Выделение кератиноцитов кожи человека: метод культивирования первичных кератиноцитов из образцов кожи

- Кератиноциты — это наиболее заметные клетки, присутствующие в эпидермисе или самом внешнем слое кожи. Они располагаются несколькими слоями по дерме, связанными с различными другими типами клеток, такими как меланоциты, дендритные клетки и клетки Меркеля.

Чтобы выделить кератиноциты, начните со забора эпидермальной ткани с кожи человека. Далее обработайте ферментативным буфером для пищеварения. Ферменты в буфере разрушают белки внеклеточного матрикса, присутствующие в эпидермальной ткани, тем самым инициируя диссоциацию клеток. Теперь добавьте подходящую среду и механически разрушьте ткань.

Чтобы высвободить диссоциированные клетки в суспензию, отфильтруйте суспензию эпидермальных клеток через ситечко, чтобы удалить любые клеточные скопления или мусор. Центрифуга для гранулирования клеток эпидермиса и отделения их от надосадочной жидкости, содержащей фермент. Удалите надосадочную жидкость и ресуспендируйте клетки, используя предпочтительную среду для роста кератиноцитов. Культивируйте клетки в течение желаемого времени.

Во время культивирования оптимизированные среды обогащают экспансию кератиноцитов, способствуя их избирательному росту по сравнению с другими типами эпидермальных