Name: Измеритель прочности Мыши (Видео) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-06-02T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 17 s
Description: Изучите методы оценки мышечной силы у мышей с помощью теста на перевернутом экране и поднятия веса. Эти надежные тесты минимизируют влияние координации и помогают исследовать нарушения двигательной функции.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Wellcome Trust для обеспечения открытого доступа к финансированию Оксфордского университета. Роберт Дикон является членом группы Оксфорда Oxion, финансируемого Wellcome Trust грант WT084655MA.

1. Аппарат Перевернутый экран 1,1 Kondziela-испытатель Перевернутый экран 43 см квадрат сетки, состоящие из квадратов 12 мм диаметром 1 мм провода (рис. 1). Он окружен 4 см в глубину деревянный бисер (который предотвращает случайное мышь, которая пытается от восхождение на другой стороне) (рис. 2). 1,2 гирь Семь веса составляют аппарата. Каждая состоит из шара запутанные штраф калибровочной проволоки из нержавеющей стали, &quot;масштаб коллектор&quot;, используемое для предотвращения образования накипи известняка во внутреннем чайники. Вес этого мал (7 г), но каждой шкале коллектор присоединен к серии стали звеньев цепи, каждый весом около 13 г. Число звеньев в диапазоне от 6:59. Их вес, следовательно: 20, 33, 46, 59, 72, 85 и 98 г (рис. 3 и 4). 2. Профессиональныйпроцедура Для всех тестов принести мышей к экспериментальной комнате 5-20 мин до начала испытания, чтобы убедиться, что они должным образом проснулся. Как правило, чтобы позволить восстановление мышечной силы и возвращение к нормальному уровню возбуждения, отдохнуть мышей Вернуться на домашнюю клетку после каждого испытания двигателя. <ol><li> Перевернутый экран Kondziela-испытатель </li><li> Процедура: Место мыши в центре экрана сетки, начать StopClock, поворачивать экран в перевернутом положении более 2 сек, с головой мыши снижается в первую очередь. Возьмитесь за дисплей стабильно 40-50 см над мягкой поверхностью. Обратите внимание тот момент, когда мышь падает, или удалить его, когда критерий течение 60 сек будет достигнута. Более длительное время критерий может быть полезен для некоторых экспериментов. </li><li> Забив перевернутого экрана: </li></ol> Падение в диапазоне 1-10 сек = 1 Падение между 11-25 сек = 2 Падение возрасте 26-60 сек = 3 Падение через 60 сек = 4 Или, например, в течение 2 мин: Падение в диапазоне 1-10 сек = 1 Падение между 11-25 сек = 2 Падение возрасте 26-60 сек = 3 Падение между 61-90 сек = 4 Падение после 90 сек = 5 3. Гирь Держите мышь к середине / основания хвоста и опустите его, чтобы позволить ему понять первый вес (20 г), который лежит на лабораторном столе. Как захватывает коллектора провод шкала с передними лапами, начать Остановить часы и поднять мышь, пока ссылка не освободится от скамьи. Трюме трех секунд является критерием. Если мышь падает вес менее чем за 3 сек, заметьте время она провела веса. Установить курсор мыши в течение примерно 10 сек и попробовать его на весу еще раз. Если она не в три раза, что завершает судебное разбирательство, и мышь присваивается максимальное время / вес достигнут. Если он удерживает его в течение 3 секунд, то попробуйте его на следующий тяжелый вес. Если он снимает это на 3 секунды, проверить его на следующий тяжелый вес, после того, какпроверили все его cagemates на первом веса. Опять же, это дается три попытки, чтобы удержать вес на 3 сек. Окончательный общий балл рассчитывается как произведение количества звеньев в тяжелой цепи, предназначенные для полного 3 сек, умноженной на время (сек) она проводится. Если тяжелый вес упал до 3 сек соответствующее промежуточное значение рассчитывается. Таким образом, мышь держит 5-ссылка вес в течение 3 секунд, но не может поднимать 6-ссылка вес, присваивается балл (5 х 3) = 15. Если он держит 6-Link веса в течение 1 секунды, она набирает (5 х 3) + (1) = 16. Иногда мышей могут быть недостаточно мотивирован, чтобы захватить аппарат. Как правило, это происходит у животных старшего возраста. Эта проблема может быть сведено к минимуму путем проведения мышей за хвост течение более длительного времени до приведения его в захватывающий расстояние провод мяча.

<ol><li>Bulfield, G., Siller, W. G., Wight, P. A., Moore, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((K.J.X+chromosome-linked+muscular+dystrophy+%28mdx%29+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">K.J.X chromosome-linked muscular dystrophy (mdx) in the mouse.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 81, 1189-1192 (1984).</li>
<li>Contet, C., Rawlins, J. N. P., Deacon, R. M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+129S2%2FSvHsd+and+C57BL%2F6JOlaHsd+mice+on+a+test+battery+assessing+sensorimotor%2C+affective+and+cognitive+behaviours%3A+implications+for+the+study+of+genetically+modified+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">A comparison of 129S2/SvHsd and C57BL/6JOlaHsd mice on a test battery assessing sensorimotor, affective and cognitive behaviours: implications for the study of genetically modified mice.</a> Behavioural Brain Research. 124, 33-46 (2001).</li>
<li>Deacon, R. M. J., Brook, R. C., Meyer, D., Haeckel, O., Ashcroft, F. M., Miki, T., Seino, S., Liss, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+phenotyping+of+mice+lacking+the+KATP+channel+subunit+Kir6.2%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Behav%22%5BJournal%5D)">Behavioral phenotyping of mice lacking the KATP channel subunit Kir6.2.</a> Physiol. Behav. 87, 723-733 (2006).</li>
<li>Deacon, R. M. J., Croucher, A., Rawlins, J. N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampal+cytotoxic+lesion+effects+on+species-typical+behaviors+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Hippocampal cytotoxic lesion effects on species-typical behaviors in mice.</a> Behav. Brain Res. 132, 203-213 (2002).</li>
<li>Rawlins, J. N. P., Morley, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+the+behavior+of+C57BL%2F6+and+C57BL%2F10+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">A comparison of the behavior of C57BL/6 and C57BL/10 mice.</a> Behav. Brain Res. 179, 239-247 (2007).</li>
<li>Guenther, K., Deacon, R. M. J., Perry, V. H., Rawlins, J. N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+behavioural+changes+in+scrapie-affected+mice+and+the+influence+of+dapsone%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Early behavioural changes in scrapie-affected mice and the influence of dapsone.</a> Eur. J. Neurosci. 14, 401-409 (2001).</li>
<li>Kondziela, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eine+neue+method+zur+messung+der+muskularen+relaxation+bei+weissen+mausen%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Int.+Pharmacodyn%22%5BJournal%5D)">Eine neue method zur messung der muskularen relaxation bei weissen mausen.</a> Arch. Int. Pharmacodyn. 152, 277-284 (1964).</li>
</ol>

Нет конфликта интересов объявлены.

Мышиные модели из многих заболеваний, поражающих человека двигательных систем постоянно развивается, поэтому хорошо анализов силы у мышей имеют важное значение. Примеры включают в себя многие формы мышечной дистрофии, болезни Паркинсона и хореи Гентингтона. Сила анализы также находят применение в моделях регенерацию нерва после спинальной или периферийные повреждения нерва. Промышленные и автомобильные аварии продолжают вызывать значительные инвалидности для людей, но гораздо доклинические работы в настоящее время расследование возможных путей лечения, основанный на нервные факторы роста. Мышцы никогда не работают по отдельности. Они активируются в мозге, местные или выше спинальных рефлексов, через нервно-мышечных синапсах и работы в рамках ограничений других мышц и скелетной системы. Таким образом, сложность системы означает Исследования in vivo мускульной силы в активном животные играют важную роль в оценке его нынешнего состояния и ЭффеCTS любого предполагаемого лечения. Мыши инстинктивно держаться материалов с сильной хваткой, таким образом, Mus мышцы является идеальным животной модели, в которых для оценки нарушения мышечной силы и возможные методы лечения.

Для мирянина, идея измерения силы у мышей может показаться абсурдным, даже что-то из оксюморон. Тем не менее, это не без основания, что дом / лабораторные мыши были названы в Mus мышцы. На самом деле они имеют очень высокую прочность / вес, больший, чем у крыс. Например, взрослых мышей может легко поддерживать свой собственный вес тела, даже с использованием только передних или задних лапах, очень мало взрослых крыс лаборатории может этого сделать. Мыши играют все большую роль в биомедицинских исследованиях. Они могут быть использованы для моделирования многих человеческих двигательных расстройств, как соматические и центральной нервной системы в происхождении. Первые включают более тридцати форм наследственной мышечной дистрофии 1 и миастения, в то время как примерами последнего являются рассеянный склероз, спинальную мышечную атрофию, болезнь Паркинсона, болезнь Гентингтона и боковой амиотрофический склероз. Для всех этих моделей, в полной мере оценить свои дефициты двигатель должен включать конкретные тестыпрочности.

Измеритель прочности Мыши

Measuring the Strength of Mice

Kondziela 7 разработана перевернутой тест экрана и опубликовал его в 1964 году. Это испытание силы мышц с использованием всех четырех конечностей. Большинство нормальных мышей легко набрать максимум на себя эту задачу, это быстро, но нечувствительным валового экрана, а вес испытания, описанного в этой статье, обеспечивают более тонкую мера мышечной силы. Есть также несколько тензометрических основе Части аппарата коммерчески доступными, что обеспечит больше данных, чем градуированных перевернутой тест экрана, но их стоимость может поставить их вне досягаемости многих лабораторий, которые не специализируются на испытания на прочность. Поэтому в 2000 году простой и дешевый аппарат был разработан автором. Она состоит из ряда звеньев цепи возрастающей длины, прикрепленный к &quot;Меховой коллектор&quot; шар тонкой проволочной сетки продаются для предотвращения накипи в регионах с жесткой водой. Случайного наблюдения показали, что мыши могут захватить эти очень плотно, так что они оказались идеальными как сцепление ПуанкареТ для тяжелой атлетики аппарата. Общим недостатком с коммерческими Измерители прочности является то, что в баре или другая особенность власть не достаточно тонкими для мышей, чтобы оказывать максимальное сцепление. Как правило, чем тоньше провод или баре, тем лучше мышь может захватить с его небольшими когтями. Это чистая проба сил, хотя, как для любого теста мотивационные факторы потенциально могли бы играть роль. Использование масштаба коллекционеры, однако, кажется, чтобы минимизировать мотивационные проблемы, как мотивация, кажется, очень высокие для большинства нормальных молодых взрослых мышей.

Ожидаемые результаты Contet соавт. 2 показано, что 129S2/sv мышам проводили аналогичным образом на веса теста на мышах C57BL / 6. Самки мышей C57BL / 6 забил около 15, 129 17 мышей, который означает, что они могли бы поднять около 5 звеньев цепи, около 70 гр. Это высокое значение, обычно 2-3 звеньев цепи (оценка 6-9, 33-46 г) поднимаются мышей C57BL / 6 5. Эти различия предположительно связанных с такими факторами, как, сколько обработке мышей получили и технических деталей экспериментатора. Поражениях гиппокампа не влияет сила, измеренная либо гирь или перевернутой 4 экрана. Прионами (скрепи) больных мышей были нарушены на перевернутый экран на 18 недель после заражения 6. Хотя несколько обесцененные на турнике и Rotarod относительно мышей C57BL / 6, C57BL/10 мышей не обесцененные по тяжелой атлетике 5. Нокаут мышей тОн КАТП канала субъединицы Kir6.2 возможной к взысканию на перевернутый экран или тяжелая атлетика тесты, хотя забил больше женщин, чем мужчин на последнем 3. Это было необычно, как правило, тяжелее мужчины проявляют большую прочность, чем женщин. <img alt="Рисунок 1" src="/files/ftp_upload/2610/2610fig1.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Рисунок 1"> Рисунок 1. Перевернутом экране. <img alt="Рисунок 2" src="/files/ftp_upload/2610/2610fig2.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Рисунок 2"> Рисунок 2. Закройте представление мыши на перевернутом экране. <img alt="Рисунок 3" src="/files/ftp_upload/2610/2610fig3.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Рисунок 3"> Рисунок 3. Массы, в диапазоне от 20 г до 98 г. <img alt="Рисунок 4" src="/files/ftp_upload/2610/2610fig4.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Рисунок 4">

Дефицит мышечной силы происходит во многих клинических условий, таких как болезни двигательных нейронов. Перевернутый экран и испытаний вес подъемного описанные здесь мера силы у мышей почти исключительно с минимальным влиянием таких факторов, как координации.

Kondziela7 разработал тест с перевернутой сеткой и опубликовал его в 1964 году. Это тест мышечной силы с использованием всех четырех конечностей. Большинство здоровых мышей легко набирают ...

Целью данной процедуры является измерение силы у мышей с использованием двух различных тестов. В первом тесте мышь помещают на зеленую металлическую сетку, которую затем переворачивают, после чего фиксируют время падения. Во втором тесте мышь захватывает сетчатый металлический шар, прикрепленный к звену стальной цепи.Добавляются дополнительные звенья цепи, и фиксируется общий вес, который животное способно удержать. В конечном итоге можно получить результаты, выявляющие различия в силе между мышами. Данный метод может быть полезен при изучении двигательных расстройств у человека.Поскольку полная оценка двигательного дефицита должна включать специфические тесты на силу, для начала поместите экспериментальных животных в помещение за 5–20 минут до начала тестирования для привыкания. Перевернутый экран представляет собой квадрат из металлической сетки размером 43 сантиметра с ячейками 12 миллиметров и диаметром проволоки 1 миллиметр.Она окружена деревянной окантовкой шириной 4 см, которая препятствует перелезанию мышей на другую сторону. Чтобы мышь не получила травму, под сетку следует положить что-то мягкое. После привыкания поместите мышь в центр сетчатого экрана.Запустите секундомер и в течение двух секунд переверните экран в перевернутое положение. Удерживая голову мыши в наклоне, сначала зафиксируйте экран неподвижно на высоте 40–50 сантиметров над мягкой поверхностью. Зафиксируйте время, когда мышь упадет или будет удалена.По достижении критерия времени в 60 секунд. Для оценки показателей на перевернутой сетке каждому интервалу времени до падения животного присваивается числовое значение. Например, падение в интервале от 1 до 10 секунд оценивается в один балл, в то время как падение в интервале от 26 до 60 секунд.При получении трех баллов верните животное в домашнюю клетку. После тестирования несколько лет назад один из моих студентов заметил, что мышь выглядит довольно неопрятно, поэтому я решил, что ее стоит привести в порядок, но не смог найти щетку. Однако я нашел комок стальной проволоки, которая используется для очистки бытовых чайников от накипи.И когда я провела по ней этим клубком проволоки, она схватила его и яростно вцепилась, и я подумала: ага, здесь должно быть испытание на силу. Перед использованием теста с грузами для измерения силы у мышей убедитесь, что экспериментальные животные акклиматизировались к условиям тестирования для подбора веса. Начните с клубка тонкой нержавеющей стальной проволоки весом около семи грамм; или же идеально подойдут сборщики шерсти для домашних животных.Затем клубок тонкой проволоки закрепляют на серии стальных звеньев цепи, каждое из которых весит примерно 13 грамм. В данном примере присоединяют до семи звеньев, чтобы получить общие веса 20, 33, 46, 59, 72, 85 и 98 грамм. Начните испытание, поместив первый груз на лабораторный стол.Затем удерживайте мышь за основание хвоста и опускайте её до тех пор, пока она не ухватится за проволочную сетку. Как только мышь зацепится за проволоку передними лапами, запустите секундомер и поднимите мышь так, чтобы звено полностью поднялось над лабораторным столом.Мышь должна удерживать груз в течение трех секунд. В случае успеха животное возвращают в домашнюю клетку, после чего проводят тестирование со следующим по величине грузом. Аналогичным образом тестируют остальных животных.Для первого теста с грузами. Для захвата проволочного шарика должны использоваться только передние лапы. Если мышь захватывает его также задними лапами, просто прекратите тест, уберите мышь и груз, и повторите попытку через несколько секунд.Если мышь не может обеспечить достаточный захват, это может быть следствием потери мотивации; в таком случае мотивацию можно повысить, увеличив уровень возбуждения, просто удерживая мышь за хвост чуть дольше перед тем, как предложить ей груз. Если мышь роняет груз ранее чем через три секунды, зафиксируйте время падения груза. Дайте мыши отдохнуть около 10 секунд и повторите тест с тем же весом.Тестирование завершено. Когда животное в третий раз не может удержать груз, верните его в домашнюю клетку и зафиксируйте максимальный вес, который животное было способно удерживать в течение трех секунд. Общий балл рассчитывается как произведение количества звеньев в самой тяжелой цепи, которую удерживали полные три секунды, на время удержания.Например, если мышь удерживает груз из пяти звеньев в течение трех секунд, но не может поднять груз из шести звеньев, ей присваивается балл, равный произведению пяти на три, что составляет 15. Если самый тяжелый груз был сброшен до истечения трех секунд, рассчитывается соответствующее промежуточное значение. Если груз из шести звеньев удерживался всего одну секунду, может быть присвоен балл, равный сумме произведения пяти на три и единицы, что составляет 16.Большинство людей считают мышей крошечными и слабыми существами, однако на самом деле отношение их силы к массе тела с учетом малого размера чрезвычайно велико, и их латинское название Mus musculus полностью оправдано. Мыши инстинктивно очень крепко держатся за предметы. Таким образом, Mus musculus является идеальным модельным животным для оценки нарушений мышечной силы и может быть использовано для тестирования возможных методов лечения таких расстройств.

Research

JoVE Journal

Medicine

Медицина

Протоколы представлены в течение двух установленных моторной координации задач, ускорения Rotarod и турник, также две тестов, разработанных в последнее время в Оксфорде, статические стержней и брусьях. Эти тесты могут обнаружить моторные нарушения потенциальный интерес сами по себе, а как возможные переменные в тестах других областях поведения.

Измерение моторной координации у мышей

Электронные измерения фон Фрея являются эффективной и улучшенной альтернативой классическим нитям фон Фрея, поскольку они позволяют быстро и точно измерять изменения механических порогов отхода грызунов, реагирующих на непрерывно применяемые раздражители до и после воспалительного события.

Измерение изменений в тактильной чувствительности в задней лапы мышей с использованием устройства Электронные фон Фрея

Основным критерием результата в клинических испытаниях для нервно-мышечных расстройств, как правило, улучшение функции мышц. Таким образом, оценки влияния потенциальных терапевтических соединений на производительность мышц предварительной клинически на мышах имеет большое значение. Мы здесь опишем несколько функциональных тестов для решения этой проблемы.

Оценивая эксплуатационные качества в<em&gt; Mdx</em&gt; Мышь Модель

Мы измеряем активации perigenital механическую чувствительность и тучных клеток в простате у мужчин C57BL / 6 мышей, которые прошли в начале жизни стресс парадигму - новорожденных материнской разделения, для того, чтобы индуцировать доклинические модель простатита / синдрома хронической тазовой боли хронической.

Оценка чувствительности и Perigenital простаты тучных клеток активации в мышиной модели новорожденных материнской разъединении

Представлен обратный генетический подход к пониманию семейств генов, связанных с человеческими заболеваниями, с использованием мыши в качестве модельной системы, и описан последующий график фенотипирования мышей. Поскольку у мышей с дефектом в гене, представляющем интерес, HtrA2, проявлялись симптомы болезни Паркинсона, режим фенотипирования сосредоточен на выявлении неврологических дефектов.

Фенотипирование режим для генетически модифицированных мышей используется для изучения генов, участвующих в человеческих болезней, связанных со старением

Поведенческое тестирование используется в предварительно клинические испытания для оценки фенотипические эффекты болезни или лечения на самочувствие животного. Чтобы глобально оценить функционирование мотора, мы выбрали тесты для общего локомоции, мышечной силы и координации: поле Открыть тест, сетки и испытания на rotarod, соответственно.

Батарея поведенческие тесты оценки общего локомоции, мышечной силы и координации мышей

Мы исполняли односторонних сонной артерии окклюзии на послеродовой день CD 7-10-1 мыши щенков для создания неонатальная гипоксически ишемического (HI) модели и изучается воздействие Привет черепно-мозговой травмы. Мы изучили нейроповеденческие функции в этих мышей, по сравнению с неоперированных обычных мышей.

Нейроповеденческих оценок в мышиной модели неонатальная гипоксически ишемического черепно-мозговой травмы

Мы разработали протокол для оценки благосостояния в мышей во время процедур с использованием общей анестезии. Серия поведенческие параметры, указывающие такого уровня благосостояния, а также были проанализированы глюкокортикоидных метаболитов. Протокол может служить общей помощи для оценки степени тяжести на основе научных, ориентированный на животных.

Систематическая оценка благосостояния в мышах для процедур с использованием общего наркоза

Tameness в животных включает в себя сокращение избежания ответов на людей (пассивный tameness) и увеличение в активных подходов к людям (активных tameness). Здесь мы описываем подробные протоколы для трех поведенческие тесты (активные tameness, пассивных tameness и пребывания на руку тесты) отдельно измерить активной и пассивной tameness мышей.

Измерение активной и пассивной Tameness отдельно в мышей

Количественная оценка максимальной силы разгибателя коленного сустава необходима для понимания функциональных адаптаций к старению, болезням, травмам и реабилитации. Представлен новый метод многократного измерения in vivo изометрического пикового тетанического крутящего момента.

In vivo Измерение функции мышц-разгибательных мышц колена у мышей

Настоящий протокол описывает тренировку и тестирование с использованием статических и динамических лестниц на животных моделях.

Универсальность протоколов тренировок и оценки отягощений с использованием статических и динамических лестниц в животных моделях

Изучите методы оценки мышечной силы у мышей с помощью теста на перевернутом экране и поднятия веса. Эти надежные тесты минимизируют влияние координации и помогают исследовать нарушения двигательной функции.

Измеритель прочности Мыши

Больше видео