Измерение моторной координации у мышей

Общая цель этой процедуры — измерить координацию движений у мышей. Это достигается путем предварительного тестирования на стержне ускорительного ротора. Далее проверяется координация моторики на ональной перекладине.

Животное также можно испытывать на статических стержнях. Наконец, можно измерить производительность на параллельных брусьях. В конечном счете, можно получить результаты, которые покажут, есть ли у мыши какие-либо нарушения в координации движений.

Как правило, люди, плохо знакомые с этой техникой, будут испытывать трудности из-за трудностей с правильным размещением мыши на устройстве для всех следующих тестов. Приведите мышей в экспериментальную комнату за пять-20 минут до тестирования, чтобы убедиться, что они полностью проснулись. Сцена с роторным стержнем здесь была построена в Оксфордском университете.

Стержень имеет три сантиметра в диаметре с рядом параллельных гребней на его поверхности, которые помогают мышам более эффективно его захватывать. Фланцевые фланцы с каждой стороны предотвращают выход мыши из стержня. Они имеют 30 сантиметров в диаметре и шесть сантиметров друг от друга.

Стержень закрепляется в 30 сантиметрах от основания аппарата. Мягкая мягкая поверхность помещается у основания, чтобы смягчить любые падения перед началом испытания. Подготовьте стержень ротора, установив начальную скорость четыре оборота в минуту и скорость разгона 20 оборотов в минуту.

Для начала держите мышь за хвост и подведите его вверх к стержню под углом 45 градусов ниже горизонтали. Быстро отпускайте животное, когда оно почти касается стержня. В качестве альтернативы, мышь можно опустить на дюбель, и дюбель будет использоваться для переноса животного на стержень.

Начните разгон через 10 секунд после установки мыши на стержень и обратите внимание на скорость, с которой мышь отваливается. Если мышь упадет менее чем на пять секунд и, вероятно, это произойдет из-за неудачного размещения экспериментатором, результат не должен быть записан, и испытание должно быть возобновлено, если мышь упадет раньше, чем на 10 секунд. Отметьте время и дайте животному еще две попытки.

Для животных, которые остаются на месте после 10 секунд, запишите скорость, с которой животное падает. Иногда мышь может перестать ходить и, следовательно, напасть на стержень, прежде чем в конечном итоге упасть. Полезно отметить быстроту этого явления.

Производительность рассчитывается как средняя скорость между испытаниями. Например, мышь, которая падает менее чем за 10 секунд один раз, а затем остается включенной до 12 оборотов в минуту. Второй раз набирает четыре плюс 12, деленные на два, что равно восьми оборотам в минуту.

Горизонтальная штанга измеряет силу и координацию конечностей падения, в то время как чаще всего используется штанга диаметром два миллиметра. Стержни большего диаметра могут обеспечить более точные показатели производительности. Латунные брусья длиной 38 сантиметров удерживаются на высоте 49 сантиметров над поверхностью скамейки деревянной опорной колонной.

Стержни удерживаются под напряжением при установке в выемки опор, которые слегка стягиваются друг с другом. Начните тестирование с двухмиллиметрового стержня. Держите мышь за хвост и поставьте ее на скамейку перед аппаратом.

Быстро сдвиньте его. Откидывайтесь назад примерно на 20 сантиметров, чтобы выровнять свое тело перпендикулярно перекладине быстро. Поднимите животное, позволяя ему ухватиться за турник в центре только четырьмя порами.

Отпустите хвост, одновременно запуская стоп-часы. Если мышь не может ухватиться за планку, причиной может быть размещение экспериментатора. Не фиксируйте падение и повторите испытание животного после краткого отдыха.

Если мышь падает менее чем на пять секунд, и это, по-видимому, не связано с неудачной постановкой экспериментатора, повторите до трех раз в попытке набрать больше пяти секунд. Записываем либо время падения мыши, либо время до одного четвертого бедного касания столбца с максимальным временем проверки 30 секунд, берем лучший балл за дату Право на зачет горизонтальной полосы. Если масса падает от одной до пяти секунд, забейте один балл между шестью секундами и 10 секундами.

Забейте два балла от 11 до 20 секунд. Забейте три балла от 21 до 30 секунд. Забейте четыре очка, упав через 30 секунд или просто оставшись на перекладине до 30 секунд.

Начисляет пять очков, и мышь также получает пять, если коснулась конца. Поддержка четырех портов в любое время во время тестирования. Если на двухмиллиметровом стержне будет достигнуто пять баллов, животное можно будет протестировать на более толстых брусьях после короткого отдыха.

Система подсчета очков для четырех- и шестимиллиметровых столбцов такая же, как и для двухмиллиметрового столбца, а итоговый балл — это общая сумма. Таким образом, мышь, которая набирает пять баллов на двухмиллиметровой полосе, но падает с четырехмиллиметровой полосы через 13 секунд. Пять плюс равно восьми.

В этом тесте на координацию движений деревянные доу или стержни различной толщины, 35, 28, 22, 15 и девять миллиметров в диаметре каждый 60 сантиметров, прикрепленные с помощью G-образного зажима к лабораторной полке на высоте 60 сантиметров от пола. В 10 сантиметрах от конца возле скамейки делается отметка для обозначения финишной черты. Для начала поместите мышь на дальний конец самого широкого стержня, обращенным в сторону от полки, запишите время, которое требуется животному, чтобы сориентироваться в сторону полки, и общее время прохождения.

Если мышь переворачивается вверх ногами и цепляется за стержень во время ориентации, произвольно назначьте ей максимальный счет в 120 секунд. Животное не тестируется на других удилищах и также получает максимальную транзитную ценность. Если мышь упадет или достигнет максимального времени тестирования в 120 секунд после ориентации, не тестируйте ее на более узких стержнях.

Максимальный балл также присваивается, если мышь переворачивается вверх ногами во время пересечения стержня после ориентации, возвращает мышь в домашнюю клетку и дает ей отдохнуть перед тестированием. Следующий стержень поменьше. Поместите животное на меньший стержень, как показано ранее.

Если мышь отвалится в течение пяти секунд, замените ее и дайте еще до двух попыток. Запишите время на переворачивание стержня или до тех пор, пока мышь не упадет. Для установки параллельных брусьев опираются два бруса, один метр в длину и четыре миллиметра в диаметре, на расстоянии 30 миллиметров друг от друга на деревянной опоре.

Колонны на высоте 60 сантиметров над полом. Поместите мышь в центр двух стержней так, чтобы ее продольная ось была перпендикулярна стержням. Обе передние поры должны быть на одной перекладине, а обе задние поры на другой перекладине.

Подсчет очков аналогичен подсчету очков для статических стержней. Берется два измерения: время, пока мышь не ориентируется на 90 градусов в исходное положение, и время, пока она достигнет одной из конечных опор. Точно так же ориентация и перемещение должны быть достигнуты без переворачивания животного вниз головой, в противном случае будет отведено максимальное время.

Если животное падает менее чем через пять секунд, это, вероятно, связано с плохой посадкой и животное следует повторно проверить. Статический стержень первоначально использовался для мониторинга развития заболевания у мутантных мышей с обогащением окружающей среды в домашних клетках или без него. Программа обогащения резко отсрочила начало двигательной дисфункции на стержне, которая сопровождалась задержкой начала плохого сцепления задней части.

Общий признак неврологического расстройства: у инфицированных мышей наблюдалось снижение производительности горизонтального стержня с 16-й недели после инъекции при тестировании стержней ротора с 18-й недели и статических стержней, по крайней мере, с 19-й недели. Повреждения гиппокампа не оказывали никакого влияния на какие-либо показатели двигательных способностей, но у двух мышей SV было нарушено по сравнению с C 57 black six, напряжение стержня ротора и статических стержней после его развития. Этот метод проложил путь исследователям болезни Гентингтона к изучению эффектов обогащения окружающей среды у мышей-мутантов с болезнью Гентингтона.