19 марта 2011 г.
Это шаг за шагом руководство показывает цель, эксплуатации и репрезентативные результаты из романа гравитационного спектрометра силу.
Установка для измерения гравитационной силы состоит из эпи-штатива, обычного светового микроскопа, цифровой камеры и компьютера. Мы используем её для проведения анализа одиночных молекул. Мы можем регистрировать равновесную силу или прикладывать градиентную силу путем изменения высоты капли.
Для начала необходимо подготовить стеклянный микропрепарат, чтобы можно было провести данный процесс. Для отмеривания примерно 10 миллиграммов используемых зерен я обычно подготавливаю 2K. Здесь у нас есть пять миллилитров, которые мы будем использовать для триологии.
Здесь мы возьмем нашу пробирку Put One. Тщательно перемешайте содержимое с помощью дозатора, затем перенесите 2 mL смеси на ваши bead cakes. Оставьте bead cakes на 2 минуты, после чего тщательно перемешайте на вортексе в течение 2 секунд.
Нижний поглотил два влажных. Вам потребуется один пурин в дважды дистиллированной воде. Сшивка при pH 6.
Таким образом, вы просто добавляете 5 mL буфера для связывания к каждой порции бусин, и этот процесс обеспечивает связывание бусин. Затем добавляются антитела для повторного связывания; перемешайте на вортексе в течение одной минуты. Центрифугируйте в течение пяти минут, и если глайадин находится в замороженном состоянии, его следует развести до концентрации 5% с использованием буфера для связывания.
Затем возьмите два миллилитра этого раствора и добавьте его; это позволит TER связаться с терминалями, которые уже находятся в нашем вортексе. Повторите это дважды, вращайте трижды. Процедура с буфером для связывания.
Снова добавьте пять миллилитров буфера для связывания в ваш слой сорбента. Повторите перемешивание, центрифугирование и аспирацию супернатанта. На четвертый раз часть супернатанта останется на поверхности слоя, чтобы антитела могли свободно перемещаться.
Перед нами антитела. Отмерьте этот объем. Разбавьте антитела до концентрации 1:100 с использованием двойной дистиллированной воды, после чего смесь перемешивают на ротаторе в течение 30 минут или иного подходящего промежутка времени.
Чтобы нейтрализовать весь оставшийся клей, глаз к глазу. Следует центрифугировать, чтобы избавиться от S. Затем нужно подготовить содержимое, которое представляет собой протокол. Возьмите пять миллилитров, возьмите бусины, вот они, внесите в зуб.
Повторите этот шаг три раза, а затем проделайте то же самое для каждого анализа, который вы проводите. Для начала подготовки нам необходимо получить белок. В данном случае обратитесь к белку, хранящемуся при -70 °C; важно разморозить этот белок и нагреть его.
Теперь этот раствор будет гораздо более концентрированным, чем то, что нам потребуется для анализа. Поэтому мы уменьшим объем примерно до 15 мкл и перенесем его в наконечник. Однако для обеспечения точности объема, после того как мы уменьшим объем примерно до 5 мкл, для крупных гранул мы будем брать больший объем, который в данном примере с гранулами составит 10 мкл.
И это даст хороший результат; здесь мы добавляем еще около 350 µL буфера для анализа в микроцентрифужную пробирку, чтобы получить конечную концентрацию. Теперь мы приступим к этому процессу, как в случае с AEX, здесь мы будем вращать пробирку, и мы это сделаем. Теперь пришло время фактически собрать систему потока, в которой будут находиться наши частицы.
Я помещаю этот стандартный предметное стекло в 1% раствор клея для фиксации якорей на поверхности стекла; края предметного и покровного стекол уже подготовлены. Затем я прикладываю этот более тонкий кусок стекла к более толстому предметному стеклу. Эта камера будет относительно небольшой.
Итак, вот здесь есть небольшой участок, и его положение повреждено. Еще один из тех случаев, с которыми мы сталкиваемся ежедневно. Препарат улучшает мое состояние, делает его лучше.
Теперь мы попробуем последние две порции 25-летнего сыра, прежде чем начнем добавлять крекер и сыр. И вы пропустили немного. Только несколько имеют вкус, всего лишь в нескольких.
Если присмотреться, здесь можно увидеть бусину. Сначала я просто слегка постукиваю по области с бусиной, после чего заполняю всю остальную поверхность предметного стекла примерно до 40 мкм, чтобы мы могли менять ориентацию стекла, не беспокоясь о том, что бусины могут сместиться вниз. Чтобы закрепить образец, я устанавливаю предметное стекло и использую дополнительный зажим для большей стабильности. Теперь можно установить объектив.
Это пульт дистанционного управления, который мы используем для позиционирования предметного стекла; все оборудование, включая камеру, включено. Мы можем начать поиск потенциальных бусин, просто наблюдая за экраном видеомонитора. В образце слева находится бусина меньшего размера, которая выглядит так же, как и другие мелкие бусины, расположенные на поверхности чипа.
Однако пара микросфер на предметном стекле содержит микросферу, которая входит в фокус, когда поверхность микросферы вне фокуса LOP указывает на то, что эта микросфера находится в другой плоскости фокуса, чем другая микросфера на предметном стекле; пара микросфер справа демонстрирует принцип работы таких пар на стекле. Таким образом, мы помещаем предметное стекло и выполняем вращение под разными углами, что позволяет получить различные длины, после чего мы используем вращение. Далее представлена компьютерная визуализация того, как может выглядеть пара микросфер.
Мы находим и то, и другое. В данном случае мы можем опустить указанную величину, и здесь мы также опускаем F. Спасибо за просмотр.
Удачи в вашем исследовании. Пришло время действовать. Кроме того, не думайте, что кто-то не сможет победить в моем состязании.
Мои друзья заняты попытками раздобыть это. Я остался позади. Где та девушка, с которой я пришел?
Она уходит с моим другом. Она действительно так считает. Неужели она не знает, что такое настоящий мужчина.
Снова в седло, снова направо, механический бык. Пусть он отпустит. Вправо, вправо, прямо там, в Мексике.
Мне очень нравится, как всё идёт сегодня. Механический бык. Только не замедляйся.
Подождите 5 секунд, когда закончите с моей левой рукой. Просто чтобы я мог использовать правую. Да, с левой рукой я просто перейду на правую.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
В данной статье представлено пошаговое руководство по назначению и принципу работы нового спектрометра гравитационной силы, а также приведены репрезентативные результаты.
Спектрометр гравитационной силы (GFS) устраняет критический пробел в биофармацевтических исследованиях и разработках (R&D)&D, обеспечивая точное количественное измерение наномеханических свойств фибриллярных белков и макромолекул. Способность метода определять абсолютную длину молекул и прикладывать физиологически значимые силы повышает прогностическую достоверность на этапах раннего поиска и валидации мишеней. Эта возможность способствует принятию обоснованных с учетом рисков решений в ключевых точках процесса разработки новых препаратов.
GFS интегрируется в континуум открытий — от ранней проверки гипотез до идентификации перспективных соединений и доклинических исследований, дополняя существующие биофизические инструменты и средства моделирования.