Инъекция в хвостовую вену: метод введения раковых клеток для метастатических исследований на мышиной модели

Начните с добавления трипсина в чашку Петри, содержащую меченые клетки рака молочной железы, чтобы отделить их от поверхности. Добавьте среду, содержащую сыворотку, чтобы остановить действие трипсина. Перенесите суспензию ячейки в коническую пробирку и центрифугируйте ее в ячейке для гранул.

Выбросьте надосадочную жидкость и ресуспендируйте клетки в фосфатно-солевом буфере. Поместите трубку на лед, чтобы замедлить клеточный метаболизм. Загрузите эту суспензию ячейки, содержащую необходимое количество клеток, в шприц с замком Люэра и закрепите на ней иглу.

Поместите мышь в ограничитель для грызунов хвостом наружу. Опустите хвост в теплую воду, чтобы расширить вены. Есть две вены на боковых сторонах и артерия на вентральной стороне хвоста. Протрите хвост спиртом, введите иглу и введите клеточную суспензию.

Попадая в кровоток, введенные раковые клетки проникают в органы, такие как легкие, и размножаются. Медленно извлеките иглу и с помощью стерильной марли надавите на место инъекции, чтобы остановить кровотечение. Верните мышь в клетку и обеспечьте полное восстановление. В следующем протоколе мы демонстрируем введение меченых метастатических раковых клеток в мышиную модель для количес