ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Kawasaki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+midbrain+dopaminergic+neurons+from+ES+cells+by+stromal+cell-derived+inducing+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Induction of midbrain dopaminergic neurons from ES cells by stromal cell-derived inducing activity.</a> Neuron. 28, 31-40 (2000).</li>
<li>Perrier, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Derivation+of+midbrain+dopamine+neurons+from+human+embryonic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Derivation of midbrain dopamine neurons from human embryonic stem cells.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 101, 12543-12548 (2004).</li>
<li>Pruszak, J., Isacson, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Directed+differentiation+of+human+embryonic+stem+cells+into+dopaminergic+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Directed differentiation of human embryonic stem cells into dopaminergic neurons.</a> , John Wiley and Sons. (2007).</li>
<li>Pruszak, J., Sonntag, K. C., Aung, M. H., Sanchez-Pernaute, R., Isacson, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Markers+and+methods+for+cell+sorting+of+human+embryonic+stem+cell-derived+neural+cell+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Markers and methods for cell sorting of human embryonic stem cell-derived neural cell populations.</a> Stem Cells. 25, 2257-2268 (2007).</li>
<li>Sonntag, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+yield+of+neuroepithelial+precursors+and+midbrain-like+dopaminergic+neurons+from+human+embryonic+stem+cells+using+the+bone+morphogenic+protein+antagonist+noggin%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Enhanced yield of neuroepithelial precursors and midbrain-like dopaminergic neurons from human embryonic stem cells using the bone morphogenic protein antagonist noggin.</a> Stem Cells. 25, 411-418 (2007).</li>
<li>Kawasaki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+dopaminergic+neurons+and+pigmented+epithelia+from+primate+ES+cells+by+stromal+cell-derived+inducing+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Generation of dopaminergic neurons and pigmented epithelia from primate ES cells by stromal cell-derived inducing activity.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 99, 1580-1585 (2002).</li>
<li>Ko, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+embryonic+stem+cell-derived+neural+precursors+as+a+continuous%2C+stable%2C+and+on-demand+source+for+human+dopamine+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Human embryonic stem cell-derived neural precursors as a continuous, stable, and on-demand source for human dopamine neurons.</a> J Neurochem. 103, 1417-1429 (2007).</li>
<li>Hong, S., Kang, U. J., Isacson, O., Kim, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+precursors+derived+from+human+embryonic+stem+cells+maintain+long-term+proliferation+without+losing+the+potential+to+differentiate+into+all+three+neural+lineages%2C+including+dopaminergic+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Neural precursors derived from human embryonic stem cells maintain long-term proliferation without losing the potential to differentiate into all three neural lineages, including dopaminergic neurons.</a> J Neurochem. , (2007).</li>
<li>Zhang, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+subtype+specification+from+embryonic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Pathol%22%5BJournal%5D)">Neural subtype specification from embryonic stem cells.</a> Brain Pathol. 16, 132-142 (2006).</li>
<li>Pankratz, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Directed+neural+differentiation+of+human+embryonic+stem+cells+via+an+obligated+primitive+anterior+stage%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Directed neural differentiation of human embryonic stem cells via an obligated primitive anterior stage.</a> Stem Cells. 25, 1511-1520 (2007).</li>
<li>Lazzari, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+derivation+of+neural+rosettes+from+cloned+bovine+blastocysts%3A+a+model+of+early+neurulation+events+and+neural+crest+specification+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Direct derivation of neural rosettes from cloned bovine blastocysts: a model of early neurulation events and neural crest specification in vitro.</a> Stem Cells. 24, 2514-2521 (2006).</li>
<li>Pomp, O., Brokhman, I., Ben-Dor, I., Reubinoff, B., Goldstein, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+peripheral+sensory+and+sympathetic+neurons+and+neural+crest+cells+from+human+embryonic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Generation of peripheral sensory and sympathetic neurons and neural crest cells from human embryonic stem cells.</a> Stem Cells. 23, 923-930 (2005).</li>
</ol>

Распространение человеческих эмбриональных стволовых (ЭС) клеток

Propagation of Human Embryonic Stem (ES) Cells

Здравствуйте, меня зовут Лорен Дион. Я руковожу центром по культивированию человеческих стволовых клеток Amgen в MGH. Да, я Лорен, я руковожу центром по культивированию человеческих стволовых клеток AM в MGH.Я работаю с человеческими эмбриональными стволовыми клетками уже несколько лет, начиная с того времени, когда я был постдоком в лаборатории Джорджа Де четыре года назад. На данный момент у нас есть две клеточные линии, H1 и H9, обе из какого-то источника. Способ, которым мы расширяем или поддерживаем эти клетки в культуре, а точнее, способ, которым мы проводим пассирование этих клеток, заключается в использовании коллагеназы.Обычно в течение первых нескольких пассажей после посева клеток я использую метод пикирования колоний. Таким образом, я могу под микроскопом определить, какие колонии выглядят жизнеспособными, дифференцированными и имеют правильную форму; я собираю только такие колонии, разделяю их на несколько фрагментов и переношу в новый флакон. Колонии, которые выглядят недостаточно дифференцированными, я просто оставляю без внимания.Другой способ пассирования клеток — использование трипсина. Здесь я не применяю этот метод. Полагаю, что коллагеназа несколько безопаснее, так как стволовые клетки человека плохо переносят индивидуализацию или пребывание в одиночестве.Таким образом, если вы используете трипсин слишком долго, например, в течение трех-четырех минут, как это делается для других типов клеток, стволовые клетки человека будут отделены друг от друга, и большинство из них погибнет, дифференцируется или просто не прикрепится к поверхности. Следовательно, важно поддерживать клетки в виде кластеров; они не должны находиться в колбе по отдельности.Таким образом, преимущество использования коллагеназы заключается в том, что клетки сохраняются в виде пластов. При использовании трипсинизации вы отбираете только те клетки, которые выживут в этом очень жестком процессе дезопсонизации. Как правило, такие клетки обладают очень высокой пролиферативной активностью.Таким образом, вы можете адаптировать свои клетки к обработке трипсином. Проблема заключается в том, что некоторые клетки ведут себя иначе и делятся гораздо быстрее. Существует риск возникновения хромосомных аномалий вследствие такого интенсивного процесса деления.Таким образом, вы утверждаете, что этот процесс может вызвать селекцию наиболее пролиферирующих клеток в культуре. Верно. Они более активны и, вероятно, обладают более высокими показателями выживаемости по сравнению с другими клетками. Следовательно, после пролиферации, по сути, после культивирования в трипсине и нескольких пассажей, культура приобретает иные свойства, становясь другой культурой.Поэтому довольно сложно определить, являются ли они абсолютно идентичными. Если провести стандартный тест — скажем, проверить маркеры, обычные маркеры терминально дифференцированных клеток, такие как OC4, nano 1 60 SC4 C, C3, — все эти молекулы могут продолжать экспрессироваться. Если провести тест на формирование сфер (TER), эти клетки все еще могут дифференцироваться и формироваться подобно обычным клеткам.При анализе кариотипа могут быть обнаружены определенные отклонения, однако кариотип может оставаться в норме. Селективное преимущество может быть обусловлено всего одной мутацией, которую невозможно выявить с помощью кариотипирования. Таким образом, сам факт того, что они растут значительно быстрее, на мой взгляд, является более тревожным показателем.И если в какой-то момент мы захотим использовать эти клетки для трансплантации, я бы определенно не стал использовать клетки такого типа. Хорошо. Итак, не могли бы вы рассказать мне, в чем заключаются основные технические проблемы при использовании данной методики для пассирования клеток? То есть при использовании S, верно.Это занимает немного больше времени, и кроме того, поскольку клетки делятся медленнее, требуется гораздо больше времени, чтобы получить достаточное количество клеток для проведения эксперимента. Так что, я бы сказал, это просто менее удобно. Не могли бы вы вкратце рассказать о целях вашего эксперимента?Как использовать клетки CS? Итак, моя основная задача здесь — получить эндотелиальные клетки из стволовых клеток AB человека. И цель состоит в том, чтобы иметь возможность создавать кровь.Мы тесно сотрудничаем с лабораториями по биоинженерии тканей, одной из целей которых является создание тканей in vitro. Однако одним из сдерживающих факторов здесь является отсутствие кровеносных сосудов, пронизывающих эти ткани. Таким образом, если мы сможем привнести или поместить эндотелиальные клетки в эту ткань, это обеспечит более эффективный рост данной ткани.Таким образом, идея заключается в том, что для получения эндотелиальных клеток известно лишь несколько источников, таких как холодная или перфузионная кровь, но было бы интересно иметь другой источник клеток, например, ткани ушных раковин человека. Преимущество состоит в том, что клетки ушных раковин человека могут экспансироваться практически бесконечно, что позволяет модифицировать эти клетки, создать индуцибельную систему и использовать ее. Затем эти клетки станут клеточным компонентом вашего конечного продукта, вашего материала.

propagation-of-human-embryonic-stem-es-cells

Research

JoVE Journal

Biology

Биология

Способность эмбриональных стволовых клеток человека самостоятельно обновлять и дифференцироваться во все типы клеток тела показывает, что они открывают огромные перспективы для обоих медицинских приложений и в качестве инструмента исследования для решения фундаментальных вопросов в развитии и болезней. Здесь мы предлагаем краткий, шаг за шагом протокол для вывода человеческих эмбриональных стволовых клеток из эмбрионов на immunosurgical изоляции внутренней клеточной массы.

Вывод человеческих эмбриональных стволовых клеток на применение специфических иммунных сывороток в хирургии

Дифференциация ESC совпадает с камерного типа специфические изменения в структуре и составе хроматина. Обнаружение этих изменений дает ценную информацию о механизмах, которые определяют stemcellness и дифференцировки клеток. Хроматин иммунопреципитации (чип) представляет собой ценный метод препарировать молекулярные механизмы, лежащие дифференциации стволовых клеток.

Хроматин Иммунопреципитация из человеческих эмбриональных стволовых клеток

В этом видеоролике показано, как поддержать рост человеческих эмбриональных стволовых клеток (ЭСК) в фидер бесклеточных условиях и как непрерывно прохождения ЭСК в питатель бесклеточных условиях. Подтверждение чЭСК плюрипотентности, выращенные в питатель бесклеточных условиях с помощью иммунофлуоресценции микроскопии также продемонстрирована. Часть 3 из 3.

С MEFs к Матригель 3: пассажи из ЭСК Матригель на Матригель

Направленной дифференцировки ЭСК в специфические клетки вызвал большой интерес в регенеративной медицине. Мы предоставляем краткие, шаг за шагом протокол для...

Судьба картирование человеческих эмбриональных стволовых клеток на формирование тератома

Несмотря на последние достижения в области генетической модификации, трансфекции человеческих эмбриональных стволовых клеток (ЭСК) остается капризной процесса. Насколько нам известно, систематические и эффективные методы для трансфекции человеческих индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК) не сообщалось. Здесь мы описываем надежные протоколы эффективно трансфекции и nucleofect ИПСК человека.

Трансфекции и Nucleofecting человека индуцированных плюрипотентных стволовых клеток

Мы создали протокол для индукции нейробластов прямо из плюрипотентных эмбриональных стволовых клеток человека поддерживается при определенных условиях с малыми молекулами, что позволяет вывод большой запас человеческого нейронов и нейронных прародителей типов клеток в развивающемся ЦНС для нейронных ремонта.

Эффективное Вывод прав нейронов и нейронов прародителей из плюрипотентных эмбриональных стволовых клеток человека с малыми Индукционная Молекула

Одноместный ген клеток выражение анализ необходим для понимания стволовых клеток неоднородности.

Профилирования Индивидуальный человеческих эмбриональных стволовых клеток путем количественного RT-PCR

Линии Репортер сотовые предлагают средства для визуализации, отслеживать и изолировать клетки интерес гетерогенных популяций. Тем не менее, ген-таргетинга с использованием обычного гомологичной рекомбинации в человеческих эмбриональных стволовых клеток крайне неэффективно. Здесь мы опишем ориентации ЦНС среднего мозга конкретного фактора транскрипции Pitx3 локуса EGFP помощью цинка пальца нуклеазы повышенную гомологичной рекомбинации.

Цинк-палец Nuclease Enhanced генного таргетинга в человеческих эмбриональных стволовых клеток

Здесь представлен протокол для генерации одноклеточной культуры эмбриональных стволовых клеток человека и их последующей дифференциации в нервные клетки-прародители. Протокол прост, надежен, масштабируем и подходит для скрининга лекарственных средств и применения регенеративной медицины.

Эффективная нейронная дифференциация с использованием одноклеточной культуры эмбриональных стволовых клеток человека

Здесь показано, как в нашей лаборатории замерзает оттенки человеческих линий стволовых эмбриональных клеток.

Замораживание клеток человека ES

Узнайте методы поддержания и расширения культуры человеческих эмбриональных стволовых клеток линий H1 и H9 с использованием коллагеназы. Этот подход сохраняет плюрипотентность и обеспечивает стабильный рост клеток для исследований.

Распространение человеческих эмбриональных стволовых (ЭС) клеток

Больше видео