Оценка биоматериалов для мочевого пузыря Увеличение использования цистометрическая анализа в различных моделях грызунов

Целью данной процедуры является оценка использования биоматериалов для пластики мочевого пузыря путем получения функциональных данных с помощью цитометрии. Это достигается путем первоначальной фиксации каркаса-матрикса к дефекту, созданному в мочевом пузыре. Вторым этапом процедуры является проведение цистостомической трубки в брюшную стенку.

Третьим этапом является установка цистостомической трубки в дополненный мочевой пузырь и её фиксация на спине животного. Заключительным этапом является проведение цистометрии для оценки функционального состояния дополненного мочевого пузыря. В конечном итоге, при помощи цистометрии в сознании можно выявить изменения объема и податливости мочевого пузыря, давления при мочеиспускании, времени цикла нутриции и остаточного объема мочи после мочеиспускания.

Значение данного метода распространяется на терапию врожденных и приобретенных аномалий мочевого пузыря или уретры, которые приводят к нарушению емкости, податливости и общей функции мочевого пузыря. Это обусловлено необходимостью функциональной оценки новых биоматериалов, используемых для пластики мочевого пузыря. После подготовки животного к абдоминальной операции с помощью скальпеля сделайте разрез по срединной линии в нижней части кожи.

С помощью зубчатого пинцета приподнимите прямую мышцу и отделите заднюю поверхность мышцы с помощью тонких ножниц-метацензис и бальз; рассеките оставшуюся часть мышцы по срединной линии на всем протяжении кожного разреза. Извлеките мочевой пузырь через операционную рану. Наложите один шов, проходя через заднюю стенку мочевого пузыря, а затем через переднюю стенку мочевого пузыря. Наложите дополнительные швы латерально на мочевой пузырь; не завязывайте эти швы.

При натяжении швов мочевой пузырь примет квадратную форму размером примерно один квадратный сантиметр; мочевой пузырь прошивается продольно через переднюю стенку, чуть ниже купола пузыря по срединной линии. Следите за тем, чтобы натяжение этих швов не было слишком сильным, так как они могут легко прорезать ткани мочевого пузыря. На данном этапе для проведения анастомоза каркаса предпочтительно использование бинокулярного микроскопа. С помощью тонких ножниц обрежьте шелковый каркас по размеру области дефекта мочевого пузыря.

Начните с одного угла каркаса и пришейте его к мочевому пузырю непрерывным швом. Для создания герметичного уплотнения по всему периметру дефекта хирургу крайне важно выполнить безнапряженное герметичное анастомозирование каркаса с мочевым пузырем. Это обеспечит удержание всей мочи внутри мочевого пузыря, так как любая интраперитонеальная утечка, скорее всего, приведет к гибели животного.

В качестве теста используйте гиподермическую иглу 30-го калибра, чтобы наполнить мочевой пузырь водой. При обнаружении утечки устраните ее с помощью дополнительного прерывистого шва. Затем введите реконструированный мочевой пузырь обратно в брюшную полость перед закрытием брюшной стенки.

Введите бупивакаин в прямую мышцу и подкожную клетку для местной анестезии, после чего ушейте разрез. Затем с помощью непрерывного шва восстановите целостность прямой мышцы и зашейте кожу также непрерывным швом. После очистки и просушивания места разреза перенесите животное в теплую чистую клетку для пробуждения от наркоза.

Перед началом работы создайте фиксатор на конце трубки PE 50 длиной 10 сантиметров, чтобы она не выскальзывала из мочевого пузыря. Для этого осторожно подвергните конец трубки воздействию пламени, чтобы он расширился. Затем убедитесь, что трубка не перекрыта.

Введите физиологический раствор в конец трубки без расширения и убедитесь, что жидкость проходит свободно. После подготовки животного к операции, перед обнажением мочевого пузыря, сделайте разрез длиной один сантиметр на дорсальной стороне между лопатками. С помощью ножниц Метсона сформируйте плоскость между кожей и подлежащей мышцей.

Затем поместите кончики ножниц в плоскость и раздвиньте их, чтобы создать подкожный туннель к вентральной части брюшной полости. Далее переверните животное. Обнажите мочевой пузырь и верните его в брюшную полость.

Вернувшись к дорсальному разрезу, поместите небольшой зажим в подкожный туннель. Пальцами прикройте содержимое брюшной полости, затем с помощью кончиков зажима проколите брюшную стенку. Теперь захватите зажимом гладкий конец расширенной трубки и вытяните её через дорсальный разрез.

Не вытягивайте расширенный конец якоря через разрез за пределы брюшной стенки. На куполе мочевого пузыря наложите шов в виде «мешочка на затяжках». На свободном конце нити оставьте небольшой зажим, чтобы избежать случайного вытягивания нити из шва.

Также не затягивайте шов слишком туго. Теперь используйте иглу 18 калибра, чтобы проколоть стенку мочевого пузыря в центре кругового шва ровно настолько, чтобы игла оказалась внутри просвета. Затем вставьте в отверстие тонкий пинцет и осторожно раздвиньте его бранши, чтобы расширить отверстие.

Вставьте расширенный конец катетера в дефект мочевого пузыря до его вхождения в просвет органа. Затяните Z-образный шов вокруг катетера и завяжите его. Затем один раз оберните свободный конец нити вокруг катетера и завяжите узел.

Теперь проверьте мочевой пузырь, медленно вводя в него физиологический раствор через трубку. Если из уретры идет жидкость, аспирируйте раствор, чтобы декомпрессировать мочевой пузырь. Повторите процедуру. Если обнаружена утечка, ее необходимо устранить с помощью шва, так как утечка мочи может привести к летальному исходу.

Зашейте разрез на брюшной стенке, как было продемонстрировано ранее. Затем перейдите к зашиванию дорсального разреза. Процедура закрытия дорсального разреза различается для крыс и мышей.

Для крыс обрежьте катетерную трубку ножницами на уровне кожи. Затем вставьте в трубку тупоконечную иглу 22-го калибра. Зашейте кожу над трубкой с помощью непрерывного шва, оставив основание иглы снаружи.

Теперь наденьте колпачок для внутривенного катетера на тупоконечную иглу и зафиксируйте кончик катетера на коже. После этого очистите место разреза и дайте животному восстановиться в теплых условиях. У мышей катетер следует фиксировать следующим образом: оставьте катетер длинным и закупорьте его конец, расплавив его пламенем.

Сверните конец трубки кольцом и оставьте его в подкожном кармане на спине животного. Зашейте кожу над трубкой непрерывным швом. Перед проведением цитрикового анализа дайте крысам или мышам восстановиться после операции в течение минимум пяти–семи дней.

После восстановления в день проведения цитометрии. Для мышей необходимо сначала под анестезией вскрыть разрез на спине и извлечь свернутую трубку из подкожного кармашка. После извлечения трубки зашейте разрез и дождитесь полного пробуждения мыши от анестезии, затем начните цитометрию, поместив животных в метаболические клетки, подвешенные над весами.

Теперь обеспечьте доступ к надлобковым катетерам с помощью иглы 27-го калибра, подключенной через T-образную трубку к преобразователю давления и инфузионному насосу. Начните инфузию физиологического раствора. Дождитесь стабилизации кривой мочеиспускания.

В течение следующих 10–20 минут давление в мочевом пузыре сначала повышается, после чего происходит мочеиспускание. Затем регистрируйте циклы мочеиспускания в течение 15–120 минут или как минимум три-четыре цикла в ходе процедуры. Следите за тем, чтобы катетер не перегибался, и предотвращайте другие возможные осложнения.

Затем можно проанализировать уродинамические кривые для определения таких параметров, как объем выделенной мочи, комплаенс, пиковое давление при мочеиспускании, сила сокращения, интервал, время цикла мочеиспускания и остаточный объем мочи. После просмотра этого видео вы получите четкое представление о том, как проводить аугментацию мочевого пузыря с использованием любого биоматериала. Вы также узнаете, как оценивать функцию мочевого пузыря грызунов с помощью цистометрии у бодрствующих животных без фиксации.