ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Сэмюэл Л. Пфафф является профессором в лаборатории экспрессии генов в Солка института биологических исследований и следователь в Медицинского института Говарда Хьюза. Эта работа была поддержана Кристофера и Даны Рив Foundation. Джо Belcovson, Кент Schnoeker и Майк Салливан в мультимедийных ресурсов в Институте Солка оказана помощь с фотографией и редактирования.

Электрофизиологические записи изолированных спинного мозга может выявить генетические и развития изменений в нервной системы 1. Ранее мы показали метод препарировать новорожденных мышей спинной мозг 2. Здесь мы представляем метод подготовки всасывания полезных электродов в записи фиктивного передвижения в изолированных спинного мозга 3. Кончик электрода пластиковые трубы может быть обращено на очень тонкой наконечником вручную с помощью низкотемпературной спиртовки 3-5. Пластиковые трубы (PE90, Клей Адамс Intramedic TM) проходит над пламенем, чтобы смягчить трубку в податливый форме. Как трубка начинает таять и становится более прозрачным он удаляется от источника тепла и концы аккуратно вытащил друг от друга. Сроки удаления трубки из пламени важно, чтобы застраховать пластик не свернуть или раскол в то же время выводы. Тонкая часть трубки разрезают бритвой в зависимости от желаемого внутреннего диаметра, как это диктуется возраст образца или сегментарного уровня мозга. Для удобства размещения уплотнительного кольца на трубу, 45 ° надрез на толстый конец трубки с лезвием бритвы. Наконечником и уплотнительные кольца установлены на толстый конец приложите электрод к стволу электрода. Для того чтобы учесть в частности размера электродов и избежать трудностей, ручной потянув электрода советы, электроды могут быть построены с использованием малых трубки вставляется в толще трубки (PE90). Длины трубы являются специфическими для требований настройки записи и переменной. Мы представляем измерений, используемых в наших экспериментах 1-3,5. 1 см длины PTFE тонкая трубка (Зевс, мелкие детали) и 10 см длиной PE90 трубки разрезают бритвой. Концы небольшие трубки должны быть рассмотрены с целью убедиться, что они не задавить или закрыты. Они могут быть открыты с помощью насекомых контактный (Fine Инструменты наук). Каплю клея (JB Weld) помещается на середину трубки PTFE. Трубки из тефлона и клей втягиваются в PE90 трубки использованием рот всасывание на PE90 труб. 45 ° надрез на толстом конце трубки и наконечника и уплотнительное кольцо соединены, как и предыдущие. Наконечником и BNC разъема отвинтил от коммерческих электрода всасывания. Разъем BNC замачивают в ксилоле в течение одного часа, чтобы удалить сургучной печати. Разъем затем промыть в воде и сушат. Нижний угловой левого борта должны быть сделаны на стороне ствола. Металлический стержень нагревается использования горелки Бунзена и прессуют в существующие отверстия на боковой стороне ствола под небольшим углом. 15 см длиной 0,010 дюйма серебряной проволоки (AM Systems) разрезают и вымачивают в отбеливателя в течение пятнадцати минут. Это сделано, чтобы создать серебряное покрытие хлорид, который помогает в проведении сигнала 6. Проволокой промывают водой, сушат, а затем припаяны BNC разъем. BNC-разъемами и серебра вставляются в ствол всасывания электрод с достаточно места для BNC разъем оставаться в стороне от ствола. Всасывающая трубка вставляется в сторону порта 2-3см. Силиконовый герметик вводят в ствол примерно на 2-3см. BNC разъем с резьбой в ствол электрод нажатием герметик вперед. Кончик электрода теперь вкручивается в передней части электрода. Термоусадочная трубка также может быть добавлен к укреплению линии всасывания со стороны порта. Электроды крепятся на микроманипуляторами, которые прикреплены к магнитной стоит, и поместил рядом с записью блюдо. BNC коаксиальных кабелей крепятся к headstage, который подключен к усилителю. Усилитель подключен к адаптеру (PolyView), который подключен к аналоговой к цифровой карте (National Instruments) в компьютер с ПО для сбора данных (PolyView). При записи электрофизиологических данных, необходимо устранить все вмешательства извне. Запись блюдо, усилитель, и глава этапе размещаются на стол воздуха внутри клетки Фарадея для предотвращения электрических и механических помех, соответственно. Представитель Результаты: <img src="/files/ftp_upload/2580/2580fig1.jpg" alt="Рисунок 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Рисунок 1"> Рисунок 1. Коммерчески доступных всасывания электрода может быть изменен путем добавления тяжелее проволока серебро и пластмассовым наконечником, который стороны обращено на спиртовке, или построенных с имеющимися в продаже пластиковые трубы конкретных размеров. Кроме того, парафин герметик заменена на более долговечный герметик силиконовый конопатить. <img src="/files/ftp_upload/2580/2580fig2.jpg" alt="Рисунок 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Рисунок 2"> Рисунок 2. Схема всасывающего электрода по отношению к таблице воздуха (для механической изоляции), клетка Фарадея (электрически isolatiп.), усилитель и компьютер. Следует отметить, что есть основание ссылки на блюдо записи и второе основание, на которое ссылается на таблицу воздуха и клетки Фарадея.

<ol><li>Gallarda, B. W., Sharpee, T. O., Pfaff, S. L., Alaynick, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defining+rhythmic+locomotor+burst+patterns+using+a+continuous+wavelet+transform%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+N+Y+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">Defining rhythmic locomotor burst patterns using a continuous wavelet transform.</a> Ann N Y Acad Sci. 1198, 133-139 (2010).</li>
<li>Meyer, A., Gallarda, B. W., Pfaff, S., Alaynick, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+cord+electrophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Spinal cord electrophysiology.</a> J Vis Exp. , (2010).</li>
<li>Gallarda, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Segregation+of+axial+motor+and+sensory+pathways+via+heterotypic+trans-axonal+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Segregation of axial motor and sensory pathways via heterotypic trans-axonal signaling.</a> Science. 320, 233-236 (2008).</li>
<li>Landmesser, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+development+of+motor+projection+patterns+in+the+chick+hind+limb%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">The development of motor projection patterns in the chick hind limb.</a> J Physiol. 284, 391-414 (1978).</li>
<li>Myers, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholinergic+input+is+required+during+embryonic+development+to+mediate+proper+assembly+of+spinal+locomotor+circuits%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Cholinergic input is required during embryonic development to mediate proper assembly of spinal locomotor circuits.</a> Neuron. 46, 37-49 (2005).</li>
<li>Chanin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+determination+of+chloride+by+use+of+the+silver-silver+chloride+electrode%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">The determination of chloride by use of the silver-silver chloride electrode.</a> Science. 119, 323-324 (1954).</li>
<li>Goulding, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circuits+controlling+vertebrate+locomotion%3A+moving+in+a+new+direction%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Circuits controlling vertebrate locomotion: moving in a new direction.</a> Nat Rev Neurosci. 10, 507-518 (2009).</li>
</ol>

Нет конфликта интересов объявлены.

Нервная система развития могут быть изучены с помощью изолированного спинного мозга грызунов. В присутствии медиаторов, фиктивный передвижения могут быть сгенерированы из спинного мозга в виде узорной электрической активности 1,3. Эти ритмичные очередей производятся на 0,2 до 0,5 Гц и по образцу в лево-право и сгибателей-разгибателей чередований. На разных стадиях развития, устойчивости и модели этой деятельности варьируется 1. Генетические мутации могут также нарушать структурирование этой деятель...

<table><tbody><tr><td>Трубки из ПТФЭ с тонкой стенкой (малые трубки)</td><td>Zeus</td><td>36AWG</td><td>ID 0.005&amp;#8221; x стенка 0.003&amp;#8221; (малые детали); также доступны размеры от 0.003&amp;#8221; до 0.006&amp;#8221;</td></tr><tr><td>Большие трубки (0.86mm (0.34&amp;#8221;))</td><td>BD Biosciences</td><td>427420</td><td>вн. диам. 0.86mm (0.34&amp;#8221;), внеш. диам. 1.27mm (.050&amp;#8221;)</td></tr><tr><td>Корпус электрода</td><td>A-M Systems</td><td>573000</td><td></td></tr><tr><td>Адгезив</td><td>JB Weld</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Адгезив: силиконовый герметик</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Припой и паяльник</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Отбеливатель</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ксилол</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Серебряная проволока: 0.010&amp;#8221;</td><td>A-M Systems</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Энтомологические булавки: Austerlitz 0.1mm</td><td>Fine Science Tools</td><td>26002-10</td><td></td></tr><tr><td>Магнитный штатив</td><td>Narishige International</td><td>GJ-8</td><td></td></tr><tr><td>Микроманипулятор</td><td>Narishige International</td><td>MN 151</td><td></td></tr><tr><td>Мини-плата (головной блок)</td><td>Grass Technologies</td><td>F-15EB/B1</td><td></td></tr><tr><td>Адаптер Polyview</td><td>Grass Technologies</td><td>PVA 8</td><td></td></tr><tr><td>Биполярная портативная система усилителей Physiodata</td><td>Grass Technologies</td><td>15LT</td><td></td></tr><tr><td>ПЛАТА АНАЛОГО-ЦИФРОВОГО ПРЕОБРАЗОВАНИЯ</td><td>National Instruments</td><td>6035E</td><td></td></tr><tr><td>Пневматический стол; виброизоляционный стол</td><td>Kinetic Systems</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

Спинной мозг электрофизиологии ii: внеклеточной изготовление электродов Всасывающая

Spinal Cord Electrophysiology II: Extracellular Suction Electrode Fabrication

Развитие нейронных схемотехника и передвижения могут быть изучены с помощью новорожденных грызунов спинного мозга центральной картины генератора (CPG) поведение. Мы демонстрируем метод для изготовления электродов всасывания, которые используются для изучения CPG деятельности, или фиктивной локомоции, в расчлененное грызунов спинного мозга. Грызун спинного мозга находятся в искусственной спинномозговой жидкости и вентральных корешков втягиваются в всасывающего электрода. Электрода построен путем изменения имеющихся в продаже всасывания электрода. Тяжелее серебряной проволоки используется вместо стандартной проволоки дается коммерчески доступных электрода. Стеклянным наконечником на коммерческой электрод заменен пластмассовым наконечником для увеличения долговечности. Мы готовим рисованной электроды и электроды из конкретных размеров трубки, что позволяет согласованность и воспроизводимость. Данные собраны при помощи усилителя и программного обеспечения neurogram приобретения. Записи выполняются на стол воздуха внутри клетки Фарадея для предотвращения механических и электрических помех, соответственно.

Демонстрация изготовления и использования внеклеточных электродов всасывания используется для измерения электрофизиологических записей новорожденных грызунов спинного мозга<em&gt; В пробирке</em

Спинной мозг электрофизиологии II: внеклеточной изготовление электродов Всасывающая

Развитие нейронных цепей и локомоции можно изучать с помощью анализа поведения центрального генератора паттернов (ЦГП) спинного мозга новорожденных грызунов. Мы демонстрируем...

Здравствуйте. Меня зовут Реш Гэри Дори, я научный сотрудник лаборатории faf Института биологических исследований Солка. Сегодня я продемонстрирую вам два метода изготовления внеклеточных всасывающих электродов. Эти электроды могут быть использованы для проведения электрофизиологических записей спинного мозга in vitro.Используйте спиртовую лампу в качестве источника тепла, чтобы расплавить пластиковую трубку PE 90 до достижения желаемой ширины. Держите трубку над пламенем и уберите ее, как только она начнет плавиться; осторожно растяните концы в разные стороны, стараясь не разорвать трубку посередине. Этот процесс показан повторно.Снимите трубку по мере того, как она размягчается и плавится, и аккуратно разведите концы в разные стороны. Отрежьте трубку острым лезвием бритвы в точке, соответствующей приблизительной ширине измеряемого образца на толстом конце трубки. Сделайте срез под углом 45 градусов.Теперь на толстый конец необходимо установить зажимную гайку (феррул) и уплотнительное кольцо. Вставьте этот конец трубки в шестигранное отверстие зажимной гайки. Затем вставьте конец трубки в резиновое уплотнительное кольцо.Данная конструкция привинчивается к передней части электрода. Острым лезвием бритвы отрежьте кусочек трубки Zeus малого диаметра длиной 1 см и убедитесь, что срезы ровные, а просвет трубки открыт. Острым лезвием бритвы отрежьте фрагмент трубки PE 90 длиной 10 см. С помощью ротового всасывания нанесите каплю эпоксидного клея JB Weld на середину трубки малого диаметра.Втяните тонкую трубку вместе со сварным швом в отверстие широкой трубки и оставьте данную конструкцию для отверждения на ночь. Хотя это и не показано, на толстом конце этой трубки необходимо сделать срез под углом 45 градусов, а затем установить на этот конец обжимное кольцо и уплотнительное кольцо, так же, как это было показано ранее.Разберите стандартный вакуумный электрод: открутите феррулу с переднего конца электрода и BNC-разъем с заднего. Теперь на боковой стороне корпуса электрода необходимо сделать нижний порт под углом. Разогрейте металлический стержень с помощью горелки.Прижмите нагретый металл к имеющемуся отверстию на боковой стороне цилиндра под малым углом. Извлеките серебряную проволоку из BNC-разъема, потянув за нее в месте соединения с разъемом. Замочите BNC-разъем в ксилоле на один час для удаления воска.После удаления воска промойте коннектор в воде и просушите бумажными полотенцами. Отрежьте кусок серебряной проволоки длиной 15 сантиметров. Замочите проволоку в отбеливателе на 15 минут.Затем промойте и высушите бумажными полотенцами. Припаяйте серебряный провод к BNC-разъему. Вставьте серебряный провод в задний конец корпуса всасывающего электрода, оставив достаточно места, чтобы BNC-разъем находился сбоку.Вставьте аспирационную трубку в боковой порт примерно на три сантиметра. Введите силиконовый герметик в заднее отверстие аспирационного электрода, прикрыв боковой порт пальцем, чтобы предотвратить вытекание герметика. Введите герметик в корпус электрода примерно на два-три сантиметра.После первой неудачной попытки плотно закрутите BNC-коннектор на место, чтобы вытолкнуть герметик вперед. Оставьте герметик для отверждения на ночь. Наденьте обжимную гайку трубки, изготовленной методом вытягивания или обрезки кончика, на переднюю часть выпрямителя электрода.Трубка поможет облегчить проведение серебряной проволоки через электрод, эта операция завершена. Установка для регистрации размещена внутри клетки Фарадея для снижения внешних помех. Наша установка также установлена на пневматическом столе для устранения механических помех.Электроды устанавливают на микроманипуляторы с магнитным основанием и размещают рядом с регистрирующей чашкой. Коаксиальные кабели BNC подключают к головному блоку (head stage), который, в свою очередь, подключен к усилителю. Усилитель соединен с адаптером PolyView, который подключен к компьютеру.На данном изображении представлена установка крупным планом. Коаксиальные кабели BNC подключены к головному каскаду. Головной каскад подключен к усилителю.Выход усилителя выводится из клетки Фарадея и подключается к адаптеру Poly View. Адаптер Poly View подключается к компьютеру с установленным соответствующим программным обеспечением для записи. Вся установка должна быть надлежащим образом заземлена.Внешнее заземление осуществляется путем подключения клетки Фарадея и пневматического стола к заземляющему контуру. Внутреннее заземление создается путем соединения диссекционной чаши с головным усилителем (head stage). Также необходимо заземлить дверцы клетки относительно основного корпуса.После правильной настройки можно приступать к сбору данных. Благодарим вас за просмотр этого видео; надеемся, что оно поможет вам в проведении ваших будущих экспериментов.

spinal-cord-electrophysiology-ii-extracellular-suction-electrode

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Нейронауки

Демонстрация изоляции новорожденных мышей спинного мозга для электрофизиологических исследований.

Спинной мозг электрофизиологии

Методика описана для имплантации...

Изготовление электрода и имплантации в Aplysia californica Для многоканального нейронных и мышечной Записи в неповрежденными, свободно Поведение животных

В этом видео представлены электрофизиологические записи из органотипических культур срезов спинного мозга, снятые с помощью многоэлектродной матрицы или устройства MEA. Эти записи оценивают регенерацию нейронов между срезами. Наблюдаемая синхронизированная электрическая активность подтверждает успешную регенерацию нейронов.

Электрофизиологические записи для оценки регенерации нейронов в сокультурных срезах спинного мозга

Это видео демонстрирует изготовление плоского электрода, оборачивающего нерв. Он демонстрирует интеграцию защитного металла и точного наслоения полимера для эффективной поверхности записи. Процесс включает в себя прикрепление, отверждение, обрезку и резку полимерных слоев для оптимального контакта с нервами и точной записи сигнала.

Изготовление нервных электродов с плоским интерфейсом для регистрации нейронной активности

Это видео демонстрирует метод имплантации системы электродов на голове крысе под наркозом для обнаружения припадков в реальном времени. Процедура включает в себя установку электродов для стимуляции и записи, закрепление их стоматологическим цементом и подключение к усилителю, установленному на голове.

Имплантация системы электродов на голове в модель крысы для обнаружения припадков в режиме реального времени

У животных с большими определены нейронов...

Внеклеточно выявления моторных нейронов для бассейна мышц Motor в<em&gt; Aplysia саЩогтса</em

В данной статье приводится подробное описание о процессе изготовления высокой плотности контакта плоской поверхности раздела электрода нерва (FINE). Этот электрод оптимизирован для записи и стимулирования нейронной активности избирательно в периферических нервов.

Изготовление High-Density Контакт, с плоским Интерфейс Нервные электроды для записи и стимуляция приложений

Этот подробный протокол описывает транскраниальной стимуляции электрода размещение на височной кости для того, чтобы исследовать кратко - и долгосрочные эффекты транскраниальной электростимуляции в свободно перемещающихся крыс.

Хронический транскраниальной электростимуляции и Intracortical запись в крыс

Здесь представлен протокол для изготовления имплантируемой системы для хронологической записи вызываемых и спонтанных электромиографических потенциалов. Система применяется к исследованию реиннервации ларинговых мышц после травмы нерва.

Имплантируемая система для хронической в виво-электромиографии

Этот протокол описывает метод с использованием патч-зажима для изучения электрических реакций двигательных нейронов на стимуляцию спинного мозга (SCS) с высоким пространственно-временным разрешением, который может помочь исследователям улучшить свои навыки в разделении спинного мозга и поддержании жизнеспособности клеток одновременно.

Подготовка ex vivo среза спинного мозга для регистрации цельноклеточного патча-зажима в двигательных нейронах при стимуляции спинного мозга

Наша цель состояла в том, чтобы предоставить обновленное, простое в использовании руководство по изготовлению и тестированию электродов эпимизиальной электромиографии. С этой целью мы предоставляем инструкции по поиску материалов и подробный пошаговый обзор процесса изготовления и тестирования.

Разработка недорогого электрода для эпимизиальной электромиографии: упрощенный рабочий процесс изготовления и тестирования

Узнайте изготовление внеклеточных всасывающих электродов для электрофизиологических записей спинного мозга неонатальных грызунов in vitro. Этот метод помогает исследователям изучать нейрональную активность с высокой точностью.

Спинной мозг электрофизиологии II: внеклеточной изготовление электродов Всасывающая

Больше видео