22 августа 2012 г.
Хроническая инфекция, передаваемыми через почву гельминтами (STHs) вызывает нарушение всасывания, задержка роста, и тратить на растущего ребенка. Таким образом, вполне вероятно, что эти инфекции также уменьшить физической подготовленности детей. Здесь мы представляем два метода для диагностики STHs и 20-метровый челночный бег тестов для оценки физического детей.
Целью следующих методик является упрощение и стандартизация попыток оценки статуса гельминтоза, передающегося таким путем, а также определение того, влияют ли подобные гельминтозы на физическое состояние школьников. Это достигается путем использования метода Като-Каца для диагностики инфекций распространенных гельминтов, передающихся через почву, а именно Ascaris Lumoid TUS Tria, а также анкилостомид CLIs stoma Duo Denali и NTO ERUs. Вторым этапом проводится метод Эрман, который является наиболее широко применяемым методом диагностики Strully Stir Corrales.
Затем, для оценки физической подготовки детей, проводится тест «челночный бег на 20 метров». Полученные результаты демонстрируют различия в уровнях физической подготовки между детьми, инфицированными Helmut, и неинфицированными детьми, на основе вышеупомянутых методологий. Сочетание этих методов может помочь ответить на ключевые вопросы, например, влияют ли переданные через сою инфекции helmet на физическую подготовку инфицированных лиц и каково истинное бремя таких инфекций.
Метод Cato-Catz применяется для облегчения обнаружения яиц паразитов, которые инфицированные субъекты выделяют с фекалиями. Начните с размещения стандартного шаблона Cato-CATT в центре предметного стекла. В шаблоне имеется отверстие посередине, предназначенное для размещения 41.7 milligrams кала; процедуру следует выполнять в перчатках.
Поместите два-три грамма свежего образца фекалий на лист газетной бумаги или алюминиевую фольгу. Затем прижмите сверху к фекалиям кусок проволочной или пластиковой сетки, чтобы просеять образец. С помощью небольшого пластикового шпателя снимите просеянный материал с сетки и полностью заполните им отверстие в шаблоне Cato Kat.
Разровняйте содержимое лунки шпателем, чтобы удалить излишки фекального материала. Затем вертикально извлеките шаблон, стараясь не повредить фекальный материал, который теперь прилип к предметному стеклу. Шаблон и шпатель можно использовать повторно после промывки водой с моющим средством.
Затем поместите кусочек целлофана, который вымачивали в растворе глицерина и малахитового зеленого в течение не менее 24 часов, поверх образца фекалий на предметном стекле. Чтобы распределить фекалии в виде толстого мазка, осторожно прижмите чистое предметное стекло к стеклу с образцом фекалий и равномерно распределите материал по кругу, диаметр которого немного меньше ширины предметного стекла. Теперь уберите стекло из-под прямых солнечных лучей и оставьте его для просветления на 30–60 минут.
Через 30–60 минут извлеките предметное стекло и систематически изучите толстый мазок с помощью светового микроскопа при 40-кратном или 100-кратном увеличении. Подсчитайте количество яиц, распределив их по видам. Затем умножьте количество яиц на 24, чтобы получить стандартизированную оценку интенсивности инфекции, которая традиционно выражается как количество яиц на грамм фекалий или EPG.
Для выполнения метода Эрмана сначала установите штатив, способный удерживать стеклянную воронку. Возьмите стеклянную воронку и прикрепите к ее ножке отрезок резиновой трубки. Пережмите трубку зажимом или пружинным клипсом, после чего зафиксируйте воронку на штативе.
Затем поместите в воронку сито или фрагмент проволочной сетки в форме конуса. Положите поверх сетки слой медицинской марли. Затем наполните воронку водопроводной водой и, используя перчатки, убедитесь в отсутствии утечек в установке.
Поместите 20–30 граммов свежего кала в центр медицинской марли и убедитесь, что образец полностью погружен в воду, при необходимости добавив еще воды. Затем сложите марлю поверх образца. После этого в течение двух часов облучайте воронку искусственным светом снизу.
Это объясняется тем, что метод Эрмана основан на принципе фототаксиса личинок Strongyloides stercoralis, благодаря которому они мигрируют из освещенного образца фекалий. Через два часа осторожно отпустите зажим на резиновой трубке и слейте 50 мл воды из нижней части воронки в центрифужную пробирку. Затем центрифугируйте собранную воду при 600 ×g в течение пяти минут.
Затем осторожно слейте супернатант, не затрагивая осадок. Оставьте в пробирке последние несколько капель, ресуспендируйте их и перенесите две капли раствора на предметное стекло с помощью пипетки. Изучите препарат под световым микроскопом, сначала при 40-кратном увеличении для обнаружения паразитов, а затем при увеличении от 100 до 400 раз для подтверждения вида.
Личинки OID первой стадии живы и будут активно перемещаться под микроскопом при подготовке к тесту с челночным бегом. Сначала отмерьте плоскую прямую беговую дорожку длиной 20 метров и отметьте расстояние конусами. Закрепите монитор сердечного ритма на запястье участника теста, а соответствующий передатчик — на груди участника.
Данное оборудование измеряет частоту сердечных сокращений до и после теста, что позволяет контролировать, приложил ли участник максимальные усилия. После закрепления мониторов попросите ребенка бегать взад и вперед по дистанции, следуя темпу предварительно записанных звуковых сигналов, соответствующих отрезкам в 20 метров, начав с беговой скорости 8,5 километров в час. Частота сигналов, указывающих на 20-метровые интервалы, автоматически увеличивается в эквиваленте 0,5 километров в час каждую минуту, чтобы обеспечить начало бега по новому 20-метровому интервалу участником.
Сигнал подается каждый раз и завершается до появления следующего сигнала. Остановите ребенка, если он или она не выдерживает заданный темп на двух последовательных 20-метровых интервалах. Затем зафиксируйте скорость бега на последнем интервале.
Участник полностью завершил исследование; также были зафиксированы возраст, пол и достигнутая частота сердечных сокращений. По окончании теста убедитесь, что данная частота сердечных сокращений является максимальной для ребенка. Если максимальная частота сердечных сокращений не была достигнута, возможно, ребенок не приложил максимальных усилий, и в таком случае тест следует повторить.
Теперь рассчитайте максимальное потребление кислорода или VO₂ max участника по следующему уравнению: VO₂ max равно 31,025 плюс 3,238 умножить на скорость в км/ч минус 3,248 умножить на возраст в годах плюс 0,1536 умножить на скорость в км/ч умножить на возраст в годах. На следующих двух изображениях показаны яйца *Ascaris lumbricoides*, длина которых составляет примерно 45–74 мкм, ширина — 35–50 мкм, и которые имеют толстые оболочки, представленные здесь в виде оплодотворенного яйца *A. lumbricoides*.
Обратите внимание на внешний вид альбуминовой оболочки, которая придает яйцу золотисто-коричневый цвет. Для сравнения здесь представлено неоплодотворенное люмоидное яйцо. Заметьте отсутствие внешней оболочки, а также то, что яйцо немного более вытянутое и крупнее, чем оплодотворенное.
В целом, на этом изображении представлены яйца Trichuris trichiura. Они имеют длину примерно 50 microns и ширину 22 microns, имеют вытянутую форму с выраженными полярными пробками. Напротив, яйца анкилосторид, представленные здесь, имеют очень тонкую оболочку, за которой следует прозрачное кольцо вокруг плотного скопления клеток в центре яйца.
На этом изображении показаны личинки S stir Corrales L one. Их длина составляет приблизительно от 180 до 380 микрон, и они имеют очень короткую ротовую полость. Отчетливо виден зачаток половой системы, отмеченный синей стрелкой.
Красная стрелка указывает на хвост личинки, который имеет острый конец. Тест «челночный бег» на 20 метров проводился для оценки физической формы. Интерпретация результатов челночного бега может быть выполнена различными способами.
Физическую форму детей можно сравнивать между инфицированными и неинфицированными субъектами, которые сопоставимы по возрасту и полу, другим потенциально значимым состояниям здоровья, социально-экономическому статусу и культурным привычкам. Далее можно попытаться определить возможную зависимость «доза-эффект» между интенсивностью инфекций STH и физической формой, а также сравнить различный уровень мультипаразитизма с показателями физической формы. В качестве примера на данном графике показано, что физическая форма была значительно ниже у детей, инфицированных T Tri Coria, по сравнению с детьми, не инфицированными T Tri Coia.
После просмотра этого видео вы должны получить четкое представление о том, как проводить технику разрезов (cut cuts technique), технику открытого монтажа (bare mount technique) и тест на бег с затвором на дистанции 20 метров. Эти методы помогут оценить, влияют ли инфекции шлема соевого передатчика на физическую форму детей школьного возраста.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
В данном исследовании изучается влияние гельминтозов, передающихся через почву (STH), на физическую форму школьников. Для оценки статуса инфицирования применяются методы диагностики, а физическая форма детей оценивается с помощью теста челночного бега на 20 метров.
Оценка статуса инвазии гельминтами, передающимися через почву (STH), и ее влияния на физическую форму позволяет создать релевантную с точки зрения заболевания систему для оценки бремени общественного здравоохранения в условиях ограниченных ресурсов. Стандартизированные методы диагностики и измерения физической формы обеспечивают механистическое снижение рисков при проверке гипотез, связывающих паразитарную инфекцию со снижением аэробной способности и продуктивности. Это способствует валидации мишеней и фенотипическому скринингу в исследованиях забытых болезней путем получения количественных, воспроизводимых данных об интенсивности инфекции и функциональных исходах.
Данный метод объединяет диагностическое подтверждение инфекции STH с функциональной оценкой физической формы, что позволяет интегрировать его в рабочие процессы от раннего этапа поиска до доклинических исследований забытых инфекционных заболеваний.