RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
ru_RU
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/1998-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study presents a novel approach to investigate drug reinforcement and addiction in rats by integrating traditional conditioned place preference (CPP) and self-administration methods. The methodology allows for a comprehensive analysis of drug-seeking behavior and preference.
Оперантное наркотиков самоуправления и обусловленное предпочтение место (CPP) процедуры экспансивно используется в исследованиях для моделирования различных компонентов препарата подкрепление, потребления и зависимости у людей. В этом докладе мы объединили традиционную CPP и самоуправления методы как новый подход к изучению подкрепление наркотиков и наркомании у крыс.
В этом видео демонстрируется новый подход к изучению злоупотребления наркотиками, сочетающий традиционные условные предпочтения места и процедуры самостоятельного приема. Во-первых, определяются базовые предпочтения для двух различных оперантных сред. Затем начинаются сеансы самостоятельного введения, в ходе которых крысы самостоятельно вводят кокаин только в одной из характерных оперантных сред.
После обусловливания измеряется количество времени, которое животные предпочитают проводить в любой из оперантных сред, затем могут быть измерены и сопоставлены изменения в месте, предпочтения и скорость самостоятельного приема препарата. Здравствуйте, я Эллисон Фидуция из лаборатории доктора Кристины Эль в Фармацевтическом колледже, отделении фармакологии и токсикологии в Техасском университете в Остине. А меня зовут Кристин Эль.
Сегодня мы хотели бы показать вам новый аппарат, который может быть использован несколькими различными способами для изучения лекарственного подкрепления и зависимости у крыс. Мы используем эту процедуру в нашей лаборатории для изучения последствий самостоятельного приема кокаина. Итак, приступим.
Чтобы начать подготовку к экспериментам с подкреплением лекарствами, сначала обучите самцов крыс нажимать на рычаг для получения вознаграждения за еду. Далее сконструируйте внутривенные катетеры, которые будут использоваться для самостоятельного введения препарата. Катетеры изготовлены из канюли из нержавеющей стали и трубки Celeste и должны быть промыты метанолом и водой.
Затем высушите воздух во время их подготовки в день операции, искупайте их в 70% этаноле. Когда катетеры готовы, крысы подвергаются хирургической процедуре катетеризации яремной кости, чтобы обеспечить самостоятельное введение препарата. Во время экспериментов обезболивайте крысу от двух с половиной до 4% изо фтора.
Далее побрейте голову и грудь, продезинфицируйте участки раствором Бетадина. Затем поместите его на стерильную прокладку после операции. Понаблюдайте за крысой в течение нескольких часов, прежде чем вернуть ее в колонию животных.
Поддерживайте проходимость катетера путем ежедневного промывания 0,1 мл 0,9%-ным раствором физиологического раствора, гепарина и ментона для приготовления используемого в экспериментах кокаина, растворяйте его в изотоническом солевом растворе в соответствующих дозовых концентрациях в соответствии с массой животных с животными и подачей препарата. Давайте посмотрим на аппарат, который используется во время экспериментов. Аппаратура, используемая во время экспериментов, состоит из двух однорычажных камер, оснащенных домашним и стимулирующим светом, и трех наборов фотолучей, которые используются для измерения локомоторной активности.
Камеры соединены между собой построенной аллеей из плексигласа. Аллея состоит из двух черных стен с белыми полосами и двух металлических стен, прозрачной столешницы из плексигласа и пола из белого плексигласа. В двух операционных камерах установлены стальные решетчатые стержневые полы, съемные металлические днища клетки.
Визуальные и обонятельные сигналы размещаются внутри оперантной камеры для создания уникальной различимой среды. В одной из сред угроза получит доступ к инъекциям кокаина. В альтернативной среде угроза будет иметь доступ только к инъекциям физраствора.
Визуальные подсказки состоят из белого или черного войлочного материала, прикрепленного к передней и задней стенкам и над верхней частью клетки. Обонятельные сигналы представляют собой масляные ощущения рядов или корицы, пропитывающие ватный шарик, расположенный под стержневым полом камеры. Во время экспериментов реакции Libra и данные о двигательной активности записываются с помощью компьютера Med Pentium с частотой 100 мегагерц, оснащенного программным обеспечением Med PC.
Теперь, когда мы увидели экспериментальную установку, давайте посмотрим, как собирать данные. Экспериментальная процедура проводится в течение нескольких дней, начиная с базовых тестов предпочтений в течение двух дней, за которыми следуют сеансы самостоятельного приема препарата продолжительностью восемь или 16 дней и заканчивая тестом на условное предпочтение места. Чтобы начать сбор исходных измерений предпочтений, поместите крысу в центральную аллею с доступом к обеим оперантным камерам на 20 минут.
Сразу после помещения крысы в камеру одновременно активируются видеокамера, медицинский компьютер, программное обеспечение и таймер. Через 20 минут выньте крысу из камеры и поместите ее обратно в домашнюю клетку. На следующий день после последнего исходного теста начните сеансы самостоятельного приема препарата.
Сначала разместите сенсорные сигналы, а затем установите панель, чтобы перекрыть доступ из центральной аллеи из плексигласа в камеру. Теперь прикрепите входное отверстие катетера животного к установленному шприцу для приема лекарств, чтобы начать сеанс. Сначала поместите животное в камеру.
Закрыв дверь оперантной камеры, запустите программу медицинского компьютера и таймер, чтобы доступ к кокаину был доступен в течение одного часа. Кокаин вводится с использованием схемы подкрепления с прогрессивным соотношением. Этот график требует все большего количества реакций рычага для получения каждой последующей инъекции кокаина.
Каждая инъекция состоит из дозы 0,75 миллиграмм на килограмм через день. В альтернативной среде схема прогрессивного соотношения также используется для инъекций физиологического раствора. В конце каждого сеанса самостоятельного приема отсоединяйте обертку от трубки с лекарством, извлекайте ее из камеры и помещайте обратно в домашнюю клетку.
На следующий день после последнего сеанса самостоятельного управления проведите тест на условное предпочтение места. Процедура проведения этого теста такая же, как и при проведении исходных измерений. Теперь давайте посмотрим, как оценивать и анализировать данные.
Во время оценки данных экспериментатора слепая группа распределяет количество времени, которое животное проводит в каждом отсеке. Экспериментатор просматривает видеопленку, чтобы подсчитать входы и выходы между отсеками в течение 15 минут, начиная через пять минут после помещения в устройство. Те же процедуры используются для определения исходных предпочтений и результатов теста CPP.
Различия между исходными измерениями и баллами СРК после кондиционирования используются для определения эффектов кондиционирования препарата. Оценки разницы после обусловливания рассчитываются путем вычитания количества времени, проведенного в заметном парном отсеке, из количества времени, проведенного в парном отсеке препарата во время теста CPP. Исходные оценки разницы рассчитываются аналогичным образом и вычитаются из оценок разницы CPP.
Статистический анализ различных изменений баллов от исходного уровня до тестовых сессий может быть выполнен для определения эффектов лекарственного кондиционирования. Здесь показан репрезентативный график исходных показателей и результатов теста CPP. Результаты теста CPP были значительно выше исходных показателей, что указывает на предпочтение кокаиновой среды.
После обусловливания здесь проиллюстрирован корреляционный анализ общего количества реакций на отпуск от наркотиков и результаты теста на разницу СРП. Группа долгосрочного приема кокаина была единственной группой, которая показала значительную положительную корреляцию между реакцией на отказ от наркотиков и результатами теста CPP. Мы только что показали вам, как сочетать традиционные методы состояния, предпочтения места и самостоятельного введения для нового подхода к изучению лекарственного подкрепления у крыс.
При выполнении этой процедуры важно вести надлежащий учет. Вот и все. Спасибо за просмотр и удачи в ваших экспериментах.
Related Videos
08:54
Related Videos
21.8K Views
07:18
Related Videos
726 Views
11:16
Related Videos
13.2K Views
09:16
Related Videos
15.9K Views
06:57
Related Videos
11.6K Views
07:51
Related Videos
11.2K Views
08:29
Related Videos
12.4K Views
08:05
Related Videos
3.1K Views
12:46
Related Videos
20.7K Views
10:52
Related Videos
12.7K Views