Методы для внутривенного введения самостоятельной в мышиной модели

Здравствуйте, меня зовут Элизабет Котик, и я здесь из лаборатории доктора Кэтрин Гилл в отделении зависимостей Центра здоровья Университета Макгилла. Сегодня я покажу вам, как провести операцию катетеризации, необходимую для проведения исследований внутривенного самостоятельного введения. Я покажу вам, как вставлять катетер, а также дам несколько советов по поддержанию проходимости катетера.

Во время сеансов внутривенного введения никотина животные подключаются к Tai на пластиковых трубках, а никотиновые инфузии доставляются с помощью прилагаемых инфузионных насосов. Оперантные боксы были приобретены у медицинских партнеров. Каждый бокс оснащен двумя сверхчувствительными рычагами мыши.

Есть несколько предметов, которые необходимо подготовить перед операцией, чтобы ввести катетер в вену. Игла 20 калибра должна быть приспособлена для скольжения трубки вниз в вену. Сбрейте примерно на два сантиметра верхнюю часть стержня иглы, создав канал, который будет использоваться для направления трубки катетера в вену.

Далее подготавливают шприцы к промывке и проверке катетера. 12 сантиметров трубки прикрепляются одним концом к игле 26 калибра шприца, а другой конец натягивается на иглу 23 калибра. Для того, чтобы трубку было легче прикрепить к канюле катетера, вам понадобятся два таких шприца, один из которых заполнен раствором гепаринизированного Т-карцина, а другой — физиологическим раствором.

Наконец, подготовьте колпачок канюли катетера. Канюля катетера должна быть закрыта, чтобы предотвратить попадание мусора. Эти колпачки изготавливаются путем натяжения пластиковой трубки на иглы 23 калибра.

Трубка разрезается в одном сантиметре от кончика иглы, а открытый конец оплавляется Чтобы герметизировать трубку, физиологический раствор проталкивается через иглу, чтобы убедиться в отсутствии утечек в колпачках. Мышиные катетеры были получены от Cam Cs в Великобритании. Отрежьте лишнюю трубку от катетера так, чтобы от конца груши катетера оставалось 1,2 сантиметра.

Затем прикрепите шприц, содержащий физиологический раствор, к внешней металлической канюле катетера и промойте его, чтобы проверить на наличие утечек. Мышей обезболивают с помощью изоофора газообразного фтора, смешанного с кислородом, и поддерживают под наркозом в течение всей операции. С помощью дыхательной трубки уровни кислорода и изофтора устанавливаются в зависимости от массы тела животного и регулируются по мере необходимости во время операции, убедитесь, что животное правильно обезболито, зажимая его задние лапы щипцами, и следите за мышью на протяжении всей операции на предмет респираторного дистресса и глубины анестезии.

Поскольку операция длится от 20 до 30 минут, нанесите глазную смазку на оба глаза. Перед операцией мышь бреется. Подготовьте место для основания катетера на спине животного.

Аккуратно подтяните кожу на спине животного и сделайте небольшой продольный разрез посередине лопатки около двух сантиметров в длину. Начиная с середины спины и продолжаясь чуть ниже шеи. Раздвиньте соединительную ткань, чтобы освободить место для основания катетера, и нанесите на разрез физиологический раствор.

Аккуратно стяните кожу с обеих сторон разреза вместе и переверните животное. Правая тегулярная вена будет находиться поверхностно под кожей шеи и может быть обнажена путем выполнения S-образного неглубокого разреза. Сделайте диагональный надрез длиной около одного-двух сантиметров, идущий от правой ключицы вверх к челюсти животного.

Трубка от основания катетера должна быть проведена через вентральный разрез на шее, чтобы быть доступной для введения в вену. Проведите щипцы под кожу плеч и прорвите соединительную ткань. Чтобы добраться до заднего разреза, протяните трубку через кожу к брюшному отверстию вокруг шеи животного.

Зажмите конец трубки артерными зажимами и оставьте его зажатым с правой стороны животного. Нанесите на разрез физраствор, изолируйте правую яремную вену. Очень осторожно отодвиньте любую соединительную и жировую ткань, которая может мешать вам обзор, и найдите вену.

Аккуратно поднимите вену вокруг верхней части и с помощью изогнутых щипцов раздавите жировую ткань и соединительную ткань вокруг и под веной. Поместите изогнутые щипцы под вену и вскройте их свободной рукой. Пропустите стерильный пластиковый брусок под вену.

Как только вена будет поднята, удалите ровно столько жира, чтобы вам был четкий беспрепятственный обзор вены. Периодически капайте на обнаженную вену физиологический раствор, чтобы она оставалась влажной. Подготовьте шовные узлы вокруг вены, чтобы иметь возможность закрепить трубку катетера на месте после ее введения в яремное место.

Швы под веной на обоих концах и образуют один очень свободный открытый узел на каждом конце. Проденьте трубку катетера через верхний узел и оберните ее петлей через шовную нить до остальной части через правое плечо. Протолкните физиологический раствор через катетер, чтобы утяжелить трубку, чтобы ввести трубку катетера в яремную вену.

Модифицированная игла 20 калибра используется для прокалывания вены, смочите как вену, так и иглу введения физиологическим раствором, чтобы уменьшить трение во время введения, аккуратно потяните назад за пластиковый стержень и вставьте иглу ближе к нижней части вены. Ровно столько, чтобы в него вошло полсантиметра иглы. Проведите трубку катетера вниз по игле и введите ее в вену.

Сопротивления быть не должно. Сопротивление будет указывать на то, что вы находитесь в соединительной ткани. Чтобы убедиться в том, что вы находитесь в пределах вены, попробуйте оттянуть назад шприц с катетером, чтобы проверить, сможете ли вы взять кровь.

Как только трубка будет на месте, извлеките иглу и подтолкните колбу катетера к точке введения. Завяжите нижний узел и убедитесь, что трубка катетера прилегает заподлицо со стержнем, прежде чем завязывать второй узел прямо над колбой. Это обеспечит фиксацию катетера на месте.

Снимите брусок и завяжите по второму узелку на каждом конце. Перед наложением швов подверните трубку катетера и наложите шовные нити под кожу. С помощью артериального зажима проведите иглу шва через кожу и закройте разрез.

Количество швов будет варьироваться в зависимости от размера разреза на животе животного. Расположите основание катетера на спине животного. Нанесите физраствор на разрез и проведите основание катетера под кожу.

Убедитесь, что трубка минимально петлена и находится под основанием, чтобы свести к минимуму вероятность ее прокола. Прострочите кожу вокруг основания катетера. Количество швов будет зависеть от размера разреза.

Обычно достаточно трех-четырех стежков. Убедитесь, что кровь все еще может быть взята из катетера. Наконец, промойте катетер раствором гепаринизированного теина, чтобы предотвратить образование инфекции и тромбов.

Ослабьте трубку, подсоединенную к канюле катетера. Затем извлеките солевую трубку и быстро замените ее трубкой от шприца, содержащей гепаринизированный раствор T Carin. Промойте катетер раствором объемом от 0,03 до 0,05 куб. см.

Снова ослабьте трубку, соединенную с канюлей. Захватите колпачок катетера щипцами и одним движением извлеките трубку из канюли и замените ее колпачком катетера. Этот шаг необходимо сделать быстро, чтобы предотвратить приток крови.

Закрутите белую крышку катетера, убедившись, что крышка надежно закреплена, не прокалывая кончик канюли. Делайте мышам подкожные инъекции анальгетика и антибиотика. Введите обезболивающий кетопрофен с одной стороны в дозе пять миллиграммов на килограмм и антибиотик амикацин с другой стороны в дозе 10 миллиграммов на килограмм.

После прекращения анестезии дайте мыши восстановиться в чистой клетке с легким доступом к пище и воде. Достоверные данные о внутривенном самостоятельном введении можно получить, следуя методикам, представленным в этом видео. Тем не менее, важно сохранить проходимость катетера.

Это достигается за счет тщательного размещения катетера в правом предсердии, ежедневной промывки катетера до и после оперных сеансов, а также за счет постоянного закрытия канюли катетера для предотвращения попадания мусора.