Экспериментальная мышиная модель метастатической меланомы: платформа для изучения метастатического потенциала клеток меланомы в легких

- Экспериментальные модели метастазирования помогают оценить потенциал опухолевых клеток к экстравазации и пролиферации в определенных местах после внутрисосудистого введения. Для начала приготовьте одноклеточную суспензию клеток меланомы в нужной концентрации с использованием соответствующей среды. Загрузите суспензию в шприц.

Затем зафиксируйте мышь в камере и закрепите ее так, чтобы ее хвост был доступен. Поверните мышь на 90 градусов, чтобы визуализировать ее боковую вену. Используйте тепловую лампу для повышения температуры окружающей среды, чтобы расширить хвостовую вену. Теперь введите иглу по направлению к дистальному концу хвоста и введите приготовленную суспензию клеток меланомы в расширенную вену.

Введенные метастатические опухолевые клетки мигрируют по кровеносной системе. В конце концов, некоторые из этих клеток экстравазируются из кровообращения в отдаленные органы, такие как легкие. Эти опухолевые клетки приспосабливаются к новому микроокружению, размножаются и создают экспериментальные метастатические очаги.

В следующем протоколе мы продемонстрируем инъекцию клеток меланомы B16-BL6 в мышиную модель в хвостовую вену для изучения их метастатического потенциала.

- После того, как все клеточные суспензии B16-BL6 будут приготовлены, выберите мышь. Держа его за хвост, направьте животное вперед на дыбы в удерживающее устройство. Когда туловище мыши находится в основной камере, а ее хвост находится за пределами устройства, продолжайте тянуть животное к концу удерживающего устройства.

Далее вставьте ограничитель-поршень и продолжайте нажимать на поршень до тех пор, пока мышь не будет надежно закреплена. Как только животное окажется на месте, поверните мышь на 90 градусов так, чтобы одна из боковых хвостовых вен была обращена вверх. Затем с помощью спиртовой салфетки энергично очистите ту сторону хвоста мыши, где вена наиболее заметна.

Чтобы подготовиться к инъекции, сначала соберите в шприц 300 микролитров из суспензии 0,5 миллиона клеток на миллилитр. После этого изгоняйте пузырьки из шприца, переворачивая его, щелкая его боком и нажимая на поршень. После удаления пузырьков извлеките клеточную культуру, чтобы получить окончательный объем 250 микролитров в шприце

Продолжайте вытягивать хвост мыши недоминирующей рукой. Держите его так, чтобы указательный палец приподнимал проксимальный конец хвоста, а большой палец надавливал на дистальный отдел. Доминирующей рукой введите иглу в вену по направлению к дистальному концу хвоста, под минутным углом вниз. Затем, введите иглу дальше, отрегулировав ее так, чтобы она совпадала с углом наклона хвостовой вены.

После того, как игла была введена, примерно на 1 сантиметр в хвостовую вену, начните нажимать на поршень, удерживая шприц неподвижно. Остановите кровотечение, приложив марлю к месту входа. После того, как клеточная суспензия будет выброшена, извлеките иглу из вены и выбросьте ее. Затем извлеките поршень из ограничителя и поместите мышь в клетку для реципиента.

• Experimental metastasis models - Tools to evaluate tumor cells' propensity to extravasate and proliferate following intravascular injection.
• Melanoma - A potent type of skin cancer that can spread to other organs like the lungs.
• B16-BL6 melanoma cells - Specific melanoma cells used in research for their metastatic potential.
• Tail vein injection - Technique to introduce substances directly into the bloodstream for experimental purposes.
• Metastatic foci - The sites where cancer cells adapt, proliferate and establish after traveling from the original tumor site.

• Melanoma metastasis - This describes how melanoma cells spread from the primary site to other parts of the body (e.g., lungs).
• Basics of tail vein injection - This procedure is a method of administering substances directly into the bloodstream (e.g., B16-BL6 melanoma cells).
• Metastatic foci formation process - This describes how injected cancer cells adapt to new environments, leading to metastasis.
• Link to mouse model - B16-BL6 melanoma cells are injected into a mouse model to study their metastatic potential.

• What is melanoma and how does it metastasize to the lungs?
• What is the purpose of tail vein injection in the metastatic model?
• How do melanoma cells form metastatic foci in distant organs?

• Targeted cancer treatments - Understanding metastasis could guide development of targeted therapies (e.g., for melanoma).
• Cancer research - The B16 mouse model aids in understanding cancer spread (e.g., melanoma metastasis).
• Medical advancements - Learning about metastasis contributes to treating other metastatic cancers (e.g., lung metastasis).
• Innovations in metastasis study - The study of metastasis helps in improving cancer diagnosis and prognosis methods.