Ассамблея, Загрузка и согласование аналитической сотовый Пример ультрацентрифуге

Привет, меня зовут Андреа Бальбо. Я работаю в группе Питера Шакса в Национальном институте здравоохранения. В этом видео мы продемонстрируем вам наши процедуры сборки, загрузки и юстировки ротора аналитической ультрацентрифужной ячейки для образцов.

Давайте начнем. Собранный. Вот компоненты аналитической ультрацентрифуги для образцов Внутри корпуса ячейки установлено 12-миллиметровое двухсекторное поле древесного угля, центральный элемент из эпона, который будет зажат между двумя окнами в сборке. Каждый оконный узел состоит из оконного уплотнителя, оконного вкладыша и окна, удерживаемого внутри оконного держателя.

Затем эти детали будут сдвинуты вниз внутрь корпуса ячейки, выровняв их шпоночные пазы с ключом, который находится внутри корпуса корпуса, прокладкой корпуса, а затем винтовое кольцо закрыло ячейку образца с крутящим моментом от 120 до 140 дюймов фунтов. После загрузки образца в эталон две прокладки пробки корпуса и заглушка корпуса герметизируют загрузочные отверстия ячейки, чтобы избежать артефактов сканирования, утечек и поломок во время экспериментов, крайне важно, чтобы все компоненты были чистыми, сухими, пылевыми, свободными и в наилучшем состоянии, часто проверяйте и заменяйте при необходимости. Вам также понадобятся аналитическая ультрацентрифуга, титановый ротор с четырьмя отверстиями, лабораторные весы, динамометрический ключ с читаемым циферблатом и динамометрической стойкой, противовес и противовесы, плоская отвертка, пара щипцов, пипетка объемом 200 микролитров с длинным коническим наконечником для пипетки, инструменты для юстировки и смазка для спиннингового покрытия.

Мы начинаем построение образца ячейки со сборки двух оконных сборок. Сначала поместите оконный уплотнитель в нижнюю часть оконного держателя. Затем расположите оконный вкладыш или иногда его называют оконной подушкой внутри оконного держателя так, чтобы отверстие вкладыша было противоположно шпоночному пазу держателя под небольшим углом.

Затем поместите окно в держатель, совместив отметку в виде надписи на окне с шпоночным пазом оконного держателя. Слегка надавите на самые края с обеих сторон окна. Чтобы обеспечить надлежащую герметизацию и точный тверкинг ячейки с образцом, мы слегка покрываем прокладку корпуса в винтовом кольце.

С помощью смазки для пальто нанесите очень небольшое количество пальто между большим и указательным пальцами. Покройте резьбу винтового кольца тонкой, невидимой пленкой прядения. Аналогичным образом покройте прокладку корпуса.

Сотрите видимую смазку. Начать сборку образца ячейки. Вставьте одно окно в сборе окном вверх к себе в корпус ячейки, совместив шпоночный паз с ключом корпуса.

Совместите центральный шпоночный паз с ключом корпуса и позвольте ему аккуратно опуститься на верхнюю часть оконного узла внутри корпуса. Никогда не используйте какой-либо инструмент для проталкивания центрального элемента в корпус ячейки. Это может привести к необратимому повреждению центрального элемента, что приведет к экспериментам по хранению утечек.

Поверните второе окно в сборе так, чтобы окно было обращено к центру и от себя. Совместите шпоночный паз с корпусным ключом и сдвиньте его вниз поверх центрального элемента. Сверху поместите прокладку корпуса.

Затем закрутите кольцо так, чтобы было видно слово out. С помощью пальцев. Затем юстировочным инструментом вручную затяните винтовое кольцо.

Иногда центральный элемент не легко скользит в корпусной цилиндр. Вы можете сначала выровнять его, а затем поместить поверх него второй оконный узел. Оказывая мягкое давление вниз на оконный узел.

Вы можете одновременно вставлять и то, и другое в корпус ячейки. Таким образом, мы избегаем прямого нажатия на центральный элемент. Сейчас самое время поискать в камере пыль, ворсинки и отпечатки пальцев.

Вы также заметите кольца Ньютона, которые указывают на то, что между центральным элементом и окнами все еще есть воздух. Они исчезнут после затяжки с поднятым винтовым кольцом и видимым словом. Поместите ячейку с образцом полностью внутрь ячейки.

Моментная цанга динамометрической стойки. Удерживайте ячейку на месте, оказывая постоянное давление на ручку подставки с крутящим моментом. Одним непрерывным движением затяните винтовое кольцо с усилием от 120 до 140 дюймов фунтов.

Отпустите ручку динамометрической стойки и осторожно снимите ячейку с образцом. Мы обычно загружаем объем 400 микролитров в каждый сектор 12-миллиметрового центрального элемента. С помощью пипетки объемом 200 микролитров расположите ячейку с образцом так, чтобы загрузочные отверстия находились сверху, а на винтовом кольце было видно слово.

Сдвиньте наконечник пипетки наполовину вниз в левый сектор центрального элемента через загрузочные отверстия и медленно выдайте 200 микролитров эталонного раствора. Повторите один раз, чтобы набрать в общей сложности 400 микролитров, используя тот же наконечник для пипетки и ту же технику, осторожно и медленно. Заполните правый сектор центрального элемента 400 микролитрами раствора образца.

Крайне важно максимально точно сопоставить объемы эталонных и образцовых решений. Плотно прилегайте наконечник пипетки к пипетке, медленно загружайте и диспенсируйте растворы, избегая попадания пузырьков, и используйте один и тот же наконечник для дозатора для обоих растворов. Все это помогает сохранить объемы равными для герметизации ячейки.

Плотно поместите две красные пробки корпуса в каждое загрузочное отверстие, убедившись, что они аккуратно расположены между центральным элементом и алюминиевым корпусом. Закройте каждое загрузочное отверстие заглушкой корпуса и затяните вручную небольшой отверткой с плоской головкой. Перед загрузкой ротора убедитесь, что противовес и ячейка, которая будет находиться напротив противовеса, находятся в пределах 0,5 грамма друг от друга по весу.

Начните с нулевого баланса. Сначала взвесьте образец ячейки, которая будет находиться в положении напротив противовесов. Разорвите весы, чтобы вычесть вес образца ячейки.

Затем взвесьте противовесы. Здесь мы обнаруживаем, что противовес на 4,193 грамма легче ячейки образца. Выберите четырехграммовый груз противовеса и вкрутите его в крепежное отверстие противовеса, следя за тем, чтобы он не выступал сверху.

Переберите противовес, чтобы убедиться, что конечный вес не превышает 0,5 грамма. С помощью ротора с четырьмя отверстиями установите противовес в четвертое положение так, чтобы белая стрелка была видна и указывала в направлении центробежной силы. Используя инструмент для выравнивания, убедитесь, что он полностью находится внутри ротора.

Расположите ячейку для весов так, чтобы заглушки корпуса были обращены к центру ротора, а на винтовом кольце было видно слово. Опять же, используя инструмент для выравнивания, убедитесь, что он полностью находится внутри ротора. Вид снизу ротора.

Выровняйте внутреннюю часть. Начертайте, отметьте ближайшую к центру ротора метку с помощью метки на противовесе с помощью инструмента для выравнивания. Таким же образом выровняйте ячейку образца во втором положении.

После того, как все ячейки выровнены, ротор готов к размещению в камере центрифуги.