Визуализация Живая Drosophila Глиальные-нервно-мышечном соединении с флуоресцентными красителями

Эта процедура начинается с подготовки личинки дрозофилы таким образом, чтобы она была вывернута наизнанку, чтобы обнажить поверхность стенки тела, связанные с поверхностью мышечных клеток, моторные нейроны и клетки GGL, сочетая флуоресцентное окрашивание пресинаптических нейронных окончаний, эндогенную экспрессию GFP и DS красного, направленного на мембраны глиальных и постсинаптических мышечных клеток, и визуализацию парасинаптического пространства с использованием флуоресцентных красителей, Четкая картина структурных изменений, происходящих в глиальном нервно-мышечном соединении, может наблюдаться в живом препарате. Здравствуйте, я Д. Бринк из лаборатории Ванессы по лечению БАС в Университете Британской Колумбии на факультете зоологии. Сегодня я покажу вам препарирование тканей и два метода мечения клеток для визуализации живых личинок в конфокальной микроскопии.

Мы используем эту процедуру в лаборатории для изучения глиальных клеток в синапсе нервных мышц. Итак, теперь о чем-то совершенно другом: подготовка тканей изнутри начинается со стадии личинок. Эта процедура будет продемонстрирована на блуждающих третьих личинках, потому что они большие и их легко препарировать, используются только три личинки, которые активно ползают.