February 25th, 2007
Меня зовут Войя Фридман. Я являюсь младшим научным сотрудником Принстонского университета. И сегодня я расскажу вам о нескольких протоколах, которые я разработал для трансинфекции, чтобы сначала изолировать, вернуться из вертолета инфицированных мух, а позже помочь ввести вертолетный корм незатронутым рейсам.
Так что, в основном, это очень простой протокол, чтобы изолировать его для основ. И вы будете использовать это устройство, из mepo, которое содержит фильтр, который идет поверх E.So, который вам в основном нужно поставить, мы начинаем примерно с сотни мух. Вы удаляете мух, помещаете их в фильтрующее устройство, вы можете просто использовать воронку, и это очень легко добавит нашу другую посадку на этом устройстве и промоет его 70% этанолом.
Вы просто берете, убираете будущее, вы можете выбросить этанол, а затем, после трехкратной последней стирки, вы делаете это с молекулярной водой, потому что вы не хотите, чтобы там были бактерии со следами этанола. Ну, а потом вы просто подходите к двери нового оружия и, а затем крутитесь на микро, настоящей микро в течение двух минут. А позже о том, как вы можете это внедрить. Его кормят только непораженные мухи.
Итак, в основном возьмите двойную клейкую ленту, и обычно эти двойные клейкие ленты имеют две стороны, одна сторона является наклейкой, а другая — это наклейка. Так что оставьте наклейку стороной вверх, потому что это та сторона, которую вы собираетесь приклеить и которая летит поверх нее. И в основном вы, газовый аппарат, если у вас есть этот свет сверху, у вас не будет газового потока, и мухи вы проснуетесь, если они находятся на вершине слайда.
Так что можно просто направлять поток, сделав немного вытяжку, немного камеру с помощью скотча. Затем вы направляете газ на мух. Итак, вы помещаете свой свет сюда с помощью ленты, и у вас есть ваши мухи.
Наклейте мушек на верхнюю часть ленты, все они имеют одинаковую ориентацию, и положите их голову в направлении, откуда вы будете вводить иглу. Потому что тогда вы можете просто пролететь над крылом, убедиться, что поскольку они летают, вы не хотите летать. Если они проснулись во время процедуры, не хотите, чтобы они уходили.
Поэтому убедитесь, что вы немного надавливаете на крылья мухи на хвосте. И ничего страшного, если у них повредятся крылья. И когда вы избавитесь, когда вы сделаете мухам инъекцию, скорее всего, они все равно потеряют свои крылья, поэтому они выживут.
Это может, это может быть полезно, потому что вы не потеряете мух, поэтому он наносит минеральное масло на микрометр для задней части иглы, затем на полюс инъекции иглы, а затем, вы можете просто отрегулировать давление, чтобы подвести материал к кончику иглы. Я делал инъекции где-то от 10 до 15 нанолитров, но столько, сколько я буду последователен. Итак, одна важная деталь этого эксперимента заключается в том, что муха, как только аппликатор вводится, когда вы увидели, игла должна пройти как можно дальше через верхнюю часть живота.
Потому что здесь, в основном, когда игла проникает, у вас есть а, а, а, а, большее пространство для подъема и спуска. И в принципе, если она находится близко, ближе к кутикуле, маловероятно, что они проникнут в жизненно важные органы во время полета. Весьма вероятно, что вы вряд ли проделаете дыру в животе, например, если это убьет полет, на котором вы проводите операцию.
Меня зовут Войя Фридман. Я являюсь младшим научным сотрудником Принстонского университета в лаборатории Эрика Хелса. И сегодня я хотел бы рассказать вам об этом протоколе, который вы только что видели, о демонстрации.
Так что этот протокол был сделан, потому что мы хотели доказать, что UBA способен проникать через ткани. Таким образом, UBA является одним из самых успешных внутриклеточных организмов на земле. Заражает от 20 до 70% насекомых и множество частиц.
И это также очень важно с точки зрения болезней человека, потому что также заражаются нематоды, которые передают такие болезни, как речная слепота или s и ssis. Так вот, и ОСА – это наше обязательное эндо в, у этих червей. И существует большой, очень большой интерес к использованию CCA также в качестве средства борьбы с паразитарными болезнями, передаваемыми комарами и комарами, а также комарами, такими как малярия и лихорадка денге.
Итак, этот, этот, этот протокол в основном был разработан, чтобы показать, что как только CCA попадает внутрь брюшной полости мухи, они могут пересекать ткани и достигать микроба. Итак, в основном то, что вы можете видеть здесь, это завязь дрозофилы, и вернуться назад, как только она присутствует в ее листе, она может скрещиваться с розовым перониалом. Она находится вокруг яичника.
А затем они пересекают мышечный слой. И на самом деле, одним из первых мест, куда они попадают внутрь яичника, является изображение соматических стволовых клеток. И тогда они могут достичь зародышевой линии.
И эти бактерии передаются так же, как митохондрии передаются через материнские растения, присутствующие в яйцеклетке. Поэтому, конечно, они должны присутствовать в зародышевой линии. Вот почему был разработан этот протокол.
И этот протокол может быть очень полезен в основном традиционным способом, которым люди пытаются трансинфицировать wbaa, в основном принимают wbaa и вводят новый вид насекомых. Это будет происходить через микроинъекции в эмбрион. Но они гораздо сложнее.
И в основном здесь мы просто пользуемся преимуществами биологии, поскольку они способны проникать через ткани стволовых клеток и переходить в ткани стволовых клеток, через зародышевую линию. Так что это облегчает получение UBA от определенных видов насекомых, которые инфицированы, и они могут передаваться неинфицированным видам. Наверное, я думаю, дело в самой инъекции.
В принципе, вам нужно быть осторожным, чтобы мобилизовать муху как можно лучше. Мы используем двустороннюю клейкую ленту, и вам нужно проникнуть в иглу в основном как можно ближе к мухе, как можно ближе к мушке, чтобы вы не углубились. И менее вероятно, что мы убьем муху после того, как они проведут операцию.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
В этой статье представлены протоколы, разработанные для выделения и инъекции специфического агента в зараженных мух. Описанные методы являются прямыми и используют специализированное устройство для эффективной изоляции.
This protocol enables tissue-crossing bacterial transfer in Drosophila, supporting mechanistic de-risking in target validation for intracellular symbiont-based interventions. By demonstrating germ-line transmission via somatic stem cell colonization, it provides a predictive model for evaluating Wolbachia-driven pathogen blocking strategies. The approach reduces reliance on complex embryonic microinjection, improving scalability in preclinical screening workflows.
The method fits within early discovery to preclinical transition, enabling symbiont characterization prior to vector-based delivery system development.