В данном ретроспективном одноцентровом исследовании анализируются дедуплицированные изоляты Pseudomonas aeruginosa (PA) за период с 2023 по 2025 год и изучаются тенденции резистентности до и после проведения четырехкомпонентного мероприятия по рациональному использованию противомикробных препаратов в отделении Resp-TB.
Исследовательская статья
Тенденции резистентности Pseudomonas aeruginosa после четырехмерного вмешательства по рациональному использованию противомикробных препаратов
* These authors contributed equally
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
В данном одноцентровом ретроспективном исследовании были проанализированы дедуплицированные изоляты Pseudomonas aeruginosa, собранные в муниципальном госпитале инфекционных заболеваний города Хуайань с 2023 по 2025 год. Всего было включено 121 уникальный изолят, из которых 83,5% были получены из мокроты. Тестирование на чувствительность к противомикробным препаратам (AST) проводилось с использованием автоматизированной микробиологической системы, а результаты определения минимальной ингибирующей концентрации (MIC) интерпретировались в соответствии с CLSI M100, 33-е издание. В начале 2024 года в отделении респираторных заболеваний и туберкулеза (Resp-TB) (n = 97) было внедрено четырехкомпонентное адресное вмешательство по оптимизации использования противомикробных препаратов, включавшее: (1) динамический мониторинг антибиотикорезистентности с ежеквартальной обратной связью; (2) стратифицированное по риску назначение противомикробных средств на основе локальных данных о чувствительности; (3) стандартизированные протоколы сбора образцов; и (4) усиленные меры по профилактике и инфекционному контролю. В отделении Resp-TB общие показатели резистентности составили 74,19% в 2023 году, 81,63% в 2024 году и 82,93% в 2025 году, при этом после вмешательства значимого снижения не наблюдалось (p ≈ 0,37). К 2025 году резистентность к тобрамицину составила 0/41 (0,00%), к цефепиму — 1/41 (2,44%), к пиперациллину-тазобактаму — 0/41 (0,00%); резистентность к левофлоксацину достигла 15/41 (36,59%). Резистентность к триметоприму-сульфаметоксазолу оставалась высокой на протяжении всего периода исследования. Эти результаты свидетельствуют о стойкой антибиотикорезистентности в отделении Resp-TB после внедрения вмешательства, в то время как резистентность к отдельным препаратам, включая тобрамицин, цефепим и пиперациллин-тазобактам, оставалась низкой в 2025 году.
Введение
Pseudomonas aeruginosa (PA) является основной причиной внутрибольничных инфекций и представляет собой одну из наиболее часто выделяемых в клинической практике грамотрицательных неферментирующих бацилл1. Её природная и приобретенная устойчивость к множеству противомикробных препаратов связана с низкой проницаемостью внешней мембраны, гиперэкспрессией эффлюксных насосов и выработкой ферментов, разрушающих лекарственные средства. Под селективным давлением антибиотиков PA может легко приобретать новые резистентные фенотипы2,3. В последние годы рост числа штаммов PA с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ) и экстремальной лекарственной устойчивостью (ЭЛУ) привел к сокращению вариантов лечения, а также стал причиной длительной госпитализации и повышения уровня смертности4,5,6,7. Подход «Единое здоровье» (One Health), признающий взаимосвязь здоровья людей, животных и окружающей среды, всё чаще предлагается в качестве важной основы для профилактики и контроля противомикробной резистентности4,6. В этом контексте локальные данные эпидемиологического надзора за противомикробной резистентностью, такие как представленные здесь тенденции устойчивости PA, могут помочь в разработке стратегий рационального использования противомикробных препаратов и мер инфекционного контроля.
Эти проблемы особенно актуальны для специализированных инфекционных стационаров. Пациенты с туберкулезом часто получают длительную противотуберкулезную терапию, которая может включать фторхинолоны, что повышает риск перекрестной резистентности к таким препаратам, как левофлоксацин, и осложняет лечение при соизоляции PA8,9. Кроме того, иммунокомпрометированный статус и длительное пребывание в стационаре данной группы пациентов могут повысить восприимчивость к изолятам MDR-PA и привести к более неблагоприятным клиническим исходам10,11.
Во многих предыдущих эпидемиологических исследованиях использовался общий подсчет изолятов без учета возможного смещения, вызванного повторным отбором проб у одного и того же пациента. Как Глобальная система надзора за резистентностью к противомикробным препаратам Всемирной организации здравоохранения (WHO GLASS), так и Институт клинических и лабораторных стандартов (CLSI) рекомендуют применять стратегии дедупликации для повышения точности данных, например, сохранение только первого изолята от одного пациента за один эпизод инфекции12.
Несмотря на то, что антимикробная резистентность PA является общепризнанной глобальной проблемой, данные о целевых мероприятиях по рациональному применению противомикробных препаратов в специализированных отделениях респираторного туберкулеза (Resp-TB) остаются ограниченными. Большинство существующих исследований сосредоточены на отделениях интенсивной терапии или общих респираторных отделениях, что создает пробел в понимании эффективности структурированных многокомпонентных вмешательств в условиях высокой распространенности туберкулеза и сложного анамнеза применения антибиотиков. В данном одноцентровом ретроспективном исследовании были проанализированы дедуплицированные изоляты PA, собранные в Муниципальной больнице инфекционных заболеваний города Хуайань с 2023 по 2025 год, с особым вниманием к Resp-TB. Мы выдвинули гипотезу, что после внедрения четырехмерного комплексного вмешательства по рациональному применению противомикробных препаратов, включающего динамический эпиднадзор, назначение препаратов с учетом стратификации рисков, стандартизированный сбор образцов, а также усиленные меры по профилактике и контролю инфекций, будут наблюдаться изменения в паттернах антимикробной резистентности PA. Целью исследования было описание местных тенденций резистентности и оценка того, могут ли эти данные стать основой для практики рационального применения противомикробных препаратов и инфекционного контроля в данной больнице.
Протокол
Информация об образцах изолятов Pseudomonas aeruginosa, собранных в период с 2023 по 2025 год, была получена из лабораторной базы данных 4-й народной больницы города Хуайань. Все образцы были деидентифицированы перед анализом и обработаны в соответствии с утвержденными протоколами комитета по этике 4-й народной больницы города Хуайань (номер одобрения HASY2024011).
Субъекты исследования и критерии включения
В данное одноцентровое ретроспективное исследование были включены клинические изоляты Pseudomonas aeruginosa (PA), собранные микробиологической лабораторией инфекционной больницы города Хуайань в период с января 2023 года по декабрь 2025 года. Изоляты считались подходящими для исследования, если они были однозначно идентифицированы как PA с помощью автоматизированной микробиологической системы с использованием идентификационной карты для грамотрицательных бактерий (GN) и имели полные, интерпретируемые результаты тестирования на чувствительность к противомикробным препаратам (AST). Образцы были получены преимущественно из дыхательных путей, включая мокроту и жидкость для бронхоальвеолярного лаважа, однако в исследование также были включены изоляты из других локализаций.
Процедура удаления дубликатов проводилась в соответствии со строгим принципом «один пациент — один изолят за календарный год» и включала два этапа. Во-первых, если в течение одного календарного года у одного и того же пациента (идентификация по имени) было выявлено несколько изолятов PA, для анализа за этот год сохранялся только первый клинически значимый изолят. Во-вторых, при наличии у пациента разных госпитализаций и соответствующих изолятов PA в разные годы, такой пациент рассматривался как независимое наблюдение в каждой ежегодной когорте. Таким образом, один и тот же пациент теоретически мог быть включен в более чем одну ежегодную когорту. Данное правило соответствует принципу удаления дубликатов WHO GLASS/CLSI13.
Критериями исключения были повторные изоляты от одного и того же пациента в течение одного календарного года, неполная информация о пациенте и технически нечитаемые результаты AST, такие как аномальный рост в лунках положительного контроля. Изоляты с неполными панелями антимикробной чувствительности исключались из соответствующих анализов по конкретным антибиотикам, а для каждого антибиотика указывалось фактическое количество протестированных изолятов (n). В общей сложности было включено 121 пациент со 121 изолятом PA: 31 в 2023 году, 49 в 2024 году и 41 в 2025 году. На Рисунке 1 представлена схема дизайна исследования.
Для образцов из дыхательных путей применялась стандартная лабораторная оценка качества. Образцы мокроты оценивали по критериям Мюррея — Вашингтона, требующим наличия <10 плоских эпителиальных клеток и >25 полиморфноядерных лейкоцитов в поле зрения при малом увеличении для подтверждения пригодности образца. Все изоляты были получены из клинических образцов, представленных для рутинной диагностики пациентов с подозрением на инфекцию. Однако в связи с ретроспективным дизайном исследования и отсутствием систематических данных о клинической корреляции, включая признаки и симптомы, результаты рентгенологического обследования, маркеры воспаления и ответ на лечение, формальное разграничение между истинной инфекцией и колонизацией для отдельных изолятов не проводилось. Таким образом, во всем тексте используется нейтральный термин «клинические изоляты» для обозначения микроорганизмов, имеющих потенциальное клиническое значение, без утверждения о том, что каждый изолят обязательно представлял собой истинную инфекцию.
Группировка данных
Данные были стратифицированы по году, отделению и источнику получения образца. Для лонгитюдного сравнения изоляты были сгруппированы по годам: 2023, 2024 и 2025. Для анализа по отделениям изоляты были распределены следующим образом: отделение фтизиатрии (Resp-TB) (n = 97/121, 80.17%), отделение гастроэнтерологии и гепатологии (n = 12/121, 9.92%), отделение инфекционных заболеваний (n = 5/121, 4.13%) и другие отделения (n = 7/121, 5.79%). Основной когортой наблюдения стало отделение фтизиатрии (Resp-TB). Источники получения образцов были разделены на мокроту, жидкость бронхоальвеолярного лаважа и другие источники для количественной оценки вклада респираторных образцов.
Культивирование микроорганизмов, их идентификация и определение чувствительности к противомикробным препаратам
Изоляты культивировали на агаре с 5% кровью барана, агаре МакКонки и трипти-соевом агаре с бацитрацином при 35–37 °C в течение 18–24 ч. Предварительная идентификация основывалась на морфологии колоний и положительном результате теста на оксидазу. Окончательная идентификация и определение чувствительности к противомикробным препаратам (AST) проводились с использованием автоматизированной микробиологической системы с картами GN identification и AST-N399. Бактериальные суспензии готовили в стерильном физиологическом растворе до стандарта 0,50–0,63 по МакФарланду в соответствии с инструкциями производителя. Всего было протестировано 10 противомикробных средств: тобрамицин, цефепим, пиперациллин-тазобактам, амикацин, меропенем, имипенем, гентамицин, цефазолин, левофлоксацин и триметоприм-сульфаметоксазол. Эти препараты были выбраны на основе стандартной лабораторной панели AST, средств, обычно применяемых в данном учреждении для лечения инфекций, вызванных P. aeruginosa, и препаратов, предусмотренных четырехмерным вмешательством по контролю за использованием противомикробных средств. Результаты интерпретировали согласно руководству CLSI M100, 33-е издание14. Промежуточные результаты классифицировали как устойчивые при расчете показателей резистентности.
Контроль качества
Для обеспечения воспроизводимости и точности ежедневно проводился контроль качества AST с использованием референтного штамма Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853. Штамм тестировали с той же панелью антимикробных препаратов, чтобы подтвердить, что минимальные ингибирующие концентрации (МИК) находились в пределах диапазонов, рекомендованных CLSI. Если результаты контроля качества выходили за допустимые пределы, серия тестов отклонялась и повторялась только после повторной калибровки автоматизированной микробиологической системы и проверки целостности реагентов.
Четырехмерное интервенционное воздействие на связи в модели Resp-TB
Начиная с января 2024 года в отделении Resp-TB было внедрено целевое мероприятие по рациональному использованию противомикробных препаратов, получившее название «Четырехмерная связь». Координацию мероприятия осуществляли заведующий отделением, врачи-инфекционисты, клинические фармакологи, а также профильные специалисты по профилактике инфекций и инфекционному контролю (IPC). Оно состояло из четырех компонентов.
Во-первых, был внедрен динамический надзор за антимикробной резистентностью и система обратной связи. Была создана ведомственная система раннего предупреждения о резистентности PA, а изменения в паттернах резистентности обобщались в квартальных отчетах для принятия решений по управлению антимикробной терапией. Во-вторых, было внедрено стратифицированное по риску управление антимикробной терапией на основе локальных данных о чувствительности. Многоуровневый алгоритм назначения препаратов отдавал предпочтение средствам со стабильно низким уровнем резистентности, включая tobramycin и cefepime, в качестве вариантов эмпирической терапии; предусматривал осторожность при использовании препаратов с растущим или высоким уровнем резистентности, таких как levofloxacin; и исключал применение trimethoprim-sulfamethoxazole, который обладает исходно низкой активностью против PA. Эти меры основывались на локальных данных AST и институциональной политике управления антимикробной терапией и не являлись официальными клиническими рекомендациями.
В-третьих, был стандартизирован сбор респираторных проб. Пациентам давали указание сделать глубокий вдох, откашляться и собрать мокроту в соответствии с лабораторным протоколом. Эта процедура была направлена на снижение контаминации из ротоглотки и повышение достоверности тестов на чувствительность для образцов из нижних дыхательных путей. В-четвертых, были усилены меры по профилактике и инфекционному контролю. Они включали регулярные проверки соблюдения гигиены рук до и после контакта с пациентом, строгие процедуры обращения с респираторными секретами и их утилизации, а также плановую дезинфекцию окружающей среды для снижения потенциала внутрибольничного распространения PA. Для оценки период исследования был разделен на период до вмешательства (с января 2023 г. по декабрь 2023 г.) и период после вмешательства (с января 2024 г. по декабрь 2025 г.).
Статистический анализ
Данные были введены дважды и проверены. Показатели резистентности выражались в процентах с 95% доверительными интервалами (ДИ). Ежегодные, поместные (по отделениям) и сравнения до и после вмешательства анализировались с помощью критерия χ2 Пирсона; при ожидаемых частотах <5 использовался точный критерий Фишера. Для анализа тренда применялся критерий χ2 Кохрана — Армитеджа. В соответствующих случаях приводятся скорректированные значения p. Для основного сравнения показателей 2023 и 2025 годов по 10 антибиотикам была применена поправка Бонферрони для корректировки порога значимости (α = 0,05/10 = 0,005). Для нескорректированных сравнений статистически значимым считалось двустороннее p < 0,05; в соответствующих случаях приводятся скорректированные значения p. Сведения о программном обеспечении представлены в Таблице материалов.
Результаты
Общее распределение штаммов и пациентов
На основании описанных выше критериев отбора и стратегии группировки в анализ было включено в общей сложности 121 уникальный изолят P. aeruginosa от 121 пациента (Рисунок 1). Ежегодное распределение составило 31 изолят в 2023 году, 49 — в 2024 году и 41 — в 2025 году (Таблица 1). Основным источником образцов была мокрота, составлявшая 83,5 % всех проб (Рисунок 2). Респираторный туберкулез внес наибольший вклад в долю изолятов (n = 97/121, 80,17%), за ним следовали отделение гастроэнтерологии и гепатологии (n = 12/121, 9,92%), отделение инфекционных болезней (n = 5/121, 4,13%) и другие отделения (n = 7/121, 5,79%) (Таблица 2 и Рисунок 2).
Доля образцов мокроты оставалась относительно стабильной в течение всего периода исследования: 82,9 % в 2023 году, 83,5 % в 2024 году и 83,0 % в 2025 году. Образцы бронхоальвеолярного лаважа и щёток для забора защищённых образцов вместе составили около 7,6 % всех образцов, тогда как кровь, моча и другие типы образцов — оставшиеся 8,9 %. Эти результаты указывают на то, что изоляты Pseudomonas aeruginosa в данной больнице в основном выделялись из респираторных образцов.
В целом, изоляты PA преимущественно выделялись у пациентов из группы Респ-ТБ и среди респираторных образцов. Такое распределение обосновывало выбор Респ-ТБ в качестве основной когорты для оценки целенаправленного вмешательства, описанного выше.
Ежегодные тенденции в антимикробной устойчивости Pseudomonas aeruginosa по всей больнице
На основе описанного выше протокола СИЧ определена годовая картина устойчивости к антимикробным препаратам у PA Таблица 1 и Рисунок 3. Поскольку уровни чувствительности и промежуточной устойчивости при Таблица 1 являются взвешенными сводными показателями, формальные сравнения проводились на уровне отдельных антимикробных препаратов. Полученные значения p представлены в Таблица 3 для сравнения 2023 и 2025 годов. Пирсон’s χ2 тест или Фишер’точный тест Фишера показал отсутствие статистически значимых различий после поправки Бонферрони (все скорректированные p > 0.05; Таблица 3).
Взвешенная частота устойчивости в 2025 году была на 4,25 процентных пункта ниже, чем в 2023 году, в то время как взвешенная частота чувствительности увеличилась на 4,25 процентных пункта за тот же период. Однако эти обобщённые показатели следует интерпретировать описательно, поскольку они объединяют результаты по нескольким антимикробным препаратам. Поэтому тенденции по отдельным антибиотикам представлены отдельно в Таблица 3.
Средняя частота выявления устойчивости незначительно увеличилась в 2025 году после более низкого значения в 2024 году. Эти изменения следует интерпретировать с осторожностью, поскольку промежуточные результаты могут варьироваться в зависимости от антимикробного препарата и учитывались как устойчивые при расчёте показателей резистентности. В целом, устойчивость Pseudomonas aeruginosa оставалась проблемой эпидемиологического наблюдения на протяжении всего периода исследования, что подчёркивает необходимость постоянного контроля за применением антимикробных препаратов, а также профилактики и контроля инфекций.
Профили устойчивости основных антибиотиков
На основании данных по чувствительности к антибиотикам, описанных выше, в течение трехлетнего периода были выявлены различные паттерны устойчивости к 10 протестированным антимикробным препаратам, как подробно изложено в Таблица 3 и проиллюстрировано на Рисунок 4 и Рисунок 5Было выявлено четыре описательных типа устойчивости.
Во-первых, устойчивость к тобрамицину, цефепиму и пиперациллину-тазобактаму снизилась в течение периода исследования. Устойчивость к тобрамицину снизилась с 3,23% в 2023 году до 0,00% в 2025 году, к цефепиму — с 12,90% до 2,44%, а к пиперациллину-тазобактаму — с 9,68% до 0,00%. К 2025 году все три препарата продемонстрировали низкие показатели устойчивости в этих данныхРисунок 4). Во-вторых, устойчивость к амикацину оставалась низкой, колеблясь в диапазоне от 0,00% до 4,08% в течение трёх лет. В-третьих, устойчивость к карбапенемам возросла в 2024 году, а затем снизилась в 2025 году. Устойчивость к меропенему увеличилась с 9,68% в 2023 году до 18,37% в 2024 году, а затем снизилась до 12,20% в 2025 году. Устойчивость к имипенему возросла с 12,90% до 24,49%, а затем снизилась до 17,07%. Эти данные указывают на временный пик устойчивости к карбапенемам в 2024 году. В-четвёртых, устойчивость к фторхинолонам оставалась проблемой. Устойчивость к ципрофлоксацину оставалась высокой на протяжении всего периода исследования, а устойчивость к левофлоксацину увеличилась с 16,13% в 2023 году до 36,59% в 2025 году. Устойчивость к триметоприм-сульфаметоксазолу оставалась стабильно высокой (>79%) во все три года. Ежегодные сравнения показателей устойчивости к отдельным антибиотикам представлены на Рисунок 5.
В целом, эти результаты демонстрируют неоднородные, специфичные для антибиотиков, паттерны резистентности у изолятов Pseudomonas aeruginosa в данном учреждении. Рост резистентности к левофлоксацину и стабильно высокая резистентность к триметоприм-сульфаметоксазолу подтверждают необходимость дальнейшего мониторинга рационального использования антимикробных препаратов.
Сравнительный анализ показателей устойчивости к противомикробным препаратам в трёх ключевых отделениях
На основании описанной выше внутрибольничной стратификации уровни резистентности в трех основных отделениях резюмируются в Таблица 2 и Рисунок 6. Resp-TB был основной мишенью вмешательства и характеризовался высоким уровнем устойчивости на протяжении всего периода исследования: 74,19% в 2023 году (23/31, 95% ДИ: 55,39–85,78%), 81,63% в 2024 году (40/49, 95% ДИ: 67,98–89,76%) и 82,93% в 2025 году (34/41, 95% ДИ: 67,94–91,18%). Статистически значимого снижения не наблюдалось (Кохрен)–Тест линейной тенденции Армитиджа, Z = 0,89, p ≈ 0,37; Фишер’точный критерий Фишера для 2023 и 2025, p ≈ 0,37). Эти результаты не подтверждают чёткой временной связи между вмешательством и снижением резистентности в отделении.
В отделении инфекционных заболеваний было выделено несколько изолятов за весь период исследования (n = 5). Соответствующие показатели составили 6,45% в 2023 году (2/31), 4,08% в 2024 году (2/49) и 2,44% в 2025 году (1/41). В связи с небольшим количеством выделенных изолятов эти результаты следует интерпретировать с осторожностью и не подходят для надёжного анализа тенденций.
В отделении гастроэнтерологии и гепатологии также было небольшое количество выделенных штаммов (n = 12). Уровень резистентности составил 0,00% в 2023 году, 55,56% в 2024 году и 0,00% в 2025 году. Эти колебания, вероятно, отражают небольшой годовой объём выборки, при котором небольшое число резистентных штаммов может значительно влиять на процентные оценки.
В целом, штаммы Resp-TB составляли большую часть изолятов PA и сохраняли высокие уровни устойчивости на протяжении всего периода исследования. В небольших отделениях объемы выборок были ограничены, что снижало надежность межотделенческих сравнений. Годовые тенденции по отделениям представлены в Рисунок 6.
Направленное вмешательство при Респ-ТБ
После внедрения четырёхмерного целенаправленного вмешательства в январе 2024 года доля случаев в отделении, зарегистрированных по форме Респ-ТБ, не снизилась, как предполагалосьРисунок 6). Сообщаемое значение составило 74,19% в 2023 году, 81,63% в 2024 году и 82,93% в 2025 году, при этом статистически значимого снижения не наблюдалось (Cochran–Тест линейной тенденции Армитиджа, Z = 0,89, p ≈ 0,37; Фишер’точный критерий Фишера для 2023 и 2025, p ≈ 0.37; Таблица 2 и Рисунок 6). Для описательного контекста годовые значения отделения были нанесены на график вместе с многоместными китайскими и международными референсными значениями из предыдущих отчетов по эпидемиологическому наблюдению (Рисунок 7)15,16Эти внешние референсные значения приведены исключительно для предоставления контекстной информации и не могут напрямую сравниваться с настоящим набором данных, поскольку исследования различались по определениям устойчивости, составу популяций пациентов, стратегиям отбора проб, процедурам устранения дубликатов изолятов и наборам антимикробных препаратов. Следовательно, Рисунок 7 не следует интерпретировать как демонстрацию значимого снижения, кумулятивного снижения, сходимости к внешнему эталону, достижения цели или эффективности вмешательства.
Антибиотик-специфические паттерны различались. Устойчивость к тобрамицину оставалась низкой, резистентные изоляты не были выявлены в 2025 году. Устойчивость к цефепиму снизилась с 12,90% в 2023 году до 2,44% в 2025 году. Напротив, устойчивость к левофлоксацину возросла с 5/31 (16,13%) в 2023 году до 11/49 (22,45%) в 2024 году и до 15/41 (36,59%) в 2025 году, несмотря на ограничение применения левофлоксацина в рамках вмешательства. Это увеличение может отражать перекрёстное селективное давление со стороны режимов лечения туберкулёза, содержащих фторхинолоны, хотя отсутствие данных о назначениях не позволяет напрямую оценить эффективность вмешательства.’влияние на поведение при выписке рецептов. Устойчивость к триметоприм-сульфаметоксазолу оставалась стабильно высокой: 96,77 % в 2023 году, 79,59 % в 2024 году и 92,68 % в 2025 году.
В целом, ежегодная доля отделения в общей структуре случаев Респ-ТБ оставалась высокой на протяжении всего периода исследования, и имеющиеся данные не продемонстрировали чёткого снижения, связанного с вмешательством. Тем не менее, результаты, касающиеся конкретных антибиотиков—включая низкую чувствительность к тобрамицину и цефепиму и растущую устойчивость к левофлоксацину—может способствовать дальнейшему местному надзору за антимикробной устойчивостью и контролю за рациональным использованием антимикробных препаратов. Поскольку в данном исследовании отсутствовали данные об уровне потребления антимикробных препаратов на уровне пациентов, одновременные контрольные отделения, а также корректировка на изменения в структуре пациентов, никакую причинно-следственную связь между четырёхмерным вмешательством и наблюдаемыми паттернами устойчивости выводить не следует.
Краткое изложение результатов в контексте гипотезы исследования
В данном исследовании выдвинута гипотеза о том, что внедрение целенаправленного вмешательства антимикробного менеджмента, основанного на четырёхмерной связке, будет связано со снижением Pseudomonas aeruginosa устойчивость при ЛНБ-ТБ. Однако уровень устойчивости в отделении не снизился после вмешательства: 74,19% в 2023 году, 81,63% в 2024 году и 82,93% в 2025 году, статистически значимого снижения не выявлено (Кохрен)–Тест линейной тенденции Армитеджа, Z = 0,89, p ≈ 0.37; Таблица 2 и Рисунок 6). Эти результаты не подтверждают гипотезу исследования на уровне отделения. Тенденции по отдельным антибиотикам различались: к тобрамицину, цефепиму и пиперациллину-тазобактаму устойчивость оставалась низкой к 2025 году, тогда как устойчивость к левофлоксацину увеличилась до 36,59 %Таблица 3, Рисунок 4и Рисунок 5).
НАЛИЧИЕ ДАННЫХ:
Необработанные наборы данных, лежащие в основе всех рисунков и таблиц в этой статье, предоставляются как Дополнительная таблица S1, Дополнительная таблица S2и Дополнительная таблица S3.
Рисунок 1Общая схема дизайна исследования. Схема обобщает сбор образцов, культивирование, идентификацию бактерий, тестирование на чувствительность к антимикробным препаратам, контроль качества, устранение дубликатов, сроки вмешательства и оценку исходов в этом одногрупповом ретроспективном исследовании эпиднадзора. Клинические образцы, включая респираторные, подвергали культивированию; предварительную идентификацию проводили на основании морфологии колоний и оксидазной пробы, а окончательную идентификацию и тестирование на чувствительность к антимикробным препаратам (AST) выполняли с использованием автоматизированной микробиологической системы. Результаты определения МПК интерпретировали в соответствии с документом CLSI M100, 33-е издание. Ежедневно проводили контроль качества Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853. Один пациент–было применено правило дедупликации «один изолят в год». Период до вмешательства — 2023 год, период после вмешательства — 2024 год–2025. Сокращения: AST = тестирование чувствительности к антимикробным препаратам; CLSI = Клинический и лабораторный стандартный институт; MIC = минимальная подавляющая концентрация. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 2. Состав Pseudomonas aeruginosa изоляты по типу образца и отделению, 2023–2025. На рисунке показано распределение изолятов по источнику образца и клиническому отделению. (А) Количество и доля изолятов по источнику образца, включая мокроту, БАЛЖ, кровь, мочу и другие источники. (Б) Число и доля изолятов по клиническим отделениям. Сокращения: BALF = бронхоальвеолярная лаважная жидкость; GI-Hep = Отделение гастроэнтерологии и гепатологии; ID = Отделение инфекционных болезней; Resp-TB = Отделение болезней органов дыхания и туберкулеза. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 3. Ежегодный профиль чувствительности к антимикробным препаратам Pseudomonas aeruginosa изоляты, 2023–2025. Столбцы показывают годовые доли устойчивых, чувствительных и промежуточных результатов по всем протестированным антимикробным агентам. Формальные статистические сравнения по каждому антибиотику представлены в Таблица 2. Сокращения: I = промежуточный; R = устойчивый; S = чувствительный. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 4. Уровни резистентности Pseudomonas aeruginosa к основным противомикробным препаратам в 2025 году. Антибиотики ранжированы по уровню резистентности в 2025 году. Пунктирная опорная линия указывает взвешенный суммарный уровень резистентности к тестируемым антимикробным агентам. Категории клинических рекомендаций не подразумеваются. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 5. Ежегодные показатели устойчивости к Pseudomonas aeruginosa к пяти выбранным антимикробным агентам, 2023–2025. Столбцы показывают годовые показатели устойчивости к тобрамицину, цефепиму, пиперациллину-тазобактаму, левофлоксацину и триметоприм-сульфаметоксазолу. Формальные статистические сравнения приведены в Таблица 2 и описано в разделе Результаты. Сокращение: PA = Pseudomonas aeruginosa. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 6. Ежегодное распределение по отделам Pseudomonas aeruginosa изоляты, 2023–2025. На рисунке сравнивается годовая доля изолятов, поступающих из трёх клинических отделений. Сплошная красная линия обозначает отделение Респ-ТБ — целевое отделение вмешательства. Пунктирная синяя линия обозначает отделение инфекционных болезней. Жёлтая пунктирная линия обозначает отделение гастроэнтерологии и гепатологии. Сокращения: ID = отделение инфекционных болезней; Resp-TB = отделение болезней органов дыхания и туберкулёза. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 7. Описательное представление годовых значений отделения на фоне внешних референсных значений по устойчивости к антимикробным препаратам. На рисунке схематически представлены годовые значения, сообщаемые для Респ-ТБ, вместе со справочными значениями из китайского многоцентрового исследования эпиднадзора и международного исследования в учреждениях третичной медицинской помощи15,16Сплошная красная линия обозначает годовые значения для Resp-TB. Серая полоса соответствует 2023 году, тогда как синие полосы соответствуют 2024 и 2025 годам. Зелёная пунктирная линия обозначает многокомпонентное референсное значение для Китая, а пурпурная штрихпунктирная линия — международное референсное значение. Эти внешние референсные значения приведены исключительно для описательного контекста и не могут напрямую сравниваться с представленными данными, поскольку лежащие в их основе исследования различались по определениям устойчивости, составу исследуемых популяций, стратегиям отбора проб, процедурам устранения дубликатов изолятов и наборам антимикробных препаратов. Соответственно, данный рисунок не следует интерпретировать как демонстрацию статистически значимого снижения, суммарного снижения, сближения с внешним эталоном, достижения заранее установленной цели или эффективности вмешательства. Сокращения: PA = Pseudomonas aeruginosa; Отделение респираторных заболеваний и туберкулёза (Resp-TB). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
| Индикатор | 2023 (n=31) | 2024 (n=49) | 2025 (n=41) | Тренд |
| Количество пациентов/изолятов | 31/31 | 49/49 | 41/41 | Первоначальное увеличение, за которым следует уменьшение |
| Общий показатель восприимчивости (%) | 46.31 | 47.6 | 50.56 | Постоянно увеличивайте |
| Средняя скорость (%) | 7.26 | 5.62 | 8.3 | Незначительные колебания |
| Процент устойчивости (%) | 46.44% | 46.78% | 41.14% | Незначительные колебания |
Таблица 1: Общий профиль антибактериальной чувствительности штаммов без повторов Pseudomonas aeruginosa изоляты, 2023–2025. В таблице приведены годовые взвешенные проценты устойчивых, чувствительных и промежуточных результатов тестирования чувствительности к антимикробным препаратам по всем исследованным антимикробным средствам. Эти сводные проценты носят описательный характер и не получены из единого биномиального знаменателя; поэтому критерий Пирсона’s χ2 Значения p неприменимы на данном уровне обобщения. Специфические для каждого антибиотика статистические сравнения приведены в Таблица 2. Сокращения: AST = тестирование чувствительности к антимикробным препаратам; I = промежуточный; R = устойчивый; S = чувствительный. Это описательные взвешенные сводные показатели, а не уровни резистентности на уровне отдельных пациентов.
| Кафедра | 2023 (N=31) | 2024 (N=49) | 2025 (N=41) | Всего (N=121) |
| Отделение туберкулёза органов дыхания | 23/31 (74.19%) | 40/49 (81.63%) | 34/41 (82.93%) | 97 (80.17%) |
| Пищеварительная система & Отдел гепатологии | 4/31 (12.90%) | 5/49 (10.20%) | 3/41 (7.32%) | 12 (9.92%) |
| Кафедра инфекционных болезней | 2/31 (6.45%) | 2/49 (4.08%) | 1/41 (2.44%) | 5 (4.13%) |
| Другие | 2/31 (6.45%) | 2/49 (4.08%) | 3/41 (7.32%) | 7 (5.79%) |
| Общее количество | 31/31 (100.00%) | 49/49 (100.00%) | 41/41 (100.00%) | 121 (100.00%) |
Таблица 2: Распределение Pseudomonas aeruginosa выделенные штаммы по отделениям, 2023–2025. Значения представлены как n/N (%), где n — количество изолятов из указанного отделения за определённый год, а N — общее количество изолятов за этот год. Единицей анализа является изолят после применения принципа «один пациент — один изолят»–правило дедупликации «один изолят на календарный год». Основной когортой наблюдения для четырёхмерного вмешательства, нацеленного на установление связей, была когорта Resp-TB. Сокращения: GI-Hep = отделение гастроэнтерологии и гепатологии; ID = отделение инфекционных болезней; PA = Pseudomonas aeruginosa; Отделение респираторных заболеваний и туберкулёза (Resp-TB).
| Антимикробное средство | 2023 (N=31) | 2024 (N=49) | 2025 (N=41) | P-значение* |
| Тобрамицин | 1/31 (3.23) | 1/49 (2.04) | 0/41 (0.00) | нс |
| Цефепим | 4/31 (12.90) | 3/49 (6.12) | 1/41 (2.44) | нс |
| Пиперациллин/тазобактам | 3/31 (9.68) | 3/49 (6.12) | 0/41 (0.00) | нс |
| Левофлоксацин | 5/31 (16.13) | 11/49 (22.45) | 15/41 (36.59) | нс |
| Триметоприм/Сульфаметоксазол | 30/31 (96.77) | 39/49 (79.59) | 38/41 (92.68) | нс |
| Меропенем | 3/31 (9.68) | 9/49 (18.37) | 5/41 (12.20) | нс |
| Имипенем | 4/31 (12.90) | 12/49 (24.49) | 7/41 (17.07) | нс |
| Гентамицин | 2/31 (6.45) | 6/49 (12.24) | 2/41 (4.88) | нс |
| Амикацин | 0/31 (0.00) | 2/49 (4.08) | 1/41 (2.44) | нс |
| Цефазолин | 6/31 (19.35) | 10/49 (20.41) | 4/41 (9.76) | нс |
Таблица 3: Годовые показатели устойчивости Pseudomonas aeruginosa к 10 противомикробным агентам, 2023–2025. Значения представлены в виде R/n (%), где R — количество устойчивых изолятов, а n — количество протестированных изолятов для каждого антимикробного препарата и года. p-значения сравнивают 2023 и 2025 годы с использованием критерия Фишера’s точным тестом. Порог значимости с поправкой Бонферрони был α = 0,005. Доверительные интервалы 95% рассчитывались с использованием метода Клоппера–Метод точного критерия Пирсона. В знаменателях указаны годовые количества изолятов после удаления дубликатов, если только неполные антимикробные панели не требуют использования знаменателей, специфичных для каждого антибиотика. Удаление дубликатов проводилось с использованием данных одного пациента–правило «один изолят в год», при этом сохраняется первый изолят. Сокращения: CI = доверительный интервал; TMP-SMX = триметоприм-сульфаметоксазол; ns = недостоверно
Дополнительная таблица S1: Анализ данных микробиологических бактериальных образцов; период отчетности: 01 января 2023 года, 00:00:00 – 31 декабря 2023 года, 23:59:59 Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить этот файл.
Дополнительная таблица S2: Анализ данных микробиологических бактериальных образцов; период отчетности: 01 января 2024 г., 00:00:00 – 31 декабря 2024 года, 23:59:59 Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить этот файл.
Дополнительная таблица S3: Анализ данных микробиологических бактериальных образцов; период отчетности: 01 января 2025 г., 00:00:00 – 31 декабря 2025 года, 23:59:59 Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить этот файл.
Обсуждение
Контроль за применением противомикробных препаратов на основе качества данных эпиднадзора
Традиционные методы подсчета изолятов могут привести к завышению показателей антимикробной резистентности из-за повторного забора проб у одного и того же пациента, особенно в отделениях, где пациенты обычно проходят длительную госпитализацию. Использование стратегии дедупликации «один первый изолят на одного пациента» соответствует рекомендациям WHO GLASS и помогает снизить эту потенциальную систематическую ошибку17,18. В настоящем исследовании подход «один пациент — один изолят за календарный год» позволил оценить ежегодные паттерны резистентности PA с использованием набора данных, ориентированного на пациента, а не на основе накопления повторных изолятов. Тем не менее, поскольку один и тот же пациент теоретически мог быть включен в более чем одну ежегодную когорту, данные следует интерпретировать как ежегодный эпиднадзор на уровне изолятов, а не как лонгитюдное исследование когорты пациентов.
После удаления дубликатов паттерны антимикробной резистентности PA анализировались в масштабах всей больницы и подвергались дескриптивному сравнению за три года исследования. Взвешенный профиль резистентности по всей больнице показал лишь незначительные изменения с 2023 по 2025 год, и имеющиеся данные не продемонстрировали значимого снижения резистентности после внедрения четырехмерного комплекса мероприятий. Следовательно, полученные результаты не следует интерпретировать как доказательство эффективности вмешательства. Отложенный эффект стратегии контроля антимикробной терапии остается возможным, поскольку изменения в практике назначения препаратов, потреблении антимикробных средств и селективном давлении могут потребовать более одного клинического цикла для того, чтобы стать измеримыми19,20. В предыдущих исследованиях сообщалось о постепенном снижении резистентности PA после комбинированного применения стратегий контроля антимикробной терапии и мероприятий по профилактике инфекций21,22. Однако те исследования проводились в иных условиях оказания медицинской помощи с использованием других популяций пациентов, компонентов вмешательства, определений резистентности, периодов наблюдения и показателей исхода. Поэтому их результаты следует с осторожностью сравнивать с результатами данного одноцентрового ретроспективного исследования.
Отчеты по внешнему эпиднадзору использовались исключительно для обеспечения описательного контекста паттернов резистентности, наблюдаемых в данной больнице. Данные надзора CHINET из Китая сообщили о снижении резистентности PA к имипенему и меропенему к 2024 году, в то время как другие многоцентровые и региональные исследования также описывали изменения резистентности PA с течением времени23,24,25,26. Напротив, настоящее исследование проводилось в специализированной инфекционной больнице, где большинство изолятов PA были получены из Resp-TB. Пациенты этого отделения могли подвергаться длительной госпитализации, иметь сложный инфекционный анамнез, структурные заболевания легких и повторные воздействия противомикробных препаратов, что могло повлиять на наблюдаемые паттерны резистентности. В исследовании одного из третичных госпиталей Саудовской Аравии была зарегистрирована частота MDR-PA примерно 37,5%16, однако это значение нельзя напрямую сравнивать с настоящими результатами из-за различий в дизайне исследования, характеристиках пациентов, методах отбора проб, процедурах дедупликации, определениях резистентности и панелях противомикробных препаратов. Аналогичная осторожность требуется при сравнении настоящих данных с лонгитюдными исследованиями из других регионов27. Соответственно, внешние референтные значения, представленные на рисунке 7, являются лишь описательными и не должны интерпретироваться как доказательство значительного снижения, совокупного улучшения, сближения с контрольным показателем, достижения цели или эффективности вмешательства.
Временное повышение резистентности к карбапенемам в 2024 году также следует интерпретировать с осторожностью. Резистентность к меропенему увеличилась с 9,68% в 2023 году до 18,37% в 2024 году, а затем снизилась до 12,20% в 2025 году. Аналогичным образом, резистентность к имипенему возросла с 12,90% до 24,49%, а затем снизилась до 17,07%. Эти колебания могут отражать изменения селективного давления антимикробных препаратов, состава групп пациентов, эмпирического применения карбапенемов или потенциальную динамику передачи. Однако клональное распространение, продукция карбапенемаз, изменения поринов, экспрессия эффлюксных насосов и другие молекулярные механизмы резистентности не исследовались напрямую. Следовательно, эти механизмы следует рассматривать как возможные объяснения, основанные на предыдущих отчетах28,29,30,31,32, а не как выводы, подтвержденные настоящим набором данных. Относительно небольшое количество ежегодных изолятов также могло усилить видимые ежегодные изменения в процентах резистентности.
Траектории резистентности к 10 оцениваемым антимикробным препаратам продемонстрировали гетерогенные антибиотик-специфические паттерны. Резистентность к тобрамицину, цефепиму и пиперациллину-тазобактаму снижалась в течение периода исследования и оставалась низкой к 2025 году. Резистентность к тобрамицину и пиперациллину-тазобактаму в 2025 году достигла 0.00%, в то время как резистентность к цефепиму снизилась до 2.44%. Резистентность к амикацину также оставалась низкой на протяжении всего периода исследования, колеблясь от 0.00% до 4.08%. Эти результаты могут отражать местную практику назначения препаратов, меры по контролю за использованием противомикробных средств, различия в воздействии антимикробных препаратов и изменения селективного давления33,34. Однако данные о назначениях на уровне пациентов, определенные суточные дозы, количество дней терапии, показания к лечению, режимы дозирования и продолжительность лечения были недоступны. Следовательно, наблюдаемые антибиотик-специфические изменения не могут быть причинно связаны с четырехмерным вмешательством.
Резистентность к карбапенемам достигла пика в 2024 году и впоследствии снизилась в 2025 году. Эта закономерность может быть связана с эмпирическим применением карбапенемов у пациентов в более тяжелом состоянии, изменениями клинических характеристик госпитализированных пациентов, селективным антимикробным давлением или неучтенными факторами инфекционного контроля. Толерантность, связанная с биопленками, и другие адаптивные механизмы были описаны в предыдущих исследованиях PA35,36. Тем не менее, настоящее исследование не включало тестирование на наличие биопленок, определение карбапенемаз, молекулярный анализ резистентности, полногеномное секвенирование или оценку клональной передачи. Таким образом, данные объяснения остаются теоретическими возможностями, основанными на литературе, и не должны рассматриваться как механизмы, продемонстрированные в данной когорте.
Резистентность к левофлоксацину прогрессивно увеличивалась с 16,13% в 2023 году до 22,45% в 2024 году и 36,59% в 2025 году. В рамках программы Resp-TB пациенты могут подвергаться длительному или повторному воздействию противотуберкулезных режимов, содержащих фторхинолоны, включая моксифлоксацин и левофлоксацин. Такое воздействие может оказывать перекрестное селективное давление на PA и другие бактериальные патогены37,38. Однако в настоящем исследовании не собирались данные на уровне отдельных пациентов о режимах противотуберкулезной терапии, предшествующем применении фторхинолонов, кумулятивных дозах противомикробных препаратов, продолжительности лечения или приверженности терапии. Следовательно, прямая связь между противотуберкулезной терапией с применением фторхинолонов и ростом резистентности к левофлоксацину не могла быть проверена. Наблюдаемую тенденцию следует рассматривать как сигнал эпидемиологического надзора, требующий дальнейшего изучения, а не как доказательство подтвержденной причинно-следственной связи.
Резистентность к триметоприму–сульфаметоксазолу оставалась стабильно высокой на протяжении всего периода исследования: показатели составили 96.77% в 2023 году, 79.59% в 2024 году и 92.68% в 2025 году. PA обладает природно низкой чувствительностью к триметоприму–сульфаметоксазолу; следовательно, данные результаты не следует интерпретировать так же, как приобретенную резистентность к рутинно активным антипсевдомональным препаратам. Напротив, эти результаты подтверждают ограниченную ценность триметоприма–сульфаметоксазола для терапии, направленной против PA, и важность интерпретации результатов AST в контексте характеристик природной резистентности и современных стандартов тестирования чувствительности.
Отделение для лечения респираторного туберкулеза (Resp-TB) было выбрано в качестве основного объекта эпидемиологического надзора и мероприятий по борьбе с PA, так как в течение периода исследования здесь была выявлена наибольшая доля изолятов. Пациенты с легочным туберкулезом могут иметь структурные повреждения легких, длительный период госпитализации, повторные воздействия противомикробных препаратов, нарушение иммунного ответа и множество сопутствующих заболеваний, что в совокупности может повышать восприимчивость к колонизации или инфекции PA39,40,41,42,43,44,45. Кроме того, в туберкулезных отделениях часто происходит сбор и обработка респираторных образцов и секретов, а также наблюдается тесный контакт между пациентами, ухаживающими за ними лицами и медицинским персоналом. Эти обстоятельства могут создавать условия для загрязнения окружающей среды и нозокомиальной передачи46,47. Таким образом, высокая концентрация изолятов PA в этом отделении обосновывает необходимость продолжения мониторинга резистентности, стандартизации сбора респираторных образцов, проведения санитарной обработки помещений, контроля за утилизацией секретов и усиления мер гигиены рук.
В рамках ограничений данного одноцентрового ретроспективного дизайна ежегодная доля отделений, зарегистрировавших Resp-TB, не снизилась после внедрения вмешательства. Зарегистрированные значения составили 74.19% в 2023 году, 81.63% в 2024 году и 82.93% в 2025 году, при этом статистически значимого снижения не наблюдалось (линейный тест тренда Кохрана-Армитажа, Z = 0.89, p ≈ 0.37). Эти значения описывают ежегодное распределение изолятов PA по отделениям и не должны интерпретироваться как прямой показатель резистентности к конкретному антибиотику. Соответственно, полученные результаты не демонстрируют явного снижения резистентности PA на уровне отделений, связанного с вмешательством. Тем не менее, четырехкомпонентная структура, включающая динамический мониторинг резистентности, назначение препаратов с учетом стратификации рисков, стандартизированный сбор образцов, а также усиленные меры по профилактике и инфекционному контролю, может стать практической основой для координации действий по рациональному использованию противомикробных препаратов, микробиологической диагностике и контролю инфекций на основе данных локального эпиднадзора.
Отсутствие статистически значимого снижения не обязательно означает, что каждый компонент вмешательства был бесполезен. Стандартизированный сбор образцов мог улучшить качество и репрезентативность респираторных проб, а ежеквартальные отчеты по эпиднадзору могли повысить осведомленность клиницистов о локальных моделях резистентности. Улучшение гигиены рук и дезинфекции окружающей среды также могло оказать поддержку рутинным мероприятиям по профилактике инфекций. Однако настоящий ретроспективный набор данных не включал такие индикаторы процесса, как потребление противомикробных препаратов, обоснованность эмпирических назначений, соблюдение протоколов сбора образцов, приверженность гигиене рук, результаты посевов из окружающей среды или время до начала соответствующей терапии. Следовательно, точность реализации и независимые эффекты четырех компонентов вмешательства не могли быть оценены.
В будущих исследованиях следует уделить приоритетное внимание нескольким направлениям. Во-первых, необходимы многоцентровые проспективные исследования с большим объемом выборки и современными контрольными отделениями для подтверждения наблюдаемых тенденций резистентности и определения того, применимы ли аналогичные структуры контроля за использованием антимикробных препаратов в различных условиях здравоохранения. Во-вторых, следует включить клиническую информацию на уровне пациентов, в том числе диагнозы, степень тяжести инфекции, сопутствующие заболевания, воздействие антимикробных средств, продолжительность лечения, клинические исходы, а также разграничение между инфекцией и колонизацией. В-третьих, потребление антимикробных препаратов следует количественно оценить с использованием стандартизированных показателей, таких как определенные суточные дозы или дни терапии, чтобы оценить взаимосвязь между практикой назначения препаратов и последующим развитием резистентности.
В будущих исследованиях также следует применять методы молекулярной эпидемиологии. Полногеномное секвенирование, выявление генов карбапенемаз, анализ изменений OprD и оценка экспрессии эффлюксных насосов помогут уточнить механизмы, лежащие в основе резистентности к карбапенемам, и определить, связаны ли временные изменения с независимым приобретением устойчивости или с клональной трансмиссией. Для оценки устойчивости целевых вмешательств в условиях высокой нагрузки, таких как отделения респираторной терапии и туберкулезные диспансеры, необходимо долгосрочное наблюдение. Кроме того, концепция «Единого здоровья» (One Health), включающая экологический мониторинг сточных вод больниц, поверхностей с высокой частотой контактов, оборудования для респираторной поддержки и региональные данные по антимикробной резистентности, могла бы помочь прояснить более широкие последствия местной резистентности PA для общественного здравоохранения.
В заключение, в данном одноцентровом ретроспективном исследовании использовался подход к дедупликации по принципу «один пациент — один изолят в календарный год» для описания паттернов антимикробной резистентности клинических изолятов PA, собранных с 2023 по 2025 год. Ежегодная доля случаев, зарегистрированная в отделении Resp-TB, не снизилась после внедрения четырехмерного целевого вмешательства по установлению связей, и имеющиеся данные не продемонстрировали связанного с вмешательством снижения антимикробной резистентности. Внешние референсные значения использовались только для описательного контекста и не были напрямую сопоставимы из-за различий в определениях резистентности, методах отбора проб, популяциях пациентов, процедурах дедупликации и панелях антимикробных препаратов. Паттерны резистентности к конкретным антибиотикам были неоднородными: резистентность к тобрамицину, цефепиму и пиперациллину-тазобактаму оставалась низкой к 2025 году, в то время как резистентность к левофлоксацину возросла, а резистентность к триметоприму-сульфаметоксазолу оставалась стабильно высокой. Эти результаты обосновывают необходимость продолжения локального эпидемиологического надзора за резистентностью и мониторинга стратегий контроля антимикробной терапии, особенно в Resp-TB, на долю которого пришлась большая часть изолятов PA.
Данное исследование имеет несколько ограничений. Во-первых, одноцентровой ретроспективный дизайн и относительно небольшой размер выборки (n = 121) ограничили статистическую мощность и возможность обобщения результатов, особенно для отделений с малым количеством изолятов. Во-вторых, подробные клинические данные были доступны не систематически. Следовательно, изоляты описываются как «клинические изоляты», а не подтвержденные инфекции, и формальное различие между инфекцией и колонизацией установить не удалось. В-третьих, данные о назначении и потреблении противомикробных препаратов на уровне отдельных пациентов отсутствовали, что ограничило оценку взаимосвязи между мероприятиями по контролю за использованием антимикробных средств, их применением и паттернами резистентности.
Во-четвертых, в исследовании отсутствовал современный контрольный отдел и не использовался дизайн прерванных временных рядов. Следовательно, временные изменения не удалось отличить от светских трендов, изменений в структуре пациентов или других параллельных мероприятий по инфекционному контролю. В-пятых, молекулярные механизмы резистентности, включая гены карбапенемаз, изменения OprD, экспрессию эффлюксных насосов, биопленочно-ассоциированную толерантность и клональную передачу, не изучались. В-шестых, дедупликация основывалась на именах пациентов и правиле «один пациент — один изолят за календарный год». Таким образом, нельзя исключить ошибочную классификацию и повторное включение одного и того же пациента в разные годы.
Наконец, фенотипы MDR и XDR в данном ретроспективном наборе данных систематически не классифицировались, а исследование было сосредоточено на показателях резистентности к конкретным антибиотикам, а не на комплексных фенотипах резистентности. Также отсутствовали показатели процесса, отражающие точность соблюдения мер вмешательства, включая потребление противомикробных препаратов, обоснованность эмпирической терапии, соблюдение гигиены рук, частоту отклонения образцов из-за низкого качества и эффективность дезинфекции окружающей среды. В будущих многоцентровых проспективных исследованиях следует использовать надежные идентификаторы пациентов, стандартизированные определения MDR/XDR, данные на уровне назначений, современные контрольные группы, молекулярное тестирование и достаточно длительные периоды наблюдения для подтверждения этих результатов и определения долгосрочной ценности целевых мероприятий по рациональному использованию противомикробных препаратов.
Раскрытие информации
Авторы не имеют конфликтов интересов, которые следовало бы раскрыть.
Благодарности
Благодарим членов команды за поддержку и вклад в этот эксперимент. Данная работа была поддержана проектом Бюро науки и технологий Хуайаня (грант № HAB2024030).
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 0.5 McFarland Standard | bioMérieux, France | 21182 | Стандартизация инокулята |
| 5% Sheep Blood Agar | Thermo Fisher Scientific, USA | PKR01200 | Культивирование клинических образцов |
| AST-N399 Card | bioMérieux, France | REF 423701 | Тестирование чувствительности к антимикробным препаратам для антимикробной панели |
| CLSI M100 (33rd Ed.) | CLSI, USA | M100-ED33 | Интерпретация пороговых значений (брейкпоинтов) |
| GN Identification Card | bioMérieux, France | 21341 | Окончательная идентификация грамотрицательных изолятов |
| GraphPad Prism | GraphPad Software, USA | Version 9.0 | Построение графиков |
| MacConkey Agar | Thermo Fisher Scientific, USA | R01552 | Дифференциация грамотрицательных бактерий |
| P. aeruginosa ATCC 27853 | ATCC, USA | ATCC 27853 | Ежедневный контрольный референс-штамм |
| SPSS Statistics | IBM Corp., USA | Version 26.0 | Статистический анализ |
| Tryptic Soy Agar w/ Bacitracin | BD, USA | ICN1010617 | Селективное культивирование |
| VITEK 2 Compact System | bioMérieux, France | V2COMPACT | Автоматизированная идентификация и определение чувствительности (ID/AST) |
Ссылки
- Elfadadny A et al. Antimicrobial resistance of Pseudomonas aeruginosa: navigating clinical impacts, current resistance trends, and innovations in breaking therapies. Front Microbiol. 2024;15:1374466.
- Algammal AM et al. Multidrug resistant Pseudomonas aeruginosa: pathogenesis, resistance mechanisms, and novel therapeutic strategies. Microb Pathog. 2024;195:106913.
- Zhao Y et al. Multidrug resistance in Pseudomonas aeruginosa: genetic control mechanisms and therapeutic advances. Mol Biomed. 2024;5(1):62.
- Naghavi M et al. Global burden of bacterial antimicrobial resistance 1990-2021: a systematic analysis with forecasts to 2050. Lancet. 2024;404(10459):1199-226.
- Murray CJL et al. Global burden of bacterial antimicrobial resistance in 2019: a systematic analysis. Lancet. 2022;399(10325):629-55.
- World Health Organization. WHO bacterial priority pathogens list, 2024. Geneva: World Health Organization; 2024.
- Pipitò L et al. Antimicrobial resistance in ESKAPE pathogens: a retrospective epidemiological study at the University Hospital of Palermo, Italy. Antibiotics (Basel). 2025;14(2):186.
- Sinha S et al. Prevalence of co-infection of culture-proven bacterial pathogens in microbiologically confirmed pulmonary tuberculosis patients from a tertiary care center. Cureus. 2024;16(8):e67423.
- Kawa DE et al. Characterization of beta-lactamase and fluoroquinolone resistance determinants in Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, and Pseudomonas aeruginosa isolates from a tertiary hospital in Yolo, Nigeria. Trop Med Infect Dis. 2023;8(11):500.
- Hernandez-Jimenez P et al. Risk factors and outcomes for multidrug resistant Pseudomonas aeruginosa infection in immunocompromised patients. Antibiotics (Basel). 2022;11(11):1459.
- Tumbarello M et al. Multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa bloodstream infections: risk factors and mortality. Epidemiol Infect. 2011;139(11):1740-9.
- Mitamura M et al. Comparison of de-duplication methods used by WHO Global Antimicrobial Resistance Surveillance System (GLASS) and Japan Nosocomial Infections Surveillance (JANIS) in the surveillance of antimicrobial resistance. PLoS One. 2020;15(6):e0228234.
- Clinical and Laboratory Standards Institute. Analysis and presentation of cumulative antimicrobial susceptibility test data. 5th ed. CLSI supplement M39. Wayne (PA): Clinical and Laboratory Standards Institute; 2022.
- Clinical and Laboratory Standards Institute. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing. 33rd ed. CLSI supplement M100. Wayne (PA): Clinical and Laboratory Standards Institute; 2023.
- Wan Y et al. Navigating an evolving microbial landscape: emerging antimicrobial resistance trends and precision stewardship in Tianjin tertiary hospitals (2021-2023). Front Cell Infect Microbiol. 2025;15:1629038.
- Shabi Y et al. A decade of antimicrobial resistance trends in Pseudomonas aeruginosa: insights from a tertiary care hospital in Saudi Arabia (2013-2022). Front Microbiol. 2025;16:1617522.
- Kim S, Yoo SJ, Chang J. Importance of susceptibility rate of 'the first' isolate: evidence of real-world data. Medicina (Kaunas). 2020;56(10):507.
- Simner PJ et al. What's new in antibiograms? Updating CLSI M39 guidance with current trends. J Clin Microbiol. 2022;60(10):e02210-21.
- Aiesh BM et al. Impact of an antibiotic stewardship program on antibiotic utilization, bacterial susceptibilities, and cost of antibiotics. Sci Rep. 2023;13(1):5040.
- Sartelli M et al. Preventing and controlling healthcare-associated infections: the first principle of every antimicrobial stewardship program in hospital settings. Antibiotics (Basel). 2024;13(9):896.
- Guo L et al. Successful control of resistance in Pseudomonas aeruginosa using antibiotic stewardship and infection control programs at a Chinese university hospital: a 6-year prospective study. PLoS One. 2018;13(5):e0196932.
- Eljaaly K et al. Impact of an antimicrobial stewardship programme on antimicrobial utilization and the prevalence of MDR Pseudomonas aeruginosa in an acute care hospital in Qatar. JAC Antimicrob Resist. 2021;3(3):dlab095.
- Guo Y et al. Antimicrobial resistance profile of clinical isolates from hospitals across China: CHINET 2024 surveillance report. One Health Adv. 2025;3:23.
- Qin X et al. Antimicrobial resistance of clinical bacterial isolates in China: current status and trends. JAC Antimicrob Resist. 2024;6(2):dlae052.
- Li J et al. Trends and implications of antimicrobial resistance in Pseudomonas aeruginosa: insights from a 19-year study in Zhejiang Province. Medicine (Baltimore). 2024;103(46):e40606.
- Xiao S, Liang X, Han L, Zhao S. Incidence, antimicrobial resistance and mortality of Pseudomonas aeruginosa bloodstream infections among hospitalized patients in China: a retrospective observational multicenter cohort study from 2017 to 2021. Front Public Health. 2023;11:1294141.
- Cimpeanu O et al. Trends in antimicrobial resistance of Acinetobacter baumannii and Pseudomonas aeruginosa from bloodstream infections: an eight-year study in a Romanian tertiary hospital. Microorganisms. 2025;13(7):1558.
- Zhao Y et al. Epidemiological and genetic characteristics of clinical carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa strains in Guangdong Province, China. Microbiol Spectr. 2023;11(3):e0426122.
- Flores-Vega VR et al. High-risk Pseudomonas aeruginosa clones harboring beta-lactamases: 2024 update. Heliyon. 2025;11(1):e41540.
- Dobrescu MS et al. The difference a year can make: how antibiotic resistance mechanisms in Pseudomonas aeruginosa have changed in Northwestern Transylvania. Biomolecules. 2025;15(1):1.
- Xie X et al. Molecular epidemiology and carbapenem resistance mechanisms of Pseudomonas aeruginosa isolated from a hospital in Fujian, China. Front Microbiol. 2024;15:1431154.
- Huang W et al. Carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa infections in critically ill children: prevalence, risk factors, and impact on outcome in a large tertiary pediatric hospital of China. Front Public Health. 2023;11:1088262.
- Falcone M, Galfo V, Tiseo G. Not all carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa strains are alike: tailoring antibiotic therapy based on resistance mechanisms. Curr Opin Infect Dis. 2024;37(6):594-601.
- Schwartz B et al. Multidrug resistant Pseudomonas aeruginosa in clinical settings: a review of resistance mechanisms and treatment strategies. Pathogens. 2024;13(11):975.
- Ciofu O, Tolker-Nielsen T. Tolerance and resistance of Pseudomonas aeruginosa biofilms to antimicrobial agents-how P. aeruginosa can escape antibiotics. Front Microbiol. 2019;10:913.
- Higazy D et al. In vivo evolution of antimicrobial resistance in a biofilm model of Pseudomonas aeruginosa lung infection. ISME J. 2024;18(1):wrae036.
- Anggriawan IMB, Rochmawati ID. Prevalence and risk factors of fluoroquinolone resistance in major bacterial pathogens: a systematic review and meta-analysis. Int J Microbiol. 2026;2026:3173058.
- Panholzer J et al. Ciprofloxacin-resistant Pseudomonas aeruginosa lung abscess complicating COVID-19 treated with the novel oral fluoroquinolone delafloxacin. Case Rep Pulmonol. 2022;2022:1008330.
- Jiang J et al. Disseminated tuberculosis is associated with impaired T cell immunity mediated by the non-canonical NF-kappaB pathway. J Infect. 2024;89(3):106231.
- Moreira-Teixeira L et al. T cell-derived IL-10 impairs host resistance to Mycobacterium tuberculosis infection. J Immunol. 2017;199(2):613-23.
- Schwander S, Dheda K. Human lung immunity against Mycobacterium tuberculosis: insights into pathogenesis and protection. Am J Respir Crit Care Med. 2011;183(6):696-707.
- Yuan Q et al. Risk factors and outcomes of inpatients with carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa bloodstream infections in China: a 9-year trend and multicenter cohort study. Front Microbiol. 2023;14:1137811.
- Maraolo AE et al. Clinical outcomes and predictors of mortality in patients with difficult-to-treat resistant Pseudomonas aeruginosa infections: a retrospective cohort study. Antibiotics (Basel). 2026;15(1):33.
- Abdul Jabar K et al. Predictors of mortality in Pseudomonas aeruginosa bloodstream infections: a scoping review. Pathogens. 2026;15(1):61.
- Geremia N et al. Risk factors for 30-day mortality and the role of empirical therapy in Pseudomonas aeruginosa bloodstream infections. Infection. 2025;53(5):2243-56.
- Boyce JM. Hand and environmental hygiene: respective roles for MRSA, multi-resistant Gram-negative bacteria, Clostridioides difficile, and Candida spp. Antimicrob Resist Infect Control. 2024;13(1):110.
- Glowicz JB et al. SHEA/IDSA/APIC practice recommendation: strategies to prevent healthcare-associated infections through hand hygiene: 2022 update. Infect Control Hosp Epidemiol. 2023;44(3):355-76.