Идентификация белковых комплексов с количественной протеомики в CEREVISIAE С.

13K просмотров

Цитируется: 4

11:12 мин.

4 марта 2009 г.

10.3791/1225-v

4 марта 2009 г.

13K просмотров
 ,  , 

Здесь мы опишем новые количественные техники протеомики для идентификации белковых комплексов в CEREVISIAE Saccharomyces. В данном исследовании мы использовали метод SILAC вместе с аффинной очистки следует тандемной масс-спектрометрии для определения с высокой специфичностью обязательными партнерами ER белков, Scs2p.

Больше видео

Идентификация белковых комплексов

Chapters in this video

0:00

Название

0:45

Введение

1:17

Подготовка приманки и контрольного штамма SILAC

2:44

Растирание клеток

4:05

Предварительная очистка клеточного лизата

5:51

Элюция с IgG-бидс путем расщепления TEV-протеазой

6:45

Осаждение трихлоруксусной кислотой (ТХК)

9:00

Анализ образцов методом вестерн-блоттинга и/или окрашивания серебром

8:11

Осаждение этанолом/ацетатом

9:30

Репрезентативные результаты/исход

10:15

Заключение

Related Videos