November 11th, 2012
Гиперплазию неоинтимы является основной причиной стеноза в arterialized вены. Мы предлагаем новый протокол, согласно которому право наружной яремной вены привиты помощью манжеты техники в общую сонную артерию крыс Sprague Dawley. Выживаемость составила 100% в момент времени жертвоприношения.
Неоинтимальная гиперплазия является одной из основных причин стеноза в артериализированных венах, используемых при артериальном коронарном шунтировании, при периферическом артериальном шунтировании, а также при пересадке артериальных венозных свищей вен. Интерпозиция в общей сонной артерии была выполнена в нескольких исследовательских проектах по изучению этиологии гиперплазии неоинтимы и терапевтических возможностей для ее лечения в настоящее время. Тем не менее, обычные микрохирургические методы с использованием моделей мелких животных сложны, разочаровывают и требуют чрезмерного жертвоприношения экспериментальных животных для упрощения всей процедуры.
Это видео иллюстрирует подробный протокол операции, который поможет начинающему хирургу изучить технику разреза и венозный трансплантат. Между положениями в общей тележной артерии 21 самка крысы-веточки от коммерческого заводчика была разделена на три равные группы, которые были прооперированы и умерщвлены на 21, 42 и 84 день соответственно. Общую анестезию животных вызывали с помощью коробки из плексигласа, подключенной к наркозному аппарату, установленному со скоростью потока кислорода один литр в минуту, и станковому испарителю фтора с 5% анестетиком.
На этом рисунке вы видите ученых перед операцией на правой грудинной сосцевидной мышце. Наружная яремная вена показана здесь. Здесь вы видите ученых после операции на правой грудино-ключично-сосцевидной мышце, где обнажаются правая общая сонная артерия и правый блуждающий нерв.
Во время последующей операции проводится анастомоз с использованием манжетной техники. Манжеты изготовлены вручную из пластиковой трубки, вырезанной в длину трех миллиметров. Эти манжеты состоят из трубчатого корпуса манжеты, включающего весь объем пластиковой трубки, и ручки манжеты, состоящей из половины объема манжеты.
И корпус манжеты, и ручка манжеты одинаково длинные. Манжета натягивается на общую кератиновую артерию. Сосуд и ручку манжеты можно безопасно закрепить вместе с помощью мини-зажима для бульдога.
После этого сосуд отклоняется и натягивается на внешнюю сторону корпуса манжеты. Затем его фиксируют шелковой лигатурой. Таким образом, просвет чаши покрывается эндотелием.
Венозный трансплантат может быть наложен на обе чашечные культи общей сонной артерии и зафиксирован шелковой лигатурой. Чтобы предотвратить образование тромбов, особенно в дистальном отделе анастомоза, важно закрепить завязку венозного трансплантата очень близко к краю манжеты, чтобы избежать контакта крови с завязкой, удерживающей артерию на месте, срединный разрез шейки матки длиной 2,5 сантиметра делается непосредственно над грудиной латерально от грудины CDO сосцевидной мышцы. Можно увидеть широкую наружную яремную вену, которая полностью отделена от окружающих тканей.
Здесь вы можете увидеть полностью мобилизованную наружную яремную вену, посредством которой венозные притоки были перевязаны семью шелковыми швами. Грудинная читовидная мышца сосцевидного отростка подготавливается здесь после операции на грудино-ключично-сосцевидной мышце. Теперь вы можете увидеть правую общую кератиновую артерию.
Общая кератиновая артерия тщательно подготавливается, следя за тем, чтобы не сдавливать артерию или блуждающий нерв, и теперь вы можете видеть общую кератиновую артерию по всей ее длине. Затем его дважды перевязывают посередине семью шелковыми швами. После этого общая сонная артерия пересекается прямо между двумя лигатурами.
Затем нейлоновая манжета, состоящая из корпуса и ручки, надевается на дистальный конец общей кератиновой артерии, при этом ручка манжеты находится позади сосуда. Затем зажатый в манжете конец дистальной общей кератиновой артерии зажимается зажимом мини бульдог прямо на ручке манжеты. Это обеспечивает стабильность.
Впоследствии артерия перерезается непосредственно за лигатурой, при этом образовавшаяся артериальная культя должна быть такой же длины, как и тело манжеты. Просвет артерии промывают солевым раствором гепарина. Затем петля лигирования откладывается в сторону.
Сразу после этого артериальная культя подтягивается вверх и надевается как рукав на тело манжеты. Впоследствии петля лигирования туго натягивается и завязывается узлом, чтобы предотвратить выскальзывание артерии из рукава. Мы используем хитрость: как артериальная стенка, так и шов одновременно защипываем парой щипцов и левыми щипцами делаем узел.
Затем та же процедура повторяется для проксимального отдела культи артерии: надевание манжеты на проксимальный конец общей кератиновой артерии с манжетой, перерезание артерии, промывание, наложение петли лигирования на культю артерии, надевание культи артерии на манжету и, наконец, завязывание петли лигирования. Отрезок зажатой наружной яремной вены длиной в один сантиметр иссекается. Две манжетные артерии находятся слишком далеко друг от друга, чтобы венозная интерпозиция могла приблизиться к правильному расстоянию для процедуры.
Вокруг каждого мини-бульдожьего зажима накручивается шов из трех нитей из Викрила, и оба шва перекрещиваются. Затем швы натягиваются в противоположных направлениях, что позволяет правильно расположить чашеобразные артериальные культи. Полоскание солевым раствором гепарина.
После наложенияшва на чашечную дистальную кератиновую артерию, затем один конец перевернутого и промытого сегмента вены надевается на манжету дистального кератинового артерии. Затем шов завязывается в правильном положении. При этом важно убедиться, что лигирование охватывает всю окружность венозного трансплантата.
Теперь сегмент вены снова промывают раствором гепарина солевым раствором, а другой конец сегмента вены проскальзывают над проксимальной культей кератиновой артерии. Впоследствии лигатура завершается. Здесь вы можете увидеть полный венозный интерпозиционный трансплантат.
После этого снимаются два мини-бульдожьих зажима. Сначала дистальный, а затем проксимальный. Наконец, устанавливается венозный интерпозиционный трансплантат.
Пульсация может наблюдаться в общей картетной артерии и венозном трансплантате. После снятия зажимов для закрытия раны накладывается подкожный бегущий шов с четырьмя ох Викрилом, в то время как для кожного бегущего шва используется шов с тремя ох Викрилом. Животные восстанавливались на плоской бумажной подстилке под инфракрасной лампой для обогрева.
Животным после операции вводили солевой норфин в концентрации от 0,03 до 0,05 мг на килограмм массы тела каждые восемь-12 часов в течение двух дней, 100% животных выжили на момент жертвоприношения. Кроме того, проходимость трансплантата составила 60% для первых 10 оперированных животных и 82% для остальных 11 животных. Кровоток в момент жертвоприношения составлял восемь плюс-минус три миллилитра в минуту.
С помощью манжетной техники сосуды с разным диаметром просвета могут подвергаться анастомозу. Важно перевязать полную окружность сосудов манжеты и TED, чтобы избежать кровотечения после реперфузии. Чтобы предотвратить образование тромбов, особенно в дистальном отделе анастомоза, важно закрепить завязку венозного трансплантата очень близко к краю манжеты, чтобы избежать контакта крови с завязкой, удерживающей артерию на месте.
Эта модель очень подходит для моделирования гемодинамики высокой скорости крови и низкого напряжения сдвига, а также для изучения механизмов, влияющих на развитие гиперплазии неоинтимы. В отличие от процедуры с использованием вальной вены в качестве трансплантата, эта аутотрансплантация с использованием наружной яремной вены в качестве трансплантата сокращает необходимое количество экспериментальных животных в два раза. В конечном счете, установка трансплантата наружной яремной вены в общую кератиновую артерию является сложной микрохирургической техникой.
Это видео помогает хирургу Sonata освоить это за минимальное время с меньшими отходами подопытных животных. Данная модель является отличным средством для начинающих хирургов для отработки техники манжеты, которая в настоящее время используется при трансплантации солидных органов у мелких животных.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Это исследование представляет новый протокол для прививки правой наружной яремной вены с использованием манжетной техники в общей сонной артерии крыс Sprague Dawley. Метод направлен на упрощение хирургической процедуры и улучшение результатов, связанных с неоинтимуальной гиперплазией, основной причиной stenоза в артериализованных венах.
This microsurgical protocol addresses a key challenge in vascular research: modeling neointimal hyperplasia in arterialized vein grafts, a primary cause of stenosis in coronary and peripheral bypass surgeries and arteriovenous fistulas. By simplifying external jugular vein interposition in the rat carotid artery using the cuff technique, the method reduces animal use and improves procedural standardization. This supports preclinical target validation and mechanistic de-risking in cardiovascular therapeutic development.
The method fits within the discovery-to-preclinical continuum by providing a disease-relevant system for evaluating mechanisms of neointimal hyperplasia, enabling lead identification through functional validation of vascular grafts, and supporting preclinical model refinement via standardized surgical execution.