Name: Количественный ПЦР в реальном времени использованием Thermo Scientific Solaris КПЦР Пробирной (Видео) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-06-17T17:04:00.000+00:00
Duration: 9 min 21 s
Description: Узнайте метод количественного ПЦР в реальном времени для анализа экспрессии генов с использованием Solaris-проб. Этот протокол обеспечивает высокую специфичность и воспроизводимость результатов.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. Thermo Scientific Solaris КПЦР Пробирной Дизайн Алгоритм <ol><li> Алгоритм, используемый в конструкции Solaris КПЦР зонд / пар праймеров регулирует Tm каждого компонента тем самым позволяя универсальных условий езды на велосипеде. Включение МГБ, или незначительные паз обязательными, группу в зонд увеличивает Tm и позволяет для более коротких зондов быть рассчитаны на большую гибкость и производительность анализа. Как следует из их названия, MGBs представляют собой класс антибиотиков, которые могут вписаться в малом желобе ДНК спирали. MGBs крепятся к 3 или 5 конец ДНК-зонда. В растворе флуоресценции FAM корреспондент зонд гасится Затмение Темный утоления. Когда зонд связывается с целевой последовательности, в результате изменений в 3-D конформация зонд с позволяет сильный флуоресцентный сигнал. Связывание ДНК-зонда к целевой последовательности стабилизируется МГБ, которая позволяет использовать весьма специфичны, короче зондов, сохраняя при соответствующей температуре плавления для ПЦР. Таким образом, обнаружение сигналов происходит во время отжига фазы цель усиления. Во время расширения шаг, МГБ зонд дистанцируется и флуоресценции опять угасает. Потому что зонд непричастности, это не влияет на эффективность ПЦР. </li><li> Еще одна особенность алгоритма Solaris является использование Superbases. Superbases изменяются баз, которые улучшили обязательных способностей для повышения стабильности AT облигаций и устранение Г. Г. самоассоциации в гуанин богатых последовательностей. Более того, они не утолить смежных флуорофоров приводится в 5 конца. Эти базы размещены выборочно, в соответствии с алгоритмом, расширить доступность целевой последовательности. Это дает возможность использовать последовательности, такие как GC богатых регионов, которые иначе были бы избегать в праймеров и зондов. </li><li> Когда это возможно, алгоритм Solaris включает в экзоне узел охватывает регионы в целевой сайт. Это увеличивает специфичность, избегая усиление загрязнения геномной ДНК. </li><li> Важно отметить, что алгоритм также определяет консенсусной последовательности для всех известных вариантов сращивания, так, что все охвачены одной зонд / грунтовка множество. Таким образом, только один анализа необходимы для конкретного гена. </li><li> Наконец, Пробирной Solaris КПЦР дизайн алгоритм использует очень жесткие параметры для критических соображений дизайна в том числе ГК содержания, длина, Tm, и участки однородного нуклеотидов. В результате последовательностей BLAST проанализированы на специфичность, используя 3 различных баз данных: геномные, стенограммы, и псевдогена. </li></ol> 2. Получение Solaris Реагенты <ol><li> Для получения соответствующего Solaris реагентов, посетите <a href="http://dharmacon.com">www.thermo.com / Solaris</a> </li><li> Однажды на сайт нажмите на кнопку "GENEius Поиск товара". Чтобы перейти непосредственно к GENEius поиска, перейдите на <a href="http://www.dharmacon.com/catalogsearch/consolidatedsearch.aspx">www.thermo.com / SolarisSearch</a> </li><li> Щелкните в окне поиска запрос и выбрать подходящий организм цели. </li><li> Поиск GENEius продукт может обрабатывать множество различных идентификаторов гена. Здесь, введите один из предложенных условий поиска, чтобы найти интересующего гена, в том числе работе Seq присоединении, Гена ID, Гена Symbol, Гена Описание, ID Сэнгер или присоединение номер или номер по каталогу. Затем нажмите на кнопку "Поиск". </li><li> Определить интерес гена и нажмите на кнопку "Выбор" на левой стороне. Откроется окно, которое показывает различные Thermo Scientific продукты, доступные для гена. В разделе "Продукция" выберите "КПЦР Обнаружение" Tab. </li><li> Под "Солярис экспрессии генов пробирной" заголовок, вы увидите одну оптимальную конструкцию зонда Solaris / грунтовки анализа. Этот анализ будет охватывать все известные варианты сплайсинга вашего гена-мишени. Выбрать требуемое количество. Они доступны в 100, 200, 400 и 1000 X 25 мкл реакции (если анализ будет идентифицирован как сделанные на заказ, 100 размер упаковки будет недоступна). Нажмите на кнопку "Добавить в корзину". </li><li> Далее, выберите необходимое сочетание мастер для термоциклер, который будет использоваться. Чтобы определить, какой мастер микс будет работать лучше всего с машины доступны, нажмите кнопку "Выясните, какие Master Mix лучше всего работает с вашей Cycler ПЦР!" </li><li> Найти КПЦР циклер, который будет использоваться в меню, чтобы определить, какое сочетание в использовании. </li><li> Вернуться в окно поиска продукта GENEius и выберите необходимое сочетание хозяина. Мастер смесь поставляется в 100, 200, 400 и 1000 размеров реакции. Нажмите кнопку "Добавить в корзину". </li><li> Предлагаемая ссылка генов и оборотной кДНК комплекты синтеза можно также заказать для полной QRT-PCR анализа. </li><li> Когда Solaris КПЦР реагентов приходят, хранить их при температуре -20 ° С до готовности к использованию. Следующие реагенты должны быть получены: 20X раствор, содержащий два праймера при условии, при 800 нм каждый и один ген конкретных зондом при условии, при 200 нм, sequENCE информации как для зонда и грунтовки, и Solaris КПЦР экспрессии генов Master Mix в 2 раза концентрации. Solaris КПЦР Анализы экспрессии генов стабильны в течение минимум 12 месяцев. Избегать повторного замораживания оттаивания. </li></ol> 3. КПЦР установки <ol><li> Начните КПЦР протокол с кДНК. Всего РНК должны быть извлечены при помощи метода спин колонки. Thermo Scientific Verso кДНК комплект синтеза рекомендуется для обратной транскрипции для получения кДНК. </li><li> Подготовка к КПЦР таянием грунтов, зонды, и мастер-микс на льду. Кроме того, иметь под рукой ПЦР воды класса и непрозрачных белых пластин КПЦР, что может улучшить чувствительность ПЦР в реальном времени. </li><li> Мастер смесь содержит все компоненты для ПЦР в реальном времени в том числе: 1) Термо-Start ДНК-полимеразы, горячего старта версия Thermoprime ДНК-полимеразы. Этот тип полимераза используется для предотвращения неспецифического усиления в ходе реакции, настройке и требует активации шаг при 95 ° С 15 мин. 2) дНТФ в смеси Solaris Master, dTTP заменяет dUTP максимального усиления эффективности 3) Собственные буфера реакции, оптимизированный для работы с Solaris грунт / зонд анализов. Эта реакция буфер содержит синюю краску, чтобы увеличить контраст между реагентом и пластика. 4) ROX, если ваш прибор требует КПЦР ROX. </li><li> После решения имеют талые, перемешать, щелкая трубку (не вихря). Спиновые их вниз, чтобы предотвратить потерю реагента. </li><li> Далее, подготовить 15 мл стерильную пробирку Сокол создать реакционную смесь для интересующего гена, плюс один для ссылки гена, расширение масштабов в зависимости от количества образцов. Подготовка достаточно таких, что три повторяет могут быть подготовлены для каждого образца, в том числе не шаблон управления (NTC) и стандартных образцов кривой, если стандартный метод кривой будет использоваться для анализа. </li><li> Для каждого образца работают на 96-луночный планшет, смешайте следующие: 5 мкл 2X Solaris Mix КПЦР Master, 0,5 мкл Solaris Primer / зонда набор (20X) и ПЦР-класса водой так, что конечный объем реакции, когда-то кДНК добавляется будет 25 мкл. Для каждого образца работают на 384-луночного планшета смеси следующие: 12,5 мкл 2X Solaris Mix КПЦР Мастер, 1,25 мкл Solaris Primer / зонда набор (20X) и ПЦР-класса водой так, что конечный объем реакции, когда-то кДНК Добавлен будет 10 мкл. </li><li> Использование нескольких дозаторов канал, передача мастером микс на соответствующие лунки пластины. Синего красителя, включенные в мастер смесь поможет в отслеживании пипетирования прогресса в белых пластин. Затем добавьте 1-5 мкл кДНК шаблона (для 96-луночного планшета) или 1-2 мкл кДНК шаблона (для 384-луночного планшета). Внесите вверх и вниз, чтобы смешаться. Место пластины в центрифуге и спином вниз, чтобы удалить пузырьки, так как они будут мешать флуоресценции чтениях. </li><li> Программа термоциклер: фермент должен быть активирован с 95 ° С 15 мин (1 цикл). Затем 40 циклов 95 ° C, денатурация в течение 15 секунд, а отжиг и расширения при 60 ° С в течение 60 секунд. </li><li> Место пластины в приборе КПЦР. Запустите программу. </li></ol> Представитель КПЦР результатов с помощью ОС Solaris <img src="/files/ftp_upload/1700/1700fig1.jpg" alt="Рисунок 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Рисунок 1"> Рисунок 1. Solaris анализы дают надежное обнаружение даже при очень низких концентрациях вход, если судить по эффективности ПЦР и r2 значения. Десять 10-кратного разведения кДНК синтезировали из синтетических ампликона РНК последовательности или последовательности ДНК ампликона усиливался по инструменту ABI 7900HT использованием Solaris КПЦР Анализ экспрессии генов для F2RL1 или CDC20, соответственно. Логарифмической шкале усиления кривые и стандартные кривые приведены вместе с исполнением каждого теста в том числе эффективность, r2 значения, динамический диапазон из 10 log10 разведения, а нижний предел обнаружения. <img src="/files/ftp_upload/1700/1700fig2.jpg" alt="Рисунок 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Рисунок 2"> Рисунок 2. Solaris анализы дают согласующиеся результаты даже между разными исследователями и лабораториями. siRNAs ориентации ALDOA и PPIB, а также без ориентации управления (NTC), были трансфекции в клетки HeLa при 100, 10, 1 и 0,1 нМ конечные концентрации. Клетки собирают и общей РНК, выделенной 48 часов после лечения. кДНК синтезировали использованием Thermo Scientific Verso Kit Синтез кДНК. Аликвоту кДНК амплифицировали в двух географически разделенных лабораторий, использующих Solaris КПЦР Анализы экспрессии генов для обнаружения ALDOA, PPIB и GAPDH на Рош LightCycler 480 (384-а) платформы. Нокдаун был рассчитан с использованием метода ΔΔCq (нормированная на GAPDH ссылкой гена и NTC-обработанных клеток). Же уровень нокдаун были продемонстрированы как для гена цели между двумя исследователями на обоих сайтах.

Авторы этой статьи являются сотрудники компании Thermo Scientific.

Thermo Scientific Solaris КПЦР Анализы обеспечивают простой, улучшенный метод для выполнения КПЦР анализа. Использование высоких алгоритм строгости, включая МГБ технологии и Superbases, эти грунтовки и зонда набора максимальной точности и надежности КПЦР экспериментов. Один грунтовки и зонда набор распознает все известные сращивания вариантов данного гена. Целевой сайт, по возможности, включает в себя экзона охватывающей регионы, чтобы геномной ДНК не усиливается. Эти особенности делают возможным запуск многочисленных проб одновременно, что значительно сокращает время, необходимое для выполнения сложных экспериментов. Так как мастер сочетания синего цвета, можно использовать белые непрозрачные пластины, которые повышают чувствительность КПЦР, не теряя из пипетки. Взятые все вместе, конструктивные особенности Пробирной Solaris КПЦР сделать этот роман анализа КПЦР простой, но высокопроизводительный анализ, который является одновременно конкретным и надежным.

Количественный ПЦР в реальном времени использованием thermo scientific solaris КПЦР Пробирной

Quantitative Real-Time PCR using the Thermo Scientific Solaris qPCR Assay

Гена Solaris КПЦР Выражение Пробирной является новым типом грунта / зонд установлен, предназначенных для упрощения процесса КПЦР, сохраняя при этом чувствительность и точность анализа. Эти грунтовки / зонд наборы заранее разработанных до&gt; 98% от человека и мыши геномы и особенности значительные улучшения по сравнению с предыдущим доступных технологий. Эти улучшения стали возможны благодаря алгоритму новый дизайн, разработанный Thermo Scientific эксперты биоинформатики. Несколько удобных функций, которые были включены в Пробирной Solaris КПЦР рационализировать процесс выполнения количественных ПЦР в реальном времени. Во-первых, протокол похоже на обычно используемые альтернативы, так что методы, используемые во время КПЦР, вероятно, будут знакомы. Во-вторых, мастер сочетание синего цвета, что делает настройку КПЦР реакции легче отследить. В-третьих, теплового режима езды на велосипеде одинаково для всех анализов (генов), что позволяет запускать многие образцы в то время и снижает вероятность ошибки. Наконец, зонд и информации грунтовки последовательности при условии, упрощение процесса публикации. Здесь мы показываем, как получить соответствующие реагенты Solaris использованием GENEius функцию поиска продукт найден в заказе веб-сайта (www.thermo.com / Solaris) и как использовать Solaris реагентов для выполнения КПЦР с помощью стандартного метода кривой.

Solaris КПЦР Анализы экспрессии генов являются новыми заранее разработанных КПЦР грунт / зонд комбинаций, предназначенных для упрощения процесса КПЦР без ущерба для специфики и надежность анализа.

Количественный ПЦР в реальном времени использованием Thermo Scientific Solaris КПЦР Пробирной

Набор для анализа экспрессии генов Solaris qPCR представляет собой новый тип наборов праймер/зонд, разработанный для упрощения процесса количественной ПЦР (кПЦР) при сохранении чувствительности и...

В данной видеостатье демонстрируется проведение ПЦР в реальном времени с использованием наборов Solaris QPCR. Наборы Solaris QPCR представляют собой ген-специфичные пары праймеров и зондов, разработанные для обнаружения всех известных сплайс-вариантов определенного гена. В универсальных условиях термоциклирования зонд Solaris содержит мотив связывания с малой бороздкой ДНК и репортер FAM на 5'-конце, а также затемнитель (dark quencher) на 3'-конце.На этапе денатурации при проведении ПЦР в реальном времени зонд остается в растворе, и флуоресценция репортера FAM гасится. В фазах отжига и элонгации праймеры и зонд связываются с целевой последовательностью, и гаситель отделяется от FAM. Затем FAM дает сильный флуоресцентный сигнал; когда зонд диссоциирует, флуоресценция снова гаснет.Результаты ПЦР в реальном времени демонстрируют чувствительность, специфичность и воспроизводимость этого эффективного анализа. Здравствуйте, я Джеймс Ковино из отдела исследований и разработок Thermo Fisher Scientific в Лафайетте, штат Колорадо. Сегодня мы покажем вам процедуру постановки стандартной реакции количественной ПЦР с использованием реагентов для анализа экспрессии генов Lars QPCR.Мы используем данную процедуру в нашей лаборатории для изучения нокдауна целевых генов с помощью технологий РНК-интерференции. Итак, приступим. Тест-система Solaris qPCR assay STEM характеризуется уникальным алгоритмом, в котором используются технологии MGB и super base, что позволяет применять один удобный анализ для 98% аннотированных генов человека и мыши.Как правило, дизайн ДНК-зондов и праймеров ограничен температурой плавления зонда, которая определяется количеством и типом оснований. Более длинные и богатые GC-парами последовательности имеют более высокую температуру плавления. Фрагмент, связывающийся с малой бороздкой и используемый в зондах Solaris, встраивается в малую бороздку спирали ДНК и стабилизирует взаимодействие зонда с целевой последовательностью.Это повышает температуру плавления, что позволяет использовать более короткие зонды. Алгоритм Solaris также селективно внедряет модифицированные нуклеотиды, называемые супербазами, для повышения стабильности AT-связей и устранения самоассоциации GG в гуанин-богатых последовательностях. Это позволяет использовать целевые последовательности, которые в противном случае пришлось бы исключить.Повышенная гибкость подбора последовательностей, обеспечиваемая использованием данных технологий, позволяет разрабатывать наборы праймеров и зондов, распознающих все известные сплайс-варианты одного гена. Следует отметить, что везде, где это было возможно, в целевой участок были включены области, перекрывающие границы экзонов, для повышения специфичности путем предотвращения амплификации контаминирующей геномной ДНК; полученные наборы праймеров и зондов были проанализированы с помощью BLAST по трем различным базам данных — геномной, транскриптомной и базе псевдогенов — для обеспечения специфичности. Кроме того, наборы праймеров и зондов Solaris были полностью оптимизированы таким образом, что условия циклирования для всех анализов QPCR идентичны, что позволяет оценивать экспрессию различных транскриптов в рамках одного цикла ПЦР.Для начала планирования эксперимента qPCR определите реагенты, необходимые для проведения qPCR исследуемого гена, используя интеллектуальный поиск продуктов, который доступен по адресу thermo.com/solaris. Нажмите в поле поискового запроса и выберите соответствующий целевой организм. Интеллектуальный поиск продуктов поддерживает работу со многими различными идентификаторами генов.Введите один из предложенных поисковых запросов для интересующего гена, затем нажмите «поиск», найдите нужный ген и нажмите «выбрать» (select) в левой части экрана. Откроется окно со списком доступных реагентов для данного гена. В разделе Solaris gene expression assay перейдите на вкладку «qPCR-детекция» (QPCR detection).Представлен оптимально разработанный праймерный анализ с использованием зонда Solaris. Этот один анализ позволит обнаружить все известные сплайс-варианты интересующего гена. После определения подходящего реагента для праймера выберите в меню амплификатор для QPCR и определите совместимую мастер-смесь: либо мастер-смесь с отдельным флаконом с пассивным референсным красителем ROX, либо смесь ROX, либо смесь с низким содержанием ROX.В данной работе будет использоваться прибор Roche LightCycler 480, поэтому будет применяться набор Master Mix PLUS. Также важно убедиться, что в исследование включен соответствующий референсный ген. После получения всех реагентов Solaris qPCR будет использоваться B2M.Их следует хранить при температуре -20 °C до использования. Реагенты стабильны в течение как минимум 12 месяцев. Следует избегать повторных циклов замораживания и оттаивания.Подготовьте кДНК для кПЦР, проведя реакции обратной транскрипции образцов РНК. После подготовки кДНК разморозьте на льду реагенты Solaris assay и мастер-микс. Мастер-микс содержит все компоненты для количественной ПЦР, за исключением ген-специфичного набора; компоненты матрицы включают термостат, ДНК-полимеразу dn, TPS rocks.Если прибор для QPCR требует использования специальных условий и проприетарного реакционного буфера, содержащего внутренний синий краситель, также подготовьте воду степени чистоты для ПЦР и планшеты для QPCR. После размораживания растворов перемешайте их легким постукиванием, затем кратковременно центрифугируйте, чтобы предотвратить потерю реагентов. Далее в пробирке объемом 15 мл приготовьте 1х смесь для анализа Solaris QPCR и мастер-микс.Смешайте для требуемого количества образцов, которые будут нанесены на планшет с 384 лунками, 5 µL 2x мастер-микса, 0,5 µL 20X реагента Solaris assay и воду степени очистки для ПЦР таким образом, чтобы конечный объем в каждой лунке составил 10 µL. Перед добавлением кДНК обязательно подготовьте объем смеси, достаточный для трех повторностей каждого образца, включая контроль без матрицы (NTC) и контроль без обратной транскриптазы (no RT) для проверки реагентов на наличие загрязнений или contaminating genomic DNA соответственно. Затем перенесите смесь в стерильный резервуар.Затем с помощью многоканального дозатора перенесите соответствующий объем готовой мастер-смеси (1x) в нужные лунки ПЦР-планшета. При использовании белых планшетов внутренний синий краситель, входящий в состав мастер-смеси, поможет контролировать процесс дозирования. На одном планшете можно анализировать несколько библиотек кДНК и референсных генов, поскольку условия циклирования для всех образцов идентичны.После добавления 1x мастер-микса в соответствующие лунки, добавьте в каждую лунку разведенную матрицу CD NA так, чтобы конечный объем составил 10 microliters; перемешайте путем всасывания и вытеснения жидкости пипеткой. Плотно закройте планшет с помощью адгезивной или термосвариваемой пленки, как показано здесь.Поместите планшет в центрифугу и центрифугируйте его, чтобы осадить реагенты на дно лунок и удалить пузырьки воздуха, которые могут помешать программе считывания флуоресценции. В термоциклере полимераза с «горячим стартом», входящая в состав мастер-микса Solaris QPCR, должна быть активирована при 95 °C в течение 15 минут (один цикл), затем следует 40 циклов, включающих денатурацию при 95 °C в течение 15 секунд и отжиг с элонгацией при 60 °C в течение 60 секунд. Данный протокол одинаков для всех анализов Soliris QPCR, независимо от амплифицируемого гена.Наконец, поместите планшет в прибор для QPCR и запустите программу. На данном рисунке показана высокая эффективность тестов Solaris: было проведено амплифицирование 10 десятикратных разведений синтетической ДНК или кДНК с использованием тестов Solaris QPCR для анализа экспрессии генов CDC 20 и F two RL one; кривые амплификации в логарифмическом масштабе и стандартные кривые для десятикратных разведок (log 10) демонстрируют высокую эффективность анализа даже при низких концентрациях исходного материала.Эффективность каждого анализа оценивается по значению эффективности в квадрате, динамическому диапазону по шкале до 10, десятикратным разведениям (log 10) и нижнему пределу обнаружения. Представленные здесь данные демонстрируют воспроизводимость анализов Solaris. В данном случае аликвоты кДНК амплифицировали в двух географически удаленных лабораториях, используя наборы для анализа экспрессии генов Solaris QPCR и мастер-микс.Для двух целевых генов в обеих лабораториях были рассчитаны одинаковые уровни экспрессии. Мы только что продемонстрировали вам способ постановки стандартной реакции QPCR с использованием реагентов для анализа экспрессии генов Solaris QPCR. При проведении этого эксперимента важно помнить о необходимости приготовления мастер-миксов с правильной конечной концентрацией реагентов, а также о включении соответствующих биологических и/или технических повторностей.Кроме того, крайне важно настроить прибор для QPCR с правильными условиями термоциклирования для Solaris. На этом все. Спасибо за просмотр и удачи в ваших экспериментах.

quantitative-real-time-pcr-using-thermo-scientific-solaris-qpcr

Research

JoVE Journal

Biology

Биология

Мы продемонстрируем, настройки и анализа предварительного микроРНК 96-луночного массивы для КПЦР использованием роботов, а также вручную с помощью пипетки Thermo Scientific многоканальный Matrix.

Профилирование Предварительно микро-РНК и микроРНК с использованием количественных ПЦР в реальном времени (КПЦР) Массивы

Мы описываем протокол ПЦР в реальном времени к профилю микроРНК в спинномозговой жидкости (ликвора). За исключением протоколов экстракции РНК, процедура может быть расширена до РНК, выделенной из других жидкостей организма, культивируемых клеток или тканей образцов.

Спинномозговой жидкости профилирования микроРНК с использованием количественных ПЦР в реальном времени

Циркуляционные микроРНК недавно появились в перспективных и новых биомаркеров различных видов рака и других заболеваний. Цель этой статьи является обсуждение трех различных зондов на основе реального времени платформы и методы, которые доступны для количественной оценки и определить содержание циркулирующих микроРНК ПЦР.

Зонд на основе ПЦР в реальном времени подходов к количественному измерению микроРНК

Provided — это протокол для разработки анализа амплификации рекомбиназной полимеразы в реальном времени для количественного определения начальной концентрации образцов ДНК с использованием либо термоампликатора, либо микроскопа и нагревателя предметного столика. Также описана разработка системы внутреннего положительного контроля. Предоставляются скрипты для обработки необработанных флуоресцентных данных в реальном времени.

Развитие количественной рекомбиназу полимеразной амплификации с внутреннего положительного контроля

Этот протокол описывает высокопроизводительный анализ qRT-PCR для анализа сигнатур экспрессии ИФН I и III типов. Анализ различает одиночные пары оснований между очень похожими транскриптами этих генов. Благодаря пакетной сборке и роботизированному пипетированию анализы получаются последовательными и воспроизводимыми.

Высокая пропускная способность Количественный реальном времени RT-PCR анализа для определения профилей экспрессии типов I и III интерферона подтипов

Дизайнерские хромосомы проекта «Синтетический геном дрожжей», Sc2.0, можно отличить от их нативных аналогов с помощью анализа генотипирования на основе ПЦР под названием PCRTagging, который имеет конечную точку присутствия/отсутствия. В данной статье мы опишем высокопроизводительный метод обнаружения ПЦР в реальном времени для генотипирования PCRTag.

qPCRTag анализ - Высокая пропускная способность, ПЦР в реальном времени Анализ на Sc2.0 Генотипирование

Это время - и экономичным в vitro протокол, изучение механизмов приобретенных сопротивление целевых терапевтических агентов, который является весьма неудовлетворенный медицинского управления рака.

Ищет пути водитель приобрела устойчивость к таргетной терапии: лекарственно Subclone поколения и чувствительность, восстановление генов нокдаун

Быстрого и точного обнаружения патогенов растений на местах, особенно почвообитающих патогенных микроорганизмов, имеет решающее значение для предотвращения дальнейшего производства посевным материалом и распространения заболеваний растений в поле. Разработанный метод здесь, с помощью портативной системы обнаружения ПЦР в реальном времени позволяет на месте диагноз в полевых условиях.

На месте молекулярной обнаружение почвообитающих фитопатогенов, используя систему портативный ПЦР в реальном времени

Здесь представлен количественный протокол на основе полимеразной цепной реакции в реальном времени для определения родного микро-РНК-содержимого (Абсолютные/относительные) частиц липопротеинов. Кроме того, демонстрируется метод увеличения уровня микро-РНК, а также метод определения скорости поглощения частиц липопротеинов в сотовой сети.

Обогащение частиц липопротеинов коренных народов с микроРНК и последующее определение их абсолютной/относительной микроРНК содержание и их сотовой скорость передачи

Микрообъеме образцы количественно с помощью спектрофотометра система, которая использует природный поверхностного натяжения, чтобы сохранить образцы без использования кювет или капилляров. Динамический диапазон белков концентрации и скорость, с которой они могут быть измерены значительно повышаются с этим методом.

Микрообъеме концентрации белка Определение использованием NanoDrop 2000c Спектрофотометр

Узнайте метод количественного ПЦР в реальном времени для анализа экспрессии генов с использованием Solaris-проб. Этот протокол обеспечивает высокую специфичность и воспроизводимость результатов.

Количественный ПЦР в реальном времени использованием Thermo Scientific Solaris КПЦР Пробирной

Больше видео