Овариоэктомия и 17β-эстрадиола Замена у крыс и мышей: наглядная демонстрация

Общая цель этой процедуры состоит в том, чтобы получить строгий контроль над колеблющимися концентрациями эстрогена в сыворотке крови у самок крыс и мышей. Это достигается путем удаления яичников за спинной корень. Далее готовятся cel эластичные капсулы и смесь Nutella.

Наконец, капсула вводится подкожно, или смесь Nutella вводится перорально. В конечном счете, результаты могут быть получены с помощью радиоиммунного анализа, который показывает стабильные или колеблющиеся концентрации 17 бета-эстрадиола в сыворотке крови для методов капсулы и нутеллы соответственно. Основное преимущество этих методов по сравнению с существующими методами, такими как гранулы с медленным высвобождением, заключается в том, что было доказано, что они производят физиологические концентрации эстрадиола в течение длительных периодов времени.

Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области эстрогена, такие как различия в эффектах между введением, корнями и дозами. После обезболивания животного поместите его в положение лежа на нагревательную пластину, соединенную с ректальным термометром. Применяют IGEL и для послеоперационного облегчения на боковой поверхности шеи животного подкожно.

Вводите пять миллиграммов на килограмм IL в физиологический раствор спереди от бритвы подвздошного гребня в области четыре на четыре сантиметра. Затем продезинфицируйте участок антисептиком, прежде чем накрыть животное хирургическим листом с апертурой четыре на четыре сантиметра. Сделайте разрез по средней линии в два-три сантиметра и тупо рассеките кожу от нижней части лица, расположенной на расстоянии одного сантиметра от средней линии.

Сделайте еще один разрез через фасцию. Затем как можно поверхностнее, тупо рассекайте латерально под этой фасцией, пока не будет достигнута брюшная полость. С помощью пинцета захватите жировую ткань, которая окружает яичник в брюшной полости и аккуратно вытяните ее.

Определите яичник и переложите рога матки и сосуды. от 0,5 до одного сантиметра проксимально к этой структуре. Вырежьте яичник и перевязанную жировую ткань и поместите оставшуюся ткань обратно в брюшную полость.

Сделайте еще один разрез в контралатеральной фасции и удалите другой яичник. Закройте раны, а если нет сразу, введите 17 бета эстрадиола. Дайте животному проснуться от наркоза.

Поместите животное в отапливаемую клетку не менее чем на два часа после операции. В течение первых нескольких дней после операции крысу содержали отдельно. Через 24 часа после операции подкожно.

Вводите животным еще 5 мг на килограмм ИЛ, чтобы ввести 17 бета-эстрадиола через школьные капсулы. Тщательно смешайте нужное количество с кунжутным маслом. Отрежьте три сантиметра длины школьной трубки и пять миллиметров длины деревянных аппликаторов для тампонирования с помощью щипцов.

Выдавите одну деревянную пробку в схоластическую капсулу перед введением раствора кунжутного масла 17 бета-эстрадиола. Чтобы заполнить всю длину, аккуратно закупорьте схоластическую капсулу с открытого конца еще одной деревянной пробкой. Инкубируйте капсулы в оставшемся растворе 17 бета-эстрадиола в течение ночи перед имплантацией.

После закрытия разрезов эктомии выбрейте и продезинфицируйте квадратный участок размером два на два сантиметра на тыльной стороне шеи крысы. Сделайте разрез в один сантиметр и протяните шнур сбоку и тупым путем. Рассеките подкожный карман, освободив достаточно места для капсулы.

Сотрите схоластическую капсулу и аккуратно введите ее через разрез. Затем закройте разрез швом. Следите за тем, чтобы капсула как можно меньше напрягала кожу, особенно вокруг раны.

Для использования орехового крема Nutella в качестве среды для введения эстрогенов тщательно растворите 17 бета эстрадиола в кунжутном масле, а затем смешайте кунжутное масло с ореховым кремом. Приготовьте крем из орехов плацебо без 17 бета-эстрадиола за пять дней до эксперимента. Приучите крыс есть ореховый крем без гормонов с первого по третий.

Тренируйте животных в группах на четвертый и пятый день. Кормите их ореховым кремом в отдельных клетках на протяжении всего эксперимента. Помещайте животных в отдельные клетки, когда их кормят физиологической сывороткой с ореховым кремом.

17 концентраций бета-эстрадиола, которые современные методы нацелены воспроизвести, составляют примерно от 5 до 140 пикограмм на миллилитр для крыс и от 5 до 35 пикограмм на миллилитр для мышей. Как показано здесь. При введении в 300 грамм самку выкладывают дой-крысы.

Подкожные эластичные капсулы производят медленное снижение концентрации 17 бета-эстрадиола в сыворотке крови с примерно 40 пикограмм на миллилитр на второй день до 10 пикограмм на миллилитр к 35-му дню. Тем не менее, сразу после введения можно ожидать, что пик концентрации в сыворотке крови примерно в 1000 пиков на миллилитр снизится до физиологического диапазона в течение восьми часов, когда капсулы были введены женщине весом 25 граммов. C 57 черная шестерка мышей.

Концентрация сыворотки крови медленно снижалась с примерно 90 пикограмм на миллилитр на второй день до 25 пикограммов на миллилитр на 35-й день при введении через ореховый крем до 300 граммов. Spra do rats. Физиологические уровни 17 бета-эстрадиола ежедневно колебались от 10 до 70 пикограмм на миллилитр у мышей.

Уровни 17 бета-эстрадиола колебались от 20 до 120 пикограмм на миллилитр После освоения техника эктомии и имплантации капсулы может быть выполнена за 10 минут при правильном выполнении. Пытаясь выполнить эту процедуру, важно помнить о строгом соблюдении гигиенических рекомендаций.