Windowing куриные яйца целях развития исследований

Добро пожаловать в лабораторию Крамера. Меня зовут Мэтт Корн, я работаю на кафедре нейробиологии и поведения в Калифорнийском университете в Ирвайне. Сегодня я покажу вам, как подготовить куриные яйца к различным манипуляциям, включая установку бусин, инъекцию красителей или исследование яйцеклеток.

Итак, без лишних слов, давайте начнем. Итак, мы пойдем дальше и почистим яйцо. Причина в том, что есть много вещей, которые можно было бы поместить в инкубатор.

Мы собираемся заклеить это скотчем. Мы не хотим, чтобы какие-то мелкие кусочки попадали в то место, где будет попадать яйцеклетка, и увеличивали вероятность того, что эмбрион умрет к тому времени, когда мы захотим его вынуть. Итак, если вы видели из инкубатора, яйца сидят большой стороной вверх.

Итак, что мы собираемся сделать, так это взять яйцо и просто повернуть его в сторону. И это приведет к двум вещам. Во-первых, наше окно будет прямо здесь, а во-вторых, эмбрион должен всплыть наверх, чтобы мы могли производить любые манипуляции.

Итак, я собираюсь выложить здесь несколько из них, от стойки, которая была в инкубаторе, до картонного держателя для яиц. На самом деле это та деталь, которая поставляется в коробке при доставке яиц. Итак, на сегодня мы пойдем дальше и будем использовать его только для хранения яиц.

Теперь все зависит от вас. Мне нравится делать это таким образом, потому что я могу получить доступ ко всем яйцам в любое время, и ни одно из них не соприкасается друг с другом. В случае, если бы я нашел один из них, который был бы незакрепленным, у него была трещина, и я бы уронил его, все они были бы немного удалены друг от друга.

Итак, я пойду дальше и возьму свою марлю вот так, просто вытащу вот такую красивую стопку и разделю ее на две части. Я собираюсь взять здесь 70% алкоголя и просто заправлять его до тех пор, пока не почувствую, как дно становится влажным. И это потому, что я собираюсь использовать всю эту стопку, чтобы смыть все яйца.

Итак, я просто возьму пару сверху, пойду дальше и просто сделаю верх, но в действительности обойду почти все яйцо здесь. И после того, как это сделано, спирт довольно быстро высыхает, и тогда мы можем пойти дальше и наклеить на него ленту. Лента будет хорошо прилипать, и к тому времени, когда я закончу набор, обычно первый из них высохнет, и мы можем перейти к следующему этапу подготовки яиц.

Итак, опять же, положите его обратно в корзину, и мы готовы перейти к следующему шагу. Итак, теперь, когда все наши яйца были промыты спиртом, мы можем сделать дренажное отверстие на большой стороне яйца, у основания яйца. И это позволит нам войти и извлечь немного альбумина, потому что если мы не экстрагируем альбумин, то эмбрион не будет сидеть должным образом.

Мы не можем делать никаких манипуляций. Так что это просто включает в себя то, что я беру лезвие и беру эту пластиковую ленту. Он немного эластичный, и это здорово.

Это не только позволяет нам расширяться над отверстием, если оно немного больше, чем нам хотелось бы, но когда мы на самом деле покрываем всю яйцеклетку, нам нужно будет растянуть ее. Таким образом, область, где будет находиться окно, полностью закрыта. Итак, я просто пойду дальше и отрежу кусок вот так, а затем сделаю примерно миллиметровую полоску.

И тогда из этого я могу сделать примерно миллиметровый квадратный кусок скотча. И затем я просто собираюсь пойти дальше и разместить его чуть выше, слева от даты. Просто положите его прямо туда, и вы сможете его увидеть.

Он очень хорошо держится. Затем я могу вернуться к той полосе, которую я уже сделал, отрезать еще один миллиметровый кусок скотча. И опять же, просто поместите его слева от цифры, которая на самом деле является верхней частью яйца.

Теперь, когда мы повернули его боком, он находится вправо. И еще один кусочек. Теперь я не ношу перчатки, потому что из-за них эта лента прилипнет к перчаткам, и я вымыл руки.

На данный момент меня не беспокоит то, что что-то еще может загрязнить актив. Итак, я пойду дальше и возьму ножницы с острым концом. Я собираюсь пойти в центр того места, где я поместил ленту, и просто поворачивать ее против часовой стрелки по часовой стрелке, пока не заполню ее немного разрывом.

И вы увидите, что там есть маленькая дыра. Отверстие не обязательно должно быть очень большим, потому что, как только мы вставим туда этот шприц, отверстие станет достаточно большим. Но это для того, чтобы мы не вонзались прямо в яйцо и не пытались разбить яйцо ею, потому что часто это приводит к тому, что вся сторона яйца разбивается на части.

Тогда мы больше не сможем использовать яйцо. Итак, теперь я собираюсь слить яйцо. У нас есть это маленькое отверстие сбоку, и я собираюсь использовать этот 10-миллилитровый шприц и довольно большую иглу калибра, чтобы извлечь альбумин.

Сейчас я хочу около трех-четырех миллилитров, точно больше трех, не намного больше четырех с половиной или пяти. Это позволит нашему эмбриону, который сейчас находится на вершине, немного отойти от скорлупы. И тогда мы сможем провести свои манипуляции.

Таким образом, входя под углом 45 градусов, я оказываюсь под желтком. И тогда я просто хочу повернуть его немного вправо, чтобы просто прокрасться туда, и вы можете почувствовать, как кончик иглы просто касается дна яйца. И я собираюсь пойти дальше и извлечь всего три или четыре, и получится довольно хорошо.

Я собираюсь пойти дальше и положить этот альбумин в свое поясное ведро здесь, а теперь я могу продолжить с другими яйцами. Итак, я продолжу. И вы увидите, что отверстие, которое я сделал для дренажа, немного больше, чем мне хотелось бы, но это оказалось нормальным.

Что меня беспокоит, так это то, что когда я втыкаю иглу, я больше не ломаю ее. Так что я собираюсь пойти дальше и сделать это. Итак, я уже вижу, что в яйце есть небольшая трещина.

Сейчас небольшие трещины – это нормально, но нужно обеспокоиться, когда они распространятся на другую плоскость яйца. И в данном случае это так. Вы можете видеть это из отверстия.

Он простирается практически до самого верха. И на самом деле, именно здесь будет находиться наше окно. Так что, к сожалению для этого яйца, мы собираемся пойти и выбросить это.

И нет ничего особенного в том, чтобы от него отказаться. Вам не нужно записывать какой-то конкретный протокол или что-то в этом роде. Просто пойдем дальше и положим его в ведро для мусора.

Мы используем эти черные мусорные баки, чтобы обозначить их как отходы животного происхождения, но в остальном об этом уже позаботились. Можно переходить к следующему яйцу. Итак, теперь, когда мы слили все яйца, мы можем пойти дальше и закрыть дренажное отверстие.

Это важно, потому что, если мы не зайдем внутрь инкубатора, мы можем получить огромное испарение того, что осталось от альбумина. И тогда яйцо, которое является сухим, — это яйцо, которое мертво. Итак, мы пойдем дальше и просто возьмем скотч примерно того же размера и поместим его на отверстие, и нам не придется беспокоиться о том, чтобы снова войти в это отверстие.

В некоторых случаях, если вы решите, что хотите попробовать слить больше альбумина из яйца, как только оно будет открыто, это отверстие будет действовать как немного запечатанная область, в которую вы затем можете вставить иглу, и вы не потеряете много альбумина. Хорошо, так ли это? Итак, теперь мы продолжим и накроем яйца куском скотча хорошего размера.

И я сравниваю это с тем, как если бы вы наклеили кусок скотча на воздушный шар перед тем, как вставить в него маленькую булавку. Прикольная вещь в том, чтобы воздушный шарик не лопнул и в этом случае немного заклейте яйцо скотчем. Яйцо не трескается в нескольких местах, и тогда окно можно запечатать, а затем, когда окно закроется, потому что мы использовали его скотчем, это как бы создает хорошее маленькое уплотнение, и нам не нужно беспокоиться о каких-либо испарениях.

Итак, вы можете видеть, что размер ленты, вероятно, самый большой, который я разрезал до сих пор, но даже тогда я собираюсь немного растянуть его, и на самом деле просто потянуть за него, немного натянуть там, и поместить его на яйцо. И я собираюсь обойти заднюю часть здесь и очень аккуратно натянуть ее на яйцо, чтобы не было складок прямо над тем местом, где будет мое окно. И вы можете немного сбросить ленту.

Это не так много прилипает, о чем вам нужно беспокоиться. Как только он застрял, он застрял. И вы можете видеть эту общую область, вот где я собираюсь пойти дальше и вырезать окно.

Итак, теперь, когда у нас есть скотч на всех яйцах, мы можем пойти дальше и вырезать окно сверху. Это может быть самой сложной частью, и часто именно здесь вы теряете большую часть своих яйцеклеток. Так что я просто пойду дальше и хорошенько протирю ножницы марлей, на которой есть спирт, а затем просто вытру их.

Алкоголь в значительной степени высыхает сам по себе, но вы не хотите, чтобы алкоголь попадал прямо в яйцо. Итак, я просто пойду в середину того места, где находится лента, и снова буду использовать движение по часовой стрелке против часовой стрелки, пока не услышу, как она немного трескается. И тогда я знаю, что мое лезвие внутри.

И тогда я хочу вытащить ножницы так, чтобы они были почти плоскими на поверхности яйца. А затем просто делайте крошечные ножницы, пока я не смогу вставить туда весь кусок ножниц. И я собираюсь вернуться в другую сторону, как только я сделаю это примерно полукругом, и я не хочу завершать круг, потому что мне нужно окно, но тогда я могу просто пойти дальше и открыть яйцо.

И сейчас кажется, что они примерно того возраста, в котором я ожидал их видеть, у них не так много кровеносных сосудов, но есть немного крови вокруг того места, где находится эмбрион, в основном из области делиона, где сейчас началась кровь и началось сердцебиение. Так что я просто закрою это, просто позволю ему сесть сверху вот так, и вернусь снова, и я закрою окна. И снова, просто, просто плашмя к поверхности и обратно в другую сторону.

Итак, у нас есть пара пузырей, и оказывается, что эмбрион находится в стороне. Теперь есть две вещи, которые мы можем сделать прямо сейчас. Если у нас много яиц и мы не беспокоимся о том, чтобы использовать все до одного, мы можем пойти дальше и выбросить это.

Или мы можем закрыть окно и просто установить его так, чтобы эмбрион как бы всплыл наверх, где мы хотим его снова. И к тому времени, когда мы доберемся до него в наших манипуляциях, он может оказаться там, где мы хотим. Если нет, мы можем выбросить его в то время.

Итак, что я сделал прямо здесь, это просто установил его под углом. У вас будет небольшой сток альбумина, но это поможет эмбриону вернуться туда, где он должен быть. Итак, теперь, когда у нас есть все эти окна, нам нужно убедиться, что они закрыты, и мы просто хотим, чтобы они были закрыты, прежде чем мы будем делать какие-либо манипуляции.

А затем мы можем пойти дальше и снова запечатать яйцо. Но если у нас открытое окно, иногда ярмо может выскользнуть наружу. Если вы знаете, что яйцо просто немного опрокидывается, когда вы переходите из одной комнаты в другую, вы не хотите, чтобы оно выпало целиком.

Итак, все, что я делаю, это отрезаю еще один миллиметр в длину, или, извините, миллиметр в ширину, вероятно, около трех, двух или трех миллиметров и длины куска пластиковой ленты. И мне нравится помещать его прямо посередине. И если я могу потянуть его вниз перед яйцом, то это как бы делает его плотным.

И вы можете видеть, куда вставляется окно, прямо там, где была другая лента, где мы разрезали окно, и это делает его довольно герметичным для этого времени. Я имею в виду, что мы собираемся сделать некоторые манипуляции всего за минуту, так что это не обязательно должно быть полностью герметичным. Вот как вы готовите и готовите свои яйца.

Так что удачи в ваших экспериментах.