Этическое заявление: Исследование проводилось в соответствии с институциональными рекомендациями и этическими принципами Хельсинкской декларации. Этическое одобрение было получено от Этического комитета Университета Биша (UBCOM-RELOC), номер одобрения H-06-BH-087/(0802.23). Участие было добровольным, и от всех участников перед включением в исследование было получено письменное информированное согласие. Материалы, оборудование и аналитические процедуры, использованные в исследовании, обобщены в Таблице материалов.
Дизайн и условия исследования
С декабря 2022 года по май 2023 года в Госпитале материнства и детства в Бише, Саудовская Аравия, было проведено ретроспективное одномоментное исследование с целью оценки статуса железа и изучения факторов, связанных с дефицитом железа у беременных женщин в северном регионе Асир.
Популяция исследования и методология отбора проб
В исследовании приняли участие в общей сложности 200 человек, включая 135 беременных женщин, посещавших клиники для планового дородового наблюдения, и 65 небеременных женщин соответствующего возраста, которые составили контрольную группу. Участники набирались из амбулаторных клиник методом стихийной выборки в течение периода исследования. Женщины, подходящие по критериям и посетившие клинику в рабочие часы, приглашались к участию последовательно до достижения целевого размера выборки. Чтобы минимизировать возможную систематическую ошибку отбора в рамках данного подхода, подбор контрольной группы по возрасту осуществлялся методом простого случайного отбора из числа подходящих по критериям небеременных посетителей клиник.
Беременные женщины могли быть включены в исследование, если их возраст составлял 18 лет и более, а срок беременности находился в диапазоне от 12 до 36 недель. Соответствующие критериям участницы набирались независимо от их статуса по железу и впоследствии классифицировались как беременные с ЖДА или без ЖДА на основании лабораторных данных. Согласно критериям ВОЗ, анемия при беременности определялась как концентрация гемоглобина (Hb) < 11,0 g/dL в первом и третьем триместрах и < 10,5 g/dL во втором триместре. ЖДА диагностировали у женщин, у которых уровень Hb соответствовал пороговому значению для беременности и имелись признаки дефицита железа, включая уровень ферритина в сыворотке < 15 ng/mL, уровень железа в сыворотке < 10 µmol/L и общую железосвязывающую способность сыворотки (ОЖСС) ≥ 68 µmol/L17,18. Беременные женщины, не подходящие под эти диагностические критерии, были отнесены к группе беременных без ЖДА. В качестве контрольной группы выступали небеременные женщины репродуктивного возраста без текущей беременности и без известных гематологических заболеваний. Критерии исключения для обеих групп включали документально подтвержденный анамнез хронических или системных заболеваний, связанных с нарушением обмена железа или воспалительным статусом, таких как хроническая болезнь почек, аутоиммунные заболевания, злокачественные новообразования, воспалительный синдром кишечника, хронические заболевания печени или наследственные нарушения обмена железа (например, гемохроматоз). Также исключались женщины с острыми инфекциями на момент забора проб, лица, получавшие внутривенную терапию препаратами железа или перенесшие переливание крови в течение предшествующих трех месяцев, а также лица, получающие длительную иммуносупрессивную терапию. Для всех участниц регистрировались индекс массы тела (ИМТ) и этническая принадлежность; однако эти переменные не использовались в качестве критериев исключения, а рассматривались как потенциальные ковариаты при анализе.
Определение размера выборки
Размер выборки был рассчитан с использованием программного обеспечения для эпидемиологического расчета размера выборки19, исходя из ожидаемой распространенности IDA среди беременных женщин в Саудовской Аравии на уровне 40%6, с доверительным уровнем 95% и предельной погрешностью 5%. Минимальный требуемый размер выборки был оценен в 182 участника; следовательно, для повышения статистической точности было набрано в общей сложности 200 участников.
Сбор данных
Анкетирование
Данные собирали с помощью структурированного и валидированного опросника. Анкета была разработана после тщательного обзора литературы и прошла оценку экспертной группой, в состав которой входили акушеры-гинекологи, диетологи и эпидемиологи, для обеспечения содержательной валидности. Для оценки ясности, надежности и осуществимости было проведено пилотное исследование с участием 20 человек, которые не были включены в окончательный анализ. Внутренняя согласованность опросника была приемлемой, коэффициент альфа Кронбаха составил 0,81.
Итоговый опросник состоял из трех разделов, включавших в общей сложности 35 пунктов (Дополнительный файл 1):
Раздел 1 (Социодемографические данные, 10 пунктов): возраст, уровень образования, род занятий, место жительства, национальность и семейный анамнез анемии.
Раздел 2 (Пищевые привычки, 12 пунктов): частота употребления продуктов, богатых железом (красное мясо, белое мясо, рыба, овощи и обогащенные злаки), потребление чая и кофе, а также режим питания. Переменные питания были выбраны априори на основании их установленной значимости для потребления железа, биодоступности железа и факторов питания, которые могут влиять на его всасывание. Анкета включала основные пищевые источники железа, в том числе красное мясо, птицу, рыбу, зеленые листовые овощи и обогащенные злаки. Оценивалось употребление продуктов, богатых витамином C, особенно цитрусовых, поскольку витамин C может усиливать всасывание негемового железа. Напротив, потребление чая и кофе оценивалось из-за того, что пищевые полифенолы могут подавлять всасывание негемового железа при употреблении во время или вскоре после еды. Также оценивались режим питания и потребление фастфуда для определения общих особенностей питания и нутритивной достаточности. Выбранные пункты меню были определены на основе литературы, изученной при разработке анкеты, и впоследствии оценены экспертами в области акушерства, нутрициологии и эпидемиологии для подтверждения содержательной валидности.
Раздел 3 (Клинический анамнез и симптомы, 13 пунктов): гестационный возраст, количество родов, анамнез переливания крови, утомляемость, головокружение, лихорадка и другие симптомы, обычно связанные с анемией.
Биохимический анализ
У каждого участника после ночного голодания был получен образец венозной крови объемом 5 mL. Образцы центрифугировали при 2000 × g в течение 15 min для отделения сыворотки, которую затем подвергали немедленному анализу. Концентрацию гемоглобина измеряли с помощью автоматического гематологического анализатора и выражали в граммах на децилитр (g/dL). Уровни ферритина в сыворотке определяли методом электрохемилюминесцентного иммуноанализа (ECLIA) на автоматическом иммунохимическом анализаторе и выражали в нанограммах на миллилитр (ng/mL). Содержание железа в сыворотке, общая железосвязывающая способность (TIBC) и ненасыщенная железосвязывающая способность (UIBC) определялись колориметрическим методом на автоматическом биохимическом анализаторе; результаты выражали в микромолях на литр (µmol/L). Насыщение трансферрина (TR-SAT) рассчитывали как отношение железа в сыворотке к TIBC, умноженное на 100, и выражали в процентах.
Статистика и анализ данных
Кодирование и анализ данных проводились с использованием стандартного программного обеспечения для статистического анализа. Для обобщения социодемографических, диетических, клинических и биохимических переменных использовались методы описательной статистики, включая средние значения, стандартные отклонения и проценты. Сравнения между группами проводились с помощью непарного t-критерия Стьюдента или однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA), в зависимости от ситуации. Статистическая значимость определялась как p < 0.05. Графические результаты были получены с помощью программного обеспечения для построения графиков и статистического анализа.
Для изучения факторов, независимо связанных с ЖДА, была применена модель многофакторной логистической регрессии. Статус ЖДА был определен как бинарная зависимая переменная (ЖДА = 1, без ЖДА/контроль = 0). Независимые переменные были выбраны априори на основе биологического правдоподобия и данных предыдущих исследований; они включали социодемографические характеристики (место жительства, семейный анамнез анемии), физиологический статус (беременность) и диетические переменные (потребление красного мяса, птицы и цитрусовых).
Категориальные переменные были закодированы с помощью фиктивных переменных, а переменные потребления с пищей были классифицированы как «низкое» или «адекватное» на основании сообщаемой частоты потребления (≤2 раз в неделю против >2 раз в неделю). Все выбранные переменные были введены одновременно в регрессионную модель для оценки их независимых связей с учетом потенциальных искажающих факторов. Были рассчитаны скорректированные отношения шансов (OR) с 95% доверительными интервалами (CI), при этом OR более 1 отражали более высокую вероятность развития IDA. Визуальное резюме OR и соответствующих 95% CI было представлено в виде форест-графика, созданного с помощью программного обеспечения для работы с электронными таблицами.