Поперечные Сужение аорты у мышей

Эта процедура начинается с обезболивания мыши, подготовки ее к асептической операции и помещения ее в лежачее положение на грелке. Эндотрахеальная интубация проводится с помощью трубки PE 90, которая затем подключается к аппарату искусственной вентиляции легких для грызунов. Далее выполняется частичная торакотомия второго ребра и втягивается грудина.

Поперечная аорта идентифицируется и впоследствии перевязывается между безымянной и левой сонной артериями. Грудная клетка закрыта, за ней следует кожа с непрерывным рисунком швов. Наконец, эндотрахеальная трубка удаляется, и мышь восстанавливается.

Здравствуйте, я Анжела Даль Меда из лаборатории доктора Зандера Варса на кафедре молекулярной физиологии и биофизики в Медицинском колледже Бейлора. Сегодня мы покажем вам процедуру поперечного сужения аорты у мышей. Мы используем эту процедуру в нашей лаборатории для изучения механизмов, лежащих в основе гипертрофии сердца и развития сердечной недостаточности.

Итак, приступим. Перед началом операции по наложению поперечной аорты или операции необходимо продезинфицировать операционное поле 75% изопропиловым спиртом. Включите грелку и установите на нее нужную температуру.

Система, которую мы рекомендуем, представляет собой циркуляционный водяной насос для геймера, подключенный к термотерапевтической прокладке, которая поддерживается на уровне 37 плюс-минус один градус Цельсия. Перед операцией простерилизуйте хирургические инструменты в стерилизаторе с горячими шариками. Для проведения налоговой хирургической процедуры необходимы следующие хирургические инструменты.

Пара тупых ножниц, два грубо изогнутых щипца для поиска щипцов под углом 45 градусов, пара ножниц с наклонной пружиной, ретрактор грудной клетки и иглодержатель. Ватные аппликаторы также должны быть под рукой на случай кровотечения. Когда операционное поле подготовлено, можно приступать к интубации мыши.

При подготовке к интубации мышь обезболивают в индукционной камере, а для сбривания шерсти от линии шеи до середины груди используются машинки для стрижки волос. Положите мышь в лежачее положение на грелку. Важно поддерживать нормальную температуру тела во время операции, чтобы избежать резкого снижения частоты сердечных сокращений и возможной внезапной смерти.

Надавите на ногтевое ложе мыши, чтобы убедиться, что мышь полностью обезболилась. Поместите резиновую ленту на передние зубы животного, чтобы удлинить шею Используя изогнутые щипцы в одной руке, осторожно манипулируйте языком в сторону другой рукой. Вставьте трубку PE 90 в трахею.

Затем подключите эндотрахеальную трубку к аппарату искусственной вентиляции легких для грызунов с объемным циклом. Аппарат ИВЛ должен работать со скоростью от 125 до 150 вдохов в минуту и дыхательным объемом от 0,1 до 0,3 миллилитров в зависимости от массы тела мыши, дезинфицировать кожу внутри операционного поля раствором бетадина с последующим добавлением 70% спирта. Повторите эту процедуру три раза, чтобы предотвратить загрязнение операционного поля во время операции, накройте мышь стерильной простыней, оставив открытым только операционное поле.

Теперь мы готовы выполнить лигирование поперечной аорты во время этой хирургической процедуры. Анестезия поддерживается на уровне от 1,5 до 2% изофтора с концентрацией от 0,5 до одного литра в минуту, 100% кислорода. Проверьте правильный уровень анестезии, надавливая на ногтевое ложе мыши.

Для подтверждения отсутствия рефлекса токена. Начните операцию с выполнения частичной торакотомии. Разрежьте грудину, начиная с краниального конца вниз до уровня второго ребра.

С помощью хирургического микроскопа втяните грудину с помощью грудного ретрактора. Затем с помощью щипцов с тонким кончиком под углом 45 градусов аккуратно отделите вилочковую железу и жировую ткань от дуги аорты. После определения поперечной аорты поместите небольшой кусочек шелкового шва 6.0 между номинальной и левой сонными артериями.

Завяжите два свободных узла вокруг поперечной аорты и поместите небольшой кусочек тупой иглы 27 с половиной калибра. Параллельно пересадке аорты. Быстро завяжите первый узел на игле, за ним последует второй узел, а затем быстро извлеките иглу так, чтобы получилось сужение в 0,4 миллиметра в диаметре.

После того, как поперечная аорта будет перевязана, снимите ретрактор грудной клетки и зажмите отток аппарата искусственной вентиляции легких на две секунды. Чтобы осторожно повторно накачать легкие, закройте грудную клетку с помощью пролинового шва 6,0 с прерывистым рисунком шва. Наконец, закройте кожу с помощью пролинового шва 6.0 с непрерывным рисунком шва.

Для послеоперационной анальгезии. Введите мышке внутрибрюшинный бупренорфин. Если после операции есть признаки обезвоживания, внутрибрюшинно вводят от 0,3 до одного миллилитра стерильного физиологического раствора.

Постепенно опускайте анестезию в исходное положение. При появлении признаков спонтанного дыхания удалите эндотрахеальную трубку, затем переместите мышь в положение лежа и дайте ей восстановиться на грелке. Через неделю после поперечного сужения аорты мышь повторно обезболивают, чтобы определить степень перегрузки давлением, вызванной латингом поперечной аорты.

Анестезия и температура тела поддерживаются, как показано ранее. Поместите доплеровский щуп с частотой 20 МГц на левую и правую стороны шеи под углом 45 градусов. Для определения скоростей кровотока в сонной артерии мы используем компьютерный допплеровский сигнальный процессор для отображения и хранения допплеровских сигналов.

В зависимости от степени перегрузки давлением, необходимой для экспериментального протокола, для дальнейшего анализа включаются только мыши с соотношением потока правой сонной артерии или RC над левой сонной артерией или lc в определенном диапазоне. Например, умеренная степень перегрузки давлением приводит к соотношению пять к восьми, в то время как более жесткое сужение, приводящее к серьезной перегрузке давлением, приводит к соотношению восемь к 10. Однако ожидается, что фиктивное животное будет иметь соотношение около единицы.

Типичная хирургическая выживаемость после TAC у мышей дикого типа составляет от 80 до 90% успеха. Хирургическое перевязка поперечной аорты приведет к соотношению скоростей допплеровского потока между правой и левой сонной артерией или ПЦ в диапазоне от 5 до 10 по сравнению с мышами, прооперированными симуляцией. Ожидается, что у мышей с перегрузкой давлением разовьется гипертрофия сердца в течение одной-двух недель и дилатация сердца через шесть-восемь недель в зависимости от плотности сужения.

Мы только что показали вам, как выполнить поперечное сужение аорты у мышей, но выполнение этой процедуры важно для поддержания нормальной температуры тела и минимизации кровопотери. Вот и все. Спасибо за просмотр и удачи в ваших экспериментах.