(1):613–632.
  39. Wang L, et al. Gut microbial bile acid metabolite skews macrophage polarization and contributes to high-fat diet-induced colonic inflammation. Gut Microbes. 2020;12(1):1–20.
  40. Hagan T, et al. Antibiotics-Driven Gut Microbiome Perturbation Alters Immunity to Vaccines in Humans. Cell. 2019;178(6):1313–1328.e13.
  41. Meng Y, et al. Jinlida ameliorates diabetic kidney disease via gut microbiota-dependent production of pyridoxamine targeting renal AGEs/RAGE and TGF-β pathways. Phytomedicine. 2026;150:157744.
  42. Zhou H, Zhang L, Ding C, Zhou Y, Li Y. Upregulation of HMOX1 associated with M2 macrophage infiltration and ferroptosis in proliferative diabetic retinopathy. Int Immunopharmacol. 2024;134:112231.
  43. Mohammad HMF, et al. Neuroprotective effect of levetiracetam in mouse diabetic retinopathy: Effect on glucose transporter-1 and GAP43 expression. Life Sci. 2019;232:116588.
  44. Peng H, et al. Autophagy and senescence of rat retinal precursor cells under high glucose. Front Endocrinol (Lausanne). 2023;13:1047642.
  45. Ding Y, Chen L, Xu J, Feng Y, Liu Q. APAF1 Silencing Ameliorates Diabetic Retinopathy by Suppressing Inflammation, Oxidative Stress, and Caspase-3/GSDME-Dependent Pyroptosis. Diabetes Metab Syndr Obes. 2024;17:1635–1649.
  46. Yang T, et al. Clinical study on the modulating effects of Jiaotaiwan on the modulating effects of microbiota–SCFAs–neurotransmitter/immune axis in patients with depression. Acupunct Herb Med 2025;5(4):456–468.
  47. Luo XX, et al. Effect of qiming granule on retinal blood circulation of diabetic retinopathy: a multicenter clinical trial. Chin J Integr Med. 2009;15(5):384–388.
  48. Hu Z, et al. Add-on effect of Qiming granule, a Chinese patent medicine, in treating diabetic macular edema: A systematic review and meta-analysis. Phytother Res. 2021;35(2):587–602.
  49. Yang M, et al. The Efficacy and Safety of Qiming Granule for Dry Eye Disease: A Systematic Review and Meta-Analysis. Front Pharmacol. 2020;11:580.
  50. Ma XF, et al. Efficacy and Safety of Qiming Granule for Nerve Injury Associated with Non-proliferative Diabetic Retinopathy: A Multicenter, Randomized, Non-inferiority, Active-Controlled Clinical Trial. Chin J Integr Med. 2026;32(3):195–203.
  51. Zhou Q, et al. Qiming granules regulate Müller cell pyroptosis and the P2X7R/NLRP3 immune inflammatory pathway in diabetic retinopathy. Chin Med. 2026;21(1):89.
  52. Zhou L, Qin T, Lv Y, Wu Z. Qiming Granules Ameliorate Diabetic Retinopathy by Regulating the PI3K/Akt Signaling Pathway. J Ocul Pharmacol Ther. 2026;42(3):202–212.
  53. Li HD, Li MX, Zhang WH, Zhang SW, Gong YB. Effectiveness and safety of traditional Chinese medicine for diabetic retinopathy: A systematic review and network meta-analysis of randomized clinical trials. World J Diabetes. 2023;14(9):1422–1449.
  54. Chen F, et al. Isorhamnetin promotes functional recovery in rats with spinal cord injury by abating oxidative stress and modulating M2 macrophages/microglia polarization. Eur J Pharmacol. 2021;895:173878.
  55. Naudhani M, Thakur K, Ni ZJ, Zhang JG, Wei ZJ. Formononetin reshapes the gut microbiota, prevents progression of obesity and improves host metabolism. Food Funct. 2021;12(24):12303–12324.
  56. Qu Y, et al. Kaempferol Alleviates Murine Experimental Colitis by Restoring Gut Microbiota and Inhibiting the LPS-TLR4-NF-κB Axis. Front Immunol. 2021;12:679897.
  57. Saikia L, et al. Therapeutic Potential of Quercetin in Diabetic Neuropathy and Retinopathy: Exploring Molecular Mechanisms. Curr Top Med Chem. 2024;24(27):2351–2361.
  58. Yao H, et al. Kaempferol Protects Blood Vessels From Damage Induced by Oxidative Stress and Inflammation in Association With the Nrf2/HO-1 Signaling Pathway. Front Pharmacol. 2020;11:1118.
  59. Zhang HX, Li YY, Liu ZJ, Wang JF. Quercetin effectively improves LPS-induced intestinal inflammation, pyroptosis, and disruption of the barrier function through the TLR4/NF-κB/NLRP3 signaling pathway in vivo and in vitro. Food Nutr Res. 2022;66:10.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

сеть CMKLR1микробиота кишечникагистопатология сетчаткивоспалительные цитокинывестерн-блоттингсеквенирование 16S рДНК
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.